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Análise de frequências alélicas de 15 marcadores STR em alunos da Faculdade de Odontologia de Bauru / Not available

Paulo Renato de Paula Frederico 14 December 2015 (has links)
Entre as muitas aplicações das tecnologias de identificação biológica humana, estão as finalidades forenses. O objetivo desta pesquisa foi verificar frequências alélicas de Short Tandem Repeat (STR) e os parâmetros estatísticos de interesse em genética de populações e forense para desenvolver o primeiro banco de dados populacional de DNA na Faculdade de Odontologia de Bauru, Universidade de São Paulo, (FOB/USP) para futuros usos forenses. Frequências alélicas de 15 locos autossômicos e do marcador de gênero amelogenina foram determinadas utilizando amostras de 200 μL de saliva doados por 296 alunos de graduação da FOB/USP, com idade ≥ 18 anos, após aprovação ética. Os testes laboratoriais foram feitos com kits comerciais. Resultados e parâmetros estatísticos foram obtidos por meio de programas clássicos: GeneMapper-ID-X, MS Excel 2002 versão 10.6871.6870, GenAlEx 6.5 e Arlequin 3.5, comparando quatro populações (brasileira, portuguesa, norte-americana e a população deste estudo). Os locos mais polimórficos foram D18S51 (17 alelos) e FGA (15 alelos), seguidos pelo D21S11 (13 alelos) e os menos polimórficos foram D16S539 e TH01 (7 alelos cada). A análise comparativa com amostra da população brasileira proveniente de estudos anteriores (n > 100.000) pelo teste goodness of fit X2 index não mostrou diferenças significativas entre estes grupos (p = 0,9999). Outros parâmetros estatísticos foram calculados comparando as populações: local (deste estudo), portuguesa e norte-americana. A análise de variância molecular (AMOVA) entre as três populações, entre as pessoas da mesma população e para cada pessoa de cada população mostrou que existe uma elevada variância individual (99%), que esta variância é mantida uniformemente entre as pessoas da mesma amostra/região (1%) e entre as três populações estudadas (0%). O estudo confirmou o elevado grau de polimorfismo e a alta heterozigosidade (96,5%) da população. Houve diferença significativa quanto ao gênero (79,7% mulheres) quando comparado à população brasileira em geral (50,4%), explicada pelas características do corpo discente da FOB/USP composto por 80,6% de pessoas do gênero feminino. Interessante foi a observação de uma microvariante alélica no loco D18S51, fora da escada padrão e da escala de abrangência do kit, correspondente ao alelo 29, ainda não definida na base de dados internacional (STRBase, atualizada em 07/08/2015). Esta microvariante deverá ser confirmada por testes familiares e sequenciamento de DNA para verificar a possibilidade de outra ocorrência familiar ou duplicação de nucleotídeos. No futuro, os dados obtidos neste estudo devem ser incorporados ao banco de dados da população brasileira e podem ser considerados como referência genética da população regional, ajudando a elucidar casos forenses. Após a confirmação, a potencial nova microvariante alélica contribuirá para a base de dados internacional STRBase. / There are many ways of applying biological human identification technologies, among these are forensic applications. The objective of this study was to verify allele frequencies for 15 autosomal short tandem repeat (STR) loci and develop the first human DNA population database at the Bauru School of Dentistry, University of São Paulo (FOB/USP), for future forensic uses. Allele frequencies for these STR loci and an amelogenin gender marker were determined using 200 μL samples of saliva donated by 296 undergraduates from FOB/USP who were ≥ 18 years old at the time of the sample collect after signing a consent form with ethical approval. For laboratory tests, commercial kits were used. Results and statistical parameters were obtained using the following software: GeneMapper IDX (version 1.5), MS Excel 2002 (version 10.6871.6870), GenAlEx (version 6.5) and Arlequin (version 3.5) to compare four populations (Brazil, Portugal, U.S. and this study population). Results indicated that the most polymorphic loci were D18S51 (17 alleles) and FGA (15 alleles), followed by D21S11 (13 alleles); the least polymorphic loci were D16S539 and TH01 (7 alleles each). Various Brazilian populations (n > 100,000) from other studies were compared with this studys Brazilian population using a goodness-of-fit chi-squared test, and no significant differences in these frequencies were observed between these two population groups (p = 0.9999). Other forensic and population genetic statistical parameters were calculated comparing this studys population with Portugal and U.S. populations. For example, an analysis of molecular variance (AMOVA) among all populations, among people of the same population and for each person for each population, showed that people have high individual variance (99%) and that this variance is maintained evenly between people of the same sample/region (1%) and among the three populations studied (0%). This study reinforced the conclusion of other allele frequency population studies for the 15 autosomal STR loci tested, confirming high polymorphic grade and high heterozygosity (96.5%). There were significantly more women in the study (79.7%) when compared to the general Brazilian population (50.4%) since the student body of FOB/USP is 80.6% female. Interestingly, an off-ladder D18S51 allele micro-variance corresponding to the allele 29, not yet identified, was found which should be confirmed using paternity and sequencing tests to verify the possibility of either familial occurrence or nucleotide duplication. In the future, due to the small differences found, the parameters obtained in this study should be incorporated into the Brazilian population database and be considered for a regional population genetic prototype database potentially aiding forensic cases with comparisons and calculations. After confirmation, the potentially new micro variant allele found could be included in the international STRBase.
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Fluorescência dental: possível aplicação forense / Fluorescence dental: potential application in forensic science

Ricarda Duarte da Silva 02 August 2012 (has links)
Nos casos de identificação de ossadas, segmentos do esqueleto ou ossos isolados, buscar o diagnóstico dos dados biotipológicos, como a idade do indivíduo, proporciona a possibilidade de estabelecer uma conexão com suspeitos desaparecidos. Em dentes naturais a fluorescência ocorre em dentina e também em esmalte, embora este apresente menor índice de fluorescência. É sabido que o esmalte, a dentina e polpa sofrem mudanças notáveis durante a vida do indivíduo. O esmalte torna-se mais mineralizado, liso e fino, sofre desgaste fisiológico e patológico o que pode causar áreas de exposição da dentina que altera a expressão cromática do dente natural. A polpa diminui em volume devido à deposição de dentina secundária, assim a dentina torna-se espessa com o tempo. Sendo o esmalte e a dentina responsáveis pelo fenômeno de fluorescência dental e estes elementos dentários sofrem alteração significativa durante a vida, sugere-se avaliar tal fenômeno sob a luz da odontologia legal com vista a desenvolver um método para se estimar a idade de um indivíduo. O presente estudo tem por propósito verificar a existência de correlação entre idade e alteração da fluorescência em dentes in vivo. A amostra foi constituída por 66 brasileiros, de ambos os gêneros, selecionados aleatoriamente. Os sujeitos de pesquisa se encontravam com idades entre 07 e 63 anos e foram divididos em 6 grupos: Grupo 1 07 a 12 anos; Grupo 2 - 13 a 20 anos; Grupo 3 21 a 30 anos; Grupo 4 31 a 40 anos; Grupo 5 41 a 50 anos e Grupo 6 51 a 63 anos. Foram incluídos na amostra os incisivos centrais superiores direito ou esquerdo livres de restaurações ou qualquer outro procedimento reabilitador ou estético nas regiões onde foi mensurada a fluorescência. Foi confeccionado um sistema de captura de imagem. A mensuração da fluorescência do dente foi realizada através da análise computacional das imagens digitais com o auxílio do software ScanWhite DMC / Darwin Systems - Brasil. A fluorescência dental decresce quando comparamos os grupos de faixa etária 21 a 30, 31 a 40, 41 a 50 e 51 a 63 anos, havendo diferença estatisticamente 8 significativa entre os grupos 41 a 50 anos e 21 a 30 anos (p=0,005) e também entre o grupo 51 a 63 anos e os demais grupos (p<0,05)). Pode-se concluir que a fluorescência dental está correlacionada com a idade e apresenta um comportamento semelhante e estável dos 7 aos 20 anos de idade, atinge seu valor máximo esperado na idade de 26,5 anos e a partir de então decresce. Através da análise do conjunto das variáveis estudas sugere-se tabela para auxiliar na identificação humana (Apêndice B). / In cases of identification of bones, some segments of the skeleton or isolated bones fetch the diagnostic data Biotype as an estimated age of the individual providing the possibility of establishing a connection to suspects disappeared. The fluorescence in natural teeth occurs in dentin and enamel as well, although this presents a lower rate of fluorescence. It is known that the enamel, dentin and pulp undergo remarkable changes during the life of the individual. The enamel becomes more mineralized, smooth and thin, wears physiological and pathological which can cause areas of dentine exposure that alters the expression of the natural tooth color. The pulp volume decreases due to deposition of secondary dentin as the dentin becomes thicker with time. Therefore, if the enamel and dentin are responsible for the phenomenon of fluorescence dental and these dental elements suffer significant changes during life, now the phenomenon of fluorescence is investigated appropriately can provide us a method to estimate the age of an individual. The purpose of this study was to verify the correlation between age and change in dental fluorescence in vivo. The sample consists of 66 Brazilians, both gender, randomly selected. Research subjects should be aged between 13 and 63 years and will be divided into five groups: Group 1 - ages 07 - 12 years, Group 2 - ages 13-20 years, Group 3 - ages 21-30 years, Group 4 - ages 31 to 40 years and Group 5 - aged 41- 50 years and Group 6: aged 51-63 years. The upper central incisors right or left will be examined and shall be free of restorations or other rehabilitative or cosmetic procedure, which includes whitening teeth, cheeks where it will be measured fluorescence. Were included in the sample the upper central incisors right or left free of any restoration or rehabilitation or aesthetic procedure in the regions where the fluorescence was measured. A system of image capture was fabricated. The measurement of the fluorescence of the tooth was performed by computer analysis of digital images with the help of software ScanWhite DMC / Darwin Systems - Brazil. 10 The fluorescence decreases when comparing dental age groups 21-30,31-40,41-50 and 51-63 years, statistically significant difference between the groups 41-50 years and 21-30 years (p=0.005) and also between the group 51-63 years and the other groups (p<0.05). It can be concluded that the dental fluorescence correlates with the age and has a similar and stable behavior at the 7 to 20 years of age, reaches its maximum expected value of 26.5 years of age and thereafter decreases. Through the analysis of all variables studied suggest table to assist in human identification (Appendix B).
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Frequencia alelica dos locus DYS390, DYS391 e DYS393 em individuos brasileiros e sua aplicação a identificação humana

Oliveira, Rogerio Nogueira de 19 February 2001 (has links)
Orientador: Heloisa Amelia de Lima Castro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T21:01:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RogerioNogueirade_D.pdf: 3569902 bytes, checksum: 17185a17d4b8451b3874e92c0c333634 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A identificação humana pode ser realizada por meio dos mais variados procedimentos técnicos, principalmente pela análise comparativa dos documentos do prontuário odontológico. Atualmente, as técnicas de biologia molecular têm se apresentado como o recurso comparativo mais eficaz, contudo parcela significativa desses métodos requer, além do estabelecimento prévio de parâmetros de coleta de material biológico, a verificação da freqüência alélica da população na qual será aplicada. Assim, o presente estudo procurou evidenciar a freqüência dos alelos em 3 lócus de STR do cromossomo Y (DYS390, DYS391 e DYS393) numa população de indivíduos brasileiros leucodérmicos. Para tanto, foram padronizados protocolos de coleta e armazenamento de diferentes materiais biológicos, e estabelecidas rotinas de extração e amplificação do DNA. Os resultados apresentaram o lócus DYS390 com freqüência nos alei os 21, 22, 23, 24, 25 e 26, sendo o alelo 24 o que apresentou maior freqüência desse lócus, com 46%; o STR DYS391 com presença nos alelos 8,9, 10, 11 12 e 13, tendo o alelo 11 incidência de 37% desse STR; e o STR DYS393 nos alelos 11, 12, 13 14 e 15, tendo o alelo 13 apresentado freqüência de 45% desse lócus. Esses dados, comparados àqueles de outras populações, demonstraram haver individualidade no perfil alélico da população estudada, comprovando que, mais do que aplicar as metodologias disponíveis, é prudente que se verifiquem os padrões dos alelos na população alvo, pois a utilização de padrões alélicos de populações diversas da nossa pode levar a imprecisões nos diagnósticos de identificação humana / Abstract: Human identification can be accomplished by several technical procedures, especially by the comparative analysis of dental documents. Nowadays, molecular biology introduced more effective resources for the human identification. However, these methods demand the previous definition of parameters to the collection of biological material, and the verification of the allele frequency of the population in which they will be applied. Aiming to subsidize these methods, we observed the frequency of the alleles in three loci of STRs of the Y chromosome (DYS390, DYS391 and DYS393) in a group of Brazilian white subjects. We also standardized protocols for the collection and storage of different biological materiais, besides defining routines for the extraction and amplification of the DNA. Results presented alleles 21, 22, 23, 24, 25 and 26 in the locus DYS390, being the allele 24 the most frequent with 46%. STR DYS391 presented alleles 8, 9, 10, 11 12 and 13, and the allele 11, with 37%, was the most frequent. STR DYS393 presented alleles 11, 12, 1314 and 15, and the allele 13, with 45%, was the mostfrequent. The comparative analysis of these data, with information related to other populations, stresses the singularity of the allele profile of the studied population. Therefore, prior to the introduction of recent methods of molecular biology to the human identification, we should carefully verify allele patterns of the population, because the use of allele standards of other populations could produce imprecision in human identification processes / Doutorado / Doutor em Odontologia Legal e Deontologia
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Avaliação morfometrica de cranios humanos brasileiros por meio de tres diferentes metodologias / Morphometric analysis of human skull brazilian through three different methods

Manoel, Cristiano 02 June 2009 (has links)
Orientador: Paulo Henrique Ferreira Caria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T11:52:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Manoel_Cristiano_M.pdf: 2133778 bytes, checksum: 24f1ce494393f39e56ad26c09d34e4bb (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Metodos Craniometricos, tem sido regularmente aplicado na determinacao do genero em diversas regioes mundiais. Avaliar morfometricamnte o indice de confiabilidade de tre metodologias distintas para determinacao do genero na populacao brasileira. Foram avaliados 215 cranios humanos brasileiros com genero, idade e etnia identificados, pertencentes a Universidade Federal de Sao Paulo. Foram utilizadas as metodologias, do cranio, area do triangulo mastoideo e do forame magno, de acordo com os criterios, estabelecidos por Yscan & Steyn (1999), Kemkes & Gobel (2006) e Gunay & Altinkok (2000). Os valores obtidos foram submetidos a analise estatistica, calculo do coeficiente de correlacao Intra-classe, test t student, com nivel de significancia de 5%, regressao logistica multipla, odss Ratio, Mann-Whitney e ANOVA multivariada. A analise por meio do metodo craniometrico revelou que o genero influenciou (p<0,05) em todas as mensuracoes. Nao houve diferenca significante da posicao do processo mastoide entre os grupos etnicos e os generos (p>0,05), porem houve prevalencia do genero masculino sobre o feminino nas mensuracoes Po-Ms e As - Po (p<0,05). A analise estatistica (ANOVA e Tukey test) revelou que o genero influenciou na largura do forame magno, sendo os masculinos (30,3±0,20) maiores que os femininos (29,4±0,23), mas nao o comprimento (p<0,05). As tres diferentes metodologias empregadas apresentaram diferencas morfometricas entre os generos para as caracteristica craniofaciais do brasileiro. Portanto, em conjunto com outras tecnicas antropologicas pode contribuir para a determinacao do genero de individuos desconhecidos. / Abstract: Craniometryc methods, has been regularly applied, for providing assistance in the gender determination in various regions in the worldwide. To evaluate morphometrically the reliability of three differents methodologies for gender determination in Brazilian population. Were evaluated 215 Brazilians human skulls with gender, age and ethnicity previously identified, belong to the Federal University of Sao Paulo. The following methodology, the skull craniometry, triangle mastoid area and foramen magnum, according to the criteria established by Yscan & Steyn (1999), Gobel & Kemkes (2006) and Gunay & Altinkok (2000). The datas were submitted to statistical analysis, Intra-class correlation coefficient, student t test, with level significance 5%, multiple logistic regression, odss Ratio, Mann-Whitney and multivariate ANOVA. The analysis by the craniometric method showed that gender influenced (p <0.05) in all measurements, more in men than women. There was no significant difference in the mastoid process position between the ethnic groups and genders (p> 0.05), but there was prevalence of male over female in the measurements and the Po-Ms - Po (p <0.05). ANOVA and Tukey test showed that gender influenced the width of the foramen magnum, and the male (30.3 ± 0.20) higher than the female (29.4 ± 0.23) but not the length (p <0.05). The three differents methods show mophometric difference between sexes for the craniofacial characteristics of the Brazilian. Therefore, together with other anthropological techniques can help to determine the gender of unknown individuals and be used in assotiation with medical expertise and odontolegais. / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Buco-Dental
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"Avaliação de três métodos de extração de DNA de dentes humanos submetidos ao calor" / DNA extraction of human teeth submitted to high temperatures: evaluation of three methods .

Vanessa Rosalia Remualdo 16 December 2004 (has links)
Nos casos de carbonização humana usualmente há uma limitação do emprego dos remanescentes biológicos para estudo. Nestes casos, têm-se usado por eleição dentes para análises forenses, já que sua constituição anatômica proporciona proteção ao material genético. No presente estudo avaliou-se a amplificação por PCR do DNA obtido de dentes submetidos ao calor (200°C, 400°C, 500°C e 600°C) durante 60 minutos testando-se três métodos de extração (orgânico, acetato de amônia/isopropanol e sílica). Foram utilizados 8 pares de dentes de indivíduos diferentes, sendo que um foi mantido in natura (gold standart) e o outro submetido à queima. Para amplificação do DNA empregaram-se iniciadores de DNA genômico (STR-F13A01) e DNA mitocondrial (MPSs). Para o DNA genômico, a análise em gel de poliacrilamida permitiu verificar que com o método orgânico 50% das amostras foram amplificadas, 38% com o acetato de amônia/isopropanol, e 0% com a sílica. Para os MPSs, o seqüenciamento das amostras mostrou que o método orgânico confirmou 100% dos resultados em 200ºC, 50% em 400ºC e 0% em 500ºC e 600ºC. Para o método acetato de amônia/isopropanol em 100% das temperaturas foi possível a análise do mtDNA. Para o método da sílica, obtivemos resultados de 50% em 400°C e 500°C, e 0% em 200°C e 600°C. Nossos resultados permitem concluir que o método acetato de 8 amônia/isopropanol é o mais indicado para obtenção de DNA amplificável por PCR de amostras carbonizadas nas temperaturas utilizadas neste trabalho. / Biological remains of carbonized human bodies are usually not possible to use in forensic analysis. In these cases, teeth are usually selected since enamel, dentin and cement provides protection to the genetic material. The present study evaluates DNA extracted using three methods (organic, isopropilic alcohol and silica) of teeth submitted to different temperatures (200°C, 400°C, 500°C and 600°C). The method of evaluation was amplification by PCR. Two third molars of eight different individuals were used; one was kept in natura (gold standart) and the other submitted to burning. For amplification primers for genomic (STR-F13A01) and mitochondrial (MPSs) DNA were used. For genomic DNA, polyacrylamide gel analysis showed that 50% of the samples extracted with organic method were amplified, 38% with isopropilic alcohol, and 0% with the silica method. For mitochondrial DNA, amplicons sequencing showed that 100% of the samples extracted with isopropilic alcohol method were confirmed in all temperatures; 100% with the organic method in 200°C, 50% in 400°C, and 0% in 500°C and 600°C. For silica method, 50% in 400°C and 500°C and 0% in 200°C and 600°C. Our results show that the isopropilic alcohol method is the best method to extract DNA from burned teeth of all used temperatures.
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"Metodologias de identificação de marcas de mordidas" / Identification methodologies of bite marks

Jeidson Antonio Morais Marques 17 May 2004 (has links)
RESUMO As marcas de mordidas têm sido relatadas na literatura como elementos periciais fundamentais para a identificação de agressores, vítimas e criminosos. Assim, o papel da Odontologia Legal é cada vez mais importante. O objetivo do presente estudo foi comparar quatro metodologias de levantamento e identificação de marcas de mordidas, além do aprimoramento e aperfeiçoamento das técnicas existentes, analisando as vantagens e desvantagens de cada metodologia aplicada e adequando-as ao tipo de suporte em que a mordida ficou impressa. A amostra foi composta por 50 (cinqüenta) modelos de gesso de alunos da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo mediante consentimento livre e esclarecido. Foram utilizadas quatro gomas de mascar, maçãs e barras de chocolate. Através de sorteio, os alimentos foram mordidos pelos participantes sem conhecimento do pesquisador. A avaliação foi feita por meio da comparação entre as metodologias para estudo de marcas de mordidas humanas. Os resultados mostraram que a técnica mais segura e indicada para esse estudo foi a Análise Métrica. De doze alimentos mordidos, foi possível identificar os autores de dez. Em dois casos não foi possível indicar os principais suspeitos, mas excluir quarenta e cinco em um dos casos, e quarenta e seis no outro. De acordo com os dados obtidos, foram elaboradas propostas de protocolos para a análise de impressões dentárias nos três tipos de suportes. Ficou comprovado que a análise de impressões dentárias em alimentos pode ser utilizada como uma prova pericial a mais, facultando a sua incorporação ao conjunto probatório da investigação criminal, com a possibilidade de conferir um grande poder incriminatório ou excludente / ABSTRACT The bite marks has been described in scientific literature like a fundamentals elements of burglars and victims identification. The Forensic Odontology has shown each more contributions in this area of investigation. The aim of this study was to compare four analysis methodologies of bite marks, moreover improvement of the actual techniques, observing advantages, disadvantages and adapting to each kind of support. The sample was composed by fifty stone models of odontology students from Dental Faculty of University of São Paulo. It was used three kinds of food: four apples, chewing gums and chocolate bars. The foods were bitten for volunteers randomly choose without knows of the scientist. The valuation was made through the comparison of methodologies to collect and study of human dental impressions. The results showed that the more secure and indicated technique for these foods was Metric Analysis. From twelve foodstuffs, it was possible to identify ten of then. Two cases it wasn’t possible indicate the main suspects, but exclude fourty-five in one of the cases and fourty-six in the other. Based on the results, it was proposed a protocol to bite marks analysis for the three foodstuffs. It was proved that the study of bite marks in foods can be used like more one investigation proof, faculting your incorporation in the probatory amount of a criminal investigation, with the possibility of confer a significant incriminatory or excludent power.
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\"Estudo de freqüências alélicas e 12 microssatélites do cromossomo Y na população brasileira de Araraquara e da região da grande São Paulo\" / Allelic frequency study of 12 Y microsatellite in the brazilian population of Araraquara and Grande São Paulo

Carolina Costa Góis 14 September 2006 (has links)
Este trabalho tem como objetivo a determinação da freqüência alélica de 12 microssatélites do cromossomo Y na população de Araraquara e da Grande São Paulo, tendo em vista a necessidade de ampliação dos dados referentes a estes marcadores devido a sua crescente aplicação em diferentes áreas, entre elas a forense na qual a utilização destes microssatélites torna-se muitas vezes a única ferramenta disponível para resolução de casos. Para isto foram tipados 200 indivíduos, que não apresentavam relação de parentesco, divididos em quatro grupos de acordo com autoclassificação de cor (branco, preto, pardo ou oriental). Foram coletadas destes indivíduos amostras de sangue ou saliva a partir das quais foi feita extração do DNA utilizando diferentes protocolos de acordo com o tipo de amostra, seguida da amplificação dos 12 locos do cromossomo Y através do PowerPlex® Y System (Promega) de acordo com instruções do fabricante. Os produtos da amplificação foram submetidos a eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante a 6%, no seqüenciador ABI377 (Applied Biosystems) para obtenção dos perfis de cada loco. Os quais foram analisados com a utilização do software GeneScan ver. 2.1 (Applied Biosystems). Foi realizado o cálculo das freqüências alélicas e diversidade gênica de cada loco, assim como da diversidade haplotípica e capacidade de discriminação para cada grupo e para a amostra total. A comparação entre os resultados obtidos demonstrou que a variação dentro de cada grupo é maior que a variação entre os grupos. Os resultados obtidos foram enviados ao banco de dados mundial do cromossomo Y (Y-STR Haplotype Reference Database). / The aim of this study is to determine the allelic frequency of 12 microsatellites of the Y chromosome in Grande São Paulo and Araraquara population, in face of the amplification necessity of these markers data due to the increasing application of these markers on different fields, including the forensic on which the use of them is sometimes the only way to solve crime cases. For this purpose it was typed 200 unrelated individuals divided according to self report in four groups based on color skin (white, black, mulatto or yellow). Blood or buccal swab samples were collected and submitted to DNA extraction with different protocols according to the kind of sample. Subsequent amplification of 12 Y-STR was proceeded using the PowerPlex® Y System (Promega) following the manufacture’s protocol. The amplification products were submitted to electrophoresis in 6% polyacrilamid gel on ABI377 sequencer (Applied Biosystems) to obtain the profile of each locus. The results were analyzed with GeneScan ver. 2.1 software (Applied Biosystems). The allelic frequency and gene diversity of each locus as well as the haplotypic diversity and discrimination capacity was calculated for each group and for total sample. The comparison among the results showed that the variation inside the groups is higher than between groups. The haplotypes observed on this sample were sent to Y-STR Haplotype Reference Database.
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Utilização da técnica de identificação genética: panorama da realidade dos serviços oficiais de identificação brasileiros e a importância da atuação do cirurgião-dentista na equipe forense / Using the technique of genetic identification: picture of reality official identification of the Brazilian and the importance of role of dentistry-on forensic team

Andréia Moribe Baraldi 13 February 2009 (has links)
A análise do DNA pode ser considerada um dos principais progressos técnicos para investigação criminal desde a descoberta das impressões digitais. Seu surgimento trouxe novos paradigmas para os critérios utilizados na formulação da culpabilidade no campo do Direito Penal, bem como no estabelecimento da certeza jurídica nas relações de filiação, campo do Direito Civil. Foi incorporada à rotina forense pelas polícias de países do primeiro mundo e começa a ser introduzida no contexto pericial em alguns Estados do Brasil. No entanto, o uso destas técnicas de identificação genética origina uma série de exigências de qualidade e excelência aos laboratórios que as realizam. Portanto, definição de normas, estabelecimento de padrões e criação de sistemas de credenciamento e certificação tornaram-se absolutamente necessários. Levando-se em consideração a crescente influência exercida pelo DNA no contexto forense, este trabalho teve como objetivo conhecer a realidade brasileira diante desta tecnologia e a importância da atuação do cirurgião-dentista na equipe forense. Para isso, tentou-se contato com o serviço oficial de identificação central da capital de cada um dos vinte e seis estados brasileiros além do Distrito Federal. Participaram da pesquisa 17 (dezessete) Estados (Minas Gerais, Goiás, Rio Grande do Sul, Pará, Pernambuco, Alagoas, Paraná, São Paulo, Paraíba, Bahia, Rio de Janeiro, Roraima, Amapá, Maranhão, Rio Grande do Norte, Ceará e Tocantins). A coleta de dados foi realizada através de um questionário. A partir deste foi possível estabelecer que a maioria dos serviços (88%) faz uso da técnica de identificação genética. Dentre estes, apenas o Rio Grande do Norte não adota protocolos de coleta e armazenamento das amostras biológicas. O sangue é a amostra biológica de eleição, porém em casos de ossadas ou quando o cadáver encontra-se carbonizado e/ou avançado estado de decomposição, os dentes são utilizados como fonte de DNA. Geralmente as amostras biológicas coletadas são provenientes de crimes sexuais. Apesar de marcas de mordida serem evidências freqüentemente encontradas em crimes desta natureza, a coleta de saliva (suabe) é realizada apenas em 43% dos Estados. Dentre as diversas categorias de profissionais que compõem a equipe de DNA forense, os farmacêuticos se destacam (43%). Possuem certificado de creditação apenas 50% dos laboratórios (São Paulo, Rio de Janeiro, Paraná, Rio Grande do Sul, Bahia, Roraima e Amapá). O presente trabalho permitiu compreender a maneira pela qual esses serviços estão se estruturando e desenvolvendo essa tecnologia. Através dos resultados obtidos neste estudo foi possível verificar a influência crescente exercida pela técnica de DNA nos processos de identificação, a importância da atuação de uma equipe multiprofissional - uma vez que a contribuição de cada área e a metodologia empregada no processo serão influenciadas pela condição do material biológico apresentado para o exame - e ressaltar a importância dos conhecimentos específicos do odontolegista, principalmente pelo fato dos elementos dentários e da saliva constituírem potenciais fontes de DNA. / The analysis of DNA can be considered major technical advances for criminal investigation since the discovery of fingerprints. Its emergence has brought new paradigms for the criteria used in the formulation of culpability in the field of criminal law, as well as the establishment of legal certainty in relations of affiliation, field of civil law. It was incorporated in routine forensic police from the countries of first world and beginning to be introduced in the context expert in some Brazilian states. However, the use of these techniques of genetic identification, gives quality requirements and excellence laboratories that perform them. Therefore, setting standards, setting principle and creating systems of accreditation and certification have become absolutely necessary. Taking into account the growing influence of the DNA in the forensic context, this study aimed to know the Brazilian reality on this technology and the importance of the role of surgeon-dentist in the forensic team. For this reason, attempts were made to contact the department\'s official identification center of the capital of each of the twenty-six Brazilian states than the Federal District. Participated in the survey 17 (seventeen) States (Minas Gerais, Goiás, Rio Grande do Sul, Para, Pernambuco, Alagoas, Paraná, São Paulo, Paraíba, Bahia, Rio de Janeiro, Roraima, Amapá, Maranhão, Rio Grande do Norte, Ceara and Tocantins). Data collection was conducted through a questionnaire. From this could be established that the majority of services (88%) made use of the technique of genetic identification. Among these, only the Rio Grande do Norte do not adopt protocols for collection and storage of biological samples. The blood is the biological sample of choice, but in cases of carcass or when the corpse is carbonized and / or advanced state of decomposition, the teeth are used as a source of DNA. Usually the samples are collected from sexual crimes. Despite the bite marks are frequently found evidence in such crimes, the collection of saliva (swab) is performed only in 43% of the states. Among the various categories of professionals who make up the team of forensic DNA, pharmacists are stressed (43%). They certificate of accreditation of laboratories only 50% (São Paulo, Rio de Janeiro, Paraná, Rio Grande do Sul, Bahia, Roraima and Amapá). This work could understand the way in which these services are structuring and developing this technology. Through the results of this study was to check the growing influence exercised by the technique of DNA in cases of identification, the importance of the many occupational, since the contribution of each area and the methodology employed in the process will be influenced by the condition of biological material submitted for review and emphasize the importance of specific knowledge of forensic dentist, mainly because of dental elements, in cases of advanced decomposition and charring, and the saliva, bite marks on this, are potential sources of DNA.
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\"Desenvolvimento de um sistema computadorizado de identificação odonto-legal\" / Development od computer system for forensic dentistry identification

Roberto Matsuzaki 08 November 2006 (has links)
A participação da odontologia legal está cada vez mais presente nos processos de identificação humana, seja nos casos de desastres em massa ou quando o único material disponível para análise são os dentes ou fragmentos de ossos da mandíbula ou da maxila. Após análise e pesquisa da literatura dos programas destinados à área de odontologia legal, foi confeccionada cinco tipos de fichas para a coleta de dados e desenvolvido um programa de computador nacional específico para a área de odontologia legal com o nome de sistema computadorizado de identificação odonto-legal (SOL). Inicialmente o programa pode ser utilizado na área criminal para os casos de: identificação humana em desastre de massa, identificação de pessoa desaparecida e análise das marcas de mordida. Para o projeto e desenvolvimento desse programa utilizou-se os programas Windows XP, Access 2003 e Visual Basic 6 da Microsoft. A plataforma apresenta-se de forma simples e não necessita de programas auxiliares de edição de texto ou imagens, nem a necessidade de conhecimentos avançados em informática do usuário. A partir da ocorrência e do cadastro dos registros, o programa realiza automaticamente uma filtragem dos dados e exibe uma lista com prováveis vítimas, de acordo com os dados coincidentes, para que o perito possa realizar o processo de identificação. Estão disponíveis para auxiliar o trabalho do perito, alguns recursos de edição e manipulação de imagem. Em que é possível alterar a angulação, o contraste, a Roberto Matsuzaki 8 escala, a transparência e negativo. O recurso de transparência possibilita a sobreposição de imagens para análise de marcas de mordidas e de estruturas anatômicas, e o recurso negativo auxilia na análise das radiografias. Para os testes e correções do programa foi realizada a simulação de um acidente com 25 vítimas hipotéticas com todos os dados dentários ante-mortem e 25 indivíduos post-mortem com algum desses eventos hipotéticos. O programa permitiu a identificação de todos os indivíduos e foi possível verificar a sua eficácia e aplicabilidade nos tipos de ocorrência a que foi proposto. / The participation of Forensic Dentistry is more and more present in human identification process, not only in mass disaster situation but also in cases when the only materials available for analysis are teeth or jawbones fragments. After the analysis and research of the programs literatures for forensic Dentistry area, five different forms was made for data collecting and a specific computer program was developed for Brazilian Forensic Dentistry area (computer system for identification forensic dentistry). Initially the program could be use in criminal area for case of: human identification in mass disaster, missing person identification and bites marks analysis. This program was designed and developed using Windows XP, Access 2003 and Visual Basic 6 ? Windows Software. The platform is simple and auxiliary text or image edition programs are not necessary, even advanced knowledge in computer program. From the event and the register data, the program automatically searches the data and display a list of probably victims, according to the coincident data, so the expert could perform the identification process. Some image edition and manipulation resources are available to assist the experts in their work, alteration in the angle, contrast, scale, transparence which permits superposing of images over bites marks and anatomical structures and invert that helps in radiography analysis. The program was tested and corrected through an accident simulation of 25 hypothetic victims with all ante-mortem dental data and 25 post-mortem subjects with Roberto Matsuzaki 10 some of the hypothetic events. The program allowed the identification of all of subjects and also permits to verify the program efficacy and applicability on the different events proposed.
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Estudo de freqüência alélica de cinco loci STR do cromossomo X na população do Estado de São Paulo e sua contribuição na identificação humana / Study of allelic frequency of five X-Chromosome?s loci STR on Sao Paulo State people and its role in human identification

Ricardo Henrique Alves da Silva 11 June 2007 (has links)
A identificação forense através da análise de ácidos nucléicos é realizada, freqüentemente, pelo estudo de regiões polimórficas do DNA, tais como os STRs, regiões que apresentam repetições consecutivas curtas. Para a utilização destes marcadores na identificação humana é necessário conhecer a distribuição de seus alelos na população a qual o indivíduo pertence, visto que essa varia entre diferentes populações. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo determinar a freqüência alélica de cinco STRs do cromossomo X (DXS6854, DXS7424, DXS101, DXS6808 e DXS7132), a fim de avaliar a contribuição destes marcadores, através de cálculos estatísticos, na prática forense e em testes de paternidade. Foram coletadas amostras de esfregaço bucal, através de swab bucal, sendo depositado em cartão de coleta, e/ou sangue, através de punção digital depositada em cartão de coleta, em 243 sujeitos da pesquisa, sendo estes indivíduos não aparentados, residentes no Estado de São Paulo. A extração do DNA foi realizada a partir do Kit DNA IQ® (Promega), de acordo com as normas do fabricante e, na reação de PCR, utilizou-se um multiplex desenvolvido pela empresa BIOCOD (Belo Horizonte, MG), sendo a tipagem dos loci obtida através de corrida eletroforética, em gel de poliacrilamida desnaturante, no seqüenciador automático AlfExpress® (Amersham Biosciences). Os resultados foram analisados através dos programas PowerStats ver. 12 (Promega®) e Arlequin ver. 3.1. Como resultados principais foram observados: a grande variabilidade de alelos presentes na população estudada para os STRs selecionados; que o Poder de Discriminação em mulheres variou de 0,658 (DXS6808) a 0,975 (DXS101), assim como em homens entre 0,451 (DXS6808) e 0,881 (DXS101); as chances de exclusão foram calculadas em duas situações, par pai/filha (MECD) e trio pai/mãe/filha (MECT), sendo os melhores resultados apresentados pelo DXS101; além de verificar que a diversidade haplotípica (nas amostras masculinas) foi de 0,9993, indicando uma Probabilidade de Coincidência menor que 0,0007. Sendo assim, é possível concluir que, com exceção do DXS6808, os demais loci STR permitem uma boa aplicação na prática forense, permitindo sua utilização para cálculo estatístico em análises de identificação humana e testes de parentesco. / The forensic identification through DNA analysis is, frequently, done by the study of DNA?s polymorphic regions, such as STR, short tandem repeats. In order to use these markers in human identification, it?s necessary to know the allelic distribution in the population in wich the person belongs. This research aimed to settle the allelic frequencies of five X-chromosome?s STR (DXS6854, DXS7424, DXS101, DXS6808 e DXS7132) and analysis the contribution of these markers, through statistical parameters, in forensic activities and paternity tests. For this, samples of oral rub were collected by oral swab, being deposited on collect card, and/or blood by digital punction, deposited on collect card, with 243 research subject, being not related, living at Sao Paulo State, Brazil. The DNA extraction was performed using Kit DNA IQ® (Promega), according to manufacturer rules and, at PCR, was used a multiplex developed by BIOCOD (Belo Horizonte, Minas Gerais State), being the loci typifying obtained by eletrophoretical procedure, on polyacrilamid gel, using AlfExpress® (Amersham Biosciences). The results were statistically analyzed by PowerStats ver. 12 (Promega®) and Arlequin ver. 3.1 programs. The principal results showed: the great allele variability in this population sample to the selected STRs; that Power of Discrimination in women varied from 0.658 (DXS6808) to 0.975 (DXS101), as well as in men between 0.451 (DXS6808) and 0.881 (DXS101); the mean exclusion chance were calculated at two conditions, pair father/daughter (MECD) and trios involving daughters (MECT), being the best results performed by DXS101; and verify that haplotipical diversity (in men samples) was 0.9993, showing a Chance of Coincidence under 0.0007. In this way, it?s possible to conclude that, with exception of DXS6808, the other STRs loci studied can be used at forensic practice, using for statistical math in human identification and kinship testing.

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