Orientador: Ana Gabriela Sávio / Banca: Mariângela Esther Alencar Marques / Banca: Érika Sinara Lenharo Orti Raduan / Resumo:A doença enxerto contra hospedeiro (DECH) ou graft-versus-host-disease (GVHD) é a maior causa de morbidade e mortalidade em pacientes que foram submetidos ao transplante de células tronco hematopoiéticas (TCTH). É uma síndrome com várias manifestações clínicas, patológicas e imunológicas. Com o objetivo de contribuir para o esclarecimento da participação das células dendríticas Mielóides, Plasmocitóides e Células NK (natural killer) na doença enxerto contra hospedeiro crônica (DECHc) e esclarecer os mecanismos envolvidos, foram analisados cortes microscópicos de mucosa jugal de 26 pacientes com Leucemia Mielóide Aguda (LMA), que realizaram o transplante alogênico de células tronco hematopoiéticas no Hospital Amaral Carvalho, Jaú - SP, onde 13 pacientes desenvolveram DECHc em mucosa bucal e 13 não desenvolveram DECHc. Cortes microscópicos foram submetidos à técnica imuno-histoquímica, utilizando-se anticorpos monoclonais anti-CD1a, anti- CD123 e anti-CD56. O número de células imunomarcadas no córion (CD1a+, CD123+ CD56+) por milímetro quadrado foi calculado dividindo-se a média das células dendríticas presentes nos 10 campos examinados pela área percorrida em cada espécime. Os dados foram avaliados pelo método de Mann-Witney Os resultados demonstraram um aumento estatisticamente significativo das células dendríticas mielóides CD1a+ (p=0,02) e das células NK CD56+(p=0,04) em pacientes com DECHc quando comparados àqueles sem DECHc. A análise da imunomarcação de CD123+ não demonstrou diferença estatística entre os grupos. Conclui-se através deste estudo que no desenvolvimento da DECH crônica há participação das células dendríticas mielóides e céulas NK no córion de mucosa bucal / Abstract:The graft versus host disease (GVHD) or graft-versus-host-disease(GVHD) is a major cause of morbidity and mortality in patients who underwent hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). It is a syndrome with various clinical, pathological and immunological. Aiming to contribute to clarifying the role of Myeloid dendritic cells, plasmacytoid cells and NK (natural killer) in chronic graft versus host disease (GVHD) and to clarify the mechanisms involved were examined microscopic sections of the oral mucosa of 26 patients with leukemia Acute Myeloid (AML) who underwent allogeneic hematopoietic stem cell in the Hospital Amaral Carvalho, Jau - SP, where 13 patients develop GVHDc oral mucosa and 13 did not develop GVHD. Microscopic sections were submitted to immunohistochemistry staining using monoclonal antibodies anti-CD1a, anti-CD56 and anti- CD123. The number of immunostained cells in the chorion (CD1a, CD123 and CD56) per square millimeter was calculated by dividing the mean of dendritic cells present in the 10 fields examined area covered by each specimen. The data were evaluated by Mann-Whitney. Results showed a statistically significant increase of myeloid dendritic cells CD1a (p = 0.02) and NK cells CD56 (p = 0.04) in patients with GVHDc compared with those without GVHDc. Analysis of CD123 immunostaining of no statistical difference between groups. It is concluded from this study that the development of chronic GVHD is participation of myeloid dendritic cells and NK cells in the chorion of oral mucosa / Doutor

Orientador: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Cleni Mara Marzocchi Machado / Banca: Fernanda de Freitas Anibal / Resumo: Yersinia pseudotuberculosis e Y. enterocolitica são patógenos que causam desordens gastrintestinais. Estudos utilizando infecção in vitro demonstraram que Y. enterocolitica pode ter como alvo as células dendríticas (DCs), afetando várias de suas funções, incluindo sua maturação e produção de citocinas, e, conseqüentemente, contribuindo para a diminuição da ativação de células T CD4+. O objetivo deste estudo foi investigar o papel das células dendríticas das placas de Peyer (PP) na determinação do padrão de resposta imune, Th1 e Th2, durante a infecção por via intragástrica de camundongos suscetíveis (BALB/c) e resistentes (C57BL/6) com a amostra virulenta de Y. pseudotuberculosis (YpIII pIB1 - Yp+) ou seu par isogênico, curado do plasmídeo de virulência (YpIII - Yp-). As DCs das PP foram obtidas no 1°, 3° e 5° dia pós-infecção, quantificadas e analisadas quanto às suas subpopulações, expressões de moléculas de superfície e capacidade imunoestimulatória por citometria de fluxo, e quanto à secreção de citocinas (IL-4, IL-10, IL-12 e TNF-α) por ELISA. Os linfócitos das PP também foram obtidos no mesmo período e tiveram suas sub-populações e o padrão de citocinas intracelulares Th1/Th2 (IL-2, IL-4, IL-10 e IFN-γ) analisado por citometria de fluxo. A infecção por Yp+ reduziu o número de DCs no 1° dia pós-infecção e aumentou, no período inicial, a expressão de B7.1 e B7.2 nos camundongos BALB/c. Nos camundongos C57BL/6 reduziu o número de DCs durante todo o período analisado, aumentou a expressão de B7.1 e B7.2 no período inicial e a expressão de ICAM-1. A infecção por ambas as amostras provocou redução da sub-população CD8α+ e da expressão de MHC II nas duas linhagens de animais, aumentou a sub-população CD11b+ nos animais suscetíveis e diminuiu nos animais resistentes. Os animais estudados não apresentaram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica are pathogens that cause gastrointestinal disorders. Studies using in vitro infection demonstrated that Y. enterocolitica can have as a target dendritic cells (DCs), affecting several of its functions, including their maturation and production of cytokines, and, consequently, contributing to the diminished activation of the T CD4+ cells. The aim of this study was to investigate the role of dendritic cell from Peyer's patches (PP) in determining of immune response pattern, Th1 and Th2, during infection by the intragastric route in susceptible (BALB/c) and resistant (C57BL/6) mice with a virulent sample of Yersinia pseudotuberculosis (YpIII pIB1 - Yp+) or its isogenic pair, cured of the virulence plasmid (YpIII - Yp-). The PP DCs were obtained on the 1st, 3rd and 5th days postinfection, quantified and analyzed as far as their subpopulations, expressions of surface molecules and immunostimulatory capacity by flow cytometry, and the cytokines secretion (IL-4, IL-10, IL-12 and TNF-α) by ELISA. The PP lymphocytes were also obtained in the same period, and had their subpopulations and the pattern of intracellular Th1/Th2 cytokines (IL-2, IL-4, IL-10 and IFN-γ) analysed by flow cytometry. The infection by Yp+ reduced the number of DCs on the 1st day post-infection and increased, in the initial period, the expression of B7.1 and B7.2 in BALB/c. In C57BL/6 mice reduced the number of DCs throughout the study period, increased the expression of B7.1 and B7.2 in the initial period and the expression of ICAM-1. The infection by both samples reduced CD8α+ subpopulation and expression of MHC II in both animals, increased CD11b+ sub-population in susceptible animals and reduced the same sub-population in resistant animals. The studied animals did not present important differences as far as secretion of cytokines by the DCs of PP and both... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor