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Pré-melhoramento genético, floração in vitro e criopreservação de orquídeas nativas do cerrado / Pre-breeding, in vitro flowering and cryopreservation of Cerrado wild orchidsCarneiro, Luciano Lajovic 27 November 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The vast majority of orchids species are pollinated by insects, mainly bees,
butterflies and moths. The orchid family is generally considered allogamic, but information
about the type of reproduction are unknown for most species. Little information exist about
orchids of Cerrado, which hinders plant breeding of these species and postpones their use
in developing new varieties for the ornamental market. Recent methods of plant
biotechnology can assist both plant breeding and conservation of these species, such as
induction of early in vitro flowering as important technique particularly for species with a
long cycle, and cryopreservation as a tool for the conservation of genetic variability. This
study aims to contribute to the improvement and conservation of orchids with distribution
in the Brazilian Cerrado. Selfcompatibility was evaluated for seven species: Cohniella
cepula, Cyrtopodium eugenii, C. saintlegerianum, Epidendrum densiflorum, Epidendrum
nocturnum, Epidendrum secundum e Lockhartia goyazensis. Only three were
autocompatible: Epidendrum nocturnum, Epidendrum secundum and Lockhartia
goyazensis. Interspecific compatibility was assessed for Cyrtopodium and Epidendrum
genera, using reciprocal crosses. Just E. nocturnum and C. eugenii produced viable seeds.
For early in vitro floral induction 20 different treatments were used through nutritional
changes and use of cytokinin (BAP) in modified MS medium. Only C. cepula showed
positive responses to treatment with formation of 46% floral stems. The effect of BAP was
evident in the results. Cryopreservation was tested by vitrification of seeds of seven species
of orchids, obtained from outcrossing. The responses to cryopreservation were partially
different for each species. Most seeds tested showed any significant differences between
freezing in liquid nitrogen without cryoprotectants and control without freezing. The
freezing without cryoprotectant was successful to maintaining seed viability for all species,
C. cepula 63%, C. eugenii 59%, C. sainttlegerianum 70%, E. densiflorum 42%, E.
nocturnum 31%, E. secundum 69% and L. goyazensis 52%. Only E .nocturnum and C.
cepula showed a significant reduction in viability when submitted to freezing in liquid
nitrogen. The results presented here are useful for the development of breeding programs
for orchids and conservation of these species. / A grande maioria das espécies de orquídeas é polinizada por insetos,
principalmente abelhas, borboletas e mariposas. A família Orchidaceae é, em geral,
considerada alógama, mas informações sobre o tipo de reprodução não são conhecidas para
a maioria das espécies. Pouca informação existe sobre orquídeas do Cerrado, o que
prejudica o melhoramento destas espécies e adia sua utilização no desenvolvimento de
novas cultivares para o mercado de ornamentais. Métodos recentes de biotecnologia
vegetal podem auxiliar tanto o melhoramento quanto a conservação destas espécies, como
a indução a floração precoce in vitro, técnica importante principalmente para espécies de
ciclo longo, e a criopreservação, como ferramenta para o desenvolvimento de bancos de
germoplasma, essenciais tanto para o melhoramento quanto para a conservação da
variabilidade genética. Este trabalho teve como objetivos contribuir para o melhoramento e
conservação de orquídeas com distribuição no Cerrado Brasileiro. Foi avaliada a
autocompatibilidade para sete espécies: Cohniella cepula, Cyrtopodium eugenii,
Cyrtopodium saintlegerianum, Epidendrum densiflorum, Epidendrum nocturnum,
Epidendrum secundum e Lockhartia goyazensis. Apenas três foram autocompatíveis: E.
nocturnum, E. secundum e L. goyazensis. Foi avaliada a compatibilidade interespecífica
dentro dos gêneros Cyrtopodium e Epidedrum utilizando cruzamentos recíprocos. Apenas
C. eugenii e E. nocturnum produziram sementes viáveis. Para a indução floral precoce in
vitro foram testadas diferentes composições nutricionais e concentrações de
benzilaminopurina (BAP) no meio MS modificado. Apenas C. cepula apresentou respostas
positivas aos tratamentos, com formação de até 46% de hastes florais. O efeito do BAP
ficou evidente nos resultados dos tratamentos. Foi testada a criopreservação por
vitrificação de sementes das sete espécies de orquídeas, obtidas de cápsulas originadas de
fecundação cruzada. As respostas aos crioprotetores foram parcialmente distintas para os
tratamentos de criopreservação avaliados, dependendo da espécie. A maioria das sementes
testadas não apresentou diferenças significativas entre o congelamento em nitrogênio
líquido e o controle sem o crioprotetor e sem o congelamento. O congelamento sem
crioprotetor foi bem sucedido para todas as espécies mantendo a viabilidade das sementes,
para C. cepula em 63%, C. eugenii em 59%, C. sainttlegerianum 70%, E. densiflorum
42%, E. nocturnum 31%, E. secundum 69% e L. goyazensis em 52%. Apenas E.
nocturnum e C. cepula apresentaram redução significativa da viabilidade quando
submetidas ao congelamento direto em nitrogênio líquido, sem crioprotetor. Os resultados
apresentados neste trabalho são úteis ao desenvolvimento de programas de melhoramento
para orquídeas e para conservação destas espécies.
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