Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Las isoflavonas son compuestos polifenólicos de conocida actividad estrogénica y alta eficiencia antioxidante, que se encuentran distribuidos en el poroto de soya, el trébol rojo y en una amplia variedad de vegetales. Los principales problemas para su aplicación farmacéutica y su estudio son su escasa solubilidad en agua y sus problemas de estabilidad. Una estrategia propuesta para proteger a compuestos inestables de la fotodegradación y también para mejorar su solubilidad en formulaciones farmacéuticas, es su inclusión en vehículos como ciclodextrinas, nanopartículas y sistemas lipídicos, entre otros. Los sistemas lipídicos formados por bicapas lipídicas (como por ejemplo: vesículas, liposomas y membranas de eritrocitos) han sido frecuentemente utilizados como modelos de estudio de interacción y transporte de fármacos en membranas. El uso de modelos tiene la ventaja de que no presentan la alta complejidad asociada a las membranas biológicas, son relativamente fáciles de preparar y constituyen un sistema bien definido y fácil de controlar. La existencia de regiones diferenciadas en la bicapa lipídica permite la interacción con un amplio tipo de substratos, existiendo una relación entre la naturaleza hidrofílica – lipofílica de la molécula y las diferentes zonas de la membrana. Así, las especies cargadas se enlazan electrostáticamente a la interfase, y los sustratos hidrofóbicos se ubican entre las cadenas hidrocarbonadas al interior de la bicapa. En este trabajo se determinó la hidrofobicidad de isoflavonas a través de la medida experimental del reparto y la distribución de estos compuestos en medio homogéneo y en sistemas microorganizados (vesículas) estableciendo una relación entre la estructura química, el grado de ionización, la lipofilicidad y las características del medio de dispersión. Los compuestos utilizados en este estudio fueron las isoflavonas genisteína, daidzeína, genistina, daidzina, equol, biochanina A, el fitoestrógeno coumestrol y el flavonol morina. Para estos polifenoles se determinó el coeficiente de reparto en un sistema octanol/agua (logP) y el coeficiente de distribución a distintos pH (logD). A partir de estos resultados, se seleccionaron cuatro compuestos para los que se evaluó su incorporación y reparto en vesículas / Isoflavones are polyphenolic compounds with known estrogenic activity and antioxidant efficiency, which are distributed in soybean, red clover and a wide variety of vegetables. The main problems for its pharmaceutical application and its study are their low water solubility and stability problems. A proposed strategy to protect unstable compounds of the photodegradation and also to improve their solubility in pharmaceutical formulations, is their inclusion in vehicles as cyclodextrins, nanoparticles and lipid systems, among others. Lipid systems formed by lipid bilayers (for example: vesicles, liposomes and erythrocyte membranes) have been frequently used as models for study of drug interaction and transport in membranes. The use of models have the advantage that they do not have the high complexity associated to the biological membranes, are relatively easy to prepare and that they constitute an easy to control and well defined system. The existence of differentiated regions in the lipid bilayer allows the interaction with a wide type of substrates, existing a relation between the hydrophilic-lipophilic nature of the molecule and the different zones in the membrane. Thus, the charged species are electrostatically linked to the interface, and the hydrophobic substrates are located between the hydrocarbonated chains inside the bilayer. In this work the hydrophobicity of isoflavones was determined through the experimental measure of the partition and the distribution of this compounds in homogeneous media and in micro-organized systems (vesicles) establishing a relation between the chemical structure, the ionization, the lipophilicity and the characteristics of the dispersion medium The compounds used in this study were the isoflavones genistein, daidzein, genistin, daidzin, equol, biochanin A, the phytoestrogen coumestrol and the flavonol morin. For this polyphenols the partition coefficient in a water/octanol system (logP) and the distribution coefficient at different pH (logD) was determined. From this results, four compounds were chosen in order to evaluate their incorporation and partition in vesicles

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-08T04:06:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334086.pdf: 6433209 bytes, checksum: d40ee2f46f80f115eeb7688ff1880de5 (MD5) Previous issue date: 2015 / No presente trabalho realizou-se o estudo fitoquímico das espécies P. molluginifolia, P. campestris e P. longicaulis. A fração acetato de etila de P. molluginifolia foi submetida ao fracionamento cromatográfico levando ao isolamento de quatro isoflavonas (1-4) da coleta 1, e duas isoflavonas (7) e (8) da coleta 2, das quais a isoflavona (1) é inédita na literatura. A fração aquosa de P. molluginifolia da coleta 1 forneceu os compostos isolados rutina (5) e sacarose (6). As diidroestirilpironas (9) e (10) foram obtidas do fracionamento da fração acetato de etila de P. longicaulis e as xantonas (11) e (12) foram isoladas da fração aquosa de P. campestris. A análise de determinação dos componentes voláteis de P. molluginifolia mostrou o salicilato de metila como componente majoritário na raiz (37,7%), nas folhas o dodecanoato de etila (2,6%), nos caules o tetradecanoato de etila (9,4%) e nas flores dodecanoato de isoamila (28,1%). Na determinação de atividade antioxidante e inibição da AchE dos extratos, frações e compostos isolados (1-4), o extrato bruto de P. molluginifolia (PMEB), a fração acetato de etila (PMFA) e as isoflavonas (1) e (4) apresentaram os melhores resultados. A xantona (12) e as diidroestirilpironas (9) e (10) apresentaram as maiores permeabilidades no ensaio PAMPA. PMEB, PMFA e compostos (1) e (4) também apresentaram atividade frente a T. cruzi e Leishmania spp. As isoflavonas (1), (4) e PMEB exibiram atividade antifúngica frente a cepas de Pb18, C. neoformans, C. gattii. Os testes de atividade anti-inflamatória no modelo de pleurisia mostraram que PMEB, PMFA e compostos isolados (4) e (5) inibiram a migração de leucócitos, neutrófilos e a exsudação. PMEB e isoflavona (4) também mostraram efeitos antinociceptivos e não afetaram a atividade locomotora dos camundongos. Na determinação de atividade anti-hiperglicêmica observou-se que PMFA e isoflavonas (1) e (4) reduziram a glicemia de forma significativa.<br> / Abstract : In the present work, a phytochemical study of the species P. molluginifolia, P. campestris and P. longicaulis was done. The ethyl acetate fraction of P. molluginifolia was subjected to silica gel chromatographic column leading to isolation of isoflavones (1-4) (collection 1), and two isoflavones (7) and (8) (collection 2), of which the isoflavone (1) is an unpublished compound. The aqueous fraction of P. molluginifolia provided the isolated compounds rutin (5) and sucrose (6). The dihydrostyrylpyrones (9) and (10) were obtained from chromatographic fractionation of ethyl acetate fraction and the xanthones (11) e (12) were obtained from the aqueous fraction of P. campestris. The analyses of volatile components of P. molluginifolia showed methyl salicylate as the main constituent in the roots (37,7%), ethyl dodecanoate in the leaves (2,6%), ethyl tetradecanoate (9,4%) in the stems and isoamyl dodecanoate (28,1%) in the flowers. In the determination of antioxidant activity and AchE inhibition of extracts, fractions and isolated compounds (1-4), the crude extract of P. molluginifolia, ethyl acetate fraction (PMFA) and isoflavones (1) and (4) showed the best results. The xanthone (12) and dihydrostyrylpyrones (9) e (10) presented the highest permeabilities in the PAMPA assay. PMEB, PMFA and compounds (1) and (4) also showed activities agains T. cruzi e Leishmania spp. The isoflavones (1), (4) and PMEB exhibited antifungal activity against strains of Pb18, C. neoformans, C. gattii. The anti-inflamatory activity evaluation on the model of pleurisy showed that PMEB, PMFA and isolated compounds (4) and rutin (5) of P. molluginifolia inhibited the migration of leukocytes, neutrophils and exudation. PMEB and isoflavone (4) also showed antinociceptive effects and did not affect spontaneous locomotor activity of the mice. In the determination of antihyperglycemic activity, PMFA and isoflavones (1) and (4), significantly decreased the glycemia.

Com uma área plantada de cerca de 21 milhões de hectares, e uma produção anual de 60 milhões de toneladas em 2008, o Brasil é hoje o segundo maior produtor de soja no mundo, com pouco mais de um quarto da produção mundial. A presença de flavonóides, em particular isoflavonas em produtos de soja, tem sido relatada como importante para a saúde humana. Foi sugerido também que esses compostos estariam envolvidos na proteção contra a radiação UV de componentes celulares vitais das plantas. A espectroscopia por ressonância paramagnética eletrônica (RPE) pode medir radicais livres resultantes do processo de irradiação. A RPE tem sido empregada com sucesso na detecção de certos produtos comestíveis irradiados. Ao todo vinte e uma cultivares brasileiras de soja, provenientes de duas safras, tratadas por radiação gama de 60Co foram estudadas através de RPE. Foi calculada a correlação entre os teores parciais e totais de isoflavonas e a intensidade do pico central observado nos espectros de RPE (fator g = 2,0039). Não houve correlação entre o sinal e os teores totais de isoflavonas, mas observou-se correlações negativas com gliciteína e acetil-daidzina. Mesmo após 7 meses da irradiação, a intensidade do sinal central de RPE manteve-se a ponto de poder identificar amostras irradiadas. Espectros com partes da soja, particularmente o hilo e a casca, mostraram-se mais eficientes do que aqueles com o grão todo para serem utilizados na identificação de soja irradiada. A radiação não alterou de modo significativo os teores totais de isoflavonas, embora haja indícios de que alguma conversão da forma glicosilada para a aglicona tenha ocorrido. / Brazil is today the second main producer of soybean in the world with a planted ground of about 21 million hectares and an annual production of 60 million tons in 2008, being slight more than a fourth of the annual production. The presence of flavonoids, particularly isoflavones in soybean products has been related as important for human health. It has been suggested that flavonoids play a role in the protection of plants by screening vital cellular components from damaging UV radiation. Electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy can measure free radicals produced by dissociation molecules resulting from irradiation. It has been successfully employed for the detection of some irradiated food products. Twenty one Brazilian soybean cultivars from two crops were gamma-irradiated with a 60Co source and evaluated by EPR. Correlation coefficients were made among the central EPR signal (g = 2.0039) and the total and partial isoflavones contents. There was no correlation with total contents, though glicitein and acetyl-daidzin showed a negative correlation. Even 7 months after irradiation the intensity of central EPR signal were high enough to distinguish the irradiated samples. EPR measurements of separated parts of the grain were more efficient for that purpose, particularly from hilum and coat. The radiation did not change substantially the total isoflavone contents, although there were some evidences suggesting some conversion of glycosides to aglycones.

Com uma área plantada de cerca de 21 milhões de hectares, e uma produção anual de 60 milhões de toneladas em 2008, o Brasil é hoje o segundo maior produtor de soja no mundo, com pouco mais de um quarto da produção mundial. A presença de flavonóides, em particular isoflavonas em produtos de soja, tem sido relatada como importante para a saúde humana. Foi sugerido também que esses compostos estariam envolvidos na proteção contra a radiação UV de componentes celulares vitais das plantas. A espectroscopia por ressonância paramagnética eletrônica (RPE) pode medir radicais livres resultantes do processo de irradiação. A RPE tem sido empregada com sucesso na detecção de certos produtos comestíveis irradiados. Ao todo vinte e uma cultivares brasileiras de soja, provenientes de duas safras, tratadas por radiação gama de 60Co foram estudadas através de RPE. Foi calculada a correlação entre os teores parciais e totais de isoflavonas e a intensidade do pico central observado nos espectros de RPE (fator g = 2,0039). Não houve correlação entre o sinal e os teores totais de isoflavonas, mas observou-se correlações negativas com gliciteína e acetil-daidzina. Mesmo após 7 meses da irradiação, a intensidade do sinal central de RPE manteve-se a ponto de poder identificar amostras irradiadas. Espectros com partes da soja, particularmente o hilo e a casca, mostraram-se mais eficientes do que aqueles com o grão todo para serem utilizados na identificação de soja irradiada. A radiação não alterou de modo significativo os teores totais de isoflavonas, embora haja indícios de que alguma conversão da forma glicosilada para a aglicona tenha ocorrido. / Brazil is today the second main producer of soybean in the world with a planted ground of about 21 million hectares and an annual production of 60 million tons in 2008, being slight more than a fourth of the annual production. The presence of flavonoids, particularly isoflavones in soybean products has been related as important for human health. It has been suggested that flavonoids play a role in the protection of plants by screening vital cellular components from damaging UV radiation. Electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy can measure free radicals produced by dissociation molecules resulting from irradiation. It has been successfully employed for the detection of some irradiated food products. Twenty one Brazilian soybean cultivars from two crops were gamma-irradiated with a 60Co source and evaluated by EPR. Correlation coefficients were made among the central EPR signal (g = 2.0039) and the total and partial isoflavones contents. There was no correlation with total contents, though glicitein and acetyl-daidzin showed a negative correlation. Even 7 months after irradiation the intensity of central EPR signal were high enough to distinguish the irradiated samples. EPR measurements of separated parts of the grain were more efficient for that purpose, particularly from hilum and coat. The radiation did not change substantially the total isoflavone contents, although there were some evidences suggesting some conversion of glycosides to aglycones.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Objetivo: Avaliar o número de fibras musculares, vasos sanguíneos e fibras colágenas na uretra e no útero de ratas adultas castradas, tratadas com extrato de isoflavonas de soja, precoce e tardiamente à castração. Métodos: Foram utilizadas 45 ratas adultas, virgens, pesando em média 200g, Rattus norvegicus albinus (Rodentia Mammalia, Wistar EPM-1). Os animais foram alimentados com ração à base de caseína, isenta de soja. Após cinco dias de adaptação, as ratas foram anestesiadas e submetidas à ooforectomia bilateral. Após cinco dias da castração, foram divididas em três grupos de 15 ratas cada: Grupo I - (controle) – castradas sem tratamento, que receberam somente o veículo propilenoglicol durante 30 dias consecutivos, sendo sacrificadas a seguir; Grupo II (ISO5D) - ratas tratadas com isoflavonas na dose de genisteína de 125 µg/g peso corporal por dia, a partir do 5o dia da castração, por 30 dias consecutivos; Grupo III (ISO28D) - ratas tratadas com isoflavonas na dose de genisteína de 125 µg/g peso corporal por dia, a partir do 28o dia da castração, por 30 dias consecutivos. Após os trinta dias de tratamento, as ratas foram sacrificadas. Utilizou-se extrato de isoflavonas a 40%, contendo 8,15% de genisteína e 19,19% de daidzeína, administrado aos animais por gavagem. Foi realizado um estudo prévio para a padronização da dose do extrato, avaliando-se o efeito no peso relativo do útero em diferentes doses de genisteína (2,5; 25; 50; 125µg/g PC/ dia), usando-se um controle negativo para comparação. Após o sacrifício, realizou-se estudo morfométrico das paredes do útero e da uretra média das ratas, por meio de contagem do número de núcleos, vasos sanguíneos e fibras colágenas. Resultados: Em relação ao útero, observa-se que os grupos tratados precoce e tardiamente com isoflavonas diferiram do grupo controle em todas as características. Em se tratando da uretra, nota-se que apenas o grupo tratado precocemente com isoflavonas diferiu do grupo controle nas características número de núcleos e de fibras colágenas. Comparando-se os grupos tratados precoce e tardiamente com isoflavonas, observa-se que não há diferença entre eles para todas as características, em relação ao útero. Analisando-se a uretra, houve diferença entre os grupos tratados para as características número de núcleos e de fibras colágenas. Conclusão: Os achados mostraram que a administração oral de extrato de isoflavonas da soja para ratas adultas ooforectomizadas, na dose de genisteína de 125µg/ g de peso corporal/ dia apresenta efeito uterotrópico. A administração do extrato precoce à ooforectomia tem efeito em uretra média, revertendo às alterações advindas da castração, o que não se observa com a administração do extrato após 28 dias da ooforectomia. / Objective: To evaluate the number of muscle fibers, blood vessels and collagen fibers in the urethra and uterus of castrated adult female rats, treated with soy isoflavone extract for 30 days, starting on the 5th or 28th day after castration. Methods: 45 adult virgin female rats, Rattus norvegicus albinus (Rodentia Mammalia, Wistar EPM-1), weighing 200g on average, were fed a casein-based, soy-free diet. After five days of adaptation, they were anesthetized and underwent bilateral oophorectomy. Five days after castration, they were split into three groups of 15 rats each: Group I (control), castrated without treatment, receiving only the propylene glycol vehicle for 30 consecutive days, and sacrificed next; Group II (ISO5D), treated with isoflavones at the dose of 125 µg genistein/g body weight a day, from the 5th day of castration, for 30 consecutive days; Group III (ISO28D), treated with isoflavones at the dose of 125 µg genistein/g body weight a day, from the 28th day of castration, for 30 consecutive days. After thirty days of treatment, they were sacrificed. Isoflavone extract at 40%, containing 8.15% genistein and 19.19% daidzein, was administered by oral gavage. A preliminary study was conducted in order to standardize the extract dose, evaluating the effect on relative uterus weight of different genistein doses (2.5; 25; 50; 125 µg/g BW/day), using a negative control for comparison. After the sacrifice, a morphometric study of the uterus and mid urethra walls was conducted, counting the number of nuclei, blood vessels and collagen fibers. Results: Regarding the uterus, the ISO5D and ISO28D groups differed from the control group in all respects. Regarding the urethra, only the ISO5D group differed from the control group, in terms of number of nuclei and collagen fibers. There was no difference between the ISO5D and ISO28D groups regarding the uterus. Regarding the urethra, there was a difference between the treatment groups in terms of number of nuclei and collagen fibers. Conclusion: Our findings show that the oral administration of soy isoflavone extract to oophorectomized female adult rats, at the dose of 125 µg genistein/g BW/day, shows an uterotropic effect. The early (5th day) administration of the extract after oophorectomy has an effect in the mid urethra, reversing the changes promoted by castration, which was not observed with the administration of the extract from the 28th day after oophorectomy. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-03-18T21:01:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 332251.pdf: 1513718 bytes, checksum: 2f3923361172d337671e9439925208f6 (MD5) Previous issue date: 2014 / A diabetes é uma doença crônica que afeta milhões de pessoas no mundo. As previsões para 2035 são de que a doença atinja mais de 592 milhões de pessoas. Estes dados revelam um importante problema de saúde pública e reforçam a necessidade de buscar por alternativas de tratamento preventivo e terapêutico. As plantas medicinais são uma importante fonte de compostos bioativos. Dentre estas, as isoflavonas despontam como uma classe de biomoléculas com importante atividade antidiabética, associadas principalmente a efeitos fitoestrógenos. Dessa forma, este estudo objetivou caracterizar a atividade anti-hiperglicêmica das isoflavonas PMA2.31 e PMA19, extraídas da fração acetato de etila de Polygala molluginifolia, bem como, elucidar os mecanismos pelos quais estas ações ocorrem. Para tanto, ambas as isoflavonas foram submetidas ao teste de tolerância oral à glicose, no qual, ratos Wistar machos receberam o tratamento (PMA2.31 e PMA19) isoladamente ou combinado com sitagliptina por gavagem e, 30 min após, uma sobrecarga de glicose foi administrada e a glicemia determinada aos 15, 30, 60 e 180 min subsequentes a esta administração. A avaliação da atividade das dissacaridases intestinais in vivo e o conteúdo de glicogênio hepático e muscular foi realizado no tempo 180 min. A atividade de dissacaridases também foi avaliada mediante incubação in vitro. Amostras de soro foram utilizadas para a dosagem de insulina e GLP-1 sérico. A atividade de DPP-IV (Dipeptidilpeptidase-IV) foi mensurada in vitro. A fim de identificar os mecanismos pelos quais as isoflavonas agem secretando insulina e/ou GLP-1, o efeito de PMA2.31 e/ou PMA19 foi avaliado no influxo de cálcio em fatias do intestino (cólon) e em ilhotas pancreáticas. Ainda, PMA2.31 e PMA19 foram incubadas na presença de albumina e glicose ou frutose, para determinação da glicação. Os resultados obtidos demonstraram a redução glicêmica induzida por PMA2.31 e PMA19 após 15 e 30 min, respectivamente. Ainda, PMA2.31 apresentou o efeito anti-hiperglicêmico potenciado quando combinado com sitagliptina. Ambas as isoflavonas aumentaram os níveis séricos de insulina além de PMA2.31 aumentar GLP-1 (Glucagon Like Peptide-1) sérico. O mecanismo pelo qual PMA2.31 atua nestes efeitos envolve a inibição parcial de DPP-IV e aumento da secreção de GLP-1 via ativação de PKC, uma vez que, houve um aumento significativo do influxo de cálcio em fatias de intestino e inibição deste estímulo quando utilizado inibidor de PKC (Proteína cinase C). Diferente de PMA2.31, PMA19 age estimulando a secreção direta de insulina, devido ao incremento observado no influxo de cálcio em ilhotas pancreáticas, sendo estas ações semelhantes às do estradiol e envolvem efeitos no canal de potássio dependente de ATP, canal de cálcio dependente de voltagem e ativação de PKA (Proteína cinase A). Além das ações supramencionadas, PMA2.31 aumentou o conteúdo de glicogênio hepático e assim como a fração acetato de etila, inibiu a atividade de maltase. A fração acetato de etila e as isoflavonas também diminuíram a glicação com albumina demonstrando um potencial efeito antidiabético. Ambas as isoflavonas não produziram alterações na concentração sérica de LDH, sugerindo serem atóxicas na concentração e tempo de tratamento avaliado.<br> / Abstract : Diabetes is a chronic disease that affects approximately 382 million people worldwide, with predictions stating that this number will increase to 592 million in 2035. These data reveal an important public health problem and support the necessity to search for new targets for preventive and therapeutical treatment. Medicinal plants are an important source of bioactive compounds. Among those, the study of plants that contain isoflavones indicates these compounds as a class of biomolecules with important antidiabetic activity, mainly associated with phytoestrogens action. Therefore, this study aimed to characterize the anti-hyperglycemic activity of isoflavones PMA2.31 and PMA19, isolated from ethyl acetate fraction of P. molluginifolia, as well as to elucidate the mechanisms by which these actions occur. To this end, both isoflavones were submitted to oral glucose tolerance test, in which, male Wistar rats received the treatment (PMA2.31, PMA19) by gavage, with/without sitagliptin and, after 30 min, a glucose load was administered and blood glucose levels were determined at 15, 30, 60 and 180 min.The evaluation of in vivo intestinal disaccharidases activity, muscle and hepatic glycogen content was measured at 180 min. The disaccharidase activity was also performed by in vitro treatment. Serum samples were collected for insulin and GLP-1 dosage. In vitro DPP-IV activity was also measured. To investigate the mechanisms by which isoflavones act in insulin and/or GLP-1 secretion, PMA2.31 and/or PMA19 effect on calcium influx in pancreatic islets and intestine slices (colon) was evaluated. PMA2.31 and PMA19 were also tested for albumin glycation measurement. The results showed a significantly blood glucose reduction after treatment with PMA2.31 and PMA19 in 15 and 30 min, respectively. The effect of PMA2.31 was higher when co-administered with sitagliptin. Both isoflavones increased insulin serum levels and PMA2.31 was able to increase GLP-1 serum levels. The PMA2.31 effect on GLP-1 may involve an intermediate DPP-IV inhibition and augmented GLP-1 secretion via PKC activation, since there was a significant increase in calcium influx in intestine slices, and this effect was inhibited by co-incubation with a PKC inhibitor. On the other hand, PMA19 acts directly on insulin secretion due to its stimulus in pancreatic islets calcium influx, with a similar mechanism of action to estradiol, which involve effects on ATP-dependent potassium channel, voltage-gated calcium channel and PKA activation. In addition to the above actions, PMA2.31 increased hepatic glycogen content and both this isoflavone and ethyl acetate fraction, inhibited maltase activity. The ethyl acetate fraction and both isoflavones also decreased albumin glycation, demonstrating a potential antidiabetic effect. Both isoflavones did not produce change in serum LDH, indicating they are non-toxic in the concentration and treatment period studied.

Resumo: Investigar o efeito independente e aditivo do treinamento resistido (TR) e da isoflavona de soja (ISO) sobre a densidade mineral óssea (DMO) e a composição corporal de mulheres na pós-menopausa. Foi conduzido estudo clínico prospectivo, duplo-cego (ISO), placebocontrolado e randomizado dois (ISO x Placebo) por dois (TR x sem TR). Oitenta mulheres sedentárias na pós-menopausa (amenorréia últimos 12 meses, FSH > 40UIml), idade entre 45 a 70 anos, foram randomizadas a um dos quatro grupos (71 completaram 9 meses de intervenção): ISO + TR (n=15; 55,7±7,0); ISO + sem TR (n=20; 56,6±8,8); placebo + TR (n=18; 56,0±5,8); placebo + sem TR (n=18; 55,3±8,0). As participantes randomizadas para ISO receberam 250mg de extrato de soja, total de 100mg/dia de isoflavona. Aquelas randomizadas para TR realizaram sessões de exercícios resistidos supervisionados, mínimo de dois dias na semana, durante 9 meses, que incluiu 2-3 exercícios para os grupamentos musculares maiores (coxa, peito e costa) e 1 exercício para os menores (bíceps e tríceps), em 3 séries de 8-12 repetições máximas. No momento basal e aos 9 meses, a composição corporal (massa gordurosa e muscular) e a DMO (corpo inteiro, colo de fêmur e coluna lombar) foram estimadas pela absortometria radiológica de feixes duplos de energia (DXA, Hologic QDR-2000). Valores plasmáticos de CTX (serum levels of C-terminal cross-linked telopeptides of type I collagen) e de osteocalcina foram dosados como marcadores da reabsorção e formação óssea, respectivamente. Para avaliação antropométrica foram obtidos: peso, estatura, índice de massa corpórea (IMC=peso/altura2), circunferência da cintura (CC) e relação cintura/quadril (RCQ). Valores plasmáticos de isoflavona foram realizados ao final da intervenção para analisar a aderência ao tratamento. Na análise... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: To investigate the independent and additive effects of resistance training (RT) and soy isoflavone (ISO) on bone mineral density (BMD) and body composition in postmenopausal women. This study used a placebo-controlled, double-blind (soy), randomized two (ISO vs placebo) x two (RT vs no-RT) design. A total of 80 sedentary postmenopausal women (>12 months amenorrhea and FSH >40mIU/ml), aged 45- 70 years, was randomized one of four groups (71 completed 9-months intervention): ISO + RT (n=15; 55.7±7.0); ISO + no-RT (n=20; 56.6±8.8); placebo + RT (n=18; 56.0±5.8); placebo + no-RT (n=18; 55,3±8,0). Participants randomized to ISO received 250mg of standardized soy extract, total of 100mg/day of isoflavone. Subjects randomized to RT attended supervised resistance exercise sessions, three days/week for 9-months and included 2-3 exercises for the larger muscle groups, and 1 exercise for smaller groups in 3 series of 8-12 repetitions. At baseline and 9-months, body composition (fat and muscle mass) and BMD (whole body, lumbar spine and femoral neck) were estimated by dual-energy x-ray absorptiometry (DXA, Hologic QDR-2000). Serum levels of C-terminal cross-linked telopeptides of type I collagen (CTX) and osteocalcin were measured as markers of bone resorption and formation, respectively. The anthropometric indicators included: weight, height, body mass index (BMI= weight/height2), waist circumference (WC) and waist/hip ratio (WHR). The plasma levels of isoflavones were measured to assess compliance. The Shapiro-Wilk, Kolmogorov & Smirnov for distribution statistics, and Levene's test for homogeneity of variances, ANOVA-repeated measure, ANOVAone way and post hoc Fisher test, Pearson's correlation, test t and analyze regression forward stepwise were used in the statistical analysis. There were no significant difference... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Eliana Aguiar Petri Nahás / Coorientador: Jorge Nahás Neto / Banca: Nailza Maestá / Banca: Leone A. Simonetti / Banca: Cesar Eduardo Fernandes / Banca: Aarão Mendes Pinto Neto / Doutor

Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Severino M. Alencar / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T01:20:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bueno-Silva_Bruno_M.pdf: 1697425 bytes, checksum: 055f2dd91e407acf734bcc51d0a438bd (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Entre as própolis brasileiras, urna nova própolis ainda não classificada de acordo com Park et al., 2002 e denominada de própolis vermelha originária do estado de Alagoas (Nordeste do Brasil), tem mostrado resultados interessantes em relação a sua composição química e atividade biológica em estudos preliminares. Assim, o objetivo principal deste trabalho é identificar a origem botânica da própolis vermelha, a composição química e atividade biológica do extrato etanólico da própolis (EEP) e do extrato etanólico da resina da planta (EER), avaliar o efeito sazonal sobre a composição química e atividade biológica do EEP e do EER. Esses objetivos foram atingidos através das seguintes metodologias: 1- observação do comportamento de visita das abelhas à . vegetação próxima à colméia; 2- comparação dos perfis químicos dos vegeÜlis visitados pelas abelhas coletoras de resina e da própolis vermelha, obtidos por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa e análises complementares, estabelecendo-se assim, as características entre ambos os materiais, visando à identificação do marcador biológico botânico e 3- avaliação da influência do efeito sazonal anual sobre a própolis vermelha e sua vegetação fonte por meio da atividade antimicrobiana e perfil químico, com coletas bimensais das amostras durante o período de 1 ano. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) e os microrganismos usados foram: O Streptococcus mutans UA159, Streptococcus sobrinus 6715, Staphylococcus aureus ATCC25923 e Actinomyces naeslundii ATCC 12104. Os resultados demonstraram o mesmo perfil quimico entre o EEP e o EER da planta Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub., cuja característica foi a alta concentração relativa das isoflavonas 3-hidroxi-8,9-dimetoxipterocarpin e medicarpina. Os perfis químicos do EEP e do EER, obtidos ao longo do ano, através do testes químicos, apresentaram-se distintos dos perfis dos demais 12 tipos de própolis brasileiras já classificadas e variaram quantitativamente de acordo com a sazonalidade. A CIM variou entre 15,6-125 'mu'g/rnL e a CBM de 31,2 - 500 'mu'g/mL considerando os 4 microrganismos àvaliados. Conclui-se que esta própolis, cuja origem botânica é a Dalbergia ecastophyllum, pode ser classificada corno o 13° tipo de própolis, de acordo Park et al., 2002, e tanto o EEP quanto o EER apresentaram alta atividade antimicrobiana, os quais poderão ser utilizados para pesquisas futuras de novas moléculas no controle da cárie dental / Abstract: Among the Brazilian propolis, new propolis not yet classified, according to Park et al., 2002 and called of red propolis, originary from Alagoas state (Northeast of Brazil), have showed interesting results in preliminary studies in our laboratories. Thus, the main objective of this work is to identify the botanical marker of red propolis, the chemical composition and biological activity of extract ethanolic of propolis (EEP) and the extract ethanolic of resin of plant (EER), verifying the effect of seasonal period on chemical composition and antimicrobial activity of EEP and EER. This objective was reached through the following methodologies: 1- observation of bee behavior in visiting vegetation next beehive; 2- comparison of chemical profile of vegetables visited by bees for collecting resin with red propolis, gotten for liquid chromatography of high efficiency in phase reverse and complementary analyses, for establishing the common characteristics between both materiaIs, aiming to identification of botanical biological marker; 3- evaluation of influence seasonal annual effect on the red propolis and its vegetation source by means of the antimicrobial activity and chemical profile, with bymonthly collections of the samples during the period of 1 year. The antimicrobial activity was evaluated by Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) and microorganism used were Streptococcus mutans UA159, Streptococcus sobrinus 6715, Staphylococcus aureus ATCC25923 e Actinomyces naeslundii ATCC 12104. The results had the same demonstrated to chemical profile between the EEP and the EER of the plant Dalbergia ecastophyllum (L.) Taub. Whose characteristic was the high relative concentration of isoflavonas 3-hidroxi-8,9 dimetoxipterocarpin and medicarpina. The chemical profiles of EEP and EER varied quantitatively according to seasonal effect The CIM varied between 15.6-125 'mu'g/rnL and the CBM of 31.2 - 500 'mu'g/rnL. One concludes that these propolis, whose botanical origin is the Dalbergia ecastophyllum, can be classified as 13° type of propolis, according to Park et al., 2002 and the EEP and EER showed high antibacterial activity which can be used for future molecule research in the control of caries dental / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Orientador: Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:01:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aguiar_ClaudioLimade_D.pdf: 3633403 bytes, checksum: a077bdb4a30340781da556e96aa2116b (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As isoflavonas são conhecidas por suas atividades biológicas tais como, atividades estrogênica, antifúngica, antioxidante e antitumoral (mama e próstata), além de inibir a atividade de enzimas ligadas à divisão celular, sendo estas atividades biológicas mais acentuadas nas formas agliconas que glicosiladas. Sua presença em produtos de soja, tem sido relatada como importante para a saúde humana, além do que o Brasil é o maior exportador de soja no mundo a partir de 2003. O presente trabalho de tese teve como objetivos, avaliar os teores de isoflavonas e seus conjugados presentes em cultivares de soja brasileiros e em alguns produtos à base de soja, bem como, discutir os efeitos associados à presença de isoflavonas, em suas diferentes formas, nas propriedades biológicas (antioxidante, antiinflamatória e antimicrobiana) encontradas em extratos alcoólicos de soja. Analisou-se os teores de isoflavonas em cultivares de soja (Glycine max L.) provenientes de diferentes órgãos estaduais e federais de pesquisa em soja e o efeito da temperatura na extração de isoflavonas de soja. As concentrações mais elevadas de isoflavonas foram obtidas principalmente por extração alcoólica em solução 80 ou 90% de metanol e solução 60 ou 70% de etanol. Foi avaliada a composição de isoflavonas presentes em soja, após tratamento térmico e por radiação gama. A farinha de soja foi tratada por aquecimento a 100 e 121°C por 20, 40 e 60 min; a 121°C por 40 e 60 min, alonil-isoflavonas em farinha de soja foram completamente transformadas a glicosil-isoflavonas. A radiação gama também promoveu a redução no conteúdo de isoflavonas. O extrato metanólico de soja tratado por radiação gama apresentou uma perda gradual no conteúdo de isoflavonas totais (perda de 33,5%), mas em farinha de soja, rica em fibras, a radiação gama teve pouco efeito (perda de 9,96%). Por outro lado, o fungo filamentoso Aspergillus onJzae ATCC 22786 produziu alta atividade de 13-glicosidase, a qual foi capaz de converter glicosil-isoflavonas em agliconas presentes em farinha de soja. Glicosil-isoflavonas (daidzina, glicitina e genistina) foram eficientemente transformadas às suas formas agliconas (daidzeína, gliciteína e genisteína) por fermentação em estado sólido por 48 h a 30°C com esporos (107 esporosjmL) ou pela l3-glicosidase de A. oryzae, após 30 min a 40°C. Após o tratamento da farinha de soja com P-glicosidase, 85,5% das glicosil-isoflavonas foram hidrolisadas às formas agliconas. O tratamento térmico a 121°C seguido da reação enzimática, produziu grande quantidade de isoflavonas agliconas. Portanto, o tratamento combinado de aquecimento a 121°C e reação com p-glicosidase de A. oryzae ATCC 22786 pode transformar eficientemente malonil-isoflavonas a glicosil-conjugados e, posteriormente, a agliconas. Além disso, os extratos metanólicos de farinha de soja tratada com aquecimento e P-glicosidase demonstraram elevadas atividades antioxidantes. No entanto, o tratamento com aquecimento e reação enzimática não mostrou claramente um aumento nas atividades antimicrobiana e antiinflamatória. / Abstract: The isoflavones from soybean are known to have several biological properties such as estrogenic, antimicrobial and antitumoral (breast and prostate) activities, besides inhibiting the activity of enzymes linked to the cellular division. These properties are shown to be more accentuated in the aglycone than glycoside forms. Their presence in soy products have been reported with a number of beneficial health effects. In addition, Brazil is a major soybean producer in the World. The main objectives of this work of Thesis was to evaluate the isoflavone contents, and its conjugate forms, present in different Brazilian soybean cultivars, as well as, in some soy products. Other objective of this work, was to discuss the effects associated to the presence of isoflavones with some biological properties (antioxidant, anti-inflammatory, and antimicrobial) into alcoholic extracts of soybean. The isoflavone contents was analyzed in different soybean cultivars donated by State and Federal Organization on Soy Research, and the effect of the temperature in the extraction of soybean isoflavones. The high isoflavone concentrations were obtained mainly by alcoholic extraction using 80% methanol and 60% ethanol solutions. As a major soybean producer, Brazil finds important to characterize the isoflavone composition of the some Brazilian soybean cultivars, which were treated with heat processing and gamma irradiation. Soybean flour was treated by heating at 100 and 121°C for 20, 40, and 60 mino At 121°C for 40 and 60 min, the isoflavone malonate into defatted soybean flour was completely converted to their glycoside conjugates. Gamma irradiation also promoted some reduction in isofIavone profiles. The methanolic extract of soybean treated by y-radiation had a gradual decreasing in their isofIavone contents (loss of 33.5%), but on soybean fIour, rich in fiber, the y-radiation had a little effect (loss of 9.96%). On the other hand, the filamentous fungus Aspergillus oryzae ATCC 22786 a high f3-glucosidase producer, was found to be able to convert glycoside isofIavones to aglycones forms present into soybean fIour. It was observed that the glycoside isofIavones extracted such as, daidzin, glycitin and genistin, were efficiently transformed into their aglycones forms (daidzein, glycitein and genistein) by solidstate fermentation after 48 h at 30°C with A. oryzae spores (107 sporesjmL) or f3-glucosidase after 30 min at 40°C. After treatment of the methanolic extracts with f3-glucosidase, 85.5% of glycoside isofIavones were hydrolyzed by this enzyme to form aglycones. The enzymatic reaction on the methanolic extract from the soybean sample treated at 121°C indicated that the glycoside isoflavones were efficiently transformed into aglycones. Therefore, combined application of heat treatment at 121°C and the fungal p-glucosidase could transform efficiently malonylglycoside isoflavones and glycoside isoflavones to aglycones. Furthermore, methanolic extracts of soybean sample treated by heating and with P-glucosidase demonstrated higher antioxidant activity. However, the treatment by heating and enzyme reaction do not show an increasing in the antimicrobial and anti-inflammatory activities. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Fabaceae é a terceira maior família botânica, apresentando grande importância ecológica, ornamental e econômica. Por sua grande diversidade de espécies está dividida em seis sub-famílias Caesalpinioideae, Cercidoideae, Detarioideae, Dialioideae, Duparquetioideae e Papilionoideae. Papilionoideae é considerada um grupo monofilético e nesta está inserida Glycine max (L.) Merr., espécie de importância econômica alimentícia (grãos, farelo, óleo) e medicinal. A soja tem seu centro de origem na China, sendo que a soja moderna foi modificada por cruzamentos entre duas espécies selvagens, por cientistas ainda na antiga China. É considerada um alimento completo, pois contém proteínas, gorduras, óleos, aminoácidos essenciais e metabólitos secundários, tais como isoflavonas e outras substâncias fenólicas, importantes antioxidantes naturais. A liberação do plantio da soja se deu com a Lei 11.105 de 24 de março de 2005, levando a um aumento exponencial de sua produção no país. Seu consumo ocorre em todo o mundo, e sua produção aumenta a cada ano, pois também vem sendo utilizada como fonte para a produção de biocombustível. Atualmente, sabemos que a poluição atmosférica e outras atividades humanas contribuem para o aumento de poluentes na atmosfera e consequente impacto na camada de ozônio. A radiação ultravioleta é dividida em três: ultravioleta A (315 a 400 nm), ultravioleta B (280 a 315 nm) e ultravioleta C (200 e 280 nm). Por conta disso, estudos que visam avaliar como a radiação ultravioleta pode interferir no metabolismo vegetal podem contribuir para o conhecimento mais aprofundado sobre como espécies cultivadas são afetadas por esse fator de estresse. Os metabólitos especiais são importantes estratégias químicas usadas pelas plantas na sua defesa contra fatores de estresse biótico ou abiótico. Em particular, as substâncias fenólicas como os flavonoides e isoflavonas são importantes metabólitos envolvidos nos mecanismos de defesa vegetal associados à fotoproteção. Este projeto teve por objetivo contribuir com conhecimentos quanto aos efeitos da radiação ultravioleta sobre a produção de metabólitos fenólicos durante o desenvolvimento vegetativo de dois cultivares de soja CD202RR e CD202, quando submetidos a três tratamentos com diferentes incidências de radiação ultravioleta (UV): 1. Ausência de radiação UV (UV-), 2. Alta incidência de radiação UV (UV+) e 3. Incidência natural de radiação UV solar (Controle). A hipótese deste estudo partiu do pressuposto que substâncias fenólicas são reconhecidos metabólitos vegetais com propriedades de absorção de luz nos comprimentos de onda do espectro UV-Visível, sendo assim, aumentariam em conteúdo em resposta a alta intensidade de radiação UV. Foram feitas análises por CLAE-DAD e CLAE-MS das substâncias fenólicas em folhas de G. max em três estádios vegetativos (V3, V4 e V5). As sementes de soja foram germinadas dentro das câmaras e 10 plantas foram coletadas por estádio, em cada câmara e em 3 repetições de experimentos (setembro de 2016 a março 2017). Foi verificado que o tratamento UV+ resultou em menores massas foliares quando comparado ao Controle e UV-. Há também diferença nas alturas das plantas de soja e danos nas folhas produzidos pela maior incidência de radiação UV. Foram identificados 28 constituintes, sendo 13 derivados do ácido cinâmico, 9 derivados dos flavonoides campferol e apigenina e 6 isoflavonas derivadas de genisteína e daidzeína. Quanto aos conteúdos fenólicos, pode-se observar que há um aumento da quantidade de isoflavonas na câmara UV+ em relação ao Controle para ambos os cultivares. Para os derivados cinâmicos e os flavonóis encontrados, observa-se um decréscimo em relação ao Controle para grande parte desses constituintes. Diminuição no conteúdo de flavonóis e aumento de isoflavonas pode ser devido a um possível desvio da via de produção dos flavonoides, uma vez que naringenina é o precursor para a síntese de ambas as classes. Além disso, isoflavonas apresentam espectro de absorção UV-Vis com banda máxima no comprimento de onda entre 260-280 nm, o que pode resultar em maior fotoproteção para plantas expostas a maiores intensidades de radiação UV / Fabaceae is the third largest botanical family, with great ecological, ornamental and economic importance. For its great diversity of species, the family is divided into six sub-families Caesalpinioideae, Cercidoideae, Detarioideae, Dialioideae, Duparquetioideae and Papilionoideae. Papilionoideae is a monophyletic group comprising Glycine max (L.) Merr., an important economic species for food (grains, bran, oil) and medicine. Glycine has its center of origin in China, and modern soybean has been modified by crosses between two wild species, by scientists still in ancient China. It is considered a complete food because it contains proteins, fats, oils, essential amino acids and secondary metabolites, such as isoflavones and other phenolic substances, important natural antioxidants. The liberation of soybean culture occurred in Brazil after the 11,105 law of March 24, 2005, leading to an exponential increase of its production in the country. Its consumption occurs all over the world, and its production increases every year, since it is also used as a source for the production of biofuel. We now know that atmospheric pollution and other human activities contribute to the increase of pollutants in the atmosphere and a consequent impact on the ozone layer. Ultraviolet radiation (UV) is divided into three: ultraviolet A (315 at 400 nm), ultraviolet B (280 to 315 nm), and ultraviolet C (200 and 280 nm). Because of this, studies aiming to evaluate how ultraviolet radiation can interfere on plant metabolism may contribute to better understand of how cultivated species are affected by this stress factor. Special metabolites are important chemical strategies used to plant defense against biotic or abiotic stress factors. In particular, phenolic substances such as flavonoids and isoflavones are important metabolites involved in the plant defense mechanisms associated to photoprotection. The objective of this project was to contribute with knowledge about the effects of ultraviolet radiation on the production of phenolic metabolites during the vegetative development of two soybean cultivars CD202RR and CD202, when exposed to three UV treatments: 1. Absence of UV radiation (UV-), 2. High incidence of UV radiation (UV +), and 3. Natural incidence of solar UV radiation (Control). The hypothesis of this study was based on the assumption that phenolic substances are recognized plant metabolites with properties of light absorption in the wavelengths of the UV-visible spectrum and thus could increase in content in response to high intensity of UV radiation. Analyzes were performed using HPLC-DAD and HPLC-MS of leaves of G. max at three vegetative stages (V3, V4 and V5). Soybean seeds were germinated within the chambers and 10 plants were collected per stage, in each chamber and in 3 experiment replicates (September of 2016 to March of 2017). It was observed that UV+ treatment resulted in smaller leaf biomass when compared to Control and UV-. There were also differences in soybean heights and leaf damage produced by the higher incidence of UV radiation. A total of 28 constituents were identified, of which 13 were cinnamic acid derivatives, 9 kaempferol and apigenin derivatives, and 6 genistein and daidzein derivatives (isoflavones). Was observed an increase in the contents of isoflavones in the UV+ comparing to Control, for both cultivars. Cinnamic acid derivatives and flavonoids showed decreased contents in relation to the Control. Decreases in flavonoid content together with increases in isoflavones might be explain by a possible flavonoid pathway deviation, since naringenin is precursor of both flavonoid classes. Isoflavones show UV-Vis absorption spectra with maximum absorption between 260-280 nm, which might result in higher capacity for UV photoprotection