Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-05-16T15:16:09Z No. of bitstreams: 1 PDF - Érika Ponchet Alves.pdf: 1299396 bytes, checksum: 3c0c4042f58e9e0ee9edd8547eef555f (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-21T20:42:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Érika Ponchet Alves.pdf: 1299396 bytes, checksum: 3c0c4042f58e9e0ee9edd8547eef555f (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-21T20:42:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Érika Ponchet Alves.pdf: 1299396 bytes, checksum: 3c0c4042f58e9e0ee9edd8547eef555f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-21T20:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Érika Ponchet Alves.pdf: 1299396 bytes, checksum: 3c0c4042f58e9e0ee9edd8547eef555f (MD5) Previous issue date: 2015-07-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Medicinal plants represent a promising source of active compounds which can be used in the development of new drugs. There is a diversity of plants that are used by the population for therapeutic purposes, among which are the Guapira graciliflora Mart., popularly known as “joão-mole”, and Schinus terebinthifolius Raddi, known as “aroeira-da-praia”. These plants stand out in folk medicine due to its therapeutic properties in inflammatory and infectious processes. This study evaluated in vitro antimicrobial and antiproliferative activities besides, toxicity and chemical composition of the hydroalcoholic extract of the leaves of G. graciliflora. and the essential oil from unripe fruits of S. terebinthifolius. Antimicrobial activity was evaluated by microdilution technique in broth, with determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and bactericidal/ Fungicide minimum concentration (MBC / MFC) using to bacterial strains: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 11775 and Salmonella enteritidis ATCC 13076, and the yeast Candida albicans ATCC 10231. The extracts were analyzed againstC. albicans biofilm after 48 hours of expositions, by means of the CFU / ml count and examination of cell morphology byfluorescence microscope (FM) using Calcofluor White. The antiproliferative activity was evaluated against nine tumor cell lines (U251, MCF7, NCI / ADR-RES, 786-0, NCI-460, HT29, K562, and PC-03 OVCAR-3) and a non-tumor cell line of keratinocytes (HaCat ). Preliminar toxicity was evaluated through the hemolysis assay. Phytochemical analysis of the extract G. graciliflora was performed by thin-layer chromatography, and the essential oil of S. terebinthifoliuswas analysed by Gas Chromatography hifenized with Mass Spectrometry (GC-MS). The G. graciliflora andS. terebinthifoliussamplesshowed potential antifungal against C. albicans with the MIC values of 0.25mg/mL and 1mg/mL, respectively, and no antibacterial activity (MIC>2mg/mL). Both samples (1mg/mL) reduced the number of CFU/mL of C. albicans biofilm. In fluorescence microscopy it was, observed the maintenance of cellular architecture of C.albicansafter the treatments. The G. gracilifloraextract presented cytocidal effect for all cells of the tumor lines except for the K562 (leukemia) while the essential oil of S. terebinthifolius proved cytocidal for all strains. Both samples did not produce hemolysis over 50% up to a concentration of 16mg/mL. Phytochemical analysis of the extract G. graciliflora revealed the predominance of flavonoid compounds, and the major compound identifiede onS. terebinthifolius essential oil were to, terpene, alpha- and beta- phellandrene. The extract from the leaves of G. graciliflora and the essential oil of the fruit of S. terebinthifolius showed potential antifungal against C. albicans in their planktonic form and organized in biofilms; besides antiproliferative activity across the human tumor cell lines and low toxicity on red blood cells. They have been considered promising sources of active compounds, for product development and medicine, anticandida and antiproliferative action. This way, other studies may extend these results, aiming the development to the studies of herbal medicines to clinical use. / As plantas medicinais representamuma fonte promissora de compostos ativos, que podem ser utilizados no desenvolvimento de novos fármacos. Existe uma diversidade de plantas que são usadas pela população para fins terapêuticos, dentre elas, encontram-se a Guapira graciliflora Mart., popularmente conhecida como joão-mole, e a Schinus terebinthifolius Raddi, conhecida como aroeira- da-praia. Essas plantas se destacam na medicina popular em função das suas propriedades terapêuticas em processos inflamatórios e infecciosos. Esteestudo avaliou in vitro as atividadesantimicrobiana eantiproliferativa, além da toxicidade, e da composição química do extrato hidroalcoólico das folhas da G. graciliflorae do óleo essencial dos frutos verdes da S. terebinthifolius. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da técnica de microdiluição em caldo, com determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida/Fungicida Mínima (CBM/CFM), frente às cepas bacterianasStaphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 11775 e Salmonella enteritidis ATCC 13076, e a levedura Candida albicans ATCC 10231. Foi analisada a ação das duas amostras vegetais sobre o biofilme monoespécie de C. albicans, de 48 horas, por meio da contagem de UFC/mL e análise da morfologia celular em microscópio de fluorescência (MF), usando o Calcofluor White. A atividade antiproliferativa foi realizada contra nove linhagens de células tumorais humanas (U251, MCF7, NCI/ADR-RES, 786-0, NCI-460, HT29, k562, PC-03 e OVCAR-3) e uma linhagem não tumoral de queratinócitos (HaCat). Para o teste de toxicidade preliminar,realizou-se o ensaio de hemólise.A análise fitoquímica do extrato da G. graciliflora foi realizada através da Cromatografia de Camada Delgada, e a do óleo essencial da S. terebinthifoliuspor meio da Cromatografia Gasosa com Espectrometria de Massa (CG-EM). A G. graciliflorae a S. terebinthifoliusapresentaram potencial antifúngico frente a C. albicans, com valores da CIM0,25 mg/mL e 1mg/mL, respectivamente, e ausência de atividade antibacteriana (CIM>2 mg/mL). As duas substâncias vegetais (1 mg/mL) reduziram o número de UFC/mL no biofilme de C. albicans. Na microscopia de fluorescência, observou manutenção da arquitetura celular da C.albicans. A G. graciliflora apresentou efeito citocida para todas as células das linhagens tumorais, exceto para a K562 (leucemia); e o óleo essencial da S. terebinthifoliusmostrou-se citocida para todas as linhagens. As substâncias vegetais não produziram hemólise acima de 50% até a concentração de 16 mg/mL. A análise fitoquímica do extrato da G. graciliflorarevelou a predominância de compostos flavonoides, e no óleo essencial da S. terebinthifolius, de terpenos alfa e beta-felandreno. O extrato das folhas da G. graciliflora e o óleo essencial dos frutos da S. terebinthifolius apresentaram potencial antifúngico frente a C. albicans, em sua forma planctônica e organizada em biofilme; atividade antiproliferativa frente às células de linhagens tumorais humanas e baixa toxicidade frente às hemácias. Podem representar promissoras fontes de compostos ativos, para o desenvolvimento de produtos ou medicamentos, com ação anticandida e/ou antiproliferativa. Desta forma, são necessários outros estudos,para ampliar os conhecimentos a respeito dessas espécies, seguindo para os estudos de riscos e eficiência do uso clínico dessas substâncias.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Thiara Karine de Araujo.pdf: 1613163 bytes, checksum: a957f23a80b49c364a5d41f8caa2a13e (MD5) Previous issue date: 2014-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The plants have been a rich source for therapeutic agents, serving as basis for the drug's synthesis, making an important source of new medicines for diseases that are yet without cure like infections and malignancies, in this context the Brazilian flora, due it's diversity, plays an important role in the discovery of potential antimicrobial drugs and antitumor. This work proposes to evaluate the antimicrobial potential of the hydroalcoholic extract of the Guapira Graciliflora Mart. (EOHG) thought the method of the microdilution in broth against strains of the Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus oralis, Streptococcus parasanguinis, Streptococcus mitis and Candida albicans, it's antiproliferative capacity in cell lines of squamous cell carcinome SCC 9, SCC 25 e HSC 3 by the essay MTT, additional to it's inducer potential of apoptosis observed by the test of annexin staining V/PI. The EOHG has presented antimicrobial activity over tested microorganisms, and the better results was observed in the bacteria S. mutans (12,50 µl/ µl), S. mitis (12,50 µl/ µl) and S. salivarius (6,25 µl/ µl), and in the clinical strains of Candida albicans (11) and Candida albicans (410), with CIMs of 0,5mg/ml and 2mg/ml, respectively. The EOHG, in the concentration of 200 µg/ml, have presented inhibition rates of 49% for the cells SCC9 and 63% for the cells HSC3 in the interval of 48h. The Rate of cellular apoptosis for HSC 3 was 19,29% on the time of 48h, additionally the tests of the annexin V/PI has revealed the induction of the cellular apoptosis, suggesting that the cellular membrane and nuclear have been damaged. Based in the results that have been presented, the Guapira Graciliflora Mart. is elected as a potential source of bioactive compound to be used in the treatment of oral infections and the CCEO. / As plantas têm sido uma rica fonte de agentes terapêuticos, servindo de base para síntese de fármacos, constituindo importante fonte de novos medicamentos para doenças que continuam sem cura como infecções e neoplasias malignas, nesse contexto a flora brasileira, por sua diversidade, desempenha papel importante na descoberta de potenciais drogas antimicrobianas e antitumorais. O presente trabalho se propôs a avaliar o potencial antimicrobiano do extrato hidroalcóolico da Guapira Graciliflora Mart. (EOHG) através do método da microdiluição em caldo frente a cepas de Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus oralis, Streptococcus parasanguinis, Streptococcus mitis e Candida albicans, sua capacidade antiproliferativa em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas SCC 9, SCC 25 e HSC 3 pelo ensaio MTT, além de seu potencial indutor de apoptose observado pelo teste da coloração anexina V/PI. O EOHG apresentou atividade antimicrobiana sobre os microrganismos testados, s os melhores resultados foram observados nas bactérias S. mutans (12,50 µl/ µl), S. mitis (12,50 µl/ µl) e S. salivarius (6,25 µl/ µl), e nas cepas clínicas de Candida albicans (11) e Candida albicans (410), com CIMs de 0,5mg/ml e 2mg/ml, respectivamente. O EOHG, na concentração de 200 µg/ml, apresentou taxas de inibição de 49% para as células SCC9 e 63% para as células HSC3 no intervalo de 48h. A taxa de apoptose celular para HSC 3 foi de 19,29% no período de 48h, adicionalmente o teste da anexina V/PI revelou indução de apoptose celular, sugerindo que houve danos a membrana celular e nuclear. Com base nos resultados apresentados, a Guapira Graciliflora Mart. representa uma potencial fonte de compostos bioativos a serem utilizados no tratamento das infecções orais e do CCEO.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-08-18T12:17:47Z No. of bitstreams: 1 PDF - Carolina Medeiros de Almeida.pdf: 2829867 bytes, checksum: ce1cd81409b0c3ee23f78d614e7c3375 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-18T12:17:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Carolina Medeiros de Almeida.pdf: 2829867 bytes, checksum: ce1cd81409b0c3ee23f78d614e7c3375 (MD5) Previous issue date: 2016-06-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Guapira graciliflora Mart. is a medicinal plant, commonly found in the caatinga, in the Brazilian semi-arid and widely used by the local population because of their antituberculosis, anti-inflammatory and healing activities. The aim of this study was to evaluate in vitro the antifungal, antibiofilm and antiproliferative potential of G. graciliflora. A hydroalcoholic extract of G. graciliflora‘s leaves was obtained. Then, the extract was fractionated by filter column on fritted funnel. The chemical characterization of the extracts was performed by G Electrospray Ionization Mass Spectrometry (ESI-MS). The antifungal activity of graciliflora extract and its fractions was evaluated by broth microdilution method to determine the Minimum Inhibitory and Fungicidal Concentrations (MIC / MFC) against Candida albicans ATCC 10231; Candida glabrata CBS 07; Candida krusei CBS 573 and Candida dubliniensis CBS 7889. The ability to inhibit formation of a C. albicans biofilm was evaluated considering the number of colony forming units (CFU/ml), the cell metabolic activity (MTT) and hydrogenic potential (pH). The antiproliferative activity of the extract and its fractions were evaluated against human tumoral cell lines (U251, MCF-7, NCI-ADR/RES, 786-0, NCI-H460, PC-3, HT-29) and not tumoral cell line (HaCat) by Sulforhodamine B assay. The cytotoxicity of the extract was evaluated on the line RAW 264.7 macrophages also by Sulforhodamine B assay. The phytochemical characterization of the extract indicated the suggestive presence of the flavonoids rutin and kaempferol. The extract and its methanol fraction showed moderate antifungal activity against C. albicans, C. glabrata and C. krusei and strong activity against c. dublniensis. The analysis about the metabolic activity and the number of viables cells at 24 and 48 hours biofilms showed diference (p < 0,05) only for the number of viables cells at 24 hours and the metabolic activity at 48 hours, with the extract‘s concentrations of 125 µg/mL and 62,5 µg/mL reducing the major number of CFU/mL (34,1% and 36,9%. respectively) and the concentration of 250 µg/mL was the most effective in decrease the metabolic activity (50,79%) of C. albicans cells. The pH values observed in biofilms treated with the extract were higher than those observed in untreated biofilm. The extract and its fractions have no antiproliferative effect against tumor cell lines tested, with average activity (mean log GI50) greater and equal to 1.71 mg/mL. Cell viability of macrophages was maintained above 80% for the extract concentrations up to 62,5 mg/mL. The extract of G. graciliflora‘s leaves has flavonoids is its chemical composition. Also has antifungal and antibiofilm potential, without significance evidence of antiproliferative activity against tumor and not tumor cell lines. / A Guapira graciliflora Mart. é uma planta medicinal, comumente encontrada na caatinga, no semi-árido brasileiro e bastante utilizada pela população local em função de suas atividades antituberculose, anti-inflamatória e cicatrizante. O objetivo do presente estudo foi avaliar in vitro os potenciais antifúngico, antibiofilme e antiproliferativo da G. graciliflora. Foi obtido um extrato hidroalcóolico das folhas da G. graciliflora através do processo de maceração. Posteriormente foi realizado fracionamento através de coluna filtrante em funil de placa porosa. A caracterização química do extrato foi realizada através de Espectrometria de Massas com ionização por eletrospray (ESI-MS). A atividade antifúngica do extrato da G. graciliflora e de suas frações foi avaliada através do método da microdiluição em caldo com determinação das Concentrações Inibitória Mínima e Fungicida Mínima (CIM/CFM), frente à Candida albicans ATCC 10231; Candida glabrata CBS 07; Candida krusei CBS 573 e Candida dubliniensis CBS 7889. A capacidade em inibir a formação de um biofilme de C. albicans foi avaliada considerando o número de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), a atividade metabólica (MTT) e o potencial hidrogeniônico (pH). A atividade antiproliferativa do extrato e de suas frações foi avaliada sobre linhagens de células tumorais (U251, MCF-7, NCI- ADR/RES, 786-0, NCI-H460, PC-3, HT-29) e não-tumoral humanas (HaCaT) através do método da Sulforrodamida B. A citotoxicidade do extrato foi avaliada sobre a linhagem de macrófagos RAW 264.7 também pelo método da Sulforrodamina B. A caracterização fitoquímica do extrato indicou a presença sugestiva dos flavonoides rutina e kaempferol. O extrato e sua fração metanólica exibiram moderada atividade antifúngica sobre C. albicans, C. glabrata e C. krusei e forte atividade sobre C. dubliniensis. A análise da atividade metabólica e a contagem de células viáveis nos biofilmes de 24 e 48 horas demonstrou diferenças estatisticamente significativa (p < 0,05) apenas para a contagem de células viáveis em 24 horas e para a atividade metabólica em 48 horas, cujas concentrações do extrato de 125 µg/mL e 62,5 µg/mL foram as que mais reduziram o número de UFC/mL (34,1% e 36,9%, respectivamente) e a concentração de 250 µg/mL foi a mais efetiva em diminuir a atividade metabólica (50,79%) das células de C. albicans. Os valores de pH observados nos biofilmes tratados com o extrato foram maiores do que naqueles sem tratamento. O extrato e suas frações não apresentaram efeito antiproliferativo sobre as linhagens tumorais testadas, com médias de atividade (log GI50) maior e igual a 1,71 µg/mL. A viabilidade celular dos macrófagos foi mantida acima de 80% para concentrações do extrato até 62,5 µg/mL. O extrato das folhas da G. graciliflora possui flavonoides em sua composição química. Apresenta potenciais antifúngico e antibiofilme, sem evidências significativas de atividade antiproliferativa sobre linhagens de células tumorais e não tumorais humanas.