Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T01:45:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vieira_MariaJuliaAcedo_M.pdf: 14524090 bytes, checksum: e7312657f40b9703e57e408fdb0fb89f (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A alta freqüência de heterozigotos e a gravidade clínica dos homozigotos sempre encorajaram os programas de triagem populacional das hemoglobinopatias hereditárias. Os programas comunitários das hemoglobinopatias admitem diferentes formas de abordagem populacional: recém-nascidos,estudantes,gestantes, militares, doadores de sangue, recrutas, entre outros. O presente estudo tem por objetivo avaliar a comunidade de Bragança Paulista pela abordagem dos doadores de sangue e comparar com os resultados encontrados pela abordagem por meio dos estudantes feita anteriormente nessa mesma cidade.O estudo foi realizado em 1.846 doadores voluntários de sangue do período de outubro de 1998 até abril de 1999 no Hemonúcleo da Universidade São Francisco na cidade de Bragança Paulista, interior de São Paulo.Dos 1.846 doadores analisados, encontramos 31 portadores de hemoglobinopatias(1,68%). Esse índice é extremamente próximo do encontrado pela análise dos estudantes, mostrando que os dois meios de abordagem são similares em termos de detecção de hemoglobinopatias, mas o método de doadores de sangue em termos prático é bem mais vantajoso / Abstract: Community programs dealing with hemoglobinopathi es are directed towards different population groups: neonates, students, pregnant women, military personnel, recruits,blood donors,etc. The viability and efficiency of these programs basically depend on the receptivity of the population, which in turn is related to very complex economic psychological and sociocultural actors. Hence, the purpose of this study was to evaluate a community from Bragança Paulista. Based on the results of the blood donors'group and to compare these results with Those previously obtained by the student group of the same city. The study consisted of 1,846 blood donors who donated blood at the São Francisco University Hemocenter Bragança Paulista São Paulo, from October, 1998 to April,1999.The analyses of the 1,846 donors showed 31 individuals who were hemoglobinopathy carriers (1.68%) in the blood donor group.This result was very similar to that obtained for the student group and demonstrated that the two methods are similar in regard to the hemoglobinopathy detection, but in practical terms, the blood donor group method has more advantages / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T16:38:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miranda_SilviaReginaPergamode_D.pdf: 5178120 bytes, checksum: da17651ed235a074ce2126f357ae54e5 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: O estudo das hemoglobinas humanas tem contribuido substancialmente para o entendimento de principios genéticos básicos e para a aplicação de novos métodos na análise de doenças. A utilização de abordagem molecular na investigação dos genes da globina tem conduzido a um rápido progresso no entendimento de sua estrutura e função. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The study of Human hemoglobins has contributed substantially to the undestanding of basic genetic principles and to the applications of new methods in the analysis of disease. The use of molecular analysis to the study of globib genes has led to rapid progress in the understanding of their structure and functions. Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Genetica Medica / Doutor em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2015-12-06T22:54:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Introdução: Estudos anteriores em população brasileira de pacientes com anemia falciforme detectaram maior freqüência do haplótipo Bantu (70%) em pacientes com anemia falciforme na região Sudeste e de haplótipo Benin (51%) na Bahia. Entretanto, indivíduos com hemoglobinopatia SC (HbSC) da região Sudeste, apresentaram alta freqüência do haplótipo Benin (57%). Esta discrepância na freqüência dos haplótipos β S sugere que diferentes mecanismos podem estar envolvidos nesta distribuição, desde uma provável miscigenação devido à migração interna, como uma diminuição do número de indivíduos Bantu, devido a uma maior gravidade da doença. Objetivo: Para uma melhor elucidação dos mecanismos envolvidos na diferença de haplótipos observada entre portadores de HbSS e HbSC, tivemos como objetivo analisar o haplótipo do gene da globina beta em crianças portadoras de HbSC e compará-lo aos obtidos em indivíduos adultos com a mesma hemoglobinopatia. Casuística: 60 crianças e adolescentes com HbSC provenientes do ambulatório de Hemato-Pediatria do Hospital São Paulo e/ou da triagem neonatal para diagnóstico de hemoglobinopatias. Dados laboratoriais de 28 adultos com HbSC analisados anteriormente neste Serviço. Métodos: A identificação dos haplótipos foi feita por PCR seguida de digestão com enzimas específicas, segundo proposto por Sutton et al. (1989). Resultados: Dos sessenta cromossomos estudados para o haplótipo β s , observou-se a presença do haplótipo Bantu (56,7%) em 34 pacientes, Benin em 25 pacientes (41,7%) e Senegal em 1 paciente (1,6%). Quanto ao haplótipo β c , o haplótipo I foi observado em 54 pacientes (90%), o haplótipo II e o haplótipo III (5%) em 3 pacientes cada. Como resultado da análise do genótipo, pôde-se observar 55% (33/60) de Bantu/I, 35% (21/60) de Benin/I, 5% (3/60) de Benin/II e 1,6% (1/60) dos respectivos genótipos: Bantu/III, Benin/III e Senegal/III. A análise comparativa dos genótipos entre crianças/adolescentes e adultos mostrou maior freqüência do genótipo Bantu/I no primeiro grupo (p=0,04). Discussão e Conclusão: As informações obtidas neste estudo são relevantes já que apontam para uma maior prevalência, na infância, do haplótipo Bantu, diferentemente dos indivíduos adultos que apresentaram haplótipo Benin. Com isso, pode-se sugerir que indivíduos com HbSC e haplótipo β S Bantu possuam um quadro clínico mais grave do que os com haplótipo Benin. / Introduction: Previous studies in Brazilian population have shown higher frequency of Bantu haplotype (70%) in patients with sickle cell anemia (SCA) in Southeast region whereas in Bahia (Noertheast) the SCA patients had more Benin haplotype (51%). However, studies in patients with SC hemoglobinopathy (HbSC) from Southeast region showed a higher frequency of Benin haplotype (57%). The different frequency of haplotypes observed in the same region (Southeast) suggest that some mechanisms may be involved on the haplotype distribution in our population, as miscegenation, secondary to internal migration, or lower Bantu patients due to higher severity of this manifestation. Objective: Our aim was to identify the frequency of beta globin haplotypes in children and teenagers with SC disease comparing to previous analysis of adults with HbSC to understand the mechanisms involved in the haplotype difference observed in these population. Methods: We studied 60 children and teenagers with SC disease from the outclinic patients and/or from the neonatal screening Service of Hospital São Paulo. Laboratorial data from 28 adults with HbSC, previously studied, were also analyzed. The haplotype identification was realized by PCR and digestion following the protocol of Sutton et al. (1989). Results: The analyses of the β S haplotype showed: Bantu in 34 (56.7%) patients, Benin in 25 (41.7%) and Senegal in 1 pacient (1.6%). Regarding the β c haplotype, the I haplotype was observed in 54 pacients (90%), the II and III haplotypes were seen in 3 patients each (5%). The genotypes observed were 55% (33/60) of Bantu/I, 35% (21/60) of Benin/I, 5% (3/60) of Benin/II e 1,6% (1/60) of the following genotypes: Bantu/III, Benin/III and Senegal/III. The comparative analyses between children/teenagers and adults showed higher frequency of Bantu/I genotype in the first group (p=0.04). Discussion and Conclusion: The results obtained in this study are relevant because they showed a higher prevalence of Bantu haplotype in children than in adults. This can suggest that HbSC patients with Bantu haplotype may have worse clinical manifestation than patients with Benin haplotype. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Orientador: Celso Dario Ramos, Carmen Silvia Passos Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T10:45:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barros_FabianaBianchinide_M.pdf: 2751233 bytes, checksum: 6f21461552f5ea5427e117087a77755a (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O c/earance de creatinina tem sido relatado como sendo impreciso para a estimativa da taxa de filtração glomerular (TFG) nos pacientes com anemia falciforme (AF). O c/earance de inulina, método de referência para a medida da TFG, é pouco prático para o uso rotineiro nesses pacientes. As medidas da TFG por depuração plasmática de EDTA51Cr raramente têm sido relatadas em portadores de AF. Visando obter valores da referência para a TFG com EDTA-51Cr nesta doença, foram estudados 70 pacientes, sendo 40 mulheres e 30 homens, com idades de 13 a 59 anos (média: 31,6 anos), portadores de AF na forma homozigótica, com creatinina sérica normal e albuminúria = 200 Jlg/min. Todos os pacientes foram submetidos a injeção única de EDTA-51Cr para análise da TFG, dosagem de albumina urinária e medida do hematócrito. A depuração plasmática do EDTA-51Cr foi calculada em diferentes grupos de idade (< 20, 20-29,30-39,40-49 e > 50 anos). A TFG média (± desvio padrão) obtida para os 70 pacientes foi 111,5 ± 23,1 ml/min/l,73 m2. A análise de variância (ANOVA) para verificar o possível efeito da interação entre a TFG por EDTA-51Cr e o sexo, idade, albumina urinária e hematócrito demonstraram a idade do paciente como sendo o único fator de influência na TFG por EDTA-51Cr (p< 0,001). O coeficiente de correlação de Spearman mostrou uma correlação significativa entre a TFG por EDTA-51Cr e a idade do paciente (r= - 0,44; p= 0,0001), mas não entre as medidas com EDTA-51Cr e a albumina urinaria (r = - 0,17, p= 0,1546) ou o hematócrito (r = 0,079, p= 0,5121). O grupo de pacientes na faixa de 20-29 anos apresentou o mais elevado valor médio de TFG por EDTA-51Cr (126,7 ± 20,4 ml/min/l,73 m2), havendo uma redução progressiva desse valor nos grupos mais velhos. Adultos jovens com AF na forma homozigótica, com creatinina sérica normal apresentam valores supranormais de TFG medida por EDTA-51Cr. Esses valores diminuem rapidamente para níveis semelhantes aos normais em faixas etárias mais elevadas. Não foi evidenciada correlação entre albuminúria e TFG nesses pacientes. / Abstract: Creatinine clearance has been reported to be inaccurate for the glomerular filtration rate (GFR) estimation in patients with sickle celI anemia (SCA). Inulin clearance, the reference method for GFR estimation, is impractical for routine use in these patients. 51Cr EDTA measurements of the GFR have been rarely reported in SCA. In order to obtain reference 51Cr-EDTA values in this disease, we studied 70 patients (40 females, 30 males; 13-59 years old, mean: 31.6 years) with homozygous SCA and normal serum creatinine. AlI patients were submitted to single-injection 51Cr-EDTA to analyze the GFR, urinary albumin and hematocrit measurements. 51Cr-EDTA clearances were calculated in different age groups (<20, 20-29, 30-39,40-49 and >50 years). The mean GFR (± standard deviation) obtained for the 70 patients was 111.5 ± 23.1 ml/min. Analysis ofvariance for evaluation ofthe possible interaction effect between 51CrEDT A clearance and sex, age, urinary albumin and hematocrit demonstrated patient age as the only factor influencing 51Cr-EDTA clearance (p<0.001). The Spearman correlation .coefficient showed a significant relationship between 51Cr-EDT A clearance and patient age (r=-0.44, p=0.0001), but not between 51Cr-EDTA and urinary albumin (r =-0.17, p=0.1546) orhematocrit (r =0.079, p=0.5121). The group aged 20-29 years presented the hi~hest 51CrEDTA clearance mean value (126.7 ± 20.4 ml/min), with a progressive reduction in the older groups. Young adults with homozygous SCA and normal serum creatinine present supranormal 51Cr- EDTA GFR values. These values rapidly decrease to normallevels with aging. We did not find association between albuminuria and GFR in these patients. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientadores : Maria de Fatima Sonati, Monica Barbosa de Melo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:43:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jorge_SimoneBordignonde_M.pdf: 1672707 bytes, checksum: 1ca1b039159c022f6091792558490b00 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Mutações de ponto e pequenas inserções ou deleções nos genes da globina a humana podem produzir variantes estruturais de cadeia a e a-talassemia. As mutações podem ser identificadas tanto pelo sequenciamento total dos genes, como por métodos de triagem, os quais selecionam o exon mutado para, então, ser seqüenciado. Embora sejam pequenos (cerca de 1Kb, com 3 exons e 2 introns), os genes da globina a são duplicados (a2 and a1) e extremamente ricos em ligações G-C, o que torna difícil a desnaturação e reduz a eficiência do sequenciamento, causando freqüentes artefatos e necessidade de repetições. Como o sequenciamento é ainda um método demorado e de custo elevado para muitos laboratórios, nós modificamos algumas condições do Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) com o intuito de otimizar a triagem de mutações nos genes da globina a humana / Abstract: Point mutations and small insertions or deletions in the human a-globin genes may produce a-chain structural variants and a-thalassemia. Mutations can be detected either by direct sequencing of the whole gene or by screening methods, which select the mutated exon for sequencing. Although small (around 1 Kb, 3 exons and 2 introns), the a-globin genes are duplicate (a2 and a1) and extremely G-C rich, what makes them difficult to denature and reduces sequencing efficiency, causing frequent artifacts and the need of repetitions. As DNA sequencing is still a time-consuming and expensive method for many laboratories, we modified some conditions of the Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) in order to optimize mutation detection in the a-globin genes / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:45:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_CamilaOrescodos_M.pdf: 6578927 bytes, checksum: db85ac88ccf51f8137bcc2551ebcd458 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As síndromes talassêmicas compreendem um grupo heterogêneo de doenças hereditárias em que existe urna redução no ritmo de síntese de urna ou mais cadeias polipeptídicas da hemoglobina.Nas ß-talassemias ocorre supressão total ou parcial da produção de cadeias ß. O estado homozigótico da maioria das variantes genéticas de ß-talassemia produz o quadro clínico da talassemia maior ou anemia de Cooley. Esses pacientes apresentam acentuada anemia e necessitam de transfusões sangüíneas regulares para sobreviverem. Os indivíduos heterozigotos para ß-talassemia apresentam, com raras exceções, apenas discreta anemia. Existem ainda alguns quadros clínicos não tão graves quanto à forma homozigótica clássica, geralmente não dependentes de transfusão, que são denominados de "talassemia intermediária". A baixa produção de ß-globina em ß-talassemia, com a síntese normal de ?-globinas resulta num excesso de cadeias a que são responsáveis pela eritropoiese não eficaz, danos à membranas de eritrócitos e redução da vida-média de células vermelhas. Recentemente foi descrita urna proteína que formaria um complexo estável quando ligado à a-globinas, evitando que estas sofressem oxidação e precipitação. Esta proteína foi denominada AHSP (Alpha Hemoglobin Stabilizing Protein). A caracterização da proteína foi feita em camundongos e, até a presente data, não são encontrados dados da expressão do gene em humanos. Durante o desenvolvimento deste trabalho foram feitas análises de expressão gênica durante a diferenciação eritróide humana e em pacientes com ß-talassemia, evoluções clínicas maior e intermediária e em indivíduos controles. Foram feitas também análises da seqüência de DNA na procura de polimorfismos ou mutações que pudessem estar relacionados com a modulação da expressão ou relacionados com a doença. A análise da expressão gênica durante a diferenciação eritróide em humanos, mimetizada por cultura de precursores eritróides em cultura de duas fases indica que o gene AHSP está sendo requerido durante toda a diferenciação celular, sugerindo que possivevelmente AHSP está sendo requerido para estabilizar cadeias-? para a formação de hemoglobina. Em pacientes com ß-talassemia,a expressão do gene AHSP está aumentada em pacientes com clínica lntermediaria quando comparados com pacientes com clínica Maior e controles, enquanto que a expressão de ?-globina não demonstra diferenças entre os grupos. Mas dados da razão da expressão do gene AHSP/a-globina demonstram que, quando comparados com os dados obtidos da cultura, os grupos provavelmente apresentam diferenças pelo fato de que ß-talassemia intermediária apresentar mais eritroblastos que os outros grupos, mostrando que possivelmente AHSP não apresenta relação com a evolução clinicaem ß-talassemias. As análises de polimorfismos demonstraram polimorfismos que podem estar relacionado com ß talassemia e uma mutação que pode estar alterando a estrutura protéica de AHSP e talvez contribuindo para a pior evolução clinica de pacientes heterozigotos para ß talassemia. Baseado nestes dados nós prevemos uma importante função deste gene durante a diferenciação eritróide normal, descrevemos polimorfismos que podem relacionar o gene AHSP com ß-talassemias na população estudada durante o desenvolvimento deste trabalho, descrevemos aqui a primeira mutação detectada no gene AHSP que possa mostrar uma possível relação desta proteína com a evolução clinica em ß-talassemia, mas uma importância concreta do gene AHSP na fisiopatologia da ß-talassemia ainda não está bem estabelecida / Abstract: Thalassemia syndromes are a heterogeneous group of heredity diseases in which there is a reduction in the synthesis of one or more hemoglobin chains. In ß-thalassemia there is a reduction or total suppression of the ß-globingene expression. The homozygous state of most ß-thalassemia genetic variants produces the clinic evolution of major thalassemia or Cooley's anemia. These patients present severe anemia and require regular blood transfusions in order to survive. Heterozygous individuaIs present, with exceptions, discrete anemia. There are some clinical evolutions, not as severe as the classic homozygous form, which are often blood transfusion independent, named ß-thalassemia intermedia. Lower levels of ß-globinin ß-thalassemia,with normal synthesis of ?-globin lead to an unbalanced globin synthesis and to an excessive production of ?-globin chains. This results in ineffectiveery thropoiesis, erythrocyte membrane damage and a shortened lifespan of red blood cells. Recently, a protein forming a stable complex when connected with ?-globin avoiding thus the deleterious effects of ?-globin precipitation and oxidation has been described. This protein has been denominated AHSP (Alpha Hemoglobin Stabilizing Protein) and its characterization has only been performed on mice. Until now no data regarding the expression in human genes has been found. The present study analyzed the gene expression of the AHSP gene during human erythroid cell differentiation and in major and intermedia homozygous ß-thalassemia patients and in controls. DNA analysis was performed in order to detect polymorphisms or mutations possibly related to expression modulation or to the disease. The gene expression analysis during human erythroid cell differentiation, reproduced by the culture of the erythroid precursor in two phases demonstrated that the AHSP gene is required during the entire cell differentiation, suggesting that AHSP may possibly be required to stabilizea-chains in order to form hemoglobin .In ß-thalassemic patients, the AHSP gene expression was increased in intermedia patients compared to major patients and controIs, however no difference regardinga-globin gene expression was demonstrated between the groups. Ratio data of the AHSP/a-globin gene expression demonstrated that, when compared with the cell differentiation data, the groups probably presented differences due to the fact that ß-thalassemia intermedia patients presented more erythroblasts than the other groups, suggesting that AHSP may not be related to the clinicalevolution of ß-thalassemia. The polymorphisms analyses showed some one that could be relationship with ß-thalassemia and a mutation that could be changing the AHSP structure an may contributing to a worse clinicevolution in patients heterozygous to ß-thalassemia. Based on these data we suggest that the AHSP gene plays an important role during normal erythroid differentiation, described some polymorphisms that could be relation AHSP gene with ß-thalassemia,described the first mutation on AHSP gene that could show a possible relation of the AHSP with the clinic evolution in ß thalassemia,but a real importance of the AHSP gene in ß-thalassemia pathophysiology is not clearly / Mestrado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientador: Maria de Fatima Sonati / Texto em portugues e ingles / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T22:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wenning_MarciaReginadeSouzaCossa_M.pdf: 14873291 bytes, checksum: a0e561ff18e15096a84204c0f2c4c2a0 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Para identificar as mutações presentes nos genes da globina a da população do Sudeste Brasileiro, foram estudados 7 pacientes com Doença da Hb H e 27 indivíduos com alterações estruturais de cadeia a. A metodologia envolveu a reação em cadeia pela polimerase (PCR), a análise com enzimas de restrição e o sequenciamento direto de DNA. Os pacientes com Hb H, caucasóides. revelaram os seguintes genótipos: -(a)20.5/- a3.7 (2 casos), -- MED/-a3.7 (1 caso), -- MED/aHpha (1 caso) e a interação da deleção -a3.7 com uma forma incomum de talassemia a, não-delecional [-?3.7/(aa)T] (3 casos) Entre as alterações estruturais encontradas estão as Hbs Hasharon (a47AspaHis) (15 caucasóides), J-Rovigo (a 53AlaaAsp) (4 caucasóides), Stanleyville-II (a78AsnaLis) (3 negróides e 1 caucasóide), G-Pest (a74 AspaAsn) (lnegróide), Kurosaki (a7LisaGlu) (l caucasóide), Westmead (al22HisaGln) (1 caucasóide) e Campinas (a26AlaaVal) (1 caucasóide), uma variante não descrita previamente. As Hbs Hasharon e Stanleyville-II foram encontradas em associação com a deleção -a3.7 . Foram determinadas pela primeira vez as bases moleculares das Hbs J-Rovigo, Stanleyville-II, G-Pest e Kurosaki (GCCaGAC, AACaAAA, GACaAAC, AAGaGAG, respectivamente). Embora as hemoglobinopatias sejam freqüentes, pouco se sabe sobre as alterações dos genes a que acometem a população brasileira. As mutações aqui detectadas refletem a importante contribuição italiana e africana na população desta região do Brasil e indicam a presença de formas não-delecionais de talassemia a, bem como de variantes estruturais raras / Abstract: In order to identify the a-globin gene mutations present in the population of southeastern Brazil, 7 unrelated Hb H disease patients and 27 individuals with a-chain structural alterations were studied. Methodology involved PCR, restriction enzyme analyses and DNA direct sequencing. Among the Hb H patients, all Caucasians, 2 showed the -(a)20.5/ -a3.7 genotype, 1 the --MED/-a3.7, 1 the --MED/a Hpha, and 3 the interaction of the - a3.7 deletion with an unusual a-thalassemia, non-deletional [-a3.7/(aa)T]. The structural alterations were the Hbs Hasharon (a47AspaHis) (15 Caucasians), J-Rovigo (a53AlaaAsp) (4 Caucasians), Stanleyville-II (a78AsnaLys) (3 Blacks and 1 Caucasian), G-Pest (a74AspaAsn) (1 Black), Kurosaki (a7LysaGlu) (1 Caucasian), Westmead (al22HisaGln) (1 Caucasian) and Campinas (a26AlaaVal) (1 Caucasian), a variant not previously described. The Hbs Hasharon and Stanleyville-II were found in association with the -a 3 .7 deletion The molecular bases of Hbs J-Rovigo, Stanleyville-II, G-Pest and Kurosaki were determined (GCCaGAC, AACaAAA, GACaAAC, AAGaGAG, respectively). Although hemoglobinopathies are frequent in Brazil, very little is known about the a-globin gene alterations. The deletions and the most prevalent structural alterations found here reflect the Italian and African contribution to the population of this region of Brazil and indicate the presence of non-deletional a thalassemia, as well as rare variants / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:43:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_AidaGomesde_M.pdf: 4241702 bytes, checksum: 2e686bbc6782bae53d7c2f5e992bbb45 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: As síndromes talassêmicas constituem um grupo heterogêneo de doenças genéticas causadas por mutações que afetam a síntese de uma ou mais cadeias globínicas, designadas de acordo com o tipo de cadeia cuja síntese está prejudicada. Nas f3-talassemiasocorre supressão parcial ou total das cadeias f3,o que provoca o excesso de subunidades livres de a-globinas instáveis, insolúveis e formam agregados chamados corpos de inclusão, responsáveis pela destruição de precursores eritróides. Os homozigotos para a f3-talassemia que apresentam anemia grave, necessitam de transfusões sangüíneas regulares, o que produz acúmulo de ferro no organismo, afetando principalmente o fígado, o coração e as glândulas endócrinas. Recentemente foi descrito o gene AHSP (Alpha Haemoglobin Stabilizing Protein) que pode ter participação na síntese de hemogiobina. A proteína produzida por este gene forma um complexo estável quando ligado a a-globinas livres, funcionando como uma chaperona molecular evitando a precipitação das cadeias nas células. O papel desta proteína nas síndromes talassêmicas ainda não está esclarecido, embora haja evidências de que ela possa desempenhar função importante quando existe excesso de cadeias a como nas f3-talassemias. Com base nesses dados, propomos o estudo do efeito da supressão da expressão do gene AHSP em células da linhagem eritroleucêmica humana K562 (ATCC), através do silenciamento gênico por interferência de RNA e em culturas de células mononucleares do sangue periférico de indivíduo portador da mutação no códon 75 do gene AHSP, para análise durante a diferenciação celular. As células mononucleares do indivíduo mutante e do controle foram obtidas a partir do sangue de doadores voluntários no ambulatório do Hemocentro da UNICAMP e foram submetidas a um sistema de cultura de células em duas fases. Através dos resultados obtidos foi possível observar que não houve a interferência esperada do gene AHSP nas condições testadas. Os resultados obtidos também demonstraram expressão diferencial no gene AHSP na presença da mutação no códon 75 que talvez esteja relacionada com a evolução clínica na ~-talassemia. Estes dados sugerem uma importante função do gene AHSP durante a diferenciação eritróide / Abstract: Thalassemia syndromes are a heterogeneous group of genetics diseases caused by mutations that affect the synthesis of one or more hemoglobin chains. In ~-thalassemia partial or total suppression of ~ - chains occurs, provoking the excess of ITeea-globin chains, which are insoluble and form aggregates called inclusion bodies, responsible for the destruction of erythrocyte precursors. Homozigotes for ~-thalassemia that present serious anemia, need regular blood transfusions, leading to the accumulation of iron in the organism, affecting mainly the liver, the heart and the endocrine glands. Recently the AHSP gene was described which may have a participation in hemoglobina synthesis. The protein produced for this gene forms a stable complex with free a-globin, functioning as molecular chaperone. The role of this protein in the thalassemia syndromes hass still not been determined, although it may e predicted that it may play an important function when an excess of chains exists as in the thalassemias. Based on these data we investigated in this project the effect ofthe suppression ofthe expression of AHSP by RNAi gene silencing in the human leukemic cell line, K562 (ATCC) and in cultures of mononuclearcells of the peripheral blood derived ITomdonor with AHSP mutation at codon 75, for analysis during the cellular differentiation. For the analysis of the cellular differentiation, the cells, obtained ITomthe blood of volunteers at the Hematology and Hemotherapy Center of the UNICAMP will be submitted to a system of culture of cells in two phases. These results demonstrated that it was not possible obtain interference of the expression of AHSP. These results also demonstrated differential expression in the AHSP gene when the mutation at codon 75 was presented and maybe was related with the clinical evolution in thalassemia. Based on this data, we proposed an important function of AHSP gene during the erythroid differentiation / Mestrado / Medicina Experimental / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientador: Maria de Fatima Sonati / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T20:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_NadiaMarquesda_M.pdf: 2031346 bytes, checksum: 93f796820a67ac3766a065f2dd5f9259 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A microcitose, definida como volume corpuscular médio dos eritrócitos reduzido (VCM< 82 fl), é uma alteração hematológica usualmente associada às talassemias, aos distúrbios de metabolismo do ferro e a algumas hemoglobinopatias estruturais, como as Hb E, Hb CC e Hb SC. Nos heterozigotos AC, embora comumente observada, a redução do VCM não tem sido bem explicada, sendo sugerido, por alguns autores, que se deva à coexistência com a talassemia a+. Na população negróide brasileira, tanto a Hb C quanto a talassemia a+ são freqüentes e, portanto, com alta probabilidade de associação. Com o objetivo de avaliar a presença e os efeitos desta interação nos valores de VCM, HCM e nos percentuais de Hb C, a deleção -a3.7 (rightward deletion) foi investigada pela reação em cadeia da polimerase (PCR) em 149 indivíduos com Hb C (136 AC, 10 SC e 3 CC). Paralelamente, os níveis de Hb F também foram determinados. Vinte e sete indivíduos (18,1%) apresentaram talassemia a+: 24 (16,1%) eram heterozigotos -a/aa (21 AC e 3 SC) e 3 (2,0%) eram homozigotos -a/-a (2 AC e 1 SC). Como esperado, as medianas de VCM, HCM e % Hb C foram significativamente mais baixas no grupo dos talassêmicos. As medianas de % Hb F não diferiram estatisticamente entre talassêmicos e os indivíduos que não apresentaram a deleção. A microcitose foi observada em 43 heterozigotos AC (31,6%), mas em 30 deles (22% do total) a deleção -a3.7 não foi detectada. Os valores de VCM foram comparados aos percentuais de Hb C e apenas uma fraca correlação foi observada. No presente estudo, a associação com a talassemia a+ não explicou a redução do VCM em 22% dos indivíduos AC, indicando que essa alteração hematológica pode ser resultante da própria presença da Hb C, embora sua proporção nas hemácias não seja o fator determinante do grau de microcitose / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Bernardo Beiguelman / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-18T03:20:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramalho_AntonioSergio_D.pdf: 6302464 bytes, checksum: ede9ec33e4e3782aabef4ccec85a953c (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed / Doutorado / Doutor em Medicina