[Truncated abstract] The mammalian inner ear is innervated by the efferent olivocochlear system which is divided into medial and lateral systems. In anaesthetised animals, medial olivocochlear (MOC) axons can be electrically stimulated at the floor of the IVth ventricle. MOC stimulation suppresses the spontaneous activity and sound-evoked responses of primary afferents by its actions on outer hair cells. Effects of MOC stimulation have been also reported on responses of neurons in the cochlear nucleus, the first central auditory center receiving cochlear input. However, very little is known about the net results of MOC effects in higher order neurons. This issue was investigated by electrically stimulating MOC axons at the IVth ventricle and recording extracellular single unit activities in the central nucleus of the inferior colliculus (CNIC) of anaesthetised guinea pigs. For the first part of the study, anatomical and neurophysiological studies were carried out to establish that the focal midline MOC stimulation can selectively stimulate MOC axons without any current spread to adjacent ascending fibers. The MOC stimulation and CNIC recordings were then carried out in a series of experiments that included normal hearing animals, animals treated acutely with gentamicin (in which the acetylcholine-mediated peripheral suppression of the olivocochlear efferents is selectively eliminated) and partially deafened animals. ... However, in other CNIC neurons, effects could not be so explained, showing either additional suppression or even marked excitatory effects. (4) MOC stimulation also suppressed the spontaneous activity of CNIC neurons in normal hearing animals. When similar efferent stimulation was carried out in partially deafened animals, the abnormally high spontaneous activity of some CNIC neurons in the deafened frequency regions was also transiently suppressed by MOC shocks. The results from this study clearly demonstrate that the MOC system can modulate the responses of midbrain neurons in a more complex manner compared to the effects seen in the periphery. The more complex effects seen for responses to tones in quiet and in noisy background are likely to result from a complex interplay between altered afferent input in the cochlea and central circuitry. In addition, the ability of MOC efferents in suppressing the normal and abnormal spontaneous activity in the midbrain also could have implications for the role of the descending system in the pathophysiology and treatment of tinnitus.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Sveriges lantbruksuniv., 2002. / Härtill 4 uppsatser.

Thesis (Ph.D.)--University of Western Australia, 2007.

Na última década, o uso de sistemas microventilados (sistema VMA) em biotérios possibilitou alojar animais com melhor qualidade sanitária devido ao maior controle ambiental fornecido por esses sistemas. Contudo, ainda é necessária uma melhor avaliação, principalmente no que tange às respostas dos animais. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a integridade do aparelho respiratório (pulmões e traquéia) de cobaias mantidas sob dois sistemas de ventilação diferentes: ventilação geral diluídora (VGD) ou ventilação para conforto e ventilação microambiental (VMA). Foram utilizados quatro grupos de animais que ficaram alojados por 180 dias no CREAL-UFRGS. Os animais foram acompanhados com exames radiológicos dos pulmões a cada 45 dias. A histopatologia foi realizada no último dia de acompanhamento dos animais.Os resultados da análise radiológica não demonstraram diferença significativa entre as lesões pulmonares de cobaias fêmeas e machos mantidas sob os dois sistemas de ventilação. A avaliação histopatológica evidenciou lesões descamativas e de metaplasia no epitélio da traquéia de animais de ambos os sexos e sistemas de ventilação. As lesões encontradas nos pulmões das cobaias machos e fêmeas de ambos os sistemas foram em sua maioria lesões inflamatórias, com intenso infiltrado de mononucleares. A presença e intensidade dessas lesões variaram de acordo com o sistema de ventilação sendo que no grupo VGD é que foram encontradas lesões mais severas. / During the last decade, the use of intracage ventilation systems (VMA) in animal facilities has improved the health status of animal by better environmental control supplied by these systems. Yet, here is little information upon use of VMA systems, mainly in that it referes to animal responses. Thus, the purpose in this investigation was to evaluate epithelial integrity in airways (trachea and lungs) of Guinea pigs kept in two different systems: general diluting ventilation system or comfort ventilation system (VGD) and intracage ventilation systems (VMA). Four groups of animals were kept for 180 days on CREAL- UFRGS. The animals were observed with radiological exam taked from lungs every 45 days. The histophatology was done in the last day of trial. The results show the radiological exams haven’t differences between lung injuries from males and females kept in two different ventilation systems. The histological examination showed lost and changes of trachea epithelium in both, male and female under two different ventilation. The injuries found in lung from Guinea pigs, male and female, under two different ventilation were in the most inflammatory injuries, predominantly mononuclear cells. Intensity of lesions varied according to the ventilation system wich animals were kept, the animals kept in VGD system have presented more intensity of injuries.

This study aimed to evaluate the ability of nymphs of Amblyomma ovale naturally infected with Rickettsia parkeri (Atlantic Forrest strain) in transmitting it to Cavia porcellus (guinea pigs), and analyze the infection in these animals. A total of 26 guinea pigs divided into three groups were used: G1 - 10 guinea pigs infested with nymphs of uninfected A. ovale; G2 - 10 guinea pigs infested with nymphs of A. ovale naturally infected with R. parkeri (Atlantic Forrest strain) and G3 - 6 uninfected guinea pigs. A tick infestation chamber was fixated on the animals, where 25 nymphs of A. ovale, either infected or not, were placed. In the first study, the vector competence of A. ovale nymphs in the transmission of R. parkeri (Atlantic Forrest strain) for C. porcellus (animals of G1 and G2) was evaluated. After the period of parasitism, engorged nymphs were collected and stored in a B.O.D incubator. To assess the anti-Rickettsia spp antibodies, blood was collected at 7, 14, 21 and 28 days post infestation (DPI) being evaluated by indirect immunofluorescence assay (IFA). To identify the multiplication of Rickettsia in the tissue from guinea pigs a polymerase chain reaction was carried out at 7, 10, 14 and 28 DPI. To verify the vector competence of nymphs, parasite periods, the percentage of molting, transstadial survival and IFA were analyzed. The average period of parasitism in G1 was 6.6 days and 6 days in G2. The average percentage of molting (nymph to adult) was 95%. In G2, the survival of transstadial Rickettsia was confirmed in 100% (PCR) and 80% (hemolymph test) of adults. In serological analysis, 100% of G1 animals were seronegative and 80% were seropositive in G2. No riquetsial DNA was detected in the tissues of animals. In the second study, the profile of experimental infection caused by rickettsia in guinea pigs (animals from G1, G2 and G3) were analyzed, seeking to identify the clinical, histopathological and hematological profile. Blood samples for hematological analyzes were performed in the same periods of the previous study and the collection of tissue for histopathological analyzes, occurred at 10 and 28 DPI. In serology, animals from G1 and G3 were negative and 80% of the G2 positive. The observed hematological results were: G1 - leukopenia at 7 DPI, increased total plasma proteins (TPP) and decreased platelets at 7, 14 and 21 DPI, G2: leukocytosis, neutrophilia and monocytosis at 7 DPI, increased platelets at 14 DPI and decreased PPT at 21 DPI. Histopathology observed: G1 - diffuse splenic hemosiderosis at 28 DPI (20%), G2 - diffuse splenic hemosiderosis at 10 DPI (10%), diffuse pulmonary congestion at 10 and 28 DPI (30%) and multifocal splenic follicular hyperplasia at 28 DPI (20%); G3 - diffuse pulmonary congestion at 10 DPI (33%). It was concluded that nymphs of A. ovale presented vector competence in the transmission of R. parkeri (Atlantic Forrest strain) to guinea pigs, being possible to determine an acute infection of subclinical character in these hosts. / Este estudo teve como objetivos avaliar a capacidade de ninfas de Amblyomma ovale naturalmente infectadas com Rickettsia parkeri (cepa Mata Atlântica) em transmiti-la para Cavia porcellus (cobaios) e, analisar a infecção nestes animais. Utilizou-se 26 cobaios divididos em três grupos: G1 - 10 cobaios infestados com ninfas de A. ovale não infectadas, G2 - 10 cobaios infestados com ninfas de A. ovale naturalmente infectadas com R. parkeri (cepa Mata Atlântica) e G3 - 6 cobaios não infestados. Foi fixada uma câmara de infestação de carrapatos nos animais onde foram colocadas 25 ninfas de A. ovale infectadas ou não, de acordo com o grupo. No primeiro estudo foi avaliado a competência vetorial de ninfas de A. ovale na transmissão de R. parkeri (cepa Mata Atlântica) para C. porcellus (animais do G1 e G2). Após o período do parasitismo, as ninfas ingurgitadas foram coletadas e armazenadas em estufa B.O.D. Para a pesquisa de anticorpos anti-Rickettsia spp., coletou-se soros sanguíneos aos 7, 14, 21 e 28 dias pós infestação (DPI) sendo avaliados por meio de reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Para a identificação da multiplicação desta riquétsia nos tecidos dos cobaios foi realizada a reação em cadeia da polimerase aos 7, 10, 14 e 28 DPI. Para verificar a competência vetorial das ninfas, analisaram-se os períodos parasitários, o percentual de ecdise, a sobrevivência transestadial e a RIFI. O período médio de parasitismo no G1 foi de 6,6 dias e, de 6 dias no G2. O percentual médio de ecdise (ninfa para adulto) foi de 95%. No G2, a sobrevivência desta riquétsia de forma transestadial foi confirmada em 100% (PCR) e 80% (teste de hemolinfa) dos adultos. Na análise sorológica, 100% dos animais do G1 foram soronegativos e 80% do G2 soropositivos. Não foi detectado o DNA riquetsial nos tecidos dos animais. No segundo estudo, avaliou-se o perfil da infecção experimental causada por esta riquétsia nos cobaios (animais do G1, G2 e G3), buscando identificar as alterações clínicas, perfil hematológico e histopatológico. As coletas sanguíneas para análises hematológicas foram realizadas nos mesmos períodos do estudo anterior e, as coletas de tecidos para análises histopatológicas, ocorreram aos 10 e 28 DPI. Na sorologia, os animais do G1 e G3 fora negativos e, 80% dos animais do G2 positivos. Os resultados hematológicos observados foram: G1 - leucopenia aos 7 DPI, aumento de proteínas plasmáticas totais (PPT) e diminuição de plaquetas aos 7, 14 e 21 DPI; G2: leucocitose, neutrofilia e monocitose aos 7 DPI, aumento de plaquetas aos 14 DPI e diminuição de PPT aos 21 DPI. Na análise histopatológica observou-se: G1 - hemossiderose difusa esplênica aos 28 DPI (20%); G2 - hemossiderose difusa esplênica aos 10 DPI (10%), congestão difusa pulmonar aos 10 e 28 DPI (30%) e hiperplasia folicular multifocal esplênica aos 28 DPI (20%); G3 - congestão difusa pulmonar aos 10 DPI (33%). Concluiu-se que ninfas de A. ovale apresentaram competência vetorial na transmissão de R. parkeri (cepa Mata Atlântica) para cobaios, sendo possível determinar uma infecção aguda de caráter subclínico nestes hospedeiros.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:30:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 12910.pdf: 3374698 bytes, checksum: 5941c584a71790c96853ebeca9e2c146 (MD5) / Tese (Doutoramento) / IEA/T / Instituto de Biociencias, Universidade de Sao Paulo - IB/USP

Na última década, o uso de sistemas microventilados (sistema VMA) em biotérios possibilitou alojar animais com melhor qualidade sanitária devido ao maior controle ambiental fornecido por esses sistemas. Contudo, ainda é necessária uma melhor avaliação, principalmente no que tange às respostas dos animais. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a integridade do aparelho respiratório (pulmões e traquéia) de cobaias mantidas sob dois sistemas de ventilação diferentes: ventilação geral diluídora (VGD) ou ventilação para conforto e ventilação microambiental (VMA). Foram utilizados quatro grupos de animais que ficaram alojados por 180 dias no CREAL-UFRGS. Os animais foram acompanhados com exames radiológicos dos pulmões a cada 45 dias. A histopatologia foi realizada no último dia de acompanhamento dos animais.Os resultados da análise radiológica não demonstraram diferença significativa entre as lesões pulmonares de cobaias fêmeas e machos mantidas sob os dois sistemas de ventilação. A avaliação histopatológica evidenciou lesões descamativas e de metaplasia no epitélio da traquéia de animais de ambos os sexos e sistemas de ventilação. As lesões encontradas nos pulmões das cobaias machos e fêmeas de ambos os sistemas foram em sua maioria lesões inflamatórias, com intenso infiltrado de mononucleares. A presença e intensidade dessas lesões variaram de acordo com o sistema de ventilação sendo que no grupo VGD é que foram encontradas lesões mais severas. / During the last decade, the use of intracage ventilation systems (VMA) in animal facilities has improved the health status of animal by better environmental control supplied by these systems. Yet, here is little information upon use of VMA systems, mainly in that it referes to animal responses. Thus, the purpose in this investigation was to evaluate epithelial integrity in airways (trachea and lungs) of Guinea pigs kept in two different systems: general diluting ventilation system or comfort ventilation system (VGD) and intracage ventilation systems (VMA). Four groups of animals were kept for 180 days on CREAL- UFRGS. The animals were observed with radiological exam taked from lungs every 45 days. The histophatology was done in the last day of trial. The results show the radiological exams haven’t differences between lung injuries from males and females kept in two different ventilation systems. The histological examination showed lost and changes of trachea epithelium in both, male and female under two different ventilation. The injuries found in lung from Guinea pigs, male and female, under two different ventilation were in the most inflammatory injuries, predominantly mononuclear cells. Intensity of lesions varied according to the ventilation system wich animals were kept, the animals kept in VGD system have presented more intensity of injuries.

Introdução: Há crescentes evidências que sinalizam o papel do estresse crônico como desencadeante e mesmo perpetuador de crises asmáticas, bem como a importância do parênquima pulmonar na piora funcional da asma. Objetivos: Deste modo, consideramos relevante avaliar em cobaias com inflamação alérgica crônica pulmonar como o estresse físico repetido, induzido pela natação forçada, modula a responsividade do parênquima pulmonar, ainfiltração eosinofílica, ativação da via de estresse oxidativo e o remodelamento, bem como o papel da ativação de enzima óxido nítrico sintase induzida nestas respostas. Métodos: Os animais receberam inalações duas vezes por semana durante quatro semanas com doses crescentes de ovoalbumina ou solução fisiológica Após 24 horas da quarta inalação os animais foram separadas em dois grupos onde metade destes animais foi submetido ao protocolo de natação forçada por dez dias com intervalo de dois dias, para a indução do estresse, enquanto a outra metade dos animais permaneceu sem a indução de estresse. Para avaliar a participação da ativação de iNOS nesta resposta as cobaias foram novamente divididas em grupos, onde parte foi tratada com 1400-W (inibidor específico de iNOS, 2mg/kg ip/dia/4 dias) ou veículo no mesmo período, iniciando 30 minutos antes da sétima inalação. Para avaliação das repercussões comportamentais da indução de estresse os animais foram submetidos ao teste de campo aberto, sendo obtidos os seguintes parâmetros: distância percorrida, velocidade média total, tempo de movimentação total. Foi também coletada uma amostra de sangue no dia da realização da mecânica pulmonar para a dosagem do cortisol. Após 72h da sétima inalação, os animais foram anestesiados, exsanguinados e fatias de tecido pulmonar periférico foram retiradas e suspensas em banho orgânico de Krebs, e a resistência (Rt) e elastância (Et) do tecido pulmonar periférico foram avaliadas em condição basal e após desafio com ovoalbumina (1%). Foi também obtida a medida de histerisividade. Após a realização da mecânica oscilatória, as mesmas fatias de tecido pulmonar periférico foram submetidas à avaliação histopatológica. Resultados: Nos animais submetidos a natação forçada foi observado um aumento no peso da adrenal, no cortisol sérico, na distância percorrida e no tempo de movimentação em campo aberto o que demonstrou que a natação forçada foi eficaz como indutor de estresse. Os animais expostos às inalações com ovalbumina apresentaram valores maiores de porcentagem de aumento da resistência e da elastância tecidual após desafio com ovoalbumina (p<0.05). Os animais expostos às inalações com ovalbumina e submetidos a estresse induzido por natação forçada apresentaram um aumento da resistência e elastância teciduais (p<0,05), enquanto que o tratamento com 1400W reverteu esse aumento tanto nos animais sensibilizados quantos nos sensibilizados submetidos a estresse. Houve aumento do número de eosinófilos (P<0.05), de células iNOS positivas (P<0,05), da deposição de fibras colágenas (P<0,05), no conteúdo de actina (P<0,05) e de 8-epi-PGF2a (P<0,05) no septo alveolar. Nos animais sensibilizados e submetidos ao estresse houve aumento todos os parâmetros morfológicos descritos anteriormente (P<0,05) exceto pelo depósito de fibras colágenas. A administração de 1400W reduziu todos estes parâmetros funcionais e morfológicos (P<0,05) com exceção do conteúdo de actina no septo alveolar, da infiltração eosinofílica e dos níveis de cortisol sérico. Conclusões: Neste modelo experimental, o bloqueio específico da iNOS atenuou a constrição, a inflamação eosinofílica, a expressão de iNOS, o remodelamento no parênquima pulmonar tanto nos animais apenas sensibilizados quanto nos animais sensibilizados e submetidos ao estresse. Estas alterações podem estar relacionadas aos efeitos da ativação da óxido nítrico sintase induzida na modulação da via do estresse oxidativo, sinalizada pelos efeitos na produção de isoprostano 8. O presente estudo sugere que a inibição específica da iNOS pode amplificar as estratégias terapêuticas utilizadas na abordagem de doenças inflamatórias crônicas pulmonares / Introduction: There is growing evidence to indicate the role of chronic stress even perpetuating as triggering asthma attacks and the importance of functional lung parenchyma in worsening of asthmatic responses. Objective: We considered relevant to evaluate in guinea pigs with chronic allergic pulmonary inflammation if repeated physical stress, induced by forced swimming, modulates the responsiveness of the distal lung parenchyma, eosinophilic infiltration, oxidative stress pathway activation and extracellular matrix remodeling as well as the role of the activation of induced nitric oxide synthase in these responses. Methods: The animals received inhalations twice a week for four weeks with increasing doses of ovalbumin or normal saline. After 24 hours of the fourth inhalation, the animals were separated into two groups where half of these animals were subjected to the protocol of forced swimming for ten days with an interval two days, while the other half of the animals remained without stress induction. In order to evaluate the involvement of iNOS activation in this response, guinea pigs were again divided in two groups, one part of them were treated with 1400W (specific inhibitor of iNOS, 2mg/kg ip/day/4 days) or vehicle in the same period, starting 30 minutes before the seventh inhalation. To evaluate the behavioral impact of stress induction, the animals were subjected to open field test, and we obtained the following parameters: distance traveled, average speed, total time of handling. It was also collected a blood sample on the day of pulmonary mechanics to measure cortisol. After 72h of the seventh inhalation, animals were anesthetized, and exsanguinated and slices of peripheral lung tissue were removed, suspended in a Krebs bath, and resistance (Rt) and elastance (Et) of peripheral lung tissue were evaluated either at baseline condition and after oavalbumin challenge (1%). It was also measured the histerisivity. After the end of the mechanical oscillatory evaluation, the same slices of peripheral lung tissue were submited to histopathological analysis. Results: We observed that animals submitted to forced swimming had an increase in adrenal weight, in the serum cortisol, in the distance and time of movement in the open field, showing that forced swimming was effective as stressor. The animals exposed to inhalations with ovalbumin and submited to stress induced by forced swimming had an increase in pulmonary tissue resistance and elastance (p <0.05), had an increased in the number of eosinophils (P <0.05), iNOS positive cells (P <0.05), actin (P <0.05) and 8-epi-PGF2a content (P <0.05) in alveolar septum compared to ovalbumin exposed animals (OVA group). Treatment with 1400W reversed this response in sensitized animals submitted or not to stress induction (P <0.05) There was no difference in the collagen deposition. Administration of 1400W for sensitized and stressed animals reduced all these functional and morphological parameters (P <0.05) except for the actin content of the alveolar septum, eosinophilic infiltration and cortisol levels. Conclusions: In this experimental model, the specific iNOS inhibition attenuated the constriction, the eosinophilic inflammation, the iNOS expression, the lung parenchyma remodeling in animals sensitized and submitted or not to stress induction. These changes may be related to the effects of inducible nitric oxide activation in the modulation of oxidative stress pathway. This study suggests that specific inhibition may amplify the therapeutic strategies to chronic inflammatory lung diseases

Na última década, o uso de sistemas microventilados (sistema VMA) em biotérios possibilitou alojar animais com melhor qualidade sanitária devido ao maior controle ambiental fornecido por esses sistemas. Contudo, ainda é necessária uma melhor avaliação, principalmente no que tange às respostas dos animais. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a integridade do aparelho respiratório (pulmões e traquéia) de cobaias mantidas sob dois sistemas de ventilação diferentes: ventilação geral diluídora (VGD) ou ventilação para conforto e ventilação microambiental (VMA). Foram utilizados quatro grupos de animais que ficaram alojados por 180 dias no CREAL-UFRGS. Os animais foram acompanhados com exames radiológicos dos pulmões a cada 45 dias. A histopatologia foi realizada no último dia de acompanhamento dos animais.Os resultados da análise radiológica não demonstraram diferença significativa entre as lesões pulmonares de cobaias fêmeas e machos mantidas sob os dois sistemas de ventilação. A avaliação histopatológica evidenciou lesões descamativas e de metaplasia no epitélio da traquéia de animais de ambos os sexos e sistemas de ventilação. As lesões encontradas nos pulmões das cobaias machos e fêmeas de ambos os sistemas foram em sua maioria lesões inflamatórias, com intenso infiltrado de mononucleares. A presença e intensidade dessas lesões variaram de acordo com o sistema de ventilação sendo que no grupo VGD é que foram encontradas lesões mais severas. / During the last decade, the use of intracage ventilation systems (VMA) in animal facilities has improved the health status of animal by better environmental control supplied by these systems. Yet, here is little information upon use of VMA systems, mainly in that it referes to animal responses. Thus, the purpose in this investigation was to evaluate epithelial integrity in airways (trachea and lungs) of Guinea pigs kept in two different systems: general diluting ventilation system or comfort ventilation system (VGD) and intracage ventilation systems (VMA). Four groups of animals were kept for 180 days on CREAL- UFRGS. The animals were observed with radiological exam taked from lungs every 45 days. The histophatology was done in the last day of trial. The results show the radiological exams haven’t differences between lung injuries from males and females kept in two different ventilation systems. The histological examination showed lost and changes of trachea epithelium in both, male and female under two different ventilation. The injuries found in lung from Guinea pigs, male and female, under two different ventilation were in the most inflammatory injuries, predominantly mononuclear cells. Intensity of lesions varied according to the ventilation system wich animals were kept, the animals kept in VGD system have presented more intensity of injuries.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:30:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 12910.pdf: 3374698 bytes, checksum: 5941c584a71790c96853ebeca9e2c146 (MD5) / Tese (Doutoramento) / IEA/T / Instituto de Biociencias, Universidade de Sao Paulo - IB/USP