Resumo: O objetivo deste trabalho foi investigar a migração celular induzida pelo hidróxido de cálcio para bolha de ar subcutânea em camundongos. Observou-se que a migração de neutrófilos ocorreu de maneira dose-dependente, alcançando o pico de migração 96 horas após a injeção do estímulo. Esta migração foi inibida com o pré-tratamento dos animais com indometacina (5mg/Kg), meloxican (5mg/Kg) e dexametasona (1mg/Kg), diferentemente, o MK886 (1mg/Kg) foi inefetivo neste processo. Constatou-se também que os animais estimulados com hidróxido de cálcio apresentaram um aumento significativo na liberação de citocinas e quimiocinas (KC, MIP-2, IL1ß e TNFa). O pré-tratamento com meloxican ou aminoguanidina inibiu a liberação de KC, MIP-2, IL1ß, mas não de TNFa. O pré-tratamento com Tioglicolato a 3% aumentou cerca de 167% a população de macrófagos na bolha de ar subcutânea, entretanto, não alterou a migração de neutrófilos. Pôde-se concluir que a migração de neutrófilos para bolha de ar subcutânea induzida pelo hidróxido de cálcio, em camundongos, foi dependente de KC, MIP-2, IL1ß e TNFa, sendo a liberação destes mediadores independente de mastócitos e de macrófagos. / Abstract: The aim of this study was to investigate the cellular migration induced by calcium hydroxide to air-pouch in mice. It was observed that the migration developed dependently to the doses and achieved the peak 96 hours after the stimulation. Neutrophil migration was inhibited with the pre-treatment with indometacin (5mg/Kg), meloxican (5mg/Kg) and dexamethasone (1mg/Kg). Differently, MK886 (1mg/Kg) was ineffective in this process. It was seen that the animals stimulated with calcium hydroxide showed an increase of cytokines and chymiokines (KC, MIP-2, IL1ß e TNFa) release. Pre-treatment with meloxican or aminoguanidine inhibited KC, MIP-2, IL1ß release, but not TNFa. Release of TNFa was not dependent of prostaglandines and nitric oxide because it was not inhibited by aminoguanidine and meloxican. Pretreatment with Tioglocolate 3% increased 167% the macrophage population in the air-pouch. However, it did not change neutrophil migration. It was possible to conclude that the neutrophil migration to the air-pouch induced by calcium hydroxide in mice was dependent on KC, MIP-2, IL1ß, TNFa and prostaglandins and it was not dependent on the mast cells and macrophages. / Orientador: João Eduardo Gomes Filho / Coorientador: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Carlos Ferreira dos Santos / Banca: Pedro Felício Estrada Bernabé / Mestre

Orientador: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Lenice do Rosário de Souza / Banca: Fátima Regina Vitani Moreno / Resumo: A tuberculose permanece como um dos principais problemas de saúde pública no Brasil e no mundo. Tem como principal agente o Mycobacterium tuberculosis, e é uma doença letal sem tratamento, e seu controle é dificultado pela longa duração e ausência de marcadores, para medir o sucesso ou a falha deste. Os TLRs são receptores que após o reconhecimento de produtos microbianos, ativam a resposta inata e adaptativa. Assim, os receptores TLRs e as citocinas possuem um papel chave na defesa contra o bacilo. Considerando a ausência de informações na literatura em relação à resposta imune de pacientes com tuberculose pulmonar durante o tratamento antituberculose, principalmente em relação à interação inicial do M. tuberculosis com as células da imunidade inata e de seu papel, na indução da resposta adaptativa, através dos receptores TLR, estudos neste sentido, são necessários para se compreender melhor como é a resposta imune do hospedeiro contra o bacilo, frente ao tratamento. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão dos receptores TLR2 e TLR4, do fator de transcrição Foxp3 e da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS), produção e expressão de citocinas, e alterações genotóxicas em pacientes durante o tratamento antituberculose. Foram coletadas amostras de sangue total dos controles saudáveis PPD+ em um único momento (G1) e de pacientes (G1) em três momentos diferentes: M1: início; M2: terceiro mês e M3: ao sexto mês de tratamento antituberculose. Após a obtenção das células mononucleares do sangue periférico (PBMC), as concentrações celulares foram ajustadas para a realização da qPCR, da citometria de fluxo e do teste do cometa. Pacientes com tuberculose pulmonar apresentaram expressão gênica, e na superfície célular de linfócitos e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tuberculosis (TB) remains a major public health problems in Brazil and worldwide. Its main agent Mycobacterium tuberculosis, and is a lethal disease without treatment, and its control is hampered by the long duration and lack of markers to measure the success or failure of this. The TLRs are receptors that after the recognition of microbial products, activate innate and adaptive response. Thus, TLRs receptors and cytokine have a key role in defense against the bacillus. Considering the absence of information in the literature regarding the immune response of patients with pulmonary tuberculosis during antituberculosis treatment, especially in relation to the initial interaction of M. tuberculosis with the cells of innate immunity and its role in the induction of adaptive response through the TLR receptors, studies in this direction are needed to better understand how the host immune response against the bacillus, towards treatment. The objective of this study was to evaluate the expression of TLR2 and TLR4 receptors, the transcription factor Foxp3 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) production and expression of cytokines and genotoxic alterations in patients during TB treatment. Samples were collected from whole blood of healthy PPD + controls in a single moment (G1) and patients (G1) at three different moments: M1: start, M2, M3, and the third month, the sixth month of TB treatment. After obtaining the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and cell concentrations were adjusted to carry out the qPCR, flow cytometry and testing of the comet. Patients with pulmonary tuberculosis showed gene expression and cell surface of lymphocytes and monocytes from TLR2 and TLR4 greater than the control subjects, both in M1, M2 and M3. However, the expression and cell surface receptor TLR2 was... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Banca: Márcia Antoniazi Michelin / Resumo: No Brasil, o câncer é a segunda principal causa de morte, sendo o câncer de mama o segundo mais frequente entre as mulheres. Um tumor sólido é composto pelo tecido neoplásico, células estromais e o sistema imune. Todas as células envolvidas produzem mediadores de forma local e sistêmica que influenciam no desenvolvimento do tumor. Os macrófagos ativados se polarizam e são capazes de ativar uma resposta imune celular, induzindo as células T para um padrão Th1, eficaz na eliminação de tumores; ou ativar uma resposta imune humoral, induzindo Th2, ineficiente contra o câncer. Na teoria, uma imunoterapia eficiente poderia alterar a ativação das células envolvidas e gerar uma inflamação voltada para um padrão de resposta celular, que gerasse a destruição das células cancerígenas. Dentre as possíveis imunoterapias, encontra-se o consumo de alimentos funcionais. A soja vem sendo estudada como um dos alimentos capazes de prevenir o câncer de mama a longo prazo. Além disso, as bactérias probióticas, parecem ser capazes de prevenir o câncer. Neste trabalho, procuramos observar o potencial do produto de soja fermentado por Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416 enquanto alimento funcional capaz de modular o sistema imune e exercer influência no desenvolvimento de câncer de mama experimental murino. Os animais consumiram diariamente produto não fermentado de soja (PNFS), produto fermentado de soja acrescido (PFSI) ou não (PFS) de isoflavonas por 40 dias, sendo o inóculo tumoral realizado no décimo dia. PNFS, PFS e PFSI elevam a produção de TNF-α, e PFS e PFSI eleva a atividade da enzima arginase de macrófagos peritoneais. PFS gera uma redução na produção de IFN-γ e PNFS, PFS e PFSI reduzem os níveis de IL-5 produzidos por linfócitos esplênicos. O volume tumoral é menor em PFS e PFSI, e o número de células apoptóticas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In Brazil, cancer is the second main cause of death, and breast cancer is the second more frequent neoplasia in women. A solid tumor contains neoplastic tissue, stromal cells and immune cells. All cells present in this microenvironment may produce mediators locally and systemically which can influence tumor development. Activated macrophages polarize and are capable of activating a cellular response, inducing T cells into a Th1 cytokine pattern, which is effective against tumor; or activate a humoral response, leading T cells into Th2, unable to fight cancer properly. In theory, a effective immunotherapy could activate involved cells and trigger a acute inflammation, with a cellular pattern, capable of destroying cancer cells. One of the possible therapies is the use of functional food. Soy has been studied as one of the food capable of preventing breast cancer in a long term diet. Besides, probiotic bacteria seems to be able to prevent cancer as well. In the present work, we intended to observe the potential of a soy product fermented using Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416 as a functional food capable of modulating immune system and influencing on experimental murine mamary tumor growth. Animals were fed daily non-fermented soy product (PNFS), fermented sou product (PFS) or fermented soy product plus isoflavones (PFSI) during 40 days, and tumor implant was performed on 10th day. PNFS, PFS and PFSI showed a higher production of TNF-α, while PFS and PFSI also showed a higher arginase activity by peritoneal macrophages. PFS reduced IFN-γ production, while PNFS, PFS and PFSI reduced IL-5 levels on splenic lymphocytes culture. Final tumor volume is reduced in PFS and PFSI, while number of apoptotic cells is elevated in these two groups. It appears that the product may influence on tumor development in a good way, but it is not clear whether immune system is important. / Mestre

Resumo: O crescimento da demanda por alimentos saudáveis está estimulando a inovação e o desenvolvimento de novos produtos na indústria alimentícia. Os alimentos saudáveis são chamados de alimentos funcionais, que são alimentos consumidos como parte de uma dieta usual que produzem efeitos metabólicos ou fisiológicos, com capacidade de reduzirem o risco de doenças crônico - degenerativas, além de suas funções nutricionais básicas. Entre os alimentos funcionais, o presente estudo destaca os produtos derivados da soja e os probióticos. As isoflavonas da soja parecem ser os componentes principais no combate ao câncer, por apresentarem, atividade antioxidante, aumento da apoptose, inibição da angiogênese e modulação da resposta imune. O produto fermentado por bactérias láticas, induz resposta imune inata e adaptativa. Os mecanismos pelos quais o produto fermentado pode inibir o crescimento do tumor são diminuição da resposta inflamatória induzida pelo carcinógeno, aumento da IgA, aumento da apoptose celular e aumento da taxa de TNF-a . Considerando o efeito benéfico dos fitoestrogênios da soja em relação à inibição do câncer e considerando, também, o fato de que determinadas bactérias láticas apresentam atividade anti-tumoral, parece-nos plenamente justificável a realização do estudo para verificar se os alimentos: produto de soja não fermentado (PSNF); iogurte de soja (IS) e iogurte de soja suplementado com isoflavonas (ISS), e Ração (R) exercem efeito no desenvolvimento do câncer de mama e verificar os níveis das citocinas, bem como a concentração de óxido nítrico liberado por macrófagos, e IFN-g em cultura de células esplênicas, indução da apoptose/necrose em macrófagos e angiogêneses no tumor. / Abstract: The growing demand for healthy foods is encouraging the development of new products by the food industry. Functional foods are normally part of a regular diet, but besides their nutritional properties, they also elicit metabolic and physiologic responses that may reduce the risk of chronic degenerative diseases. This study focuses on probiotics and soy-derived products. Soy isoflavones seem to play the most important role in the fight against cancer because, besides their anti-oxidant effects, they stimulate apoptosis, inhibit angiogenesis and modulate the immune response. Probiotics may inhibit tumor growth by diminishing the inflammatory response provoked by the carcinogen and by increasing apoptosis and TNF-_ and IgA levels. Considering the beneficial effects of soy phytoestrogens on cancer and the fact that some lactic bacteria have antitumor activity, is seems reasonable to carry out a study that analyzes whether non-fermented soy product (PSNF), soy yoghurt (IS), soy yoghurt supplemented with is flavones (ISS) and regular feed (R) have an effect on the development of breast cancer by assessing: 1. levels and nitric oxide (NO) produced by macrophages; 2. levels of IL-10 and IFN-g in spleen cell cultures; 3. induction of apoptosis/necrosis in macrophages; and 4. tumor angiogenesis. / Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Coorientador: Elizeu Antônio Rossi / Banca: Christiane Pienna Soares / Banca: Célia Lúcia de Luces Fortes Ferreira / Banca: Elaine Cristina Pereira de Martinis / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Doutor

Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Sueli Calvo / Banca: Daniel Araki Ribeiro / Banca: Maria Lúcia Zaidan Gagli / Resumo: Não disponível. / Abstract: Several studies have shown that stress affects the immune system, promoting the progression of cancer. Since propolis is a honeybee product showing immunomodulatory and antitumoral activities, the goal of this work was to evaluate propolis effect on Th1 (IL-2 and IFN-) and Th2 (IL-4 and IL-10) cytokines' expression and production by melanoma-bearing mice submitted to immobilization stress. In groups without melanoma, stress did not affect IL-2, IL-4 and IL-10 gene expression. Propolis treatment of stressed animals did not influence these cytokines expression as well. On the other hand, IL-2 and IL-10 expression was inhibited in melanoma-bearing mice, stressed or not. Th1 cytokines production was also inhibited in melanoma-bearing mice. Propolis administration to melanoma-bearing mice submitted to stress stimulated IL-2 expression, as well as Th1 (IL-2 and IFN-) production, indicating the activation of antitumor cell-mediated immunity. Propolis also stimulated IL-10 expression and production, what may be related to immunoregulatory effects. Our data indicate that propolis showed an immunomodulatory activity in this assay, what may be related to its antitumoral action in vivo. Further investigation will help to understand propolis usefulness during stress. / Doutor

Orientador: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Cleni Mara Marzocchi Machado / Banca: Fernanda de Freitas Anibal / Resumo: Yersinia pseudotuberculosis e Y. enterocolitica são patógenos que causam desordens gastrintestinais. Estudos utilizando infecção in vitro demonstraram que Y. enterocolitica pode ter como alvo as células dendríticas (DCs), afetando várias de suas funções, incluindo sua maturação e produção de citocinas, e, conseqüentemente, contribuindo para a diminuição da ativação de células T CD4+. O objetivo deste estudo foi investigar o papel das células dendríticas das placas de Peyer (PP) na determinação do padrão de resposta imune, Th1 e Th2, durante a infecção por via intragástrica de camundongos suscetíveis (BALB/c) e resistentes (C57BL/6) com a amostra virulenta de Y. pseudotuberculosis (YpIII pIB1 - Yp+) ou seu par isogênico, curado do plasmídeo de virulência (YpIII - Yp-). As DCs das PP foram obtidas no 1°, 3° e 5° dia pós-infecção, quantificadas e analisadas quanto às suas subpopulações, expressões de moléculas de superfície e capacidade imunoestimulatória por citometria de fluxo, e quanto à secreção de citocinas (IL-4, IL-10, IL-12 e TNF-α) por ELISA. Os linfócitos das PP também foram obtidos no mesmo período e tiveram suas sub-populações e o padrão de citocinas intracelulares Th1/Th2 (IL-2, IL-4, IL-10 e IFN-γ) analisado por citometria de fluxo. A infecção por Yp+ reduziu o número de DCs no 1° dia pós-infecção e aumentou, no período inicial, a expressão de B7.1 e B7.2 nos camundongos BALB/c. Nos camundongos C57BL/6 reduziu o número de DCs durante todo o período analisado, aumentou a expressão de B7.1 e B7.2 no período inicial e a expressão de ICAM-1. A infecção por ambas as amostras provocou redução da sub-população CD8α+ e da expressão de MHC II nas duas linhagens de animais, aumentou a sub-população CD11b+ nos animais suscetíveis e diminuiu nos animais resistentes. Os animais estudados não apresentaram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica are pathogens that cause gastrointestinal disorders. Studies using in vitro infection demonstrated that Y. enterocolitica can have as a target dendritic cells (DCs), affecting several of its functions, including their maturation and production of cytokines, and, consequently, contributing to the diminished activation of the T CD4+ cells. The aim of this study was to investigate the role of dendritic cell from Peyer's patches (PP) in determining of immune response pattern, Th1 and Th2, during infection by the intragastric route in susceptible (BALB/c) and resistant (C57BL/6) mice with a virulent sample of Yersinia pseudotuberculosis (YpIII pIB1 - Yp+) or its isogenic pair, cured of the virulence plasmid (YpIII - Yp-). The PP DCs were obtained on the 1st, 3rd and 5th days postinfection, quantified and analyzed as far as their subpopulations, expressions of surface molecules and immunostimulatory capacity by flow cytometry, and the cytokines secretion (IL-4, IL-10, IL-12 and TNF-α) by ELISA. The PP lymphocytes were also obtained in the same period, and had their subpopulations and the pattern of intracellular Th1/Th2 cytokines (IL-2, IL-4, IL-10 and IFN-γ) analysed by flow cytometry. The infection by Yp+ reduced the number of DCs on the 1st day post-infection and increased, in the initial period, the expression of B7.1 and B7.2 in BALB/c. In C57BL/6 mice reduced the number of DCs throughout the study period, increased the expression of B7.1 and B7.2 in the initial period and the expression of ICAM-1. The infection by both samples reduced CD8α+ subpopulation and expression of MHC II in both animals, increased CD11b+ sub-population in susceptible animals and reduced the same sub-population in resistant animals. The studied animals did not present important differences as far as secretion of cytokines by the DCs of PP and both... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Cleni Maria Marzocchi Machado / Banca: Luciana Simon Pereira Crott / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Resumo: Os receptores "toll-like" (TLR) são importantes no reconhecimento de patógenos por um hospedeiro e conseqüentemente para a ativação da resposta imune inata. Evidências clínicas e experimentais mostram que defeitos nesses receptores ou em suas vias de sinalização deixam o hospedeiro suscetível a vários tipos de infecção. Já foi demonstrado que o TLR2 e o TLR4 estão envolvidos no reconhecimento de vários fungos, como Candida albicans, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus e Saccharomyces cerevisiae, entretanto não há informações disponíveis sobre a participação dos TLRs no reconhecimento do Sporothrix schenckii. O S. schenckii é um fungo termodimórfico causador da esporotricose, uma infecção micótica caracterizada pelo comprometimento da pele e tecidos subcutâneos; em algumas ocasiões, como em pacientes imunocomprometidos, pode induzir lesões em órgãos. Os mecanismos de defesa, principalmente a imunidade mediada por células, são importantes na resistência à infecção. O objetivo deste trabalho foi verificar o papel do TLR4 na resposta dos macrófagos ao S. schenckii, empregando camundongos defectivos na expressão de TLR4 (C3H/HeJ) e camundongos controle (C3H/HePas), através da avaliação de mediadores imunológicos produzidos pelas células peritoneais dos camundongos, da expressão de proteínas acessórias ao TLR4 e da avaliação da apoptose destas células durante dez semanas. A produção dos intermediários reativos do oxigênio, determinada através da técnica de redução do vermelho de fenol, revelou que os camundongos defectivos na expressão do TLR4 produziram menores concentrações de H2O2 que os camundongos TLR4 normais. Nestes, as maiores concentrações de H2O2 foram induzidas pela presença do extrato lipídico da fase miceliar do S. schenckii. No entanto, a produção de óxido nítrico (NO) e das citocinas ocorreu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Toll-like receptors (TLR) are important to pathogen recognition by a host and to the subsequent triggering of an innate immune response. Experimental and clinical evidence show that defects in TLR or in signaling pathways downstream from these receptors render hosts susceptible to various types of infection. TLR2 and TLR4 are involved in recognition of several fungi, such as Candida albicans, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus and Saccharomyces cerevisiae. However, no information is available about TLR recognition of Sporothrix schenckii. S. schenckii is a thermally dimorphic fungus, the causative agent of sporotrichosis, a mycotic infection characterized by frequent involvement of the skin and subcutaneous tissues; occasionally, it may also produce lesions of the internal organs mostly reported among immunocompromised hosts. Immune defense mechanisms, particularly cellmediated immunity have been reported to be important in infection resistance. The aim of this study was to assess the role of TLR4 in the response of macrophages to S. schenckii, using TLR4-deficient mice (C3H/HeJ) and control mice (C3H/HePas), evaluating immunological mediators produced by exudate peritoneal cells, TLR4 accessory protein expression, and apoptosis of these cells over a period of ten weeks. Reactive oxygen intermediates production was determined through phenol red oxidation method and has revealed that TLR4-defective mice produced lower levels of H2O2 than TLR4 normal mice. In these animals, higher H2O2 concentrations were seen when lipid extract obtained from S. schenckii mycelium was used. However, nitric oxide (NO) and cytokine production occurred in higher levels when cells were challenged with lipid extract from S. schenckii yeast cells, which is the morphotype found in the host during infection. NO and cytokines such as IL-1, TNF- and IL-10 production in culture supernatants were also lower... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Angela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Eduardo Bagagli / Resumo: A esporotricose é uma micose de distribuição universal cujo agente é o fungo termodimórfico Sporothrix schenckii. A forma mais comum da doença é a linfocutânea, que compromete pele, tecido subcutâneo e gânglios linfáticos regionais. Os principais constituintes da parede celular de S. schenckii são compostos peptídeo-polissacarídicos contendo ramnose, manose e galactose. Estes compostos se arranjam na parede celular de modo a formar duas subcamadas distintas na forma leveduriforme do fungo, uma das quais, a mais interna e fixa delas, é denominada como peptídeo-polissacarídeo da parede celular (PPC) e foi utilizada como antígeno neste estudo, juntamente com a levedura termo-inativada (SSTI). Os antígenos liberados pelo fungo participam diretamente do processo de escape do sistema imune e também servem como alvos para a eliminação do mesmo por anticorpos ou ligação a receptores presentes em células da imunidade inata, como os macrófagos. Nossos resultados mostraram que o PPC induz citocinas de padrão inflamatório de forma mais pronunciada que o SSTI, que por sua vez induziu maior liberação de IL-10. Sugerimos também que no modelo experimental utilizado a IL-10 não atua provocando supressão da resposta proliferativa dos esplenócitos, e que a IL-4 atua apenas na fase de resolução da infecção, não sendo induzida como forma de escape imunológico pelo fungo. Também mostramos que os antígenos testados são capazes de induzir a liberação de IL-17 em culturas de esplenócitos, num perfil semelhante àquela das citocinas Th1 / Abstract: Sporotrichosis is a micotic infection of universal distribution, which is caused by dimorphic fungus Sporothrix schenckii. It usually happens as a lymphocutaneous disease, compromising skin, subcutaneous tissues and regional lymphatic nodules. Major constituents of S. schenckii cell wall are peptido-polysaccharide complexes containing rhamnose, mannose and galactose. These complexes are organized in two distinct layers in the fungus yeast cell wall, of which the inner one is called cell wall peptido-polysaccharide (PPC), being used as antigen in this study, along with the heat-killed yeast (SSTI). Antigens released by the fungus directly participate in evasion of the immune system, also serving as targets for fungus elimination by binding of antibodies or innate immune cells like macrophages. Our results showed that PPC induces inflammatory cytokines in a more pronounced way when compared to SSTI, which induced higher levels of IL-10. We also suggest that, in the animal model used, IL-10 doesn't act as a suppressor of splenocyte proliferative response, and that IL-4 play a role at the resolution phase of the infection, being not induced as a means of immunologic escape by the fungus. Also, we showed that the assayed antigens are capable of inducing IL-17 secretion in splenocyte cultures, in a fashion close to that of Th1 cytokines / Mestre

Orientador: João Eduardo Gomes Filho / Banca: Robson Frederico Cunha / Banca: Marco Antonio Húngaro Duarte / Banca: Roberta Okamoto / Banca: João Eduardo Gomes Filho / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta tecidual do tecido subcutâneo de rato ao implante de tubos de polietileno preenchidos com CPM ® (Cimento Portland Modificado) comparado com Ângelus MTA ® . Estes materiais foram colocados em tubos de polietileno e implantados no tecido conjuntivo dorsal de ratos Wistar por 7, 15, 30, 60 e 90 dias. Os espécimes foram preparados para serem corados com HE, Von Kossa ou não corados para luz polarizada. Foi realizada análise qualitativa e quantitativa da reação inflamatória. Os materiais CPM ® e Ângelus MTA ® causaram reação moderada no tempo experimental de 7 dias que diminuiu com o tempo. A resposta foi similar entre os grupos Controle, CPM ® e Ângelus MTA ® no tempo experimental de 30 dias. Aos 60 e 90 dias todos os grupos foram semelhantes ao Controle. Mineralizações e granulações birrefringentes à luz polarizada foram observadas com ambos os materiais. Podese concluir que o CPM ® apresentou resposta tecidual semelhante ao Ângelus MTA ® inclusive com estimulação de formação de tecido mineralizado / Abstract: The aim of this study was to evaluate the tissue response of rat subcutaneous tissue implantation of polyethylene tubes filled com CPM® (Portland Cement Modified) compared with Angelus MTA ®. These materials were placed in polyethylene tubes and implanted into dorsal connective tissue of rats by 7,15,30,60 and 90 days. The specimens were prepared to be stained with HE, Von Kossa staining or without starning for polarized light. It were performed qualitative and quantitative analysis of reactions inflammatory. CPM materials ® and Angelus MTA ® caused a moderate reaction in the experimental period of 7 days decreased with time. The response was similar between control, CPM® and Angelus MTA ® in the experimental time of 30 days. At 60 and 90 days all groups were similar to control. Mineralization and granulations birefringent to polarized light were observed with all materials. It was possible that CPM® presented similar tissue response to Angelus MTA ® Iinduding with mineralized tissue stimulation / Doutor

Orientador: João Eduardo Gomes Filho / Banca: Célio Percinoto / Banca: Elisa Maria Aparecida Giro / Resumo: A necessidade de melhorar a qualidade dos materiais utilizados no tratamento endodôntico tem estimulado o estudo de vários materiais, buscando melhores condições de trabalho, biocompatibilidade e propriedade de estimular a ocorrência do selamento biológico. Este trabalho teve a finalidade de avaliar quantitativamente e qualitativamente a resposta tecidual frente ao implante de tubos de polietileno preenchidos pelos cimentos Endo-CPM-Sealer®, Sealapex® e Ângelus MTA® em tecido subcutâneo de ratos e a citotoxicidade e a produção de citocinas (IL-1β e IL-6) por fibroblastos de camundongos estimulados por estes cimentos. Para os testes de biocompatibilidade foram utilizados 30 ratos, os quais receberam individualmente três implantes de tubos de polietileno contendo os cimentos a serem testados e mais um tubo vazio como controle. Após 7, 15, 30, 60 e 90 dias do período de implantação, os animais foram sacrificados e os tubos de polietileno juntamente com o tecido que o circunda foram removidos, fixados e processados para análise em microscopia de luz. Após inclusão em glicol metacrilato, foram realizados cortes seriados de 3mm, corados com hematoxilina-eosina e cortes de 10mm, corados com Von Kossa e sem coloração para serem analisados sob luz polarizada. Os resultados foram analisados estatisticamente pelo teste de Kruskal Wallis. Os materiais Endo-CPM-Sealer®, Sealapex® e Ângelus MTA® causaram reações moderada no tempo experimental de 7 dias que diminuiu com o tempo. A resposta foi similar entre os grupos Controle, Endo- CPM-Sealer® e Ângelus MTA® no tempo experimental de 30 dias. Aos 60 dias todos os grupos foram semelhantes ao Controle. Mineralizações e granulações birrefringentes à luz polarizada foram observadas com todos os materiais. Foi possível concluir que o Endo-CPM-Sealer® foi biocompatível e estimulou a mineralização. Para o teste... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The need of improving the quality of materials used in endodontic treatment has stimulated the study of various materials seeking better working conditions, biocompatibility and property to stimulate the occurrence of biological sealing. The aim of this study was to evaluate quantitatively and qualitatively the tissue response to the implantation of polyethylene tubes filled with Endo-CPM-Sealer®, Sealapex® and Ângelus MTA® in subcutaneous tissue of rats and cytotoxicity and production of cytokines (IL-1β and IL-6) by mouse fibroblasts stimulated by these sealers. Thirty rats were used for the biocompatibility tests. Each animal received three implants of polyethylene tubes containing the cement to be tested and one empty polyethylene tube was used as control. After 7, 15, 30, 60 and 90 days from the implantation time, the animals were killed and the tubes with surrounding tissues were removed, fixed and processed for analysis using a light microscope. After inclusion in glycol methacrylate, they were serially sectioned into 3 μm or 10 μm cuts and stained with hematoxylineosin, Von Kossa or remained without staining to be observed under polarized light. The results were statistically analyzed by Kruskal Wallis test. The materials Endo- CPM-Sealer®, Sealapex® and Ângelus MTA® caused moderate reactions at 7 days which decreased with time. The response was similar among the control group, Endo- CPM-Sealer® and Ângelus MTA® at the 30th day. At 60th day all groups were similar to control group. Mineralization and granulations birefringent to the polarized light were observed with all materials. It was possible to conclude that Endo-CPM-Sealer® was biocompatible and stimulated mineralization. To test the cytotoxicity of mouse fibroblast (L929) were incubated in plate of 24 wells and stimulated with the sealers tested. Cell culture... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre