Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-01-30T11:04:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Arthur Francisco Júnior.pdf: 1488392 bytes, checksum: 48308d252d06dcc28ec7f91907c90eec (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-30T13:36:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Arthur Francisco Júnior.pdf: 1488392 bytes, checksum: 48308d252d06dcc28ec7f91907c90eec (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-30T13:36:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Arthur Francisco Júnior.pdf: 1488392 bytes, checksum: 48308d252d06dcc28ec7f91907c90eec (MD5) Previous issue date: 2014-08-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study was conducted to evaluate the effect of adding L-acetyl-cysteine (CIS) as anti oxidant agent to extender used for sperm cryopreservation of equine Mangalarga Marchador. Three semen samples from seven healthy stallions were obtained by artificial vagina, diluted in commercial extender and distributed into two treatments: control without addition and CIS, containing the antioxidant concentration of 2.5 mM. After the stabilization period, the samples were filled into 0.5 mL straws and subjected to cryopreservation protocol manually. Sixty days after the samples were thawed and evaluated in vitro by means of computerized analysis of sperm kinetics (CASA) and the evaluation of the integrity of plasma and acrosomal membranes by fluorescent probes. Regarding the kinetic variables related to sperm was found that in samples supplemented with CIS percentage of total and progressive motility (TM) (MP) was higher (P <0.01) compared to control samples (23.95±3 , 33 X 11 .38±2.35 and 4.66 ± 0.84 X 2.04 ± 0.36, respectively), but variable for straightness (STR) and linearity (LIN) the percentages were highe r (p ≤ 0.01) for the control samples (86.95 ± 1.02 X 82.28 ± 1.02 and 49.85 ± 1.32 X 45.19 ± 1.17, respectively). As those related to the integrity of the membranes of the sperm variables was superior (P <0.05) in the number of sperm with intact acrosome reaction (ICRA) in the samples compared to those CIS Control (4.7 ± 1.6 x 0.8 ± 0.2, respectively). The results suggest that the addition of acetyl-L-cysteine concentration of 2.5 mM in the diluent medium before cryopreservation can improve both the motility as the integrity of the sperm plasma membrane equine Mangalarga Marcher. More studies should be done to confirm this effect in vivo. / Esse estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar o efeito da adição de L-acetilcisteína (CIS) como agente anti oxidante ao meio diluente utilizado para criopreservação de espermatozóides de equinos da raça Mangalarga Marchador. Três amostras seminais de sete garanhões hígidos foram obtidas por meio de vagina artificial, diluídas em meio comercial e distribuídas em dois tratamentos: controle, sem adição e CIS, contendo o antioxidante na concentração de 2,5 mM. Após o período de estabilização as amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL e submetidas ao protocolo de criopreservação manual. Sessenta dias após as amostras foram descongeladas e avaliadas in vitro por meio da análise computadorizada da cinética espermática (CASA) e da avaliação da inte gridade das membranas plasmática e acrosomal por meio de sondas fluorescentes. Em relação às variáveis relacionadas à cinética espermática verificou-se que nas amostras suplementadas com CIS o percentual de motilidade total (MT) e progressiva (MP) foi superior (P<0,01) em relação às amostras controle (23,95±3,33 X 11,38±2,35 e 4,66±0,84 X 2,04±0,36, respectivamente), mas para as variáveis retilinearidade (STR) e linearidade (LIN) os percentuais foram maiores (P≤0,01) para as amostras Controle (86,95±1,02 X 82,28±1,02 e 49,85±1,32 X 45,19±1,17, respectivamente). Quanto às variáveis relacionadas à integridade das membranas do espermatozóide houve superioridade (P<0,05) no número de espermatozóides íntegros com reação acrossomal (ICRA) nas amostras CIS em relação àquelas controle (4,7±1,6 X 0,8±0,2, respectivamente). Os resultados sugerem que a adição de L-acetil-cisteína na concentração de 2,5 mM ao meio diluente antes da criopreservação pode melhorar tanto a motilidade quanto a integridade da membrana plasmática de espermatozóides de equinos da raça Mangalarga Marchador. Mais estudos devem ser feitos para comprovar esse efeito in vivo.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-11-24Bitstream added on 2014-06-13T20:06:44Z : No. of bitstreams: 1 azevedo_hc_dr_botfmvz.pdf: 1090855 bytes, checksum: bd7f7a04aa00c86d1200aecb917ca794 (MD5) / Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivando testar a ação do colesterol, desmosterol, ácido oléico-linoléico ou Q-Iactoalbumina sobre os espermatozóides ovinos, alíquotas de sêmen de 25 carneiros foram submetidas à criopreservação após tratamento com essas substâncias. O sêmen foi avaliado antes do processamento e após a refrigeração, descongelação e incubação quanto à, cinética pela análise subjetiva e computadorizada (CASA), morfologia, avaliação simultânea da integridade da membrana plasmática (IMP) e do acrossomo (IAC) e do potencial de membrana mitocondrial (PMM) pela associação da aglutinina de Pisum sativum conjugada ao isotiocianato de fluoresceína (FITC-PSA), iodeto de propídio (PI) e JC-1 e, status de capacitação pela c10rtetraciclina (CTC). A influência dos aditivos em poucos parâmetros não foi suficiente para sugerir a superioridade de qualquer um dos tratamentos. A criopreservação provocou prejuízos à cinética, IMP, IAC, PMM, além de induzir a capacitação e reação do acrossomo. Foram observadas diferenças entre grupos de carneiros quanto ao status de capacitação no sêmen in natura, assim como na sensibilidade desse sêmen à crioinjúria e criocapacitação. Após a descongelação, as mudanças semelhantes à capacitação foram maiores nos animais de menor IMP. A segregação dos carneiros de acordo com a crioresistência da membrana plasmática norteou o comportamento de vários outros parâmetros. Conclui-se, que o colesterol, desmosterol, ácido oléico-linoléico e alactoalbumina não protegem o sêmen ovino contra as crioinjúrias, que a congelação-descongelação é mais danosa que a refrigeração e, que existem diferenças entre grupos de indivíduos relacionadas à crioresistência e criocapacitação espermática. / In order to evaluate the proteeting aetion of some substanceson ram spermatozoa, semen samples of 25 rams were colleeted and submitted to cryopreservation after treatment with cholesterol, desmosterol, oleic-linoleic acid or Q-Iactalbumin. Before the processing and after the procedures of cooling, freezing-thawing and incubation, semen was evaluated as to kínetcs by subjective and computerized analyses (CASA), morphology, simultaneously to plasma membrane integrity (PMI), acrosome integrity (ACI) and mitochondrial membrane potential (MMP) by isothiocyanate-conjugated Pisum sativum (FITCPSA), propidium iodide (PI) and JC-1 combination and as to sperm capacitation and acrosome reaction determined by chlortetracycline (CTC) assay. The influence resulted from the additives in a few parameters was not enough to suggest the superiority of any treatments. The cryopreservation process, especially the freezing-thawing, promotes damages to kinetics, PMI, ACI, MMP and induees accelerated eapacitation and acrosome reaction in spermatozoa. Differenees among groups of rams were observed regarding capacitation status in fresh semen as well as the sensibility of their semen to cryoinjury and cryocapacitation. Higher and more accelerated capacitation-like ehanges were observed in groups of rams presenting lower plasmatic membrane cryoresistance after thawing. The segregation of rams in different levels of PMI influenced the behavior of several other parameters. It was concluded that cholesterol, desmosterol, oleic-Iinoleic acid and Q-Iactalbumin do not protect the ram semen against the cryoinjuries as well as freezing-thawing is more harmful than cooling. Important differenees among groups of individuais were noticed as for the spermatozoa resistance to the damages provoked by cryopreservation such as the eryocapacitation susceptibility.