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Studies using Mongolian gerbils found that during a primary infection with Giardia lamblia trophozoites, disaccharidase activities were decreased from day 10 post-infection (p.i.) until well past elimination of the parasite. However, during a challenge infection, enzyme deficiencies were short-lived. A challenge with a soluble extract of G. lamblia trophozoites also resulted in reductions in disaccharidase activity. The degree of these reductions in enzyme activity was dependent on the extract dose. Gel filtration of the trophozoite crude extract resulted in fractions F1, F2, and F3. However, only a challenge with F1 led to disaccharidase deficiencies. Further separation of F1 resulted in fractions F1a and F1b. Impairments of enzyme activity were obtained only in gerbils challenged with F1b. Protein analysis of F1b revealed several high and low molecular weight bands. When gerbils previously exposed to G. lamblia were challenged with an extract of Entamoeba histolytica trophozoites, disaccharidase activities remained comparable to controls. Moreover, enzyme levels in gerbils challenged with excretory/secretory G. lumblia products were affected in a manner which was inconsistent with the live parasitic challenge. Results suggest that the disaccharidase deficiencies in giardiasis are parasite-specific and are induced by a heat-stable constituent(s) of fraction F1b, possibly through an immune response to an antigenic component of this parasite fraction.

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A survey of gastro-intestinal parasites was conducted on faecal samples collected from 379 feral cats and 851 native fauna from 16 locations throughout Western Australia. The prevalence of each parasite species detected varied depending upon the sampling location. Common helminth parasites detected in feral cats included Ancylostoma spp. (29.8%), Oncicola pomatostomi (25.6%), Spirometra erinaceieuropaei (14%), Taenia taeniaeformis (4.7%), Physaloptera praeputialis (3.7%) and Toxocara cati (2.6%). The most common protozoan parasites detected in feral cats were Isospora rivolta (16.9%) and I. felis (4.5%). The native mammals were predominately infected with unidentified nematodes of the order Strongylida (59.1%), with members of the orders Rhabditida, Spirurida and Oxyurida also common. Oxyuroid nematodes were most common in the rodents (47.9%) and western grey kangaroos (27.8%). Several species of Eimeria were detected in the marsupials whilst unidentified species of Entamoeba and coccidia were common in most of the native fauna. Primers anchored in the first and second internal transcribed spacers (ITS1 and ITS2) of the ribosomal DNA (rDNA) were used to develop a polymerase chain reaction-linked restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) technique to differentiate the species of Ancylostoma detected in feral cats. Amplification of the ITS+ region (ITS1, ITS2 and 5.8S gene) followed by digestion with the endonuclease RsaI produced characteristic patterns for A. tubaeforme, A. ceylanicum and A. caninum, which were detected in 26.6%, 4.7% and 0% of feral cats respectively. Giardia was detected in a cat, dingo, quenda and two native rodents. Sequence analysis at the small subunit rDNA gene (SSU-rDNA) identified the cat and dingo as harbouring G.duodenalis infections belonging to the genetic assemblages A and D respectively. Subsequent analysis of the SSU-rDNA and elongation factor 1 alpha (ef1á) identified a novel species of Giardia occurring in the quenda. Attempts to genetically characterise the Giardia in the two native rodents were unsuccessful. Serological detection of Toxoplasma gondii was compared to a one tube hemi-nested PCR protocol to evaluate its sensitivity. PCR was comparable to serology in detecting T. gondii infections, although PCR was a much more definitive and robust technique than serology for large numbers of samples. Amplification of T. gondii DNA detected infections in 4.9% of feral cats and 6.5% of native mammals. The distribution of T. gondii does not appear to be restricted by environmental factors, which implies that vertical transmission is important for the persistence of T. gondii infections in Western Australia. These results demonstrate that cats carry a wide range of parasitic organisms, many of which may influence the survival and reproduction of native mammals. As such, the large-scale conservation and reintroduction of native fauna in Western Australia must not disregard the potential influence parasites can have on these populations.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2005. / Härtill 5 uppsatser.

Resumo: O presente estudo foi realizado para investigar a prevalência de enteroparasitas em crianças e funcionários da creche do município de Pratânia, Estado de São Paulo, e caracterizar geneticamente os isolados de Giardia duodenalis obtidos dos indivíduos desse grupo empregando gdh e tpi como genes-alvo. Para isso, amostras de fezes de 141 crianças com idade de zero a seis anos e de 18 colaboradores foram colhidas e processadas pelo método de centrífugo-flutuação e pelo kit TF-test®. Nas 141 crianças, parasitas e/ou comensais intestinais foram diagnosticados em 64 (45,4%), das amostras, sendo Giardia (22%) e Cryptosporidium (22%) os parasitas mais freqüentes. Nos funcionários, Giardia foi diagnosticada em apenas uma amostra (5,5%) e o protozoário comensal Entamoeba coli (22,2%) foi o mais prevalente. Empregando técnicas baseadas em PCR, o DNA extraído de 86 (31 amostras positivas e 55 negativas para Giardia no exame microscópico) foi amplificado e os produtos obtidos foram seqüenciados. A análise de 35 seqüências revelou a ocorrência de infecção pelos genótipos A (28,6%) e B (71,4%), subtipos AI, AII, BIII/BSI e BIV, no entanto, associações entre os genótipos e fatores de risco para a infecção não foram observadas. O alinhamento das seqüências de gdh e tpi, revelou a presença de um a 12 SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) em isolados dos genótipos A e B, sendo que em alguns deles, as mutações foram responsáveis por alterações nas seqüências de aminoácidos. A infecção de seis crianças de um mesmo grupo e de uma funcionária por isolados classificados como genótipo B e apresentando seqüências nucleotídicas 100% idênticas entre si sugere a ocorrência de transmissão antroponótica na população estudada. Além disso, a maior prevalência do genótipo B, grupo predominante nas infecções humanas, reforça o fato de que a transmissão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study was conducted to investigate the prevalence of intestinal parasites in children and employees of a daycare center of Pratania, São Paulo State, and to evaluate the genotypes Giardia duodenalis isolates obtained from individuals in this group by using gdh and tpi genes as targets. Fecal samples of 141 children aged zero to six years and 18 employees were processed by a flotation method and the TF-Test® kit. Of the 141 children samples, parasites and/or commensal organisms were diagnosed in 64 (45.4%) samples, and Giardia (22%) and Cryptosporidium (22%) were the most frequent parasites. In employees, Giardia was diagnosed in only one sample (5.5%) and the commensal protozoan Entamoeba coli (22.2%) was the most prevalent. DNA extracted from 86 samples (31 samples positive and 55 negative for Giardia by microscopic examination) was amplified by PCR and the products were sequenced. The analysis of 35 sequences revealed the occurrence of infection with genotypes A (28.6%) and B (71.4%) subtypes AI, AII, BIII / BIV and BSI, however, associations between genotypes and risk factors for infection were not observed. The alignment of the sequences revealed SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) in both genotypes A and B, altering the amino acid sequence of some isolates. Among isolates identified as genotype B, six obtained from children of the same group and one from the only one employee infected with Giardia showed gdh and tpi sequences different from reference ones, but 100% identical to each other. This data is suggestive of anthroponotic transmission in the studied population. In addition this finding, the higher prevalence of genotype B, the main group associated to human infections, reinforces the fact that anthroponotic transmission has importance in collective environments that meet children at an age that they still have not practice the basic precepts of hygiene. / Orientador: Semíramis Guimarães Ferraz Viana / Coorientador: Teresa Cristina G. de Oliveira-Sequeira / Banca: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Marcelo Urbano Ferreira / Mestre

In biennial following (spring 2005, autumn 2005, spring 2006, autumn 2006) we're rasitology examine 288 samples dropping from heifers and 288 samples dropping from bulls. Exhibits we're examined floatation in Sheather´s sugar solution. In examinate dropping we're proved present cysts Giardia intestinalis and oocysts Cryptosporidium andersoni and family Eimeria. In heifers was most frequent parasites coccidia Eimeria sp. (28,5 %). Flagellata Giardia intestinalis occur in 17 % of all designs. At least we're open up Cryptospordium andersoni (9,4 %). In bulls we're noted highest occurrence coccidia Eimeria sp. (19,1 %). Almost same occurrence we're found out near Giardia intestinalis (18,8 %). Very low prevalence we're have observed near Cryptosporidium andersoni (1,4 %).

Orientador: Maria Jacira Silva Simões / Banca: João Aristeu da Rosa / Banca: Marcia Aparecida Silva Graminha / Banca: Antonio Fluminhan Junior / Resumo: O estudo epidemiológico da giardíase empregando técnicas moleculares, como o RAPD (Randomly Amplified Polimorphic DNA), fornece subsídio para identificação dos fatores de transmissão da G. lamblia. Este trabalho teve como objetivo estudar a epidemiologia da G. lamblia em uma creche infantil de Presidente Bernardes, SP, Brasil, no ano de 2006, por meio de um inquérito epidemiológico e tipagem molecular das cepas isoladas empregando a técnica de RAPD. A análise dos perfis genéticos obtidos foi realizada com auxílio de um dendrograma de similaridade obtido pelo programa Gel Compar II versão 2.0 para Windows (Applied MATHS). Foram realizados exames parasitológicos de fezes de 101 crianças freqüentadoras da creche infantil. A partir desses exames, 15 amostras que apresentavam cistos de G. lamblia foram purificadas para posterior extração do DNA. Os pais e irmãos das 15 crianças parasitadas, assim como os cães de estimação e também dos funcionários da creche tiveram suas fezes coletadas para posterior exame parasitológico. Das mesmas extraíram-se DNA das amostras que apresentavam cistos de G. lamblia. Entre as 31 amostras positivas para G. lamblia obtida entre as crianças e seus respectivos pais e irmãos, concluiu-se que a transmissão do parasita ocorreu entre as crianças provavelmente no convívio da creche, mas não no convívio familiar. / Abstract: Epidemiological studies on giardiasis by using molecular techniques such as RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA) give information on factors related to the transmission of G. lamblia. The aim of this work was to assess the G. lamblia epidemiology in a day care center in Presidente Bernardes, SP, Brazil, in 2006, by means of an epidemiological inquiry and molecular typing of the isolated strains by using the RAPD technique. The genetic profiles were analyzed by means of a dendrogram of similarity obtained with the software Gel Compar II v. 2.0 for Windows (Applied MATHS). Parasitological examinations were made on feces samples taken from 101 children attended in the day care center. After examinations, 15 samples that presented G. lamblia cysts were purified for further DNA extraction. The respective relatives and brothers of the 15 children, in addition to their pets and the day care center’s workers had their feces collected for further parasitological examination. Samples in which G. lamblia cysts were found were also submitted to DNA extraction. Among the 31 samples positive for G. lamblia obtained from the children and their respective parents and brothers, it was concluded that the transmission of the parasite occurred between children probably during the cohabitation in the day care center, but not inside the family. / Doutor

A giardíase e a criptosporidiose estão entre as enfermidades de veiculação hídrica originadas por protozoários que têm ganhado maior notoriedade nas últimas décadas. Os microrganismos causadores dessas doenças têm-se tornado um desafio para as empresas de abastecimento de água. Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência dos protozoários Cryptosporidium sp e Giardia sp nas águas brutas de quatro afluentes do Lago Guaíba: Rios Taquari, Caí, dos Sinos e Gravataí. Juntos, abastecem uma população de dezenas de municípios da Região Metropolitana de Porto Alegre. Foram feitas amostragens mensais, durante doze meses, em cada afluente. Foi empregado o método de filtração em membrana para pré-concentração, centrifugação para concentração, separação imunomagnética para purificação e comparados três métodos de detecção para ambos os microrganismos: DAPI (4’,6-diamidino-2-fenilindol), Safranina e Kinyoun para Cryptosporidium e DAPI, Iodo Lugol e Iodo Tricrômico para Giardia. A avaliação microscópica e contagem de (oo)cistos foram feitas utilizando-se microscopia de imunofluorescência e contraste de fase para o DAPI e microscopia óptica para as demais colorações. Obtiveram-se os seguintes resultados: para os Rios Taquari, Caí, dos Sinos e Gravataí, respectivamente: 75, 42, 33 e 25% das amostras foram positivas para Cryptosporidium e 92, 83, 67 e 50% para Giardia. As concentrações médias de Giardia foram superiores às de Cryptosporidium em todos os quatro afluentes. Os valores médios observados foram: 80 oocistos e 176 cistos/100L no Taquari; 47 oocistos e 66 cistos/100L no Caí; 19 oocistos e 53 cistos/100L no Sinos; 16 oocistos e 92 cistos/100L no Gravataí. Estes podem estar subestimados devido à baixa recuperação dos métodos analíticos existentes e empregados. As densidades encontradas indicam que os protozoários estão disseminados nas águas superficiais dos formadores do Lago Guaíba.

Giardia lamblia é um protozoário que acomete mais comumente animais jovens e que convivem em grupos. Apesar da alta prevalência, nem todos animais apresentam a doença clínica. Mesmo assim, a giardíase tem importância epidemiológica por possuir um elevado potencial zoonótico. O presente estudo teve como objetivo determinar a freqüência de Giardia lamblia em cães no município de Canoas, RS, Brasil, através do Método de Faust e cols. (1939) e da Técnica de Coloração da Auramina. Os grupos experimentais foram divididos de acordo com a procedência e o sexo. Das 332 amostras analisadas com o Método de Faust e cols, a estimativa em ponto da freqüência obtida foi de 34,04%, podendo variar de 28,95 a 39,13%, dentro de um intervalo de confiança de 95%. Destas amostras, 40,96% foram positivas em animais de canil e 27,11% de rua. O Teste Exato de Fisher aplicado a esses dados revelou existir uma diferença significativa (p = 0,0107) entre as variáveis resultado e procedência. A variável sexo, neste método não apresentou diferença significativa em relação ao resultado (p = 0,8162) totalizando 33,11% de machos positivos e 34,08% de fêmeas infectadas com o parasita. Das 147 amostras realizadas com a Técnica de Coloração da Auramina, 23 foram positivas, totalizando 15,65%. A análise estatística através do Teste McNemar revelou existir diferença significativa entre as duas técnicas (p = 0,0004). O valor Kappa foi igual a 0,07, considerado como um grau de concordância fraco. Os resultados encontrados neste estudo nos permitem afirmar que o Método de Faust e cols. foi o mais adequado para o diagnóstico na infecção por Giardia lamblia, entre os métodos analisados.