Orientador: Daisy Maria Fávero Salvadori / Banca: Noeme Souza Rocha / Banca: Maria Inês de Campos Pardini / Banca: Catarina Satie Takahashi / Banca: Eneida de Moraes Marcílio Cerqueira / Resumo: Os linfomas representam um grupo heterogêneo de tumores que acometem o tecido linfóide nodal e extranodal. O tratamento, baseado na utilização da poliquimioterapia associada ou não à radioterapia, tem proporcionado altas taxas de cura. Entretanto, é sabido que tais terapias podem induzir mutações genéticas que, mais tarde, podem ser responsáveis pelo desenvolvimento de neoplasias secundárias. Assim sendo, o presente estudo objetivou avaliar os efeitos tardios das terapias antineoplásicas para linfomas. Para isso, foram investigados os danos no DNA e a capacidade de reparo da molécula pelo teste do cometa, e a relação entre polimorfismos e expressão de dois genes de reparo do DNA - XRCC1 (codons 280 e 399) e hOGG1 (codon 326) - com os níveis de lesões genotóxicas. A casuística do estudo incluiu 3 grupos de indivíduos: 14 pacientes recém-diagnosticados com linfoma e antes de qualquer tratamento antineoplásístico (grupo pré-terapia); 29 pacientes com história de linfoma e que haviam finalizado o tratamento há no mínimo 2 anos (histopatologicamente negativos para neoplasia; grupo pós-terapia); 29 indivíduos saudáveis pareados por sexo, idade e hábito tabagista (grupo controle). Os resultados mostraram que os pacientes com diagnótico ou história de linfoma (pré e pós-terapia, respectivamente), apresentavam níveis aumentados de danos no DNA quando comparados aos indivíduos saudáveis. Esses dados evidenciam a relação entre a presença da doença e lesões no DNA, e que mesmo com diagnóstico negativo, os indivíduos com história de linfoma apresentam níveis aumentados de genotoxicidade até, em média, sete anos após o término da terapia. A menor capacidade de reparo do DNA observada nos pacientes do grupo pós-terapia, e o menor nível de expressão dos genes XRCC1 e hOGG1 nos pacientes pré e pós-terapia, poderiam ser explicações para tais achados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lymphomas are a heterogenous group of malignancies that arise in nodal sites with or without extranodal involvement. The treatment, based on polychemotherapy associated or not with radiotherapy, has provided high cure rates. However, it is known that such therapies can induce genetic mutations that could be related to development of second malignancies. Therefore, the present study aimed to evaluate the late effects of antienoplastic therapies for lymphomas. DNA damage and repair capability as depicted by the comet assay, and the relationship between DNA repair genes polymorphisms (XRCC1 codons 280 and 399, hOGG1 codon 326) or gene expressions and the levels of DNA lesions were investigated. Three groups were included in this study: pre-therapy, with 14 patients newly diagnosed with lymphoma and before any antienoplastic; post-therapy, with 29 patients with history of lymphoma and who had finished treatment at least three years before blood collection (histopathologically negative for neoplasia); control, with 29 healthy subjects matched for age, sex and smoking habit. The results showed that patients from pre- and post-therapy groups presented higher amount of DNA damage than the healthy subjects. These data first indicated that individuals with lymphoma have high frequency of primary DNA lesion in lymphocytes, then, that even with negative histopathological diagnostic, patients with history of lymphoma presented increased DNA damage until the average of 7 years after the end of therapy. The reduced DNA repair capability and the low XRCC1 and hOGG1 expression observed in the post-therapy group could explain such findings. Furthermore, higher DNA repair capability was observed in those subjects with XRCC399arg/arg, XRCC1280arg/his and hOGG1326ser/ser genotypes. In conclusion, our data demonstrated that lymphomas were associated with high level of damage and low DNA repai... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Cilmery Suemi Kurokawa / Banca: Lisiane de Almeida Martins / Resumo: Não disponível / Abstract: Toll-like receptors (TLRs) present in innate immune cells recognize pathogen molecules and influence on immunity to control the host-parasite interaction. Our objective was to evaluate the mRNA expression of TLR-2 and 4, expression and production of IL-12, IFN-γ, TNF-α, IL-17, IL-10 and TGF-β and NO production during infection with Leishmania chagasi and correlate TLR2 and 4 expressions with cytokines production and NO. Infection resulted in increased TLR2, TLR4, IL-17, TNF-α and TGF-β expression at the beginning of infection, with a decrease at the final phase in according the parasitic load; IFN- γ and IL-12 decreased at the peak of parasitemia and increased at the final phase; IL-10 increased during the whole period under analysis. With respect to cytokines and NO production, TGF-β, TNF-α and IL-17 showed high rates at the initial phase, and IFN-γ and IL-12 showed high rates at the final phase; IL-10 and NO showed increasing production during the infection period evaluated. There was a positive correlation of TLR2 and 4 with TNF-α, IL-17, NO, IL-10 and TGF-β at the beginning of infection, and with TNF-α, IL-17 and TGF-β at the end. Our data suggest that L. chagasi was in contact with host's cells via TLR2 and 4, which resulted in cytokine modulation. This interaction could be considered as pathogenic mechanism in visceral leishmaniasis / Mestre

Orientador: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Lenice do Rosário de Souza / Banca: Fátima Regina Vitani Moreno / Resumo: A tuberculose permanece como um dos principais problemas de saúde pública no Brasil e no mundo. Tem como principal agente o Mycobacterium tuberculosis, e é uma doença letal sem tratamento, e seu controle é dificultado pela longa duração e ausência de marcadores, para medir o sucesso ou a falha deste. Os TLRs são receptores que após o reconhecimento de produtos microbianos, ativam a resposta inata e adaptativa. Assim, os receptores TLRs e as citocinas possuem um papel chave na defesa contra o bacilo. Considerando a ausência de informações na literatura em relação à resposta imune de pacientes com tuberculose pulmonar durante o tratamento antituberculose, principalmente em relação à interação inicial do M. tuberculosis com as células da imunidade inata e de seu papel, na indução da resposta adaptativa, através dos receptores TLR, estudos neste sentido, são necessários para se compreender melhor como é a resposta imune do hospedeiro contra o bacilo, frente ao tratamento. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão dos receptores TLR2 e TLR4, do fator de transcrição Foxp3 e da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS), produção e expressão de citocinas, e alterações genotóxicas em pacientes durante o tratamento antituberculose. Foram coletadas amostras de sangue total dos controles saudáveis PPD+ em um único momento (G1) e de pacientes (G1) em três momentos diferentes: M1: início; M2: terceiro mês e M3: ao sexto mês de tratamento antituberculose. Após a obtenção das células mononucleares do sangue periférico (PBMC), as concentrações celulares foram ajustadas para a realização da qPCR, da citometria de fluxo e do teste do cometa. Pacientes com tuberculose pulmonar apresentaram expressão gênica, e na superfície célular de linfócitos e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tuberculosis (TB) remains a major public health problems in Brazil and worldwide. Its main agent Mycobacterium tuberculosis, and is a lethal disease without treatment, and its control is hampered by the long duration and lack of markers to measure the success or failure of this. The TLRs are receptors that after the recognition of microbial products, activate innate and adaptive response. Thus, TLRs receptors and cytokine have a key role in defense against the bacillus. Considering the absence of information in the literature regarding the immune response of patients with pulmonary tuberculosis during antituberculosis treatment, especially in relation to the initial interaction of M. tuberculosis with the cells of innate immunity and its role in the induction of adaptive response through the TLR receptors, studies in this direction are needed to better understand how the host immune response against the bacillus, towards treatment. The objective of this study was to evaluate the expression of TLR2 and TLR4 receptors, the transcription factor Foxp3 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) production and expression of cytokines and genotoxic alterations in patients during TB treatment. Samples were collected from whole blood of healthy PPD + controls in a single moment (G1) and patients (G1) at three different moments: M1: start, M2, M3, and the third month, the sixth month of TB treatment. After obtaining the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and cell concentrations were adjusted to carry out the qPCR, flow cytometry and testing of the comet. Patients with pulmonary tuberculosis showed gene expression and cell surface of lymphocytes and monocytes from TLR2 and TLR4 greater than the control subjects, both in M1, M2 and M3. However, the expression and cell surface receptor TLR2 was... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria de Lourdes Pires Bianchi / Banca: Maria de Lourdes Pires Bianchi / Banca: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Heloisa Della Coletta Francescato / Resumo: Os antioxidantes, principalmente os encontrados na dieta, são agentes responsáveis pela inibição e redução dos danos oxidativos causados pelas espécies reativas nas células. A cisplatina (cDDP), um potente agente antineoplásico utilizado com frequência no tratamento de tumores sólidos, tem seu uso clínico limitado devido aos efeitos adversos como nefrotoxicidade, genotoxicidade e supressão da medula óssea. Como a geração de espécies reativas pode resultar em danos ao DNA pela ação destas espécies ou indiretamente via produtos de degradação da peroxidação lipídica, nosso estudo avaliou o possível efeito protetor da adição da polpa de maracujá amarelo na dieta de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e Wistar normotensos, contra a nefrotoxicidade e genotoxicidade induzida pela cDDP. Os resultados obtidos nas condições experimentais estabelecidas neste trabalho mostraram que a cDDP promoveu um aumento dos níveis das substâncias reativas aos ácido tiobarbitúrico, bem como decréscimo nos níveis de glutationa nos rins dos animais SHR, reforçando a hipótese que a peroxidação lipídica está relacionada com o mecanismo de nefrotoxicidade. O tratamento com doses múltiplas da polpa de maracujá amarelo não alterou os outros parâmetros da função renal no período analisado. Embora o efeito protetor da polpa de maracujá contra os danos induzidos ao DNA em células renais e hepáticas não tenha sido evidente nos resultados obtidos pelo Ensaio do Cometa, a polpa foi eficaz na redução de micronúcleos induzidos pela cDDP. Assim, umas das hipóteses para a redução da pressão arterial sistólica observada neste trabalho, poder ser atribuída à presença de alguns compostos fenólicos e outros ainda não identificados na polpa. Visto que, a interação entre os fitoquímicos presentes na polpa de maracujá demonstraram eficácia na redução da mutagenicidade e efeitos protetores antioxidantes. / Abstract: The antioxidants, particularly those found in the diet, are responsible for inhibiting and reducing the damage caused by reactive species in the cells. Cisplatin (cDDP), a potent anticancer agent often used in the treatment of solid tumors, has limited clinical use due to adverse effects such as nephrotoxicity, genotoxicity and myelosuppression. As the generation of reactive species can result in DNA damage by direct action of this or indirectly by degradation products of the lipid peroxidation, our study evaluated the potential protector of adding yellow passion fruit pulp to the diet of spontaneously hypertensive rats (SHR) and normotensive wistar rats, against the nephrotoxicity and genotoxicity induced by cDDP. The results showed that the cDDP promoted an increase in the levels of thiobarbituric acid reactive substances and a decrease in the levels of glutathione in the kidneys of the animals, reinforcing the hypothesis that lipid peroxidation be related to the mechanism of nephrotoxicity. The treatment with multiple doses of passion fruit pulp did not change the others parameters of renal function in the schedule. Although the protective effect of passion fruit pulp against the damage caused to the DNA of kidney and hepatic cells has not been evident in the results obtained by Comet assay, the pulp was effective in the reduction of micronuclei induced by cDDP. One of the hypotheses for the reduction in systolic blood pressure observed in the present study attributed this effect to the presence of some phenolic compounds and others not yet identified in the passion fruit pulp. Furthermore, the interaction between the phytochemicals of the pulp demonstrated effectiveness in reducing the mutagenic and antioxidant effects. / Mestre