Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-08T13:12:12Z No. of bitstreams: 1 Elizabeth Hortencio Ferreira Lima.pdf: 1462177 bytes, checksum: 77d2db37110891a6e2a4fd1fdafe1015 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T13:12:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elizabeth Hortencio Ferreira Lima.pdf: 1462177 bytes, checksum: 77d2db37110891a6e2a4fd1fdafe1015 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study aimed to investigate the effect of administration of sodium monensin in the diet on blood metabolites and rumen of ewes before, during and pospartum, due to the complexity that this period is due to anatomical changes, physiological and metabolic changes in female to meet the higher demand for energy growth of the fetus and lactation. A prospective study was conducted involving 13 sheep, in order to evaluate the effect of monensin supplemented from 60 days before calving (dap), on the hormonal and metabolic profile in periods of antepartum and postpartum. We used 13 Santa Inês sheep, pregnant, clinically healthy. Two groups were formed randomly, a control group receiving bulky, balanced feed and mineral salt and another group that received beyond bulky, balanced ration containing 30 mg monensin / day and mineral salt with monensin. Blood and ruminal fluid were collected at 60, 50, 40, 30, 20, 10 days before delivery, at birth and at 10, 20 and 30 days postpartum. We conducted the CBC and biochemical measurement of the following variables: glucose, non-esterified fatty acids (NEFA), β-hydroxybutyrate, cholesterol, triglycerides, fructosamine, total protein, albumin, urea, creatinine and research ketone bodies in urine. Enzyme activity by aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP), gamma glutamyl transferase (GGT), creatine kinase (CK) and hormonal determinations of cortisol and insulin. In the analysis of ruminal fluid pH were determined, proof of reduction of methylene blue (PRAM), the infusoria, the chloride content and the concentration of volatile fatty acids (VFA) (acetic, propionic and butyric). Statistical analysis was employed ANOVA and correlation study (P<0,05). With regard to haematological values in different physiological periods studied, there was no significant difference (P> 0,05), except for the white blood count revealed a mild leukocytosis with neutrophilia at birth significantly (P <0,05) in two groups. The enzymatic activity of AST levels were more elevated in the control group (P<0,05) during the postpartum period and significant differences were also recorded between groups, no 10 dpp and 20 dpp (P<0,05) and higher in the control group compared to monensin. There was no difference in cholesterol (P>0,05). Effect of time (P<0,05) was observed with respect to triglycerides in both groups, being higher in the pre-partum. Monensin significantly (P<0,05) increased concentration of propionate in the rumen, fructosamine and insulin. Little effect was observed for glucose, NEFA and BHB. No treatment effect (P>0,05) was observed for pH, chloride and diatomaceous the rumen, and the protein profile. The administration of monensin in ewe in the period before the birth did not influence the indicators hematologic and enzymatic activity, but caused improvement in some indicators of energy balance, this result is considered important for the prevention of metabolic diseases associated with energy deficit that occurs this period, such as toxemia of pregnancy. / Este estudo teve por objetivo estudar o efeito da administração da monensina sódica na dieta sobre os metabólitos sanguíneos e ruminais de ovelhas antes, durante e após o parto, em razão da complexidade que representa este período devido às modificações anatômicas, fisiológicas e metabólicas na fêmea para atender a maior demanda energética para o crescimento dos fetos e a lactação. Um estudo prospectivo foi realizado envolvendo 13 ovelhas, com o intuito de avaliar o efeito da monensina, suplementada a partir de 60 dias antes do parto (dap), sobre o perfil metabólico e hormonal nos períodos do pré-parto e pós-parto. Foram utilizadas 13 ovelhas da raça Santa Inês, prenhes, clinicamente sadias. Dois grupos foram formados aleatoriamente, um grupo controle recebendo volumoso, ração balanceada e sal mineral e outro grupo que recebeu além do volumoso, ração balanceada contendo 30 mg de monensina/dia e sal mineral com monensina. Amostras de sangue e fluido ruminal foram colhidas aos 60, 50, 40, 30, 20, 10 dias antes do parto, no momento do parto e aos 10, 20 e 30 dias pós-parto. Foi realizado o hemograma e mensuração das seguintes variáveis bioquímicas: glicose, ácidos graxos não esterificados (AGNE), β-hidroxibutirato, colesterol, triglicerídeos, frutosamina, proteína total, albumina, uréia, creatinina e pesquisa de corpos cetônicos na urina. Atividade enzimática através da aspartato aminotransferase (AST), fosfatase alcalina (FA), gama glutamiltransferase (GGT), creatino quinase (CK) e determinações hormonais de cortisol e a insulina. Na análise do fluido ruminal foram determinados o pH, a prova de redução do azul de metileno (PRAM), os infusórios, o teor de cloretos e a concentração dos ácidos graxos voláteis (AGV) (acético, propiônico e butírico). A análise estatística foi empregada a ANOVA e um estudo de correlação (p<0,05). Com relação aos valores hematológicos nos diferentes períodos fisiológicos estudados, não foi observado diferença significativa (P>0,05), com exceção do leucograma que revelou uma discreta leucocitose por neutrofilia no momento do parto de forma significativa (P<0,05) nos dois grupos. A atividade enzimática da AST apresentou-se mais elevada no grupo controle (P<0,05) durante o pós-parto e diferenças significativas também foram registradas entre os grupos, no10 dpp e 20 dpp (P<0,05) sendo mais elevada no grupo controle quando comparada ao monensina. Não houve diferença nos valores de colesterol (P>0,05). Efeito de momento (P<0,05) foi observado com relação aos triglicerídeos nos dois grupos, sendo mais elevados no período pré-parto. A monensina influenciou significativamente (P<0,05) elevando a concentração do propionato no rúmen, frutosamina e insulina. Pouco efeito foi constatado para a glicose, BHB e AGNE. Nenhum efeito do tratamento (P>0,05) foi observado para o pH, teor de cloretos e os infusórios do rúmen, e para o perfil proteico. A administração da monensina nas ovelhas no período que antecede ao parto não influenciou os indicadores hematológicos e a atividade enzimática, porém provocou melhora em alguns indicadores do balanço energético, este resultado é considerado importante para a prevenção de doenças metabólicas, associadas ao déficit energético que ocorre neste período, como a toxemia da prenhez.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Food additives are substances that control animal metabolism, increasing the efficiency of feed utilization and providing greater animal production. Monensin is certainly the most studied and used, but in recent years its use has undergone several constraints, mainly by the European Union and the United States, so it is crucial to study new alternatives which present satisfactory results additives on animal performance. Thus, an experiment was conducted evaluating, by the in vitro gas technique, the use of a product based on organic acids compared to monensin. Four treatments were used: CTL (no additives), MON (monensin) and CTX 250 and 500 (250 and 500ppm organic additive)with four replications in a completely randomized design with repeated measures in time. Were evaluated the parameters of gas production, production of short chain fatty acids (SCFA), methane (CH4), ammoniacal nitrogen (NH3-N) and pH. MON treatment increased (P <0.05) propionate production and decreased (P <0.05) gas production, CH4, acetate, butyrate, valerate, isobutyrate, isovalerate, the ratio of acetate/propionate and SCFA total production relative to CTL, not changing the NH3-N concentration. Treatments with organic acids 250 and CTX 500, CTX 500 only showed a decrease in the concentrations of NH3-N, the other parameters showed no significant changes (P >0.05) with the addition of organic acids in relation to CTL. In this sense the monensin presents characteristics of modulation rumen environment. / Os aditivos alimentares são substâncias que controlam o metabolismo animal, aumentando a eficiência de utilização de alimentos e proporcionando maior produção animal. A monensina sódica é certamente a mais estudada e empregada, porém nos últimos anos sua utilização tem sofrido diversas restrições, principalmente pela União Européia e Estados Unidos, portanto, é fundamental o estudo de novas alternativas de aditivos que apresentem resultados satisfatórios no desempenho animal. Assim, foi conduzido um experimento avaliando, pela técnica de digestibilidade in vitro gás, o uso de produto à base de ácidos orgânicos em comparação à monensina sódica. Foram testados quatro tratamentos: CTL (sem aditivo), MON (monensina) e CTX 250 e 500 (aditivo orgânico 250 e 500ppm), com três repetições em um delineamento inteiramente casualizado com medidas repetidas no tempo. Foram avaliados os parâmetros de produção de gás, produção de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC), metano (CH4), nitrogênio amoniacal (NNH3) e pH. O tratamento MON aumentou (P<0,05) a produção de propionato e diminuiu (P<0,05) a produção de gás, CH4, acetato, butirato, valerato, isobutirato, isovalerato, a relação de acetato/propionato e a produção total AGCC em relação ao CTL, não alterando a concentração de N-NH3. Dos tratamentos com ácidos orgânicos CTX 250 e 500, somente o CTX 500 mostrou diminuição nas concentrações de N-NH3, os demais parâmetros avaliados não mostraram alterações significativas (P>0,05) com adição dos ácidos orgânicos em relação ao CTL. Neste sentido a monensina sódica apresenta características de modulação do ambiente ruminal.

A imunidade passiva surge como uma alternativa para a manipulação da fermentação ruminal e anticorpos de origem aviária contra bactérias específicas começam a ser pesquisados. Objetivou-se com este trabalho avaliar um preparado de anticorpos policlonais contra Streptococus bovis, Fusobacterium necrophorum e algumas cepas de bactérias proteolíticas (Peptostreptococcus anacrobius, Clostridium aminophilum e Clostridium sticklandii) sobre a diversidade microbiana ruminal e degradabilidade in situ de alguns alimentos. Foram utilizadas nove vacas mestiças portadoras de cânula ruminal. O delineamento experimental foi o quadrado latino 3 x 3 replicado 3 vezes, com arranjo fatorial de tratamentos 3 x 3 referente a 2 modificadores ruminais representados pela monensina (MON) e pelo preparado de anticorpos policlonais (PAP) mais o grupo controle e 3 fontes energéticas suplementadas na dieta, representadas pelo milho seco moído (MSM), silagem de grão úmido de milho (SGUM) e polpa cítrica (PC). Cada subperíodo experimental foi composto de 21 dias, sendo 16 dias para adaptação aos tratamentos e 5 para coleta de dados. A degradabilidade in situ dos alimentos testados foi mensurada através da técnica de saco de náilon. A coleta de amostras para a análise quantitativa de protozoários ocorreu no 21° dia de cada período, às 0 e 4 horas pós-alimentação, sendo estas coletadas por varredura do assoalho ruminal. O conteúdo ruminal foi coletado no 21° dia de cada período, às 4 h pós-alimentação, para análise da diversidade microbiana através de técnica de eletroforese em gel com gradiente de desnaturação. Observou-se que dietas contendo PC apresentaram aumento de 80,6%; 75,4% e 66,8% da degradabilidade efetiva da FDN da cana-de-açúcar para as taxas de passagem de 2, 5, 8%/h, respectivamente, em relação ao grupo tratado com SGUM, mas não em relação ao grupo com MSM. O tratamento com PAP demonstrou efeito sobre a fração solúvel (a) do amido do MSM, diminuindo esta em 45,26% e 45,37% em relação ao grupo CON e grupo MON, respectivamente. Observou-se que o tratamento com MON diminuiu em 16,14% o valor da fração potencialmente degradável (b) da MS da SGUM em relação ao grupo CON, mas não em relação ao grupo tratado com PAP. Já sobre a taxa de degradação (c), a MON aumentou o valor desta em 63,18% e 60,65% em relação ao grupo CON e PAP, respectivamente. Também a MON diminuiu a degradabilidade potencial (Dp) da MS da SGUM em 3,40% em relação ao grupo CON, mas não em relação ao grupo tratado com PAP. Observou-se que o PAP aumentou em 93,65% a contagem relativa de Isotricha em relação ao grupo CON, mas não em relação ao grupo MON. Já a PC aumentou em 334,42% (0h) e 399,75% (4h) a contagem relativa de protozoários do gênero Isotricha em relação às dietas de MSM e SGUM. Observou-se que o tratamento com PC aumentou em 52% a contagem do número de bandas em DGGE para a comunidade Archaea, em relação ao grupo MSM, sem diferir do grupo SGUM. Em linhas gerais, no presente experimento, não foi possível atribuir um padrão na estrutura de amplificação das comunidades Bacteria ou Archaea do conteúdo ruminal de animais tratados com dois diferentes modificadores ruminais ou 3 fontes energéticas distintas. / Passive immunity arises as an alternative for ruminal fermentation manipulation and aviary antibodies against specific bacteria starts to be studied. The objective of the present study was to evaluate a polyclonal antibody preparation (PAP) against Streptococus bovis, Fusobacterium necrophorum and some proteolytic bacteria (Peptostreptococcus anacrobius, Clostridium aminophilum and Clostridium sticklandii) on ruminal microbial community diversity and in situ degradability of some feedstuffs. Nine ruminally fistulated cows were used in a latin square 3 x 3 replicated 3 times with factorial arrangement of treatments 3 x 3 regarding to two rumen modifiers [monensin (MON) and (PAP) plus a control group (CON)] and three energetic sources supplemented in the diet represented by the dry-grounded corn grain (CG), high moisture corn silage (HMCS) and citrus pulp (CiPu). Each trial lasted 21 days where 16 days were for treatments adaptation and 5 for data collection. In situ degradability of the experimental diets was measured by nylon bag in situ technique. The collection of samples for quantitative protozoa analysis occurred on day 21 of each trial at 0 and 4 h after feeding by scanning the ruminal floor. The ruminal content was collected in the day 21 of each trial at 0 and 4 h after feeding for the analysis of microbial ruminal diversity by the denaturing gradient gel electrophoresis. Diets with CiPu presented an increase of 80.6%; 75.4% and 66.8% in effective degradability of NDF of sugar cane for outflow rates of 0.02, 0.05, 0.08/h, respectively, in relation to group treated with HMCS but not to the group CG. The group treated with PAP showed effect on soluble fraction (a) of starch of CG decreasing it in 45.26% and 45.37% in relation to CON and MON group respectively. It was observed that the treatment with MON decreased in 16.14% the value of potentially soluble fraction (b) of DM from HMCS in relation to CON group but not in relation to PAP. For the degradation rate (c) the MON increased it values in 63.18% and 60.65% in relation to CON and PAP group respectively. Also, MON treatment decreased potential degradability (Pd) of DM of HMCS in 3.40% in relation to CON group but not to PAP. It was observed that PAP treatment increased in 93.65% the relative counting of Isotricha in relation to CON group but not in relation to MON group. It was observed that CiPu diet increased in 334.42% (0h) and 399.75% (4h) the relative counting of Isotricha in relation to CG and HMCS. It was observed that CiPu increased in 52% the counting of the numbers of bands in DGGE for Archaea community in relation to CG without difference to HMCS group. In general lines, in the present experiment, it was not possible to assign that there was a pattern in the structures of amplification by Bacteria and Archaea communities of the ruminal content of animals treated with two different rumen modifiers or three distinct energetic sources.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-14T17:23:12Z No. of bitstreams: 1 texto completto.pdf: 210234 bytes, checksum: 464b1f5b0e3804e8d782b45d54081c76 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-14T17:23:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completto.pdf: 210234 bytes, checksum: 464b1f5b0e3804e8d782b45d54081c76 (MD5) Previous issue date: 2004-04-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram realizados cinco estudos para avaliar o efeito de antibióticos ionóforos (monensina e lasalocida), própolis e óleo de soja sobre a perda de potássio intracelular de populações de bactérias do rúmen e verificar a ação destes em pH 5,5 e 7,0, simulando dietas a base de grãos ou de forragens, sobre a produção de amônia, de proteína bacteriana e de gases total. Nos dois primeiros estudos, líquido ruminal de bovinos sob pastagem foi usado na incubação in vitro em diferentes meios artificiais com valores de pH 5,5 e 7,0, para se avaliar a ação de níveis crescentes de monensina na resistência à perda de potássio intracelular de bactérias mistas ruminais e verificar o efeito de monensina e lasalocida na produção de amônia e de proteína microbiana em pH 5,5 e 7,0. O meio utilizado para determinar a perda de potássio interfere nos valores absolutos de potássio. A concentração de monensina necessária para causar a metade da perda máxima de potássio foi de 2,77 μM em pH 5,5 e 0,056 μM em pH 7,0, mostrando que as bactérias incubadas em meios com pH 5,5 foram mais resistentes à monensina que aquelas incubadas em meios com pH 7,0. Os ionóforos e a acidez do meio reduziram a produção de amônia, sem haver interação sobre os mesmos. Não houve diferença entre os ionóforos onde, independente do pH do meio, os mesmos inibiram a produção de amônia em 56%. A acidez, por sua vez, inibiu a produção de amônia em xii50,5%, independente dos ionóforos. No entanto, o efeito dos ionóforos e acidez foram aditivos, onde a inibição máxima ocorreu pelo uso de ionóforos em baixo valor de pH (75,2%). A produção de proteína microbiana foi menor quando a lasalocida estava presente no meio de cultura com baixo valor de pH. No terceiro estudo dois bois castrados mantidos em pastagem foram utilizados como doadores de líquido ruminal, sendo a população de bactérias do rúmen utilizada para avaliar a ação de níveis crescentes de monensina, lasalocida e própolis na resistência à perda de potássio intracelular em dois valores de pH. O pH do meio utilizado na incubação de 10 minutos não interferiu na perda de potássio intracelular quando se utilizou lasalocida, mas a perda máxima de potássio intracelular (K max ) foi maior em bactérias de animal consumindo dieta rica em volumoso que em concentrado (54,8 vs 32,5%). Já nas incubações com monensina houve interação entre o pH do meio e a procedência das bactérias ruminais. Em meio com pH 7,0, houve necessidade de apenas 0,072 μM de monensina para causar metade da perda máxima de potássio intracelular (K d ) em bactérias de animal consumindo dieta rica em volumoso comparado a 0,425 μM em dieta rica em concentrado. Em meios com pH 5,5 não houve diferença na concentração de monensina (0,147 vs 0,130 μM) para causar metade da perda máxima de potássio. Estes resultados mostram ser as bactérias de animais recebendo dietas ricas em volumoso mais sensíveis aos ionóforos. A própolis não interferiu no conteúdo de potássio celular, indicando modo de ação sobre as bactérias diferente dos ionóforos. Nos dois últimos estudos com vacas lactantes como unidades experimentais e doadoras de líquido ruminal, as populações de bactérias foram utilizadas para avaliar a ação de níveis crescentes de lasalocida e monensina na resistência à perda de potássio intracelular, e para produção de gases in vitro. O K max da lasalocida foi menor para as populações de bactérias obtidas do líquido de rúmen das vacas submetidas a dietas com monensina, óleo de soja e monensina mais óleo de soja (19,4 a 25,4%) quando comparado com aquele (30,1%) das vacas submetidas a dietas sem ionóforo e óleo de soja. O mesmo ocorreu para o K max da monensina, onde o menor foi de 6,5% para monensina mais óleo e o maior de 29,5% para o controle. Necessita-se de alta concentração de monensina (2,3 μM), porém baixa de lasalocida (0,218 μM) para causar a metade da perda máxima de potássio intracelular de populações de bactérias do rúmen de vacas submetidas a dietas com monensina. Não há resistência cruzada entre os dois ionóforos testados in vitro. As amostras incubadas com própolis produziram menor volume de gases (12,9 mL/100 g de MS), porém monensina e lasalocida também reduziram a mesma. Isto representa menor perda de energia para animais submetidos a dietas com propolis, monensina ou lasalocida. PALAVRAS CHAVE: amônia, ionóforos, óleo de soja, pH, potássio intracelular, produção de gases, rúmen. / Five experiments were performed to evaluate antibiotics (monensin and lasalocid), bee propolis and soybean oil effect on potassium depletion in ruminal bacteria population. In addition, it was verify the action of theses additives in pH 5.5 and 7.0, representing, high grains or roughage diets by measuring ammonia, bacterial protein and gas production. Were carried out two studies, in which the fluid from steers fed pasture was used in incubations with different artificial media in pH 5.5 and 7.0, in order to evaluate the action of increasing levels of monensin in the resistance to intracellular potassium losses by mixed ruminal bacteria and verify the effect of monensin and lasalocid on ammonia and microbial protein production at pH 5.5 and 7.0. The media culture affected the potassium absolute values. The monensin concentration needed to cause half maximal potassium depletion was 2.77 μM in pH 5.5, and 0.056 μM in pH 7.0, showing that bacteria incubated in pH 5.5 were more tolerant to monensin than those incubated in pH 7.0. The ionophores and acidity decreased ammonia production, without interaction between them. In addition, there was no difference between ionophores that, independently of the medium pH, both inhibited ammonia production by 56%. The acidity, on the other hand, inhibited ammonia xvproduction by 50.5%, independently of the ionophores. Therefore, the effect of the ionophores and acidity were additive, the maximum inhibition occurred by the presence of ionophores at low pH value (75.2%). The microbial protein production was lowest when lasalocid was present in the culture media at low pH, causing inhibition of microbial growth. On thirty experiment two steers kept in Coast-cross pasture were used as ruminal fluid donors. The ruminal bacterial population was used to evaluate the action of increasing levels of monensin, lasalocid and bee propolis on the intracellular potassium depletion in two values of pH. The pH values from media used in 10 minutes incubation did not affect potassium depletion when lasalocid was used, but maximum intracellular losses of potassium (K max ) were higher in bacteria from animal fed diet rich in forage than concentrate (54.8 vs 32.5%). There was interaction between media pH and origin of ruminal bacteria when monensin was used in vitro. In the media with pH 7.0 only 0.072 μM of monensin was needed to cause half maximal potassium depletion (K d ) in bacteria from animal fed diet rich in roughage compared to 0.425 μM in diet rich in concentrate. There wasn’t difference in media with pH 5.5 in the monensin concentration (0.147 vs 0.130 μM) to cause half maximal potassium depletion. These results show that bacteria from animal fed diet rich in roughage are more sensitive to ionophores. The bee propolis did not cause potassium depletion in ruminal bacteria population, therefore its mode of action on bacteria is different from the ionophores. On the last two studies were conducted with lactating cows as experimental units and ruminal fluid donors. The ruminal bacteria population were used to evaluate the action of increasing levels of lasalocid and monensin in the resistance of intracellular potassium depletion and gas production with monensin, lasalocid or propolis. Potassium depletion technique showed that K max of lasalocid was lower to ruminal bacteria population obtained from of cows fed diets with monensin, soybean oil and monensin plus soybean oil (19.4 to 25.4%) when compared to the cows fed untreated control diet (30.1%). The same happened for K max of monensin, in which the lowest was 6.5% to monensin plus soybean oil and the greatest was 29.5% to control. High monensin concentration (K d = 2.30 μM) was required, but low lasalocid concentration (K d = 0.218 μM) was necessary to cause half of maximum potassium depletion in ruminal bacteria population from cows fed diet with monensin. This result shows that there was no cross resistance between the evaluated ionophores. In vitro gas production showed the lowest volume when diets were incubated with propolis (12,9 mL/100 g of DM), but monensin xviand lasalocid also reduced it. This represent lower escape energy for animals fed diets with bee propolis, monensin or lasalocid. Key Words: ammonia, gas production, ionophores, pH, potassium depletion, rumen, soybean oil.