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Determinação do padrão de expressão de receptores de d-manose em espermatozoides de homens ferteis

Silveira, Carolina Fernanda 10 July 2003 (has links)
Orientador: Paulo Augusto Neves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:40:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_CarolinaFernanda_M.pdf: 803217 bytes, checksum: 0260430f0cf72b3e2acfab59beed51b4 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Estudos prévios demonstraram que, em mamíferos, a interação entre os gametas, que antecede a fertilização propriamente dita, é mediada por uma glicoproteína, a D-manose. Os óvulos são ricos em D-manose e os espermatozóides apresentam, em sua superfície, receptores para D-manose, que, durante a interação, reconhecem os óvulos através de um mecanismo tipo chave-fechadura. Os espermatozóides, uma vez capacitados durante sua ascensão pelo trato genital feminino, interagem com os óvulos, sofrem a reação acrossômica e, a seguir, penetram a zona pelúcida. Inúmeros trabalhos procuraram estudar esta interação através de um teste de D-manose, porém não foram conclusivos quanto à metodologia nem quanto aos padrões de expressão dos receptores nos espermatozóides. O presente trabalho teve por objetivo padronizar o teste de D-manose no Laboratório de Reprodução Humana da Universidade Estadual de Campinas e avaliar o padrão de expressão de receptores de D-manose em espermatozóides de homens sabidamente férteis. No período de maio de 2001 a dezembro de 2002, 30 pacientes do programa de vasectomias da Universidade Estadual de Campinas foram selecionados e forneceram uma amostra de sêmen após período de abstinência sexual de três dias, após assinarem consentimento informado. Todas as amostras enquadraram-se dentro dos critérios de normalidade propostos pela Organização Mundial da Saúde. As amostras foram processadas de acordo com a técnica de swim-up e incubadas por um período de 20 horas para induzir a reação acrossômica. Foram colhidas alíquotas da amostra inicial, após processamento seminal por uma hora, e após incubação por 20 horas. As alíquotas seminais foram submetidas ao teste de D-manose, utilizando o corante Man-FITC-BSA, concomitantemente ao teste da reação acrossômica, utilizando o corante RITC - PSA. Para fins de análise, 3.000 espermatozóides foram analisados em cada momento, e os resultados das alíquotas foram comparados entre si. Os principais padrões de expressão dos receptores de D-manose em espermatozóides não reagidos acrossomicamente foram determinados. Os resultados revelaram que houve aumento significativo da proporção de espermatozóides reagidos acrossomicamente ao se comparar as alíquotas inicial e 20 horas e de uma e 20 horas, demonstrando que a incubação por 20 horas foi eficiente em provocar a reação acrossômica. Observou-se expressão de receptores de Dmanose em 18% dos espermatozóides na amostra inicial, em 21,5% na amostra incubada por uma hora e em 28% dos espermatozóides incubados por 20 horas. Ao se analisar especificamente os espermatozóides que expressaram receptores para D-manose, porém que se mantiveram com o acrossoma intacto, não houve diferença estatística entre os três momentos (zero hora, 1 hora e 20 horas): medianas de 4,0%, 5,5% e 5,0%, respectivamente. Os principais padrões de expressão dos receptores de D-manose em espermatozóides não reagidos acrossomicamente em homens férteis foram: padrão 1: marcação apenas da peça intermediária (25,1%), padrão 2: marcação do contorno da cabeça (12,2%), padrão 3: todo o corpo marcado (12,2%), padrão 4: somente região equatorial (7,6%) e padrão 5: cabeça toda marcada (6,3%) e outros padrões (36,6%). Uma vez estabelecido o comportamento dos receptores de D-manose em homens férteis, estudos comparativos com homens inférteis poderão ser propostos na tentativa de se estabelecer novos mecanismos fisiopatológicos da infertilidade masculina / Abstract: Several studies showed that, in mammals, gamete interaction is mediated by a glycoprotein, D-manose. The surface of the eggs is rich in D-manose, and the spermatozoa show, in their surface, receptors that interact with the female gamete in a key-lock manner. The sperm is capacitated during his ascension in the female tract, interacts with the egg, suffers acrosomal reaction and penetrates the zona pelucidae. Previous studies fail to establish the methodology of the Dmanose test, nor could determine usual patterns of expression of the receptors. The objectives of the present work are to standardize the D-manose test in normal fertile men and to determine the usual patterns of expression of the receptors at the Laboratory of Human Reproduction of the University of Campinas Medical School ¿ Brasil. The period at May-2001 to December-2002, thirty normal patients who presented for vasectomy provided a semen sample after 3 days of sexual abstinence. All samples were considered normal according to the criteria of World Health Organization (2001). All samples were submitted to swim-up procedure and further incubation for 20 hours, in order to induce acrosomal reaction. One aliquot of initial sample, after swim-up (1 hour incubation) and after 20 hours of incubation of all samples were collected and submitted concomitantly to D-manose test, using Man-FITC-BSA dye and to acrosomal reaction test, using RITC - PSA as dye. Three thousand sperms were analysed under epifluorescence microscope in every moment, and it was determined the main patterns of expression of D-manose receptors in spermatozoa without acrosomal reaction. The results showed that there was a significant increase of acrosomal reaction in sperm incubated for 20 hours, denoting that this period of incubation is adequate to induce acrosomal reaction. 18% of sperm expressed Dmanose receptors in initial samples, in 21,5% of sperm incubated for 1 hour and in 28% of sperm incubated for 20 hours. There was no significant statistical difference of the median percentage of expression of D-manose receptors in sperm without acrosomal reaction in the three moments (0, 1 and 20 hour incubation): 4.0, 5.5 and 5.0%, respectively. The most common patterns of expression of D-manose receptors in spermatozoa that not suffered acrosomal reaction were: pattern 1 ¿ intermediate piece (25.1%), pattern 2 ¿ around the head (12.2%), pattern 3 ¿ all body of sperm (12.2%), pattern 4 ¿ only equatorial region (7.6%), and pattern 5 ¿ all head (6.3%), other patterns (36.6%). Once established the usual patterns of expression of D-manose receptors of normal fertile donors, comparative studies can be proposed in order to evaluate infertile men and to disclose new physiopathological mechanisms of male infertility / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Tocoginecologia
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Caracterização fluorimetrica da materia organica de origem natural e sua complexação com ions cobre

Lombardi, Ana Teresa 20 July 2018 (has links)
Orientador: Wilson de F. Jardim / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-20T06:33:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lombardi_AnaTeresa_D.pdf: 3834283 bytes, checksum: b32a909c15c8badb9e078a92bd38c19b (MD5) Previous issue date: 1995 / Doutorado
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Estudo da fluorescencia nativa de mucosa oral normal : busca de um padrão de normalidade

Fiorotti, Renata Cristina 29 July 2005 (has links)
Orientadores: Ester Maria Danielli Nicola, Jorge Humberto Nicola / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T03:04:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fiorotti_RenataCristina_D.pdf: 1246345 bytes, checksum: 1340d936f6cef9d5e113da620edaad9b (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O fotodiagnóstico ou diagnóstico por fluorescência é um método complementar ao exame anátomo-patológico para detectar alterações morfológicas dos tecidos biológicos. A presente tese, apresentada segundo o formato alternativo estabelecido pela Comissão de pós-graduação da Unicamp, consta de três artigos e teve por objetivos: (1) estudar o efeito fotodinâmico, principalmente sob o ponto de vista diagnóstico, revendo a literatura sobre sua aplicação na cavidade bucal; (2) analisar através de estudo experimental em cães, a fluorescência nativa da mucosa oral avaliando a relação da mesma com diferentes sítios e estruturas; (3) desenvolver e validar um protótipo de fonte de luz e um método para estimulação e captação das fluorescências nativas em cavidade bucal de humanos; (4) avaliar os espectros de fluorescência assim obtidos , no sentido de determinar um padrão de fluorescência para mucosa oral normal. Para a elaboração desta tese foram utilizados 20 cães e 2 grupos de estudo compostos por 50 e 100 adultos normais, respectivamente. A revisão de literatura demonstrou que, embora exista grande quantidade de estudos sobre a fluorescência nativa, poucos se referem ao tecido normal, sem alterações patológicas. O projeto piloto (Capítulo 1) teve como objetivo principal estudar a fluorescência nativa produzida por radiação ultravioleta nos tecidos biológicos e desenvolver a metodologia necessária para realizar fotodiagnóstico, utilizando um modelo animal. A partir dos resultados deste estudo e da revisão de literatura, desenvolvemos uma fonte de luz adequada para a realização do fotodiagnóstico em humanos. Esta fonte de luz consiste em três diodos emissores de luz ultravioleta (LEDs) com comprimento de onda de 410 nm e foi desenvolvida e testada com auxílio de uma empresa nacional do ramo. O Capítulo 2 apresenta resultados preliminares em humanos, comprovando que o método desenvolvido para o estudo da espectroscopia demonstra sensibilidade para detectar a fluorescência nativa na mucosa oral. No último artigo (Capítulo 3) são apresentados os resultados do estudo em um grupo de 100 voluntários, nos quais foram avaliados três sítios da mucosa bucal freqüentemente sujeitos a alterações. Foi possível evidenciar características comuns ao espectro de cada sítio, bem como algumas particularidades inerentes a condições e hábitos pessoais. O conjunto de trabalhos desenvolvidos, evidencia a importância do estudo da fluorescência nativa da cavidade bucal e seu grande potencial como método diagnóstico precoce e não invasivo de alterações da mucosa oral / Abstract: Photodiagnosis or Fluorescence Diagnosis is a complementary method to detect morphological alterations in biological tissues. The present thesis is composed of three papers and have the following objectives: (1) to study the photodynamic effect and its applications, mainly from diagnostic view point, reviewing the literature about its application in the buccal cavity ; (2) to analyze, through experimental study in dogs, the native fluorescence of the oral mucosa in relation to different sites and structures; (3) to developed and validate a prototype used to stimulate and detect native fluorescence in humans oral mucosa; (4) to analyze the obtained spectra with the objective to determine patterns of fluorescence for normal mucosa. The literature review comproved that despite the large amount of researches on native fluorescence, very few concerns to normal tissue and its morphological or physiological alterations. The three studied groups for this thesis were composed of 20 adults¿ mongrel dogs and, for the human study we selected 50 and 100 healthy volunteers, respectively. A pilot study was necessary to understand the fluorescent emissions of mucosal tissue under ultraviolet stimulation in order to develop the necessary methodology which was used with the animal model (Chapter I). With the obtained results and based on the literature review was possible to develop the prototype device used to study the native fluorescence of buccal cavity, in a group of 50 volunteers. This prototype is composed by three diodes (LEDs), emitting in ultraviolet region (410 nm) coupled to an optical fiber and connected to a plug-in spectrometer. The results of this preliminary work demonstrate that the fluorescence spectra shows significantly differences according to the various sites of the oral mucosa (Chapter II). Chapter III comprehends a more detailed study developed in three sites of the oral mucosa of 100 volunteers and made possible to stablish some common characteristics in the spectra of each site, according to the age, race, gender and alcohol or tobacco. The analysis of the results of this thesis leads to the conclusion that the native fluorescence of the normal oral mucosa has great potential to be used for early diagnoses of oral disease and deserves deeper studies / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas
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Desenvolvimento de método analítico para determinação de ozônio residual em água utilizando a ténica de fluorescência e estudo da viabilidade da construção de um sensor fluorimétrico em uma gota de solução para determinação de ozônio em ar /

Passaretti Filho, Juliano. January 2010 (has links)
Orientador: Arnaldo Alves Cardoso / Banca: Gilbert Bannach / Banca: Ivana Cesarino / Resumo: O ozônio é o principal gás envolvido nas reações de oxidação que ocorrem na atmosfera. Esse gás pelo alto poder oxidante vem sendo utilizado em diversos processos que demandam a ação de um oxidante forte, como o processo de desinfecção de água potável e de uso para recreação. A fluorescência foi estudada como técnica de medida para o ozônio residual em água. O procedimento é baseado na reação de ozonólise que ocorre entre o ozônio e o corante índigo trisulfonado, gerando como produto uma molécula fluorescente que exibe emissão em 410 nm quando excitada em 260 nm. O procedimento utilizado é idêntico ao previamente descrito para absorbância. As vantagens são que o sinal analítico de fluorescência é resultado de uma medida de um produto da reação enquanto que na absorbância o sinal analítico é obtido do descoramento e requer a diferença entre a medida da concentração do reagente antes e após a reação. Para medidas de ozônio de concentração entre 0 á 5,5 μmolL-1 o método desenvolvido possui um limite de detecção de 0.014 μmolL-1 e quando comparado com o método colorimétrico é 100 vezes mais baixo. Em condições otimizadas de reação a intensidade de fluorescência é linear na faixa de zero e 5,5 μmol.L-1, com uma precisão de 3,66% e exatidão entre 87,2-112,8%. O método é 1000 vezes mais sensível do que o colorimétrico e não difere significativamente em um intervalo de confiança de 95%. A mesma reação foi estudada para ser aplicada em uma gota suspensa para determinar ozônio no ar ambiente. Inicialmente foi estudo o comportamento espectroscópico da espécie fluorescente buscando outros comprimentos de onda de excitação da molécula. Foi observado que a mesma pode ser excitada em 220, 260, 325 e 340 nm resultando em uma intensidade de fluorescência maior para 220 nm e menor para 325 nm. Para o desenvolvimento do método... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Ozone is the main gas involved in the oxidation reactions that occur in the atmosphere. This gas by the high oxidizing power has been used in several processes that require the action of a strong oxidant, as the process of disinfecting drinking water and recreational use. Fluorescence was studied as a technique for measuring residual ozone in water. The procedure is based on the ozonolysis reaction that occurs between ozone and indigo trisulfonate, generating product as a fluorescent molecule that exhibits emission at 410 nm when excited at 260 nm The procedure is identical to that previously described for absorbance. The advantages are that the analytical signal of fluorescence is a result of a measure of the reaction product while the absorbance at the analytical signal is obtained from the bleaching and requires the difference between the measured concentration of the reagent before and after reaction. To measure ozone concentrations from 0 to 5,5 μmolL-1, the developed method has a detection limit of 0,014 μmolL-1 and compared with the colorimetric method is 100 times lower. Under optimized reaction conditions the fluorescence intensity is linear in the range of zero to 5,5 μmol.L-1 with an accuracy of 3.66% and accuracy between 87.2 to 112.8%. The method is 1000 times more sensitive than colorimetric and does not differ significantly in a range of 95%.The same reaction was studied to be applied in a hanging drop to determine ozone in ambient air. Initially we study the spectroscopic behavior of fluorescent species looking for other wavelengths of excitation of the molecule. It was observed that one can be excited at 220, 260, 325 and 340 nm resulting in a higher fluorescence intensity for 220 nm to 325 nm and smaller. To develop the method for atmospheric ozone used a He-Cd laser with 325 nm emission, although that result in a lower emission analytical signal was the source... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Desenvolvimento de metodologias de ciclização de selenoacetilenos e selenetos vinílicos para formação de heterociclos indólicos

Coelho, Felipe Lange January 2018 (has links)
O presente trabalho descreve o desenvolvimento de métodos sintéticos para a construção regiosseletiva de heterociclos indólicos funcionalizados com grupamentos organosselênio nas posições 2 e 3 do anel. A abordagem sintética envolve reações de hidroaminação intramolecular de selenoacetilenos ou 1,2-bisarilselenil alcenos fornecendo, respectivamente, 2-selenilindóis e 3-selenilindóis. A obtenção regiosseletiva dos indóis foi possível explorando a reatividade dos precursores que fornecem a funcionalização nas posições desejadas a partir de suas características estruturais. O desenvolvimento de um protocolo de síntese para 2-selenilindóis é inédito onde foi promovida a ciclização térmica dos selenoacetilenos sem a necessidade de catalisadores ou aditivos. A conversão dos 1,2-bisarilselenil alcenos em 3-selenilindóis reforça a aplicação sintética desses derivados de selênio e foi realizada empregando bases fortes. Além disso, um novo protocolo de síntese de selenoacetilenos foi desenvolvido aplicando estruturas do tipo arilselenilpirazol na formação de complexos catalíticos de cobre (I). A metodologia tolera diversos grupos funcionais fornecendo os produtos finais com excelente rendimento e quimiosseletividade. As propriedades fotofísicas dos selenilindóis foram investigadas e esses foram aplicados como sensores ópticos em solução para cobre (II) e níquel (II), além de peróxido de benzoíla. Ao longo dos experimentos de identificação dos analitos, observou-se que a presença desses promove o aumento da emissão de fluorescência do fluoróforo acompanhado do deslocamento batocrômico da banda de emissão que podem estar associados à restrição da transferência eletrônica fotoinduzida. / The present work describes the development of protocols for regioselective synthesis of 2- and 3-substituted indoles with selenium derivatives. The synthetic route involves intramolecular hydroamination of selenoacetylenes and vinyl selenides to afford, respectively, 2-selenylindoles and 3-selenylindoles. The regioselective preparation of indole was performed through different intermediates in which the reactivity was exploited to provide the desired position of functionalization. The unprecedented synthetic methodology for 2-selenylindole preparation was performed by thermal cyclization of selenoacetylenes in absence of catalyst or other additives. The conversion of vinyl selenides in 3-selenylindoles was performed using strong bases and this reaction reinforces the synthetic application of these species. Furthermore, a new protocol for the selenoacetylene synthesis was established in which arylselenylpyrazole compounds was investigated as copper (I) ligand. The methodology tolerates a wide range of functional groups and affords the desired products in excellent yields and chemoselectivity. The photophysical properties of selenylindoles were investigated and these compounds were applied as optical sensor for copper (II), nickel (II) and benzoyl peroxide. The assays revealed that the presence of analyte promotes a fluorophere fluorescence emission enhancement with redshifted absorption maximum that can be associated with inhibition of photoinduced eletron transfer.
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A fluoresceinoscopia como método preditivo de deiscência de anastomose intestinal isquêmica : estudo experimental em ratos

Moschetti, Laura January 2014 (has links)
Resumo não disponível.
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Detecção óptica da eficiência quântica da fotossíntese

Henrique Duarte, Carlos January 2003 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T17:40:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo7040_1.pdf: 3098471 bytes, checksum: a3478fe2304ae89df2c936e8f917313e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / A fotossíntese é o processo de síntese orgânica realizada por vegetais portadores de clorofila, que absorvem a luz para possibilitar a reação entre o gás carbônico e a água, produzindo carboidratos e oxigênio. Num sistema biológico, a importância da resposta à luz tem de ser analisada em termos de seu requerimento quântico. Neste sentido, a medida da fluorescência da clorofila a é uma técnica simples, rápida e não invasiva, para avaliação quantitativa in vivo da fotossíntese. Este trabalho objetiva utilizar a fotônica para detectar alterações físicas pré-determinadas numa cultura de milho, que foi escolhida por sua simplicidade, grande importância dentre os principais cultivos de grãos e rápido crescimento. Assim, iniciamos a confecção de um módulo optoeletrônico, que será nosso primeiro protótipo para as medições. Em seguida realizamos trabalho de campo, na Embrapa Sete Lagoas MG, utilizando um fluorímetro para medição da fluorescência de uma cultura de milho submetida ao déficit de nitrogênio. Finalmente, obtivemos nos laboratórios da USP-São Carlos, curvas de espectroscopia da fluorescência das folhas de milho sob diferentes regimes hídricos. Paralelamente a isso reunimos uma farta bibliografia relativa aos processos de realização da fotossíntese e à emissão de fluorescência. Também como motivação para este trabalho mostramos a importância da inserção da tecnologia no aumento da produção de grãos. A proximidade entre este centro de fotônica e a próspera região agrícola de Petrolina, propiciam condições favoráveis para incrementar a alta tecnologia no campo
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Desenvolvimento de sonda fluorescente para a determinação específica da atividade halogenante das enzimas mieloperoxidase e peroxidase de eosinófilos /

Bertozo, Luiza de Carvalho. January 2017 (has links)
Orientador: Valdecir Farias Ximenes / Banca: Rodrigo Cardoso de Oliveira / Banca: Luiz Carlos da Silva Filho / Resumo: A enzima mieloperoxidase (MPO), proveniente dos neutrófilos e monócitos, é capaz de catalisar a oxidação de íons Cl- e Br- a partir da redução do peróxido de hidrogênio. Os oxidantes formados, ácido hipocloroso (HOCl) e ácido hipobromoso (HOBr) são intensamente reativos e atuam como agentes bactericidas, podendo estar envolvidos em processos deletérios que caracterizam doenças de cunho inflamatório. A determinação da atividade halogenante específica da MPO não é trivial, pois devido ao alto potencial redox da forma ativa composto I (1,16 V), além de Cl- e Br-, ela é capaz de catalisar a oxidação de vários compostos orgânicos pelo mecanismo peroxidásico. Assim, são poucas as metodologias utilizadas até o momento que medem exclusivamente a atividade halogenante. Neste trabalho desenvolvemos uma metodologia para a determinação da atividade halogenante da MPO utilizando a sonda fluorescente dansilglicina (DG), a qual se mostrou insensível a ação peroxidásica da enzima, mas susceptível ao ataque eletrofílico dos ácidos HOCl e HOBr. Os estudos de cinética rápida mostram que a velocidade de reação entre a DG e o HOCl aumenta com a adição de Br-. Foi possível verificar a queda linear na intensidade de fluorescência da DG quando concentrações crescentes de HOCl foram adicionadas ao meio reacional juntamente com uma concentração fixa de Br-. Os mesmos resultados foram obtidos utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e, quando acoplado ao espectrômetro de massas, foi p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The enzyme myeloperoxidase (MPO) is able to catalyze the oxidation of chloride (Cl-) and bromide (Br-) ions from the reduction of hydrogen peroxide. The formed oxidizing agents, hypochlorous acid (HOCl) and hypobromous acid (HOBr) are highly reactive and involved in deleterious inflammatory processes that characterizes many diseases. The determination of the specific halogenating activity of MPO is not trivial, because due to high redox potential of the active form of compound I (MPO-I, 1.16 V), MPO is also capable to catalyze the oxidation of various organic compounds by the peroxidase mechanism. Thus, there are few methods used to date to measure only the halogenating activity. In this work, we developed a methodology for determining the halogenating activity of MPO using the fluorescent probe dansylglycine (DG), which proved insensitive to peroxidase action, but susceptible to electrophilic attack of HOCl and HOBr. The fast kinetics studies show that the reaction rate between DG and HOCl increases with the addition of Br-. It was possible to verify a linear decrease in fluorescence intensity of DG when increasing concentrations of HOCl were added to the reaction medium together with a fixed concentration of Br-. The same results were obtained using high performance lquid chromatography (HPLC) and, when coupled to mass spectrometry, it was possible to identify the product of the reaction, the compound bromo-dansylglycine. The abstraction of Cl- and Br- from the buffer block... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Desenvolvimento de um novo método de pré-concentração em linha em eletroforese capilar através de gradientes térmicos

Mandaji, Marcos January 2005 (has links)
Nos últimos dez anos, milhares de trabalhos foram publicados somente no desenvolvimento da técnica de eletroforese capilar (CE) e suas aplicações em ciências biológicas, química e em outras áreas. Apesar disto, muitos tópicos de pesquisa básica da CE ainda continuam sendo desenvolvidos. Algumas vantagens da CE sobre as demais técnicas de separação são marcantes, tais como: possibilidade de automação, rapidez na obtenção dos resultados e alto poder de resolução. A pequena quantidade de amostra que é necessária para uma análise é uma característica muito interessante no estudo de sistemas biológicos, sendo que normalmente são injetados no capilar, volumes de 5 a 50 nl de amostra. Por outro lado, esta reduzida quantidade de amostra utilizada, a pequena janela de detecção e as baixas concentrações dos analitos nas amostras biológicas, são fatores que desafiam os pesquisadores nesta área. Para contornar este problema diversos métodos de pré-concentração de amostra foram desenvolvidos. Neste trabalho, foi desenvolvido um método inédito de pré-concentração de amostras através de gradientes térmicos em CE. O princípio do método é concentrar o analito quando ele passa de uma zona de alta temperatura para uma zona de baixa temperatura. Um modelo teórico foi desenvolvido para auxiliar o planejamento experimental no que diz respeito à determinação das condições em que a corrida deve ser realizada (pH, tipo de tampão, temperatura) para aplicar a compressão térmica em um analito. Foi utilizado L-Lisina derivatizada com naftaleno 2,3-dicarboxialdeído (Lys/NDA) como analito modelo. Uma diferença de temperatura de 58 °C entre as duas zonas térmicas foi suficiente para comprimir em 2,5 vezes a banda da Lys/NDA em um tampão de baixo coeficiente térmico com o pH ajustado para 8,7. O método de compressão de banda por gradientes térmicos proposto neste trabalho é uma nova opção para aumentar a sensibilidade e a resolução em CE. Ao contrário dos métodos clássicos de pré-concentração, esse novo método pode ser aplicado em amostras tanto com alta ou baixa condutividade iônica, comprimir bandas de analitos aniônicos ou catiônicos e ser aplicado em corridas em solução livre ou não. Além disso, considerando que o controle de temperatura seja realizado de maneira automatizada, pode apresentar altas taxas de reprodutibilidade, além de ser de simples e de fácil aplicação, podendo ser empregado em análises de rotina. Diferentes LEDs (Light Emitting Diode) foram testado em detector por fluorescência induzida por LED. Além disso, um novo sistema de aquisição de dados e tratamento de sinal utilizando a placa de som de um PC (Personal Computer) e um amplificador Lock-in emulado por software foi montado e comparado com um sistema de aquisição de dados convencional. O equipamento de CE utilizado neste trabalho com esses componentes, apresentou uma elevada sensibilidade, na faixa de 0,5 à 1 fmol para os peptídeos e aminoácidos testados e foi superior ao sistema convencional em vários aspectos como: sensibilidade de detecção, faixa linear de detecção em concentração do analito, facilidade de operação e custo do sistema.
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Classificação tipo/titulação de óleos almentícios por fluorimetria e redes neurais

Silva, Carlos Eduardo Tanajura da 14 March 2014 (has links)
Submitted by Marcio Filho (marcio.kleber@ufba.br) on 2017-06-02T12:54:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Carlos_Eduardo_Tanajura_da_Silva.pdf: 4957398 bytes, checksum: 6c7b0143e1fa8db0895eb3ea9bd85d0b (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Reis (vanessa.jamile@ufba.br) on 2017-06-08T11:03:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Carlos_Eduardo_Tanajura_da_Silva.pdf: 4957398 bytes, checksum: 6c7b0143e1fa8db0895eb3ea9bd85d0b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T11:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Carlos_Eduardo_Tanajura_da_Silva.pdf: 4957398 bytes, checksum: 6c7b0143e1fa8db0895eb3ea9bd85d0b (MD5) / O Brasil destaca-se entre os maiores exportadores de grãos do mundo, sendo assim, cada vez mais surgem novos produtos e derivados destas Commodity. Os métodos para classificação desses produtos muitas vezes são custosos e demorados, quase sempre se valendo de técnicas de química analítica e métodos matemáticos como PCA (Principal Component Analysis), PCR (Principal Components Regression) ou PLS (Properties of Partial Least Squares) e RNA (Redes Neurais Artificiais) para aumentar sua eficiência. Devido à grande variedade de produtos são necessários métodos mais eficientes para qualificar, caracterizar e classificar estas substâncias, uma vez que o preço final deve refletir a excelência do produto que chega ao consumidor. Este trabalho propõe uma solução para classificação de óleos vegetais: Canola, Girassol, Milho e Soja colocados no mercado por diferentes marcas e fabricantes. O método de análise empregado é a fluorescência induzida por LED de amostras de óleo diluídas em heptano, com diferentes concentrações, sendo que a classificação dos espectros de fluorescência foi feita por RNA. Foram produzidas e caracterizadas 640 amostras, sendo 480 para treinamento da rede neural e 160 para sua validação. Para a classificação das amostras de fluorescência, os dados foram organizados em dois estudos, o primeiro com referência ao tipo das amostras, o segundo a titulação, este por final contento três arranjos dos dados e RNAs distintas. Na classificação do tipo das amostras, a rede conseguiu identificar 115 amostras, tendo acertado aproximadamente 72% destas amostras de validação. A classificação por titulação, utilizou a metade das amostras de fluorescência, o universo de treinamento passou a ter 240 amostras, as de validação 80. Para esse segundo estudo houve 3 arranjos desses dados, o resultado do primeiro arranjo teve 33 amostras classificadas com sucesso de 80, o segundo 49 e o terceiro 31.

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