Orientador: Rodney Kozlowiski de Azevedo / Resumo: Mixozoários são metazoários parasitos obrigatórios principalmente de peixes, sendo alguns dos mais importantes patógenos desses hospedeiros. Existem cerca de 2200 espécies descritas para a classe Myxosporea, porém no Brasil os estudos ainda continuam escassos. Nesse estudo foram coletados peixes de diferentes espécies entre março de 2014 e agosto de 2015, para ser verificado a presença de mixozoários parasitos. Foram encontrados mixozoários do gênero Henneguya e Myxobolus parasitando peixes das ordens Characiformes e Siluriformes. Os parasitos coletados foram processados visando uma análise morfológica através de microscopia de luz, histopatologia e análise ultraestrutural, observando-se ainda a relação parasito-hospedeiro. Henneguya sp. 1 foi encontrado parasitando as brânquias de Astyanax altiparanae e Henneguya sp. 2 parasitando as brânquias de Leporinus friderici. Myxobolus prochilodus, Henneguya sp. 3 e Myxobolus sp. 1 foram encontrados parasitando as brânquias de Prochilodus lineatus causando deformações nas lamelas primárias dos peixes. Henneguya sp. 4 foi encontrada parasitando as brânquias de Cyphocharax modestus, causando uma junção das lamelas secundárias e diminuindo a área de respiração útil do peixe. A análise ultraestrutural permitiu a compreensão da interface parasito-hospedeiro. Também foram observados Henneguya guanduensis parasitando o intestino de Hoplosternum litoralle e Myxobolus sp. 2 parasitando o intestino de Rhamdia quelen. Myxobolus aureus foi enc... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Myxozoans are metazoan parasites mainly on fish, with some of the most important pathogens of these hosts. There are about 2,200 described species for Myxosporea class, but in Brazil the studies are still scarce. In this study fish of different species were collected between March 2014 and August 2015 to be verified the presence of myxozoans parasites. The genera of myxozoans found were Henneguya and Myxobolus parasitizing fish of Characiformes and Siluriformes orders. The parasites collected were processed aiming a morphological analysis by light microscopy, histopathology and ultrastructural analysis, observing the host-parasite relationship. Henneguya sp. 1 was found parasitizing the gills of Astyanax altiparanae and Henneguya sp. 2 parasitizing the gills of Leporinus friderici. Myxobolus lomi (Myxobolus prochilodus), Henneguya sp. 3 and Myxobolus sp. 1 were found parasitizing the gills of Prochilodus lineatus causing deformities in fish primary lamellae. Henneguya sp. 4 was found parasitizing the gills of Cyphocharax Modestus, causing a junction of secondary lamellae and decreasing the useful breathing area of the fish. The ultrastructural analysis allowed the understanding of parasite-host interface. Also were observed Henneguya guanduensis parasitizing the intestine of Hoplosternum litoralle and Myxobolus sp. 2 parasitizing the intestine of Rhamdia quelen. Myxobolus aureus was found parasitizing the gonads and liver of Salminus hilarii. Histopathological analysis indic... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O filo Myxozoa compreende organismos parasitários que infectam vertebrados, principalmente peixes, em diversas regiões do Brasil e do mundo. Com mais de 2180 espécies já descritas os mixosporídeos estão entre os patógenos mais importantes que infectam peixes tanto de ambiente natural como de sistemas de criação. Neste estudo, foram realizadas coletas no ano de 2012, onde foram capturados 13 espécimes de piraputanga (Brycon hilarii) e 14 espécimes de piauçu (Leporinus macrocephalus) oriundos de pisciculturas do estado de São Paulo. Foram encontrados mixosporídeos infectando o rim de B. hilarii e o filamento branquial de L. macrocephalus. Para a identificação das espécies de parasitos, foi utilizada a microscopia de luz para a análise morfológica e, também, histopatológica para a observação das alterações decorrentes do parasitismo. A análise ultraestrutural foi realizada para verificar a interação parasita-hospedeiro do mixosporídeo encontrado na piraputanga. A análise filogenética do gene 18S rDNA avaliou a relação entre as espécies identificadas com outras espécies de mixosporídeos já descritas. Uma nova espécie de Myxobolus foi descrita neste estudo infectando o rim de B. hilarii e a caracterização molecular e filogenética de Henneguya leporinicola, encontrado infectando o filamento branquial de L. macrocephalus, foi realizada. No estudo filogenético, utilizando o método de Máxima Verossimilhança para ambas as espécies, verificou-se que as espécies de mixosporídeos se agruparam primeiro de acordo com a ordem do hospedeiro Characiforme e pelo tropismo tecidual. A análise molecular demonstrou diferenças genéticas significativas em comparação com outras espécies já descritas na América do Sul e em outros países. / The Myxozoa phylum comprises parasitic organisms that infect vertebrates, mainly fish, in many areas from Brazil and from the world. With more than 2180 species already described, myxosporeans are among the most important fish pathogens which infect both natural environment and breeding systems. In this study, captures were made in 2012, where 13 specimens of piraputanga (Brycon hilarii) and 14 specimens of piauçu (Leporinus macrocephalus) proceeding from fish farms in the state of Sao Paulo were capured. Myxosporeans were found infecting the kidney of B. hilarii and the gill filament of L. Macrocephalus. For the identification of parasite species, it was used light microscopy for morphological and histopathological analyzes to observe the damage caused by parasitism. The ultrastructural analysis was performed to verify the host-parasite myxosporean interaction found on piraputanga. The phylogenetic analysis of 18S rDNA evaluated the relation between the species identified with other myxosporean species already described. A new Myxobolus species was described in this study infecting the kidney of B. hilarii and molecular characterization and phylogenetic of Henneguya leporinicola, infecting the gill filament of L. macrocephalus, was performed. In phylogenetic study, using the method of Maximum Likelihood for both species, it was observed that the species of myxosporean grouped according to the order of the host Characiform and the tissue tropism. Molecular analysis showed significant genetic differences with other described species in South America and other countries.

Os organismos do filo Myxozoa são endoparasitas obrigatórios que infectam principalmente peixes em diversas regiões do mundo, estando entre os mais importantes patógenos de peixes, com mais de 2180 espécies descritas porém, pouco se conhece deste parasita em peixes do Brasil. Neste estudo foram realizadas coletas entre abril de 2011 a agosto de 2012, onde foram coletados oito exemplares de piapara (Leporinus obtusidens) e dezessete exemplares de dourado (Salminus brasiliensis), oriundos do rio Mogi-Guaçu, próximo a Cachoeira de Emas, localizada no município de Pirassununga, estado de São Paulo. As análises morfológicas (microscopia de luz, histologia e a análise ultraestrutural), técnicas de biologia molecular (PCR e sequenciamento) foram utilizadas na identificação de duas novas espécies de Henneguya e análise filogenética do gene 18S rDNA foi realizada para avaliar a relação filogenética desta duas novas espécies com outras espécies de mixosporídeos. Duas novas espécies foram encontradas neste estudo. Uma delas foi encontrada infectando a nadadeira de L. obtusidens e é descrita neste estudo como Henneguya sp. 1 e uma outra espécie encontrada infectando a membrana do arco da branquial e na membrana entre os raios da nadadeira de S. brasiliensis, a qual foi aqui descrita como Henneguya sp. 2. A análise histopatológica revelou que Henneguya sp. 1 ocasionou uma leve compressão no tecido adjacente. A análise ultra-estrutural permitiu a compreensão da interface parasita-hospedeiro e o processo de esporogênese das duas espécies descritas; além disso, foi observado a presença de vesículas esbranquiçadas para Henneguya sp. 2, com função ainda desconhecida. Nos estudos filogenéticos, utilizando os métodos máxima parcimônia e máxima verossimilhança para ambas as espécies, foi avaliado no estudo 1 que Henneguya sp. 1, parasita de peixe characiforme, aparece isolado dando origem a um clado irmão de Henneguya spp., parasitas de siluriformes, characifomes e esociformes; já no estudo 2, a análise filogenética da espécie Henneguya sp. 2, também parasita de peixe characiforme, foi observado a formação de um clado com 3 espécies parasitas de characiformes, sendo duas espécies de Henneguya descritas neste estudo e o Myxobolus oliveirai. / The parasites of Myxozoa are endoparasites that infect mainly fishes in several parts of the world, being this group considered one of the most important pathogens of fishes, with more than 2180 species described. However little is known about this group of parasite in Brazil. During this study, eight piapara (Leporinus obtusidens) and seventeen dourado (Salminus brasiliensis) were caught in Mogi-Guaçu river in a period from April 2011 to August 2012, near waterfall Cachoeira de Emas located at Pirassununga city, state of São Paulo, Brazil. Morphological analyses (light microscopy, histology and ultrastructure) and molecular biology techniques (PCR and sequencing) where done to identify two new species of Henneguya and phylogenetic analyses using the 18S rDNA gene were performed to evaluate the phylogenetic relationship of this two new species among others myxosporeans available on GenBank. Henneguya sp. 1 has been described infecting the fin of L. obtusidens and Henneguya sp. 2 has been described infecting the gill arch membrane and the fin membrane of S. brasiliensis. The histopathological analyses revealed that Henneguya sp. 1 occasioned a small compression of adjacent tissue of the host. Ultraestructural analyses showed the host-parasite\'s interface and the sporogenesis of the two Henneguya spp. furthermore Henneguya sp. 2 showed several whitish vesicles with an unknown function. Phylogenetic studies using the maximum parsimony and maximum likelihood methods, showed in the first study Henneguya sp .1 appearing alone as a basal branch of a sister clade composed by Henneguya parasites of siluriforms, characiforms and esociforms fishes, and the second study showed Henneguya sp. 2 grouped with Hennegua sp. 1 and Myxobolus oliveirai, both parasites of characiforms fishes.

Os organismos do filo Myxozoa são endoparasitas obrigatórios que infectam principalmente peixes em diversas regiões do mundo, estando entre os mais importantes patógenos de peixes, com mais de 2180 espécies descritas porém, pouco se conhece deste parasita em peixes do Brasil. Neste estudo foram realizadas coletas entre abril de 2011 a agosto de 2012, onde foram coletados oito exemplares de piapara (Leporinus obtusidens) e dezessete exemplares de dourado (Salminus brasiliensis), oriundos do rio Mogi-Guaçu, próximo a Cachoeira de Emas, localizada no município de Pirassununga, estado de São Paulo. As análises morfológicas (microscopia de luz, histologia e a análise ultraestrutural), técnicas de biologia molecular (PCR e sequenciamento) foram utilizadas na identificação de duas novas espécies de Henneguya e análise filogenética do gene 18S rDNA foi realizada para avaliar a relação filogenética desta duas novas espécies com outras espécies de mixosporídeos. Duas novas espécies foram encontradas neste estudo. Uma delas foi encontrada infectando a nadadeira de L. obtusidens e é descrita neste estudo como Henneguya sp. 1 e uma outra espécie encontrada infectando a membrana do arco da branquial e na membrana entre os raios da nadadeira de S. brasiliensis, a qual foi aqui descrita como Henneguya sp. 2. A análise histopatológica revelou que Henneguya sp. 1 ocasionou uma leve compressão no tecido adjacente. A análise ultra-estrutural permitiu a compreensão da interface parasita-hospedeiro e o processo de esporogênese das duas espécies descritas; além disso, foi observado a presença de vesículas esbranquiçadas para Henneguya sp. 2, com função ainda desconhecida. Nos estudos filogenéticos, utilizando os métodos máxima parcimônia e máxima verossimilhança para ambas as espécies, foi avaliado no estudo 1 que Henneguya sp. 1, parasita de peixe characiforme, aparece isolado dando origem a um clado irmão de Henneguya spp., parasitas de siluriformes, characifomes e esociformes; já no estudo 2, a análise filogenética da espécie Henneguya sp. 2, também parasita de peixe characiforme, foi observado a formação de um clado com 3 espécies parasitas de characiformes, sendo duas espécies de Henneguya descritas neste estudo e o Myxobolus oliveirai. / The parasites of Myxozoa are endoparasites that infect mainly fishes in several parts of the world, being this group considered one of the most important pathogens of fishes, with more than 2180 species described. However little is known about this group of parasite in Brazil. During this study, eight piapara (Leporinus obtusidens) and seventeen dourado (Salminus brasiliensis) were caught in Mogi-Guaçu river in a period from April 2011 to August 2012, near waterfall Cachoeira de Emas located at Pirassununga city, state of São Paulo, Brazil. Morphological analyses (light microscopy, histology and ultrastructure) and molecular biology techniques (PCR and sequencing) where done to identify two new species of Henneguya and phylogenetic analyses using the 18S rDNA gene were performed to evaluate the phylogenetic relationship of this two new species among others myxosporeans available on GenBank. Henneguya sp. 1 has been described infecting the fin of L. obtusidens and Henneguya sp. 2 has been described infecting the gill arch membrane and the fin membrane of S. brasiliensis. The histopathological analyses revealed that Henneguya sp. 1 occasioned a small compression of adjacent tissue of the host. Ultraestructural analyses showed the host-parasite\'s interface and the sporogenesis of the two Henneguya spp. furthermore Henneguya sp. 2 showed several whitish vesicles with an unknown function. Phylogenetic studies using the maximum parsimony and maximum likelihood methods, showed in the first study Henneguya sp .1 appearing alone as a basal branch of a sister clade composed by Henneguya parasites of siluriforms, characiforms and esociforms fishes, and the second study showed Henneguya sp. 2 grouped with Hennegua sp. 1 and Myxobolus oliveirai, both parasites of characiforms fishes.

O filo Myxozoa compreende organismos parasitários que infectam vertebrados, principalmente peixes, em diversas regiões do Brasil e do mundo. Com mais de 2180 espécies já descritas os mixosporídeos estão entre os patógenos mais importantes que infectam peixes tanto de ambiente natural como de sistemas de criação. Neste estudo, foram realizadas coletas no ano de 2012, onde foram capturados 13 espécimes de piraputanga (Brycon hilarii) e 14 espécimes de piauçu (Leporinus macrocephalus) oriundos de pisciculturas do estado de São Paulo. Foram encontrados mixosporídeos infectando o rim de B. hilarii e o filamento branquial de L. macrocephalus. Para a identificação das espécies de parasitos, foi utilizada a microscopia de luz para a análise morfológica e, também, histopatológica para a observação das alterações decorrentes do parasitismo. A análise ultraestrutural foi realizada para verificar a interação parasita-hospedeiro do mixosporídeo encontrado na piraputanga. A análise filogenética do gene 18S rDNA avaliou a relação entre as espécies identificadas com outras espécies de mixosporídeos já descritas. Uma nova espécie de Myxobolus foi descrita neste estudo infectando o rim de B. hilarii e a caracterização molecular e filogenética de Henneguya leporinicola, encontrado infectando o filamento branquial de L. macrocephalus, foi realizada. No estudo filogenético, utilizando o método de Máxima Verossimilhança para ambas as espécies, verificou-se que as espécies de mixosporídeos se agruparam primeiro de acordo com a ordem do hospedeiro Characiforme e pelo tropismo tecidual. A análise molecular demonstrou diferenças genéticas significativas em comparação com outras espécies já descritas na América do Sul e em outros países. / The Myxozoa phylum comprises parasitic organisms that infect vertebrates, mainly fish, in many areas from Brazil and from the world. With more than 2180 species already described, myxosporeans are among the most important fish pathogens which infect both natural environment and breeding systems. In this study, captures were made in 2012, where 13 specimens of piraputanga (Brycon hilarii) and 14 specimens of piauçu (Leporinus macrocephalus) proceeding from fish farms in the state of Sao Paulo were capured. Myxosporeans were found infecting the kidney of B. hilarii and the gill filament of L. Macrocephalus. For the identification of parasite species, it was used light microscopy for morphological and histopathological analyzes to observe the damage caused by parasitism. The ultrastructural analysis was performed to verify the host-parasite myxosporean interaction found on piraputanga. The phylogenetic analysis of 18S rDNA evaluated the relation between the species identified with other myxosporean species already described. A new Myxobolus species was described in this study infecting the kidney of B. hilarii and molecular characterization and phylogenetic of Henneguya leporinicola, infecting the gill filament of L. macrocephalus, was performed. In phylogenetic study, using the method of Maximum Likelihood for both species, it was observed that the species of myxosporean grouped according to the order of the host Characiform and the tissue tropism. Molecular analysis showed significant genetic differences with other described species in South America and other countries.

Orientador: Rodney Kozlowiski de Azevedo / Resumo: Os parasitos do filo Myxozoa são endoparasitas obrigatórios que infectam peixes, anfíbios, répteis, mamíferos, aves aquáticas em diversas regiões do mundo, com mais de 2180 espécies descritas, estando entre os mais importantes patógenos de peixes, porém, pouco se conhece deste parasito em peixes do Brasil. Neste estudo foram realizadas coletas entre março e setembro de 2016, na qual foram coletados 30 exemplares de curimba (Prochilodus lineatus) e dezessete exemplares de lambari (Astyanax altiaparanae), oriundos do rio Batalha, em dois locais de coleta, um ponto de coleta no município de Reginópolis e outro ponto no município de Agudos, estado de São Paulo. Foram utilizadas análises morfológicas (microscopia de luz, histologia e análise ultraestrutural), técnicas de biologia molecular (PCR e sequenciamento) na descrição de duas espécies de Henneguya Duas espécies foram documentadas neste estudo, uma delas foi encontrada infectando o filamento primário da brânquia de P. lineatus e é descrita neste estudo como Henneguya prochilodus e outra espécie encontrada infectando o filamento secundário da brânquia de A. altiparanae, a qual foi proposto uma descrição expandida da Henneguya chydadea Barassa et al. (2003), previamente descrita utilizando análises morfológicas e histopatologia. Análise filogenética do gene 18S rDNA foi realizada para avaliar a relação filogenética dessas duas espécies de Henneguya com outras espécies de mixosporídeos da América do Sul e de outras regiões do m... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Myxozoa parasites are obligate endoparasites that infect fish, amphibians, reptiles, mammals, waterfowl in several regions of the world, with more than 2180 described species, being among the most important fish pathogens, but little is known of this parasite in fish from Brazil. In this study were collected from March to September 2016, where 30 specimens of Curimba (Prochilodus lineatus) and seventeen specimens of lambari (Astyanax altiaparanae) from the Batalha River, in two collection sites, a collection point in the municipality of Reginópolis and another point in the municipality of Agudos, state of São Paulo. Morphological analyzes (light microscopy, histology and ultrastructural analysis), molecular biology techniques (PCR and sequencing) were used to describe two species of Henneguya. Two species were documented in this study, one of which was found infecting the primary filament of the gill of P. lineatus and is described in this study as Henneguya prochilodus and another species found infecting the secondary filament of the gill of A. altiparanae, which has been proposed an expanded description of Henneguya chydadea Barassa et al. (2003), previously described using morphological analysis and histopathology. Phylogenetic analysis of the 18S rDNA gene was performed to evaluate the phylogenetic relationship of these two species of Henneguya with other species of myxosporids from South America and other regions of the world. / Mestre

Submitted by Vinicius Panciera Tagliavini (viniciustagliavini@gmail.com) on 2018-04-21T17:38:50Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Vinícius Panciera Tagliavini.pdf: 3064208 bytes, checksum: 4c9144ee7408032982fc3216adac6c5a (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2018-04-23T17:37:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 tagliavini_vp_me_bot.pdf: 3064208 bytes, checksum: 4c9144ee7408032982fc3216adac6c5a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-23T17:37:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tagliavini_vp_me_bot.pdf: 3064208 bytes, checksum: 4c9144ee7408032982fc3216adac6c5a (MD5) Previous issue date: 2018-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Os parasitos do filo Myxozoa são endoparasitas obrigatórios que infectam peixes, anfíbios, répteis, mamíferos, aves aquáticas em diversas regiões do mundo, com mais de 2180 espécies descritas, estando entre os mais importantes patógenos de peixes, porém, pouco se conhece deste parasito em peixes do Brasil. Neste estudo foram realizadas coletas entre março e setembro de 2016, na qual foram coletados 30 exemplares de curimba (Prochilodus lineatus) e dezessete exemplares de lambari (Astyanax altiaparanae), oriundos do rio Batalha, em dois locais de coleta, um ponto de coleta no município de Reginópolis e outro ponto no município de Agudos, estado de São Paulo. Foram utilizadas análises morfológicas (microscopia de luz, histologia e análise ultraestrutural), técnicas de biologia molecular (PCR e sequenciamento) na descrição de duas espécies de Henneguya Duas espécies foram documentadas neste estudo, uma delas foi encontrada infectando o filamento primário da brânquia de P. lineatus e é descrita neste estudo como Henneguya prochilodus e outra espécie encontrada infectando o filamento secundário da brânquia de A. altiparanae, a qual foi proposto uma descrição expandida da Henneguya chydadea Barassa et al. (2003), previamente descrita utilizando análises morfológicas e histopatologia. Análise filogenética do gene 18S rDNA foi realizada para avaliar a relação filogenética dessas duas espécies de Henneguya com outras espécies de mixosporídeos da América do Sul e de outras regiões do mundo. / The Myxozoa parasites are obligate endoparasites that infect fish, amphibians, reptiles, mammals, waterfowl in several regions of the world, with more than 2180 described species, being among the most important fish pathogens, but little is known of this parasite in fish from Brazil. In this study were collected from March to September 2016, where 30 specimens of Curimba (Prochilodus lineatus) and seventeen specimens of lambari (Astyanax altiaparanae) from the Batalha River, in two collection sites, a collection point in the municipality of Reginópolis and another point in the municipality of Agudos, state of São Paulo. Morphological analyzes (light microscopy, histology and ultrastructural analysis), molecular biology techniques (PCR and sequencing) were used to describe two species of Henneguya. Two species were documented in this study, one of which was found infecting the primary filament of the gill of P. lineatus and is described in this study as Henneguya prochilodus and another species found infecting the secondary filament of the gill of A. altiparanae, which has been proposed an expanded description of Henneguya chydadea Barassa et al. (2003), previously described using morphological analysis and histopathology. Phylogenetic analysis of the 18S rDNA gene was performed to evaluate the phylogenetic relationship of these two species of Henneguya with other species of myxosporids from South America and other regions of the world. / Capes: 20400004

Myxozoans are cnidarian parasites of primarily freshwater and marine fish, with some being important pathogens of aquacultured fish species worldwide. Their life cycles have waterborne actinospores released from aquatic annelid definitive hosts and myxospore stages in fish intermediate hosts. In the southeastern United States, catfish aquaculture is burdened by annual losses to a myriad of infectious diseases. Henneguya ictaluri, the causative agent of proliferative gill disease in channel catfish Ictalurus punctatus and female channel catfish x male blue catfish Ictalurus furcatus hybrids, is the most commonly diagnosed parasitic disease of catfish in Mississippi. Other myxozoans infect these ictalurid fish, but their impact on catfish production is unknown. Surveys of actinospores from the oligochaete Dero digitata and myxospore stages from fish revealed an unexpected diversity for these production systems. Six genetically distinct actinospores representing four collective groups were observed from D. digitata. Herein, two novel Henneguya spp. are described from the gills and a novel Unicauda sp. is described from the intestinal tract of channel catfish. One Henneguya sp. was linked to its actinospore stage and represents the fourth known life-cycle in the genus. In addition to catfish, smallmouth buffalo Ictiobus bubalus polycultured with catfish were examined and two Myxobolus spp. were characterized from the gills. Phylogenetic analyses strongly support a clade of ictalurid Henneguya spp. and a clade of catostomid Myxobolus spp. Although diverse, H. ictaluri is the only myxozoan in catfish attributed to significant losses. With no feasible method of control or treatment, investigations into less susceptible fish were initiated and showed promise. Infectivity trials characterizing H. ictaluri development in channel, blue, and hybrid catfish were performed. Channel catfish were suitable hosts with myxospores developing in the gills by six weeks and persisting for at least 14 weeks. In hybrid catfish arrested or limited development was observed with no pseudocysts observed during Trial 1 and only two at 14 weeks during Trial 2. These results may suggest a possible way of decreasing losses attributed to PGD through hybrid catfish monoculture or fish crop rotation to reduce the number of infectious myxospores released into the pond.

Proliferative gill disease (PGD) caused by the myxozoan parasite Henneguya ictaluri is one of the most devastating parasitic infections in channel catfish aquaculture. Currently, there is no effective treatment for H. ictaluri and the unpredictable outbreaks can result in 100% mortality. Management strategies have been developed to prevent losses in newly stocked fingerlings by evaluating the PGD status of a pond prior to stocking, which is difficult since resident fish may not show clinical signs even when actinospore levels are lethal to naive fish. Current diagnostic methods are limited to the identification of an active infection and methods of predicting potential outbreaks have several limitations. The PGD status of a pond to be stocked can be determined using sentinel fish exposures which are labor intensive and require a source of parasite free fish. These limitations necessitated the development of more rapid and efficient means of determining actinospore concentrations to determine the risk of losing fish prior to stocking. The development of a quantitative real-time polymerase chain reaction (QPCR) assay provided a more rapid, sensitive and quantitative method of diagnosing active infections and also provides a means to predict potential PD outbreaks and determine the PGD status of a pond prior to stocking. Another approach in the control of this parasite is the identification of a less susceptible culturable species or to identify traits that could be targeted in a selective breeding program. Challenge studies have shown that the closely related blue catfish (Ictalurus furcatus) does not exhibit as severe an inflammatory response to H. ictaluri and mortalities are significantly lower than in channel catfish. Comparisons of PGD severity and H. ictaluri infection in channel catfish, blue catfish and channel x blue catfish backcross hybrids by gross examination, histopathology and the newly developed H. ictaluri real-time PCR (QPCR) assay supported previous research suggesting the life cycle of the parasite can not be completed as efficiently through the blue catfish host. This dissertation describes the development and validation of a QPCR assay to detect H. ictaluri in both fish tissues and environmental samples and the application of this assay in both research and production settings.

O filo Myxozoa possui uma grande diversidade, sendo conhecidas cerca de 2300 espécies, as quais infectam principalmente peixes, mas também anfíbios répteis e aves. Para este estudo, coletas dos peixes de água doce foram realizadas no Pantanal Mato-grossense (estados de Mato Grosso e do Matogrosso do sul) e no Rio Mogi Guaçu e piscicultura do CEPTA/ICMBio (estado de São Paulo), visando estudos moleculares e morfológicos de mixosporídeos parasitas de 6 espécies de peixes. Os resultados das análises moleculares (amplificação e sequenciamento do gene 18S rDNA) e morfológicas revelaram a ocorrência de 11 espécies de mixosporídeos, sendo cinco parasitas comuns a Pseudoplatystoma corruscans e Pseudplatystoma fasciatum, três parasitas de Salminus brasiliensis, uma espécie parasita de Brycon hilarii, uma de Zungaru jahu e outra de Piaractus mesopotamicus. Das onze espécies, cinco ainda não são descritas pela literatura. A análise filogenética, utilizando o método de Neighbor-Joining, mostrou que o agrupamento das espécies ocorre principalmente de acordo com a proximidade filogenética de seus hospedeiros e que todas as espécies da América do Sul agruparam em um clado monofilético. Foi observado, em alguns pontos da árvore filogenética, que o tropismo de tecido e/ou órgão de infecção caracteriza um importante fator de seleção evolutiva. Com menor frequência também foi observado alguns agrupamentos resultantes de parasitas cuja maior relação aparente era a sua localização geográfica, porém, novos estudos ainda são necessários para determinar o verdadeiro papel deste fator na evolução dos mixosporídeos. / The phylum Myxozoa has a great diversity, with about 2300 known species, which infect mainly fishes, but also amphibians, reptiles and birds. In this study, freshwater fishes were caught in the Brazilian Pantanal wetland (Mato Grosso and Mato Grosso do Sul states) and in the Mogi Guaçu River and CEPTA/ICMBio\'s fishfarm (São Paulo state) aiming the molecular and morphological studies of myxosporeans parasites of 6 fish species. The results of molecular (amplification and sequencing of the 18S rDNA gene) and morphological analysis revealed the occurrence of 11 species of myxosporeans, five of them infecting both Pseudoplatystoma corruscans and Pseudoplatystoma fasciatum, three parasites of Salminus brasiliensis, one specie infecting Brycon hilarii, one infecting Zungaro jahu and another infecting Piaractus mesopotamicus. Of these eleven species, five are not yet described by literature. The phylogenetic analysis, using the Neighbor-joining method, showed that the species clustered mainly according to the phylogenetic distance of their hosts and that all species of South America were grouped in a monophyletic clade. In some positions of the phylogenetic tree was observed that tissue tropism and/or organ of infection characterized an important factor in evolutionary selection. Less frequently was also observed some groups containing species which the major apparent relation is its geographical position, however, new studies are still needed to determine the true role of this factor in the evolution of myxosporeans.