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Polimorfismos de nucleotídeo simples (SNPs) em genes codificadores de citocinas e suas correlações com parâmetros clínicos e laboratoriais de pacientes portadores do vírus da imunodeficiência humana /

Léda, Ana Rachel Oliveira. January 2010 (has links)
Orientador: Deilson Elgui de Oliveira / Banca: Ricardo Sobhie Diaz / Banca: Celso Teixeira Mendes Júnior / Resumo: A história natural de infecção pelo HIV e a progressão para a aids podem variar entre diferentes indivíduos, possivelmente devido a fatores genéticos, entre eles os polimorfismos de nucleotídeo simples (SNPs). SNPs localizados em regiões promotoras de genes que codificam citocinas podem afetar a síntese e a regulação dessas moléculas, resultando em alterações nas respostas imunitárias. O presente estudo buscou avaliar as frequências e os possíveis efeitos de SNPs nas posições -589 e -1098 da região promotora do gene da IL-4 e SNPs nas posições -238 e -862 da região promotora do gene do TNF-α em pacientes portadores do HIV. Amostras de DNA de 157 pacientes foram obtidas através de células mononucleares de sangue periférico e a genotipagem dos SNPs foi realizada pela técnica de High Resolution Melting (HRM). Foi observado que pacientes portadores de TT em SNP/pIL-4 -589 apresentaram contagem de linfócitos T CD8 + menor em relação aos portadores de CC (p=0.0104). Além disso, portadores de TT em SNP/pIL-4 -1098 apresentaram contagem de linfócitos T CD8 + maior em comparação aos portadores de GT (p=0.0053). Em relação a SNP/pTNF-α -238, as proporções de pacientes portadores de GG e GA diferiu entre os pacientes sem HAART e pacientes com HAART e sem falha terapêutica (p=0.0205). Assim, os resultados obtidos no presente estudo fortalecem a hipótese de que SNPs em genes de citocinas podem alterar a história natural da infecção pelo HIV e o curso clínico da doença, principalmente devido a alterações no balanço da produção de citocinas pro- e antiinflamatórias. / Abstract: The natural history of HIV infection and its progression towards aids may vary considerably among different individuals, possibly due to genetic factors, such as single nucleotide polymorphisms (SNPs). In cytokines genes promoters, SNPs may affect protein synthesis and regulation, resulting in more or less efficient immune responses against HIV. The present study evaluated the frequencies and possible effects of SNPs in the IL-4 gene promoter at positions -589 and -1098 and in the TNF-α gene promoter at positions -238 and -862 in HIV-infected patients from Brazil. DNA samples from 157 patients were obtained from peripheral blood mononuclear cells, and SNPs genotyping was performed by High Resolution Melting analysis (HRM). Patients carrying TT at SNP/pIL-4 -589 had lower circulating T CD8 + cells compared to CC carriers (p=0.0104). Moreover, carriers of TT at SNP/pIL-4 -1098 had more circulating T CD8 + cells compared to GT carriers (p=0.0053). Regarding SNP/pTNF-α -238, GG and GA proportions were significantly different between patients without HAART and patients on HAART without therapeutic failure (p=0.0205). In conclusion, these results provide compelling evidence that the presence of SNPs in cytokine-coding genes do modify the natural history of HIV infection, mainly due to changes in the balance between pro- and anti-inflammatory cytokines. / Mestre
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Efeito modulador de citocinas sobre a formação e atividade fungicida de células gigantes multinucleadas obtidas de mnóctos humanos estimulados com antígeno de Paracoccidioides brasiliensis /

Nascimento, Magda Paula Pereira do. January 2008 (has links)
Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Gil Benard / Banca: Andréa de Faria Fernandes Belone / Resumo: Células gigantes multinucleadas (CGM) são células características, presentes em lesões granulomatosas, induzidas por agentes infecciosos e, sua formação pode ser modulada por citocinas produzidas por células da resposta imune. No presente trabalho avaliou-se o efeito modulador de citocinas pró-inflamatórias (IFN-γ e TNF-α) e anti-inflamatórias (IL-10 e TGF-β1) na formação de CGM in vitro, a partir de monócitos humanos, estimulados com antígenos de Paracoccidioides brasiliensis (AgPb) e sobre a atividade fungicida dessas células desafiadas com a cepa Pb18 de P.brasiliensis. Monócitos do sangue periférico de indivíduos saudáveis foram cultivados na ausência de estímulo (controle), com AgPb (100ug/mL) ou com associações de AgPb e GM-CSF (100 U/ml) com as citocinas: IFN-γ (300UI/mL), IL-10 (50U/mL), TGF- β1 (250pg/mL) ou TNF-α (50U/mL). A formação de CGM foi avaliada após três dias de cultivo, estabelecendo-se o índice de fusão (IF) e a percentagem de CGM após fixação e coloração das células com May-Grunwald-Giemsa. Além disso, a atividade fungicida dessas células foi avaliada após 4 h de co-cultivo das CGM com 4 x 104 células leveduriformes viáveis da cepa Pb18 de P. brasiliensis, por plaqueamento das co-culturas em meio BHI-ágar e determinação da recuperação de fungos viáveis. O método estatístico empregado para comparação dos resultados foi análise de variância, com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que a incubação de monócitos com AgPb+GM-CSF+IFN-γ induziu IF significativamente mais elevados em relação a todas as demais culturas: controle, apenas estimulados com AgPb ou AgPb adicionado das demais citocinas. A adição de TNF- α+AgPb+GM-CSF não resultou em IF maiores do que os obtidos na cultura estimulada apenas com o AgPb, enquanto as citocinas IL-10 e TGF-β1 apresentaram efeito supressor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Multinucleated giant cells (MGC) are characteristics cells present in granulomatous lesions induced by infectious agents and also may be modulated by cytokines produced by cells of the immune response. The present study evaluated the modulatory effect of interferon-gamma (IFN-γ) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) pro-inflammatory cytokines, and interleukin-10 (IL-10) and transforming growth factor beta (TGF-β1) anti-inflammatory cytokines on in vitro formation of MGC derived from human monocytes, stimulated with Paracoccidioides brasiliensis antigen (PbAg) and on fungicidal activity of these cells challenged with the Pb18 strain of P.brasiliensis. Peripheral blood monocytes obtained from healthy individuals were cultured for three days without stimulus (control) or with PbAg (100 ug/mL) or with association of PbAg and granulocyte macrophage colony stimulator factor (GMCSF (100 U/mL) with the following cytokines: IFN-γ (300 UI/mL), IL-10 (50 UI/mL), TGF-β1 (250 pg/mL) or TNF-α (50 UI/mL). The generation of MGC was evaluated by fusion index (FI) and the percentage of MGC formation after cell fixing and May-Grumwald-Giensa staining. Fungicidal activity of monocytederived MGC was evaluated 4h after co-culture of MGC with 4 x 104 viable yeast cells of Pb18 strain, by plating the cultures in BHI-agar and determination of viable fungi recovery. The statistical method employed for the comparison of the results was analysis of variance with the significance set at p< 0.05. The results showed that the incubation of monocytes with PbAg+GM-CSF+IFN-γ induced FI significantly higher than those observed in all the other cultures, such as control cultures, cultures stimulated with PbAg only or cultures stimulated with PbAg associated with the other cytokines. Stimulation with PbAg+TNF+GM-CSF did not result in FI higher than those obtained in the culture stimulated with PbAg only... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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ß-2 microglobulina e citocinas séricas como indicadores de falha terapêutica aos anti-retrovirais /

Almeida, Ricardo Augusto Monteiro de Barros. January 2009 (has links)
Orientador: Domingos Alves Meira / Banca: Rogério de Jesus Pedro / Banca: David Salomão Lewi / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Resumo: Iniciativas como a "WHO/UNAIDS '3 by 5' permitiram que se atingisse, no ano de 2007, a marca de 3 milhões de pessoas com acesso à terapia antiretroviral (TARV) em países de baixa e média renda. O aumento da cobertura nestes países demanda custos importantes com anti-retrovirais, porém também levanta outro problema, que é o monitoramento da terapia em localidades de poucos recursos. Há consenso no fato de que devem ser pesquisados marcadores de eficácia da TARV mais acessíveis. Considerando o comportamento da β-2 microglobulina sérica e das citocinas séricas TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10 com relação à atividade inflamatória induzida pela replicação do HIV-1, o objetivo deste estudo foi o de verificar o comportamento destas substâncias como indicadores da presença, ou não, de falha terapêutica à HAART. Entre agosto de 2004 e novembro de 2005, 89 indivíduos infectados pelo HIV-1, atendidos pela Área de Doenças Tropicais da Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP, e 20 indivíduos normais, doadores de sangue do Hemocentro de Botucatu [43 mulheres e 66 homens; idade média = 39,7 anos (22 - 66 anos)] foram divididos em 4 grupos: G1- 15 indivíduos infectados pelo HIV-1, virgens de tratamento ou sem HAART há pelo menos seis meses e com contagens de linfócitos T CD4 + menores que 350 células/mm3; G2- 31 indivíduos infectados pelo HIV-1, em uso de HAART e sem falha terapêutica virológica (FT); G3- formado por 43 indivíduos infectados pelo HIV-1, em uso de HAART e com FT, e GC- formado por 20 indivíduos normais, não infectados pelo HIV-1, que serviram de controles para as citocinas séricas. Foram revisados os dados demográficos, clínicos e de HAART e realizados os exames β-2 microglobulina sérica, citocinas séricas (TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10), genotipagem do HIV-1, carga viral plasmática (CV) e linfócitos T CD4 + e T CD8 +. Para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Initiatives such as WHO/UNAIDS '3 by 5' made it possible to achieve the figure of 3 million people with access to antiretroviral therapy (ART) in middle- and low-income countries in 2007. The increase in these countries' coverage leads to important expenditure on antiretroviral drugs; however, it also raises another problem, which is therapy monitoring in low-income locations. There is agreement on the fact that more accessible ART efficacy markers must be studied. By considering the behavior of serum β-2 microglobulin and serum cytokines TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10 in relation to inflammatory activity induced by HIV-1 replication, the objective of this study was to assess the behavior of such substances as indicators of the presence, or not, of antiretroviral therapeutic failure (TF). From August 2004 to November 2005, 89 HIV-1-infected individuals assisted by the Tropical Diseases Sector of the Botucatu School of Medicine - UNESP and 20 normal blood donors at the Blood Transfusion Center of Botucatu [43 female and 66 male; mean age = 39.7 years (22 - 66 years)] were divided into 4 groups: G1- 15 HIV-1-infected individuals, previously untreated or without HAART for at least six months and CD4 + < 350 cells/mm3; G2- 31 HIV-1-infected individuals undergoing HAART without virological therapeutic failure (TF), G3- 43 HIV-1-infected individuals undergoing HAART with TF, and CG- 20 normal individuals who served as controls for serum cytokines. Demographic, clinical and HAART data were reviewed, and serum β-2 microglobulin, serum cytokines (TNFα, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10), HIV-1 genotyping, plasma viral load (VL) and T CD4 + and T CD8 + lymphocytes tests were performed. The Mann-Whitney test for independent samples was used for between-group comparison in the case of numeric variables, and Fisher's exact test was applied for category variables. Statistical difference... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Infecção pela Leishmania chagasi : papel dos receptores Toll-like 2 e 4 alterações genotóxicas em camundongos BALB/c /

Cezário, Glaucia Aparecida Gomes. January 2011 (has links)
Orientador: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Cilmery Suemi Kurokawa / Banca: Lisiane de Almeida Martins / Resumo: Não disponível / Abstract: Toll-like receptors (TLRs) present in innate immune cells recognize pathogen molecules and influence on immunity to control the host-parasite interaction. Our objective was to evaluate the mRNA expression of TLR-2 and 4, expression and production of IL-12, IFN-γ, TNF-α, IL-17, IL-10 and TGF-β and NO production during infection with Leishmania chagasi and correlate TLR2 and 4 expressions with cytokines production and NO. Infection resulted in increased TLR2, TLR4, IL-17, TNF-α and TGF-β expression at the beginning of infection, with a decrease at the final phase in according the parasitic load; IFN- γ and IL-12 decreased at the peak of parasitemia and increased at the final phase; IL-10 increased during the whole period under analysis. With respect to cytokines and NO production, TGF-β, TNF-α and IL-17 showed high rates at the initial phase, and IFN-γ and IL-12 showed high rates at the final phase; IL-10 and NO showed increasing production during the infection period evaluated. There was a positive correlation of TLR2 and 4 with TNF-α, IL-17, NO, IL-10 and TGF-β at the beginning of infection, and with TNF-α, IL-17 and TGF-β at the end. Our data suggest that L. chagasi was in contact with host's cells via TLR2 and 4, which resulted in cytokine modulation. This interaction could be considered as pathogenic mechanism in visceral leishmaniasis / Mestre
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Perfil de citocinas no soro e na secreção cervical de mulheres com lesão intraepitelial de baixo grau, lesão intraepitelial de alto grau e carcinoma epidermóide invasor /

Marcolino, Larissa Doddi. January 2011 (has links)
Resumo: A infecção por Papilomavírus Humano (HPV) oncogênico é o fator de risco mais importante para desenvolvimento de lesões intraepiteliais bem como para o carcinoma epidermóide invasor. A resposta imune tem um papel importante na história natural da infecção pelo HPV na cérvice uterina estando envolvida na persistência viral e na progressão das lesões. As citocinas são moléculas reguladoras da transcrição do HPV, sendo que o padrão Th1 contribui para o desenvolvimento da imunidade celular contra a neoplasia e infecção pelo HPV, e está relacionado com clearance dessa infecção. O padrão Th2 está associado com a persistência da infecção viral e com a progressão das lesões. Avaliar a concentração de IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IFN-g e TNF-a na secreção cervical e no soro de mulheres portadoras de lesão intraepitelial de baixo grau (LIEBG), lesão intraepitelial de alto grau (LIEAG) e carcinoma epidermóide invasor (CE). Foram incluídas no estudo 109 mulheres com diagnóstico histopatológico de LIEBG (n=16), LIEAG (n=40), CE (n=13) e 40 mulheres com suspeita de doença HPV induzida, mas sem alterações histopatológicas na biópsia do colo do útero (grupo controle), atendidas no Ambulatório de Colposcopia da Faculdade de Medicina de Botucatu (UNESP) e no Ambulatório de Ginecologia Preventiva do Hospital Amaral Carvalho, Jaú, SP. Durante o exame especular foi coletada a secreção cervical com cytobrush para determinação do perfil de citocinas. O sangue periférico das mulheres incluídas no estudo foi colhido por punção venosa, em volume de 10mL e os padrões de citocinas no soro e na secreção cervical foram avaliados por ensaio imunoenzimático (ELISA). A pesquisa de HPV nas biópsias foi realizada empregando-se a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os primers específicos (MY9/11 e GP5+/GP6+) e a genotipagem foi realizada... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Infection with oncogenic types of human papillomavirus (HPV) is the most important factor for development of intraepithelial lesions and invasive squamous cell carcinoma. The immune response has an important role in the natural history of HPV infection in uterine cervix is involved in viral persistence and progression of lesions. Cytokines are molecules that regulate the transcription of HPV; the Th1 cytokine profile contributes to the development of cellular immunity against HPV infection and neoplasia, and is related to clearance of infection. The Th2 cytokine profile is associated with persistence of viral infection and the progression of lesions. Objectve: To evaluate the concentration of IL-2, IL-4, IL-6, IL- 10, IL-12, IFN-g and TNF-a in cervical secretion and serum of women with low-grade squamous intraepithelial lesions (LSIL), high-grade intraepithelial lesion (HSIL) and invasive squamous cell carcinoma (EC). The study included 109 women with histological diagnosis of LSIL (n = 16), HSIL (n = 40), EC (n = 13) and 40 women with suspected of HPVinduced disease, but no pathological changes on cervix biopsy (control group) attending in the Colposcopy Clinic of the Botucatu Medical School (UNESP) and in the Preventive Gynecology, Hospital Amaral Carvalho, Jaú, SP. During speculum examination cervical secretion was collected with cytobrush to determining the profile of cytokines. The peripheral blood of women enrolled in the study was collected by venipuncture in 10 mL volume and patterns of cytokines in serum and cervical secretion were assessed by enzyme immunoassay (ELISA). The search for HPV in the fragments of the biopsies were performed using the technique of polymerase chain reaction (PCR) using specific primers (MY9/11 and GP5+/GP6+) and genotyping was performed using the technique of PCR primers specific and confirmed by the analysis of restriction fragment polymorphism... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Coorientador: João Manuel Grisi Candeias / Banca: Denise Fecchio / Banca: Gisele Alborgheti Nai / Mestre
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Dicotomia Th1/Th2 : papel do óxido nítrico e citocinas na esporotricose /

Maia, Danielle Cardoso Geraldo. January 2005 (has links)
Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Luciana Simon Pereira Crott / Banca: Eva Burger / Banca: Valderez Gambale / Banca: Cleni Mara Marzocchi Machado / Resumo: A esporotricose é uma infecção micótica provocada pelo fungo dimórfico Sporothrix schenckii, causando em geral lesões subcutâneas nodulares e/ou ulcerativas que se proliferam via linfática, porém em raros casos pode provocar infecção sistêmica. O óxido nítrico (NO) é sintetizado através da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS) em macrófagos ativados. Por outro lado, as citocinas exercem papel importante em todo o processo de ativação das células T e pode influenciar diretamente na resposta imunológica, juntamente com os compostos intermediários do nitrogênio. Para melhor avaliar a inter-relação entre as respostas inata, adaptativa, celular e humoral esse trabalho analisou vários mediadores como a iNOS (arginina marcada por trício), NO (teste de Griess), citocinas ( teste imunoenzimático), transformação linfocitária (incorporação da timidina triciada) e detecção de IgG (teste imunoenzimático). Observou-se que o NO produzido a partir da iNOS causou uma imunossupressão entre a quarta e sexta semana de infecção, levando a uma depressão na produção de algumas citocinas como a IL-1b e o TNF-a, além de inibir a proliferação das células T nas mesmas semanas. A IL-12 como o IFN-g são importantes mediadores da resposta imune celular tipo Th1 e em conjunto com a IL-2 parecem ser produzidos como uma tentativa de proteção do hospedeiro contra a doença. Por outro lado, a IL-10 parece estar relacionada com a suscetibilidade à infecção. Para reverter esse quadro da doença fúngica a IL-6 e a IL-4 podem vir a induzir uma resposta humoral verificada pela produção de anticorpos nas semanas finais da infecção e por fim, levar a remissão da infecção experimental por S. schenckii. / Abstract: Sporotrichosis is a micotic infection desease caused by dimorphic fungus Sporothrix schenckii, causing in general subcutaneous nodulares and/or ulcerative lesions that proliferate through lymphatic vessels, however in rare cases sistêmic can provoke infection. The nitric oxide (NO) is synthezed through of the enzyme nitric oxide sintase induzível (iNOS) in activated macrophages. On the other hand, the cytokines exert important role in all the process of activation of cells T and can to influence directly in the immunological response, together with intermediate composites of nitrogen. The evaluation between the innate, adaptativa, cellular and humoral response this work were analyzed several mediators as iNOS (arginine H3), NO (Griess reagent), cytokines (immunoenzimatic assay), lymphatic transformation (incorporation of timidine- H3) and detection of IgG (immunoenzimatic assay). We observed that NO the produced from iNOS caused an immunossupression between the fourth and sixth week of infection leading to a depression in the production of some cytokines as the IL-1b and TNF-a, besides inhibiting the proliferation of cells T in the same weeks. The IL-12 as the IFN-g is important mediators of the cellular Th1 response and together with IL-2 seem to being produced as a protection host attempt against the disease. On the other hand, the IL-10 seems to be related with the susceptibility to the infection. To revert this immunological response IL-6 and IL-4 can come to induce an humoral response verified by the antibodies production in the infection final weeks and finally, lead the experimental infection remission by S. schenckii. / Doutor
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Importância do flagelo para a patogenicidade de Salmonella enterica subespécie Enterica Sorovar Gallinarum biovar Gallinarum /

Freitas Neto, Oliveiro Caetano de. January 2012 (has links)
Orientador: Angelo Berchieri Júnior / Coorientador: Paul Barrow / Banca: Guilherme Correa de Oliveira / Banca: Fabiana Horn / Banca: Raphael Lucio Andreatti Filho / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / Resumo: S. Gallinarum (SG) provoca o tifo aviário, doença sistêmica com alta mortalidade em aves. Esse biovar é imóvel devido à falta de flagelos. Foi sugerido que a ausência de flagelo resultaria na indução de resposta pró-inflamatória de menor intensidade na mucosa intestinal, favorecendo o desenvolvimento da infecção sistêmica. Para investigar essa hipótese, um mutante de SG capaz de produzir flagelos (SG Fla+) foi construído. Analisou-se a capacidade deste mutante de invadir células epiteliais renais (CRGs), sobreviver em macrófagos da linhagem HD 11 e induzir a expressão de genes responsáveis por mediadores da resposta imune nestas células, em conjunto com outras estirpes de Salmonella spp. Aliado a isso, comparou-se a patogenicidade de SG Fla+ e SG para aves de uma linhagem para postura comercial, avaliando-se a mortalidade e as alterações macroscópicas. Os resultados demonstraram que o flagelo aumentou a capacidade de invasão das estirpes para CRGs, mas não alterou a sobrevivência de SG Fla+ no interior dos macrófagos HD 11. SG Fla+ induziu a maior aumento da expressão de CXCLi2, IL-6 e de iNOS em CRGs que as estirpes sem flagelos (p<0,05). A expressão de genes responsáveis por mediadores da resposta imune em macrófagos HD11 não esteve ligada a presença de flagelo. SG Fla+ provocou menores taxas de mortalidade que SG (p<0,05). Após 28 dias do desafio, SG Fla+ foi isolada no conteúdo de alguns cecos com alterações sugestivas de inflamação / Abstract: S. Gallinarum (SG) is the causative agent of fowl typhoid, a systemic disease responsible for high mortality rates in birds. This biovar is non-motile due to the lack of flagella. It has been proposed that the absence of flagellum would provoke less pro-inflammatory immune response in the gut, favoring the development of systemic infection. In order to investigate this, a SG mutant strain capable of producing flagella (SG Fla+) was constructed. The capability of this mutant and other Salmonella spp. strains in invading chicken kidney cells (CKCs), surviving in HD 11 macrophages and inducing inflammatory responses in these cells were assessed. In adittion, the pathogenicity of SG Fla+ and SG was comparatively assessed in commercial laying hens. Mortality rates and gross lesions were evaluated. The results shown that flagellum increased the invasiveness of strains to CKCs while its presence did not change the survival of SG Fla+ in HD11 macrophages. SG Fla+ induced higher levels of CXCLi2, IL- 6 and iNOS gene expression than non-flagellated strains did (p<0.05). The expression of genes responsible for mediators of immune responses in infected HD11 macrophages were not related to the presence of flagella. SG Fla+ caused lower mortality rates than SG (p<0.05). SG Fla+ was recovered from the contents of caeca which presented inflammation-like macroscopic alterations not observed in birds infected with SG / Doutor
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Caracterização das subpopulações de monócitos M1 e M2 e associação com produção de citocinas em gestantes portadoras de pré-eclâmpsia /

Medeiros, Leonardo Teixeira Lopes de. January 2012 (has links)
Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Érika Nakaira Takahagi / Banca: Leandro Gustavo de Oliveira / Resumo: Monócitos do sangue periférico de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia encontram-se ativados endogenamente e secretam níveis elevados de radicais livres e citocinas inflamatórias. Este trabalho teve como objetivo avaliar se o estado inflamatório de monócitos, observado na pré-eclâmpsia, está associado à polarização da subpopulação de monócitos de perfil M1 no sangue periférico, correlacionando a expressão de receptores de superfície CD64, TLR2, TLR4, CD163 e CD206 com a produção de citocinas. Foram estudadas 90 gestantes, sendo 30 normotensas e 60 portadoras de pré-eclâmpsia, pareadas pela idade gestacional. Monócitos de sangue periférico obtidos de gestantes normais ou com pré-eclâmpsia foram cultivados por 18h na ausência ou presença de lipopolissacáride de Escherichia coli (LPS) ou de peptidoglicano (PG) de bactéria Gram-positiva. A expressão de receptores presentes na superfície da subpopulação de monócitos inflamatórios M1 (TLR2, TLR4 e CD64) e de monócitos supressores M2 (CD163 e CD206) foi detectada por de citometria de fluxo, empregando-se anticorpos monoclonais específicos, marcados com fluorocromos. Os resultados foram expressos como média da intensidade de fluorescência. Além disso, a produção de citocinas pró-inflamatórias associadas a padrão M1 (TNF-, IL-12p70 e IL-23) e anti-inflamatória, associada a perfil M2 (IL-10) foi avaliada no sobrenadante de cultura de monócitos pela técnica de ELISA. Os resultados foram analisados por testes não paramétricos, com nível de significância de 5%. A expressão de CD64 e TLR4 em monócitos, não estimulados, de gestantes com pré-eclâmpsia foi significativamente maior, enquanto a expressão de CD163 e CD206 foi significativamente menor em relação às gestantes normotensas, sugerindo a expressão de um perfil M1 de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Monocytes from peripheral blood of pregnant women with preeclampsia are endogenously activated and secrete high levels of free radicals and inflammatory cytokines. This work aimed to evaluate whether the inflammatory state of monocytes observed in preeclampsia is associated with the polarization of monocyte to M1 profile in peripheral blood, correlating the expression of surface receptors CD64, TLR2, TLR4, and CD163 and CD206 with cytokine production. We studied 90 pregnant women, 30 normotensive and 60 with preeclampsia, matched for gestational age. Peripheral blood monocytes obtained from normotensive pregnant or preeclamptic pregnant women were cultured for 18h in the absence or presence of Escherichia coli lypopolysacharide (LPS) or peptidoglycan (PG) of Gram-positive bacteria, and the expression of surface receptors on M1 inflammatory monocyte subpopulation (TLR2, TLR4 and CD64) and M2 suppressor monocyte subpopulation (CD163 and CD206) were evaluated by flow cytometry, using specific monoclonal antibodies, labeled with fluorochromes. The values were expressed as the mean fluorescence intensity. Moreover, the production of proinflammatory cytokines associated with M1 profile (TNF-, IL-12p70 and IL-23) and the anti-inflammatory cytokine associated with M2 profile (IL-10) were evaluated in the monocyte supernatant of culture by enzyme immunoassay. Results were analyzed using nonparametric tests with significance level set at 5%. The expression of CD4 and TLR4 on non-stimulated monocytes, from women with preeclampsia was significantly higher, while the expression of CD163 and CD206 was significantly decreased compared with normotensive pregnant women, suggesting the predominance of monocyte M1 profile. Endogenous production of TNF-, IL-12p70 and IL-23 by monocytes was increased, while synthesis of IL-10 was lower in women with... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Associação entre presença de Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum e níveis de citocinas pró e antiinflamatórias no líquido amniótico de gestação de termo /

Ramos, Bruna Ribeiro de Andrade. January 2011 (has links)
Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Rodrigo Paupéro de Camargo Soares / Banca: Vera Lúcia Mores Rall / Não disponível / Abstract: Microbial invasion of the amniotic cavity has been described in term deliveries and its role on the immune modulation is of interest to the better understanding of the underlying labor processes. The aim of this study was to determine the prevalence of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum in the amniotic fluid of term pregnancies and to evaluate its influence on cytokines production at the end of pregnancy. A cross sectional study was conducted with fifty five pregnant women out of labor with intact membranes and gestational age between 37 and 41 weeks seen at the Bom Jesus hospital in Ariquemes, Rondônia, between June 2009 and May 2010. Amniotic fluid samples and fragments of chorioamniotic membranes were collected at cesarean section. M. hominis and U. urealyticum detection was performed by PCR and Interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8, IL-10 and Tumor Necrosis Factor (TNF)- levels were determined by ELISA. Chorioamniotic membranes were submitted to histopatological analyses. Presence of M. hominis was detected in 36.4% of amniotic fluid samples and any of them was positive for U. urealyticum. Regarding cytokines levels, 63.6% and 90.9% of samples have not shown detectable concentrations of TNF- and IL-1β. The median concentration of IL-6 and IL-8 were 107.9 pg/mL (0-517.1) and 208.1 pg/mL (0-1897.4), respectively. Interleukin-1, IL-6, IL-8 and TNF- concentrations were not associated with the presence of M. hominis in amniotic fluid, regardless the gestational age. No sample had detectable IL-10 levels. The histopatological analyses have shown no chorioamnionitis in any of the membranes, only a discreet mononuclear infiltration in the decidua could be observed in 40.4% of the samples. Presence of M. hominis was detected in 36.4% of amniotic fluid samples and any of them was positive for U. urealyticum. Regarding cytokines levels, 63.6% and 90.9% of samples have not... (Complete abstact click electronic access below) / Mestre
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Efeito da movimentação ortodôntica na progressão da doença periodontal induzida em ratos /

Nogueira, Andressa Vilas Boas. January 2010 (has links)
Orientador: Joni Augusto Cirelli / Banca: Carlos Rossa Júnior / Banca: Sérgio Luís Scombatti de Souza / Resumo: O movimento ortodôntico ocorre por meio da remodelação dos tecidos periodontais em resposta à aplicação de uma força mecânica, sendo que vários mediadores químicos são sintetizados e liberados para seu início e manutenção. Dentre esses mediadores, o óxido nítrico (NO) atua como modulador da atividade de osteoclastos e osteoblastos na remodelação óssea. Interleucina-1_ (IL-1-_), interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral-_ (TNF-_) estimulam a reabsorção óssea e encontram-se aumentados no movimento ortodôntico. Estes mesmos mediadores também encontram-se aumentados e participam da destruição tecidual na doença periodontal. O objetivo deste estudo é avaliar in vivo a expressão de IL-1b, IL-6, TNF-_, NO sintase constitutiva endotelial (ecNOS), e NO sintase indutível (iNOS) nos tecidos periodontais de dentes sob movimentação ortodôntica em condições de saúde e doença periodontal, correlacionando-as às alterações histomorfométricas nesses tecidos. Para isso, 88 ratos foram divididos nos grupos: 1-controle (CONTR), 2- doença periodontal experimental induzida por ligaduras (DP), 3- movimento ortodôntico (MO), 4- doença periodontal experimental induzida por ligaduras, seguido de movimento ortodôntico (MODP). Biópsias dos tecidos gengivais ao redor 13 dos primeiros molares foram removidas para análise da expressão protéica e de mRNA, respectivamente, por Western blot e RT-PCR em tempo real. Cortes histológicos foram obtidos para avaliação histomorfométrica da perda óssea alveolar. Análise estatística foi realizada através do one-way ANOVA e a comparação entre os grupos foi feita com o teste de Tukey (nível de significância de 5%). Resultado: Máxima expressão gênica de todas as proteínas avaliadas foi observada no grupo MODP, nos períodos de 3h (eNos) ou de 1 dia (citocinas e iNOS) (p<0.05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Orthodontic tooth movement (OTM) occurs in response to mechanical forces through periodontal tissues remodeling. Several chemical mediators are synthesized and released for the beginning and maintenance of tissue remodeling. Among these mediators, nitric oxide (NO) acts as modulator of osteoclasts and osteoblasts activities in bone turnover. Interleukin-1_ (IL-1_), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-_ (TNF-_) stimulate bone resorption and are increased in orthodontic movement. These same signaling molecules are also increased and play an important role on tissue destruction in periodontal disease. Objectives: The aim of this study was to assess in vivo the expression of IL-1ß, IL-6, TNF-_, NO synthase constitutive endothelial (ecNOS), and inducible NO synthase (iNOS) in dental tissues during orthodontic tooth movement in rats suffering from ligature-induced periodontal disease or in periodontally health animals. Cytokines expressions were correlated to histomorphometric changes on alveolar bone and other periodontal tissues. Methods: Eighty-eight rats were divided into four groups: 1- negative control (sham operated), 2 - ligature-induced periodontal disease (PD), 3 - orthodontic movement (OM), 4 - ligature-induced periodontal disease, followed by orthodontic movement (OMPD). Biopsies of gingival tissue around the first molars were removed for protein and mRNA expression analysis, respectively by, Western blot and Real Time RT-PCR. Histologic tissue sections were obtained for histomorphometric evaluation of alveolar bone loss. Statistical analysis was performed by one-way ANOVA and Tukey's posthoc tests for all parameters (5% significance level). Results: Maximum mRNA expression of all evaluated proteins was observed in the OMPD group, on 3h (eNos) or day 1 (citokines and iNos) periods (p<0.05). Also on day 1, all proteins were expressed in high levels for all groups... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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