Orientador: Áureo Evangelista Santana / Banca: José Corrêa de Lacerda Neto / Banca: Antonio Carlos Alessi / Banca: Márcia Ferreira da Rosa Sobreira / Banca: Raimundo Souza Lopes / Resumo: Com o objetivo de avaliar e comparar as alterações clínicas e hematológicas de equinos submetidos a modelo experimental de obstrução intestinal, 24 animais foram distribuídos em quatro grupos, controle instrumentado (GI), obstrução do duodeno (GII), íleo (GIII) e cólon maior (GIV). O exame clínico e a colheita das amostras de sangue e de líquido peritoneal foram realizados antes da cirurgia (T0), durante as obstruções (T30ob-T180ob) e após as desobstruções (T30des-T7º). Os equino do GII e do GIII apresentaram sinais de dor abdominal, diminuição da motilidade intestinal e aumento da freqüência cardíaca e respiratória. Nestes mesmos grupos houve diminuição na contagem de leucócitos a qual posteriormente, cedeu lugar a leucocitose por neutrofilia, com desvio à esquerda. Na análise hemogasométrica apenas os animais do GIV e os do GII, nos apresentaram aumento do pH(v), da cHCO- 3(vP) e da cBase(v) que, acrescidos do aumento da pCO2(v) e da ctCO2(v), caracterizou a alcalose metabólica com compensação respiratória. No líquido peritoneal os animais do GII e do GIII apresentaram aumento na contagem global celular, bem como na concentração de proteína total, fibrinogênio, lactato e de fósforo inorgânico. Os resultados clínico-laboratoriais obtidos foram associados à distensão intestinal, resultante do modelo de obstrução e, indicam que algumas alterações laboratoriais quando analisadas em conjunto com os dados obtidos no exame clínico, podem auxiliar na identificação do segmento intestinal obstruído, na elaboração do prognóstico e no acompanhamento da evolução do processo de cura. / Abstract: This study aimed to evaluate and compare clinical and hematological alterations in horses submitted to an experimental model of intestinal obstruction. Twenty-four animals were divided in four groups: instrumented control (GI), duodenum obstruction (GII), ileum obstruction (GIII) and large colon obstruction (GIV). Clinical examination was carried out and blood and peritoneal samples were collected before surgery (T0), during the obstruction (T30ob-T180ob) and after unblocking procedures (T30des-T7º). Animals from GII and from GIII presented signs of abdominal pain, reduced gastrointestinal sounds and increased heart and respiratory rates, as well as leukopenia and neutropenia which later developed to leukocytosis, neutrophilia and left shifts. Animals from GIV and from GII presented higher values for pH(v), cHCO- 3(vP) and cBase(v) which, added to the increase of pCO2(v) and ctCO2(v), characterized the metabolic alkalosis with respiratory compensation. After unblocking procedure animals from GII and GIII presented higher global cells counts, as well as in fibrinogen, total protein concentrations, lactate and inorganic phosphorus concentrations in peritoneal fluid were also increased. The results were associated to enteric injury from the obstruction model showing that some laboratorial alterations when analyzed, including clinical examination, can be helpful at the identification of which intestinal segment is blocked, for draw up a prognosis and can be used as support in the evolution of cure process. / Doutor

Orientador: Áureo Evangelista Santana / Banca: Raquel Yvonne Arantes Baccarin / Banca: Rafael Resende Faleiros / Banca: Marcia Rita Fernandes Machado / Banca: Juliana Regina Peiró / Resumo: Trabalhos recentes relatam a eficácia do azul de metileno na prevenção dos danos impostos por espécies reativas de oxigênio aos tecidos de vários órgãos, em vários modelos de isquemia/reperfusão. Este estudo foi concebido com o fito de avaliar o efeito do azul de metileno sobre as respostas clínico-laboratoriais, na obstrução experimental do jejuno em equinos, associada à exposição de lipopolissacarídeo. Dois grupos de animais foram submetidos à indução da endotoxemia e à obstrução experimental do jejuno em período anterior. Posteriormente administrou-se em um deles, infusão de azul de metileno (3 mg/kg I.V), 15 minutos antes da obstrução experimental, e no outro, a mesma infusão 15 minutos antes da desobstrução do jejuno. Foi realizada avaliação clínica, hematológica e bioquímico-sérica, e perfil bioquímico e citológico do líquido peritoneal a partir de aferições em oito tempos durante 12 horas, também foram caracterizadas as lesões intestinais. Após 3 horas de isquemia, verificou-se hemorragia, edema, infiltração de neutrófilos e desprendimento da mucosa. Essas lesões manifestaram-se predominantemente após a reperfusão, e de forma concomitante com o aumento dos componentes celulares e moleculares da inflamação, tanto no sangue quanto no líquido peritoneal. Contudo, todos os achados foram discretamente menos evidentes nos animais que receberam o azul de metileno antes da fase de reperfusão. Não é possível afirmar efeito benéfico do azul de metileno sobre a resposta dos equinos na obstrução experimental do jejuno. / Abstract: Intestinal ischemia is one of the most serious intra-abdominal alterations and reflects extremely elevated morbility and mortality. Reoxygenation on the ischemic tissue produces deleterious inflammatory events with consequences even more severe than the ischemia itself. Methylene blue, due to this action as an inhibitor of free-radical formation. The objective of this test was to study the effects of methylene blue on the clinical and laboratory response before and after the experimental obstruction of the jejunum, associated to the exposition of lypopolysacharide. Two groups of animals were submitted to endotoxemia and experimental obstruction of the jejunum. After, in one group was administered, intravenously, a solution of methylene blue (3 mg/kg), immediately before the experimental obstruction, in the other group, the solution was administered immediately before interrupt the obstructive process in the intestinal segment. The horses were submitted to the evaluation of clinical signs and laboratory response during the 12 hours of study. Based on the clinical and laboratory findings we concluded that, the administration of methylene blue was not able to avoid the clinical and laboratory responses in the experimental model proposed for this study. / Doutor

Orientador: Juliana Regina Peiró / Banca: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Carlos Augusto Araújo Valadão / Resumo: A endotoxemia é um importante distúrbio sistêmico que se origina da resposta do hospedeiro a um componente das bactérias Gram-negativas, o lipopolissacarídeo (LPS) ou endotoxina, que é liberado após bacteriólise ou rápida multiplicação. A ativação do sistema imune inato pelo LPS é um fator chave para o disparo da resposta inflamatória pelo hospedeiro e que acarreta a produção de mediadores inflamatórios, responsáveis pelos eventos patológicos da endotoxemia. A interação dos receptores Toll-like (TLRs) com antígenos específicos deflagram a resposta inflamatória, sendo que o receptor Toll-like-4 (TLR-4) é ativado pela ação das endotoxinas, enquanto o receptor Toll-like-2 (TLR-2) interage com uma variedade de componentes microbianos. Uma exposição prévia a baixas concentrações de LPS pode tornar os cavalos "tolerantes" a um desafio letal subsequente, acarretando uma diminuição na produção de citocinas inflamatórias por um período transitório. Pouco se sabe a respeito do mecanismo celular deste fenômeno em equinos, supondo-se o envolvimento dos receptores Toll-like semelhante ao encontrado em outras espécies. Com este estudo investigaram-se os mecanismos celulares da tolerância à endotoxina em um modelo ex vivo com sangue total. Foi demonstrado redução na síntese de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α, IL-1 e IL-6), aumento da expressão gênica da citocina anti-inflamatória IL-10, e ausência de expressão do TGF-β, após o desafio secundário com LPS. A maior expressão dos receptores TLR-2 e -4 após o segundo estímulo de LPS demonstrou que a tolerância à endotoxina não acarreta diminuição da expressão de ambos os receptores em equinos. / Abstract: Endotoxemia is an important systemic disease originated from host response to a component of Gram-negative bacteria, lipopolysaccharide (LPS) or endotoxin, which is released after bacteria death or quick replication. The innate immune recognition of LPS has a key role triggering host inflammatory answer and is due to inflammatory mediator's synthesis, which are responsible for pathologic events of endotoxemia. Signs initiated by interaction of Toll-like receptors (TLRs) with specific products induce the inflammatory response. Toll-like receptor-4 (TLR- 4) is activated by endotoxin action while Toll-like receptor-2 (TLR-2) interacts with a range of microbial compounds. Some studies demonstrate that both can act like LPS receptors, although by independent pathways. It was demonstrated that a previous exposition to low concentrations of LPS can render horses "tolerant" to a lethal subsequent challenge with endotoxin, leading to a diminished release of inflammatory cytokines during a transient period. However, little is known about the cellular mechanisms involved in this phenomenon in horses, suspecting that there is involvement of cell surface receptors, similarly to other species. This study investigated cellular mechanisms of endotoxin tolerance in a whole blood ex vivo model, demonstrating a reduction on pro-inflammatory cytokines synthesis (TNF- α, IL-1 and IL-6), increased gene expression of anti-inflammatory cytokine IL-10 and no alteration in TGF-β expression, after a secondary stimulus with LPS. The Toll-like receptors-2 and -4 increased expression after a second stimulus with LPS showed that endotoxin tolerance does not lead to a decreased expression of both receptors in horses. / Mestre

Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: Anderson Farias / Banca: Francisco José Teixeira Neto / Resumo: Entre os animais domésticos, os equinos são os que apresentam maior taxa de mortalidade sob intervenção anestésica, sendo a principal causa a depressão cardiovascular. Os agonistas 2 produzem efeitos sedativos e analgésicos, porém, causam hipertensão transitória seguida de hipotensão, bradicardia com redução do débito cardíaco, às vezes, associada ao bloqueio atrioventricular de segundo grau. A medetomidina é um agonista 2 de alta especificidade produzindo sedação e analgesia mais profundas e duradouras em relação aos outros agentes desta classe. A hioscina minimiza os efeitos cardíacos dos agonistas 2, com discreto efeito sobre a motilidade gastrintestinal dos equinos. Avaliaram-se os efeitos clínicos e comportamentais induzidos pela injeção de medetomidina em oito equinos pretratados com hioscina por via IV ou IM ou solução de NaCl 0,9% alocados em três grupos: GSFM (grupo solução de NaCl 0,9% seguida de medetomidina, dose 7,5 g/kg); GHivM (grupo hioscina IV, dose de 0,14 mg/kg, seguida de medetomidina); e GHimM (hioscina IM, dose de 0,3 mg/kg, seguida de medetomidina). O segundo fármaco foi aplicado cinco minutos após o primeiro. A hioscina, tanto por via IV quanto por via IM elevou significativamente a FC, as pressões arteriais e o débito cardíaco. Houve diminuição da PA no GHivM. Houve diminuição significativa na f e na altura da cabeça nos três grupos. Não houve diferenças significativas na PaO2 e PaCO2. A hioscina diminuiu o tempo de sedação, sendo este efeito dependente de dose. A hioscina, tanto por via intravenosa quanto por via intramuscular preveniu os efeitos cardiovasculares da medetomidina, sendo que por via intramuscular, este efeito foi mais tardio, porém de maior duração. / Abstract: Between domestic animals, the horses have the biggest mortality rate during general anaesthesia, and the main cause is the cardiovascular depression. The 2 agonist produces sedative and analgesic effects, but they produce transitory hypertension followed by hypotension, bradycardia with decrease in cardiac output, and, sometimes, second-degree atrioventricular block. The medetomidine is a high specificity the 2 agonist producing sedation and analgesia more profound than other being more potent than the other 2 agonist. The hyoscine minimizes the cardiovascular effects of 2 agonist and has minimal effects over the gastrointestinal tract. We evaluated the behavioural and clinical effects of medetomidine in eight horses pre-treated with IV or IM hyoscine put in three groups: GSFM (group NaCl 0,9% solution before medetomidine, at dose 7.5 g/kg); GHivM (group IV hyoscine, at dose 0.14 mg/kg, before medetomidine); GHimM (group IM hyoscine, at dose 0.3 mg/kg, before medetomidine). The second drug was administered five minutes after first. The IV and IM hyoscine increased significantly the heart rate, the arterial pressures and the cardiac output. Fall in MAP had occurred late in the group GHivM. There were significantly decrease in respiration rate and head height in all groups. There were no changes in partial pressure of oxygen and carbonic gas. The hioscyne reduced the sedation time, dose-dependent. Both intravenous and intramuscular hioscyne administrations prevented the cardiovascular effects of medetomidine. The intramuscular route started your effect late, but lasted more than the intravenous administration. / Mestre

Orientador: José Corrêa de Lacerda Neto / Banca: Ana Liz Garcia Alves / Banca: Cristina de Oliveira Massoco / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Marcia Rita Fernandes Machado / Resumo: As células-tronco da linhagem mesenquimal representam uma fonte promissora para o tratamento de injúrias do sistema músculo-esquelético de equinos atletas. Objetivou-se com este trabalho avaliar técnicas de coleta e isolamento de células-tronco mesenquimais em equinos, determinar a caracterização morfológica e fenotípica e avaliar o comportamento celular sob diferentes condições de cultivo. Cinco cavalos foram submetidos à coleta de medula óssea do esterno e de tecido adiposo da região glútea. As amostras foram processadas para o isolamento de células mononucleares e cultivadas em dois tipos de meios de cultivo. No vigésimo quinto dia, foi adicionado TGF-β1, mantendo um grupo controle para cada meio. As técnicas de coleta e processamento foram avaliadas por meio de fatores como facilidade de obtenção, viabilidade celular e número de células obtidas. Características morfológicas qualitativas foram avaliadas semanalmente mediante observação das colônias por microscopia óptica de luz invertida. Características fenotípicas foram avaliadas testando-se marcadores de superfície. Os efeitos do TGF-β1 sobre as culturas de células foram determinados por meio de avaliação citoquímica, número de unidades formadoras de colônia e porcentagens de apoptose e necrose. Foram observadas diferenças entre as amostras em fatores como a viabilidade celular após descongelamento, formação de colônias e relação entre necrose e apoptose em meios de cultivo diferentes. O TGF-β1 apresentou um efeito indutor de apoptose e estimulou a formação de colônias e a produção de proteoglicanas sulfatadas confirmando o efeito condrogênico / Abstract: Mesenchymal stem cells could be a new treatment for healing musculo-skeletal injuries of equine athlete. The objectives of this study were: to analyze the harvest and isolation techniques of equine mesenchymal stem cells, to determine morphological and phenotypical characterization and to evaluate cellular behavior in different culture conditions. Five horses had sternal aspirates bone marrow and croup fat tissue harvest. Both of them harvested materials was processed for mononuclear cells isolation and cultivate in two different kinds of culture medium. Twenty-five days later TGF-β1 was add in both culture mediums, remains a control group for each one. The harvest and process techniques were evaluated through some factors like: easily of harvest, cellular viability and cellular number. Morphological qualitative characteristics were described weekly by culture microscopy observation. Phenotypical characteristics were evaluated testing cluster markers. The effects of TGF-β1 on the cells cultures were determined by histological evaluation, number of unit forming colony and relation between necrosis and apoptosis. Differences between bone marrow and fat tissue cells were observed in some factors like: cellular viability after freezing, unity colony forming and relation between necrosis and apoptosis in different mediums culture. TGF-β1showed apoptosis inductor effect and stimulated the unit forming colony and sulfated proteoglicans production confirming the chondrogenic effect / Doutor

Orientador: José Luiz de Mello Nicoletti / Banca: José Luiz de Mello Nicoletti / Banca: Armen Thomassian / Banca: Roberto Pimenta de P. Foz Filho / Resumo: Na prática cotidiana da medicina eqüina, são freqüentes as situações onde é necessária a reposição e ou manutenção do equilíbrio hidroeletrolítico com fluídos e eletrólitos, principalmente em afecções do trato digestório. O presente estudo teve como objetivo avaliar a técnica cirúrgica de fistulização temporária do ceco com a implantação de uma sonda nesta víscera e a utilização desta via para a administração de fluido enteral. Foram utilizados 6 eqüinos adultos entre 350 e 435 kg, machos e fêmeas, que foram submetidos a dois períodos de jejum - hídrico e alimentar - um período sem hidratação e outro período com a hidratação enteral por via intracecal. A solução hidratante foi constituída de 5,7 g de Cloreto de Sódio, 3,78 g de Bicarbonato de Sódio, e 0,37 g de Cloreto de Potássio por litro de água administrado seis vezes ao dia, na base de 50 ml/kg de peso. Ao final do experimento pudemos constatar que a técnica cirúrgica de implantação da sonda é viável e de baixo custo, podendo ser considerada uma opção viável de terapia hídrica, eletrolítica e de nutrição enteral em eqüinos, nas situações em que as vias tradicionais - intravenosa e nasogástrica - se apresentam indisponíveis ou a terapia tradicional se mostra economicamente inviável. / Abstract: In daily equine medical practice is often necessary to re-establish or maintain hemodynamic balance with fluids and electrolytes, mainly due to digestive tract diseases. The objective of this study is to evaluate therapeutic caecal fistulization surgery, with a catheter placement and the main trans and post-operative complications. Six adult horses of both sexes, weighting between 350 and 435kg were used; they were submitted to two periods of total fast - hydric and nutritional - one period without hydration and the other with enteral hydration by intracaecal route. The hydrating solution consisted of 5.7g sodium chloride, 3.78g sodium bicarbonate, and 0.37g potassium chloride per litre of water. We could observe the horse's capacity to tolerate long periods without food and water, and that surgical catheter implant is a viable and low cost option for hydration and electrolyte therapy, and enteral nutrition in horses where traditional routes - intravenous and nasogastric - are not available or traditional therapy is not economically viable. / Mestre