Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the effect of inclusion of concentrated dietary fiber as prebiotic agent in diets on metabolic, immune responses, performance parameters, deposition of nutrients and production of digestive enzymes of juvenile silver catfish. Concentrates were prepared from dietary fiber citrus pulp, biomass of yeast brewery and grain included in linseed and mixed diets followed a diet containing the prebiotic commercial mananoligossacarids base Actigen® and control treatment without added prebiotic agent. For 50 days, 600 juvenile silver catfish with average initial weight of 3.54±0.53 g were kept in a water recirculation system with two biological filters, settling box, heating and 20 tanks with a capacity of 230 liters. Were randomly assigned to 30 fish per experimental unit, which were fed the experimental diets, three times a day (8:00, 13:00 and 17:00) to apparent satiation. At the end of the experiment the animals were subjected to biometrics were collected blood, liver, mucous, intestine and data length and weight, beyond a sample of fish. The experimental design was a randomized, with five treatments and four replications, the data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test (P<0.05). Cholesterol levels, total protein, globulin and mucoprotein were higher in animals fed yeast autolysate and linseed fiber in the diet. A higher amount of liver glycogen in fish fed with control diet and Actigen®, the liver protein content was higher (P<0.05) in a diet containing linseed fiber. Fish fed diets containing yeast autolysate and linseed fiber were superior (P<0.05) to the other treatments tested, as well as higher crude protein values and deposited body fat. Animals fed diets containing citrus pulp showed lower performance and nutrient deposition. The yield of body, digestive indices and production of digestive enzymes were not affected by the tested treatments. The yeast autolysate and linseed fibers provide a prebiotic effect when added to diets for juvenile silver catfish, since they benefit the immune system and provide improved performance and deposition of nutrients by the animal. / Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da inclusão de fibra alimentar concentrada como agente prebiótico em dietas sob as respostas metabólicas, imunológicas, parâmetros de desempenho, deposição de nutrientes e produção de enzimas digestivas de juvenis de jundiá. Foram avaliados concentrados de fibra alimentar preparados a partir da polpa cítrica, biomassa de levedura de cervejaria e grão de linhaça e incluídos em dietas mistas, além de uma dieta contendo o prebiótico comercial a base de mananoligossacarídeos Actigen® e uma dieta controle sem adição de agente prebiótico. Durante 50 dias, 600 juvenis de jundiá com peso médio inicial de 3,54±0,53g foram mantidos em um sistema de recirculação de água dotado de dois filtros biológicos, caixa de decantação, reservatório de água, aquecimento e 20 tanques com capacidade de 230 litros. Distribuiu-se ao acaso 30 peixes por unidade experimental, os quais receberam as dietas experimentais, três vezes ao dia (8:00, 13:00 e 17:00 horas) até a saciedade aparente. Ao final do experimento os animais foram submetidos a biometria onde coletou-se sangue, fígado, muco e intestino dos peixes, além de dados de peso e comprimento e uma amostra de peixes. O delineamento experimental o inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e quatro repetições, os dados foram submetidos a análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P<0,05). Os níveis de colesterol, proteína total, globulina e mucoproteína, foram superiores nos animais alimentados com autolisado de levedura e fibra de linhaça na dieta. Observou-se maior quantidade de glicogênio hepático nos peixes alimentados com dieta controle e Actigen®, o conteúdo de proteína hepática foi superior (P<0,05) para os animais que receberam dieta contendo fibra de linhaça. Os peixes alimentados com dietas contendo autolisado de levedura e linhaça fibra apresentaram desempenho superior (P<0,05) aos demais tratamentos testados, bem como maiores valores de proteína bruta e gordura corporal depositada. Animais alimentados com dietas contendo polpa cítrica mostraram menor desempenho e deposição de nutrientes. O rendimento de carcaça, índices digestivos e produção de enzimas digestivas não foram afetados pelos tratamentos testados. O autolisado de levedura e a fibra de linhaça proporcionam efeito prebiótico quando adicionados a dietas para juvenis de jundiá, uma vez que beneficiam o sistema imune e proporcionam maior desempenho e deposição de nutrientes pelos animais.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The immunostimulatory properties of inactivated parapoxvirus ovis (iPPVO) have been investigated in different animal species and experimental settings. This study investigated the effects of administration of iPPVO on selected events of the innate response in mice. Neutrophil activation, phagocytic activity of macrophages, serum bactericidal activity, induction and antiviral activity of interferon type I (IFN - I) and expression of several classes of cytokines were assayed following intraperitoneal inoculation of Mus musculus with iPPVO (107 TCID50). Serum from iPPVO-treated animals showed IFN-I activity against murine encephalomyocarditis virus (EMCV) between 6 and 12 hours post infection (hpi), as shown by plaque reduction. A significant activation of neutrophils at 6hpi was observed by NBT reduction test in animals treated with the iPPVO. Peritoneal macrophages from mice treated with iPPVO demonstrated a significant increase (p<0.01) in phagocytic activity against Candida albicans both in vivo (between 12 and 96 hpi) and in vitro (24 and 72 hpi). iPPVO treated mice showed increased serum bactericidal activity against Escherichia coli (p<0.05) at two periods (24 and 72 hpi). A second study evaluated the expression of cytokines in response to inoculation of iPPVO. For this, spleens and serum samples were collected from mice treated with iPPVO at different intervals after inoculation and subjected to quantification of messenger RNA (mRNA) by real time PCR (qRT-PCR) and detection/quantification of serum cytokines by ELISA. Quantification of mRNA identified a significant and transient increase in the expression of various cytokines, with variable magnitude and kinetics. mRNA expression of proinflammatory cytokines (IL-1β, TNF-α and IL-8) peaked at 24 hpi (5.4 times increase) and 48 hpi (3 and 10 times, respectively). A 15-fold increase in expression of INF-γ and 6-fold for IL-12 was observed at 48 and 24 hpi, respectively. An increase in the expression of self-regulatory cytokines (Th2) cells, especially IL-10 and IL-4 was detected at later periods (72 and 96 hpi) with peaks of 4.7 and 4.9 fold, respectively. The determination of the concentration of serum cytokines by ELISA showed an increase in IL-1β, TNF-α, IL- 12, IFN-γ and IL-10 with kinetics similar to that observed by qPCR, especially for IL-1 and INF-γ. In summary, these results demonstrate that inoculation with iPPVO stimulates transiently a number events associated with cellular and humoral innate immune responses. If taken together, these effects would likely contribute for the enhanced resistance to certain pathogens observed in animals treated with iPPVO. / As propriedades imunoestimulatórias do Parapoxvirus ovis inativado (iPPVO) têm sido verificadas em diferentes espécies animais e condições experimentais. No presente trabalho foram investigados os efeitos da administração do iPPVO sobre eventos da resposta inata de camundongos. Ativação de neutrófilos, atividade fagocítica de macrófagos, atividade bactericida do soro, indução e atividade antiviral do interferon tipo I (INF-I) e expressão de várias classes de citocinas foram investigados em diferentes intervalos após inoculação de Mus musculus pela via intraperitonial com iPPVO (dose 107 TCID50). O soro de animais tratados com iPPVO apresentou atividade de INF-I frente ao vírus da encefalomiocardite murina (EMCV) entre 6 e 12 horas pós inoculação (hpi), como demonstrado pela redução significativa de formação de placas virais. Uma significativa ativação dos neutrófilos circulantes foi observada pela técnica de redução do NBT em animais tratados com o iPPVO às 6 hpi. Macrófagos peritoneais de camundongos tratados com iPPVO demonstraram um aumento significativo (p<0,01) na atividade fagocítica frente a Candida albicans tanto in vivo (entre 12 e 96 hpi) quanto in vitro (24 e 72hpi). Camundongos tratados com iPPVO apresentaram aumento na atividade bactericida do soro frente à Escherichia coli (p<0,05) em dois períodos avaliados (24 e 72 hpi). Um segundo estudo avaliou a expressão de citocinas em resposta à inoculação do iPPVO. Para isso, amostras de baço e soro foram coletados de camundongos tratados com iPPVO em diferentes intervalos após a inoculação e submetidas a quantificação de RNA mensageiro (RNAm) por PCR em tempo real (qRT-PCR) e detecção/quantificação de citocinas no soro por ELISA. A quantificação de RNAm permitiu detectar um aumento significativo e transitório da expressão de várias citocinas, com magnitude e cinética variáveis. A expressão de RNAm das citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, TNF-α e IL-8) atingiu o pico às 24 hpi (aumento de 5,4 vezes), 48 hpi (3 e 10 vezes, respectivamente). Um aumento de 15 vezes na expressão gênica do INF-γ, e de 6 vezes para a IL-12 foi observado às 48 e 24 hpi, respectivamente. Um incremento na expressão das citocinas auto-regulatórias (Th2), principalmente IL-10 e IL-4, foi detectado em períodos mais tardios (72 e 96 hpi) com picos de 4,7 e 4,9 vezes, respectivamente. A determinação da concentração das citocinas séricas por ELISA revelou um aumento nos níveis de IL-1β, TNF- α, IL-12, INF-γ e IL-10, com uma cinética similar à observada pela técnica de qPCR, especialmente para IL-1β e INF-γ. Em resumo, esses resultados demonstram que o tratamento com iPPVO estimula de forma significativa e transitória uma série de eventos celulares e humorais ligados à resposta imune inata. Esses efeitos, se considerados em conjunto, provavelmente contribuem para o aumento da magnitude da resposta imunológica a certos patógenos observada em animais tratados com o iPPVO.