Actinobactérias são microrganismos capazes de produzir compostos bioativos presentes em extratos brutos com ação antibiótica e ionófora. A hipótese deste estudo foi de que extratos brutos de actinobactérias apresentem eficácia similar à monensina sódica para modulação da fermentação ruminal; no aumento da digestibilidade da matéria seca e matéria orgânica, aumento da concentração de propionato e redução da produção de gases totais, da desaminação protéica e de metano. Portanto, o objetivo foi avaliar in vitro dois extratos brutos (AMC e Caat) sobre a fermentação ruminal (produção total de gases, de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e de metano (CH4); digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS), da matéria orgânica (DIVMO) e produção de nitrogênio amoniacal (N-NH3). O estudo foi dividido em duas fases; a primeira objetivou estabelecer a curva dose-resposta dos extratos e a segunda para avaliação com controle positivo de monensina sódica. Para ambas fases, foram utilizadas como doadoras de líquido ruminal (inóculo) três vacas da raça Holandesa em lactação, portadoras de fístula ruminal. As dietas fornecidas foram à base de silagem de milho, farelo de soja, ureia, milho moído e suplemento mineral, com relação volumoso:concentrado de 60:40. Amostras de fluido ruminal foram coletadas por meio de bomba de vácuo, armazenadas em garrafas e caixas térmicas e transportadas ao laboratório para incubação em frascos de vidro. Para a primeira fase, foram avaliadas 4 doses (0,3; 0,6; 0,9 e 1,20 mg) de 2 extratos (AMC e Caat) em ensaio in vitro de 72 horas, no qual foram mensuradas a produção de gás durante a incubação e, ao final, as concentrações de AGCC, DIVMS e DIVMO foram determinadas. Na segunda fase, o ensaio foi de 24 horas, e ao final foram feitas análises para CH4 e N-NH3, além de AGCC, DIVMS, DIVMO e produção de gás. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado (DIC) para ambas as fases. Na primeira fase, a inclusão do Caat diminuiu linearmente a DIVMO após 72 hs e reduziu as concentrações de ácido isovalérico, butírico, da relação acetato:propionato e da produção de gás acumulado por 24, 48 e 72 h. Na segunda fase, a inclusão dos extratos causaram diminuição da produção de gás acumulada em 24 horas, sendo menor no tratamento monensina e no Caat. Houve efeito de inclusão do Caat e da monensina sobre a concentração de AGCC, aumentando a concentração de propionato e diminuindo a concentração de butirato, acetato e a relação acetato:propionato. A concentração de N-NH3 foi menor mediante inclusão do extrato Caat e da monensina enquanto que a concentração de CH4 foi maior para a inclusão dos extratos quando comparados com a inclusão de monensina, entretanto não foram maiores do que o controle. A inclusão do extrato Caat foi capaz de modificar a fermentação in vitro de forma semelhante à monensina sódica, mas não alterou a digestibilidade da fibra. Por outro lado, o AMC não alterou a fermentação ruminal, seja na digestibilidade da fibra, na produção de gases totais, metano, nitrogênio amoniacal e AGCC / Actinobacteria are microorganisms that can produce bioactive compounds present in crude extracts with antibiotic and ionophore activity. Our hypothesis was that actinobacteria crude extracts showed similar efficacy to monensin on ruminal fermentation; increasing the digestibility of dry matter and organic matter, increasing propionate concentration and reducing the total gas production, protein deamination and methane. Therefore, the objective was to evaluate two crude extracts (AMC and Caat) on in vitro ruminal fermentation (total gas, short chain fatty acids (SCFA) and methane (CH4) production; in vitro digestibility of dry matter (IVDDM), of organic matter (IVOMD) and ammonia nitrogen production (NH3-N). The study was divided into two phases: the first aimed to establish the dose-response curve of the extracts and the second aimed to evaluate a positive monensin control. For both, it was used three lactating Holstein cows with ruminal fistula as rumen fluid donors (inoculum). The diets were based on corn silage, soybean meal, urea, ground corn and mineral supplement under forage:concentrate ratio of 60:40. Ruminal fluid samples were collected by a vacuum pump, stored in bottles and coolers and transported to the laboratory for incubation in glass bottles. For the first phase, they were evaluated 4 doses (0.3; 0.6; 0.9 and 1.20 mg) of 2 extracts (AMC and Caat) on a 72 hours in vitro assay, which were measured gas production during incubation and in the end, SCFA, IVDMD and IVOMD concentrations were determined. In the second phase, it was a 24 hours assay, and include final analyzes for CH4 and NH3-N, plus SCFA, IVDMD, IVOMD and gas production. The experimental design was completely randomized (DIC) for both phases. In the first phase, the Caat inclusion linearly decreased IVOMD after 72 hours and reduced isovaleric acid and butyric acid concentration and acetate:propionate ratio and cumulative gas production by 24, 48 and 72 h. In the second stage, the inclusion of the extracts caused a reduction of the cumulative gas production in 24 hours, being lower in monensin and Caat treatments. There was an effect of Caat and monensin inclusion on SCFA concentration, increasing the propionate concentration and reducing the butyrate and acetate concentration and the acetate: propionate ratio. The NH3-N concentration was lower by Caat inclusion and monensin while the CH4 concentration was higher for the extracts inclusion as compared with monensin, however were not bigger than control. The Caat inclusion was able to modify the in vitro fermentation similarly to monensin, but did not affect the fiber digestibility. Moreover, AMC did not affect the rumen fermentation, either in fiber digestibility, total gas, methane, ammonia nitrogen and SCFA production

Foram objetivos do presente experimento estudar os efeitos da administração da enramicina, em comparação com a monensina sódica, sobre a fermentação ruminal e a digestibilidade total em bovinos. Doze fêmeas bovinas não-gestantes e não-lactantes (675 kg ± 63 de PV) foram distribuídas inteiramente ao acaso aos três tratamentos formados por um grupo controle (ausência de antibiótico), um grupo tratado com enramicina (antibiótico não-ionóforo) e outro tratado com monensina (antibiótico ionóforo). A enramicina foi administrada na dose de 20 mg/animal/dia e a monensina na dose de 300 mg/animal/dia. O experimento teve duração total de 21 dias, sendo os 10 últimos destinados à aplicação do marcador (15 g de óxido crômico/animal/dia) e os últimos 5 dias destinados à coleta de fezes e amostragem dos alimentos. O 21º dia foi utilizado para colheitas de líquido ruminal realizadas às 0, 2, 4, 6, 8, 10 e 12 horas após a 1a refeição para determinação dos AGVs, pH e nitrogênio amoniacal. A monensina aumentou a concentração total de AGVs no tempo 12 horas após a alimentação e diminuiu a relação acético:propiônico nos tempo 0 e 6 h, em relação à enramicina, mas não em relação ao controle. Nenhum dos antibióticos testados alterou a proporção molar dos ácidos acético, propiônico e butírico, bem como o pH ou a concentração ruminal de nitrogênio amoniacal. Também não alterou o comportamento de consumo, avaliado em atividades de alimentação, ruminação e ócio. Nenhum dos antibióticos testados alterou a digestibilidade da matéria seca, proteína bruta, extrato etéreo, extrativo não nitrogenado, fibra bruta, fibra em detergente ácido, fibra em detergente neutro, amido, energia bruta ou os nutrientes digestíveis totais / The objective of this trial was to study the effects of enramycin administration, compared to sodium monensin, on ruminal fermentation and on total digestibility of diet nutrients in bovine. Twelve non-pregnant and non-lactating cows (675 ± 63 kg of BW) were randomly assigned to three treatments: control group (non-antibiotic), enramycin-treated group (non-ionophore antibiotic) and monensin-treated group (ionophore antibiotic). Treatments were 20 mg/animal/day of enramycin or 300 mg/animal/day of monensin. Trial lasted 21 days, the last 10 used for external marker administration (15 g of chromic oxide/animal/day) and the last 5 for feces collection and feed sampling. The 21st day was used for ruminal fluid sampling at 0, 2, 4, 6, 8, 10 and 12 hours after 1st meal to determine VFA, pH and ammoniacal nitrogen. Monensin increased total VFA concentration 12 h after feeding and decreased the acetic:propionic ratio at times 0 and 6 h, in relation to enramycin, but not when compared to control. The two antibiotics tested did not influence the molar proportion of acetic, propionic or butiric acids, pH, ammoniacal-N concentration, or dry matter intake and intake behavior, evaluated during activities of feeding, rumination and idleness. The two antibiotics tested did not alter the digestibility of dry matter, crude protein, ether extract, nitrogen-free extract, crude fiber, acid detergent fiber, neutral detergent fiber, starch, gross energy and total digestible nutrients (TDN), or the intake of digestible dry matter or TDN

Foram objetivos do presente experimento estudar os efeitos da administração da enramicina, em comparação com a monensina sódica, sobre a fermentação ruminal e a digestibilidade total em bovinos. Doze fêmeas bovinas não-gestantes e não-lactantes (675 kg ± 63 de PV) foram distribuídas inteiramente ao acaso aos três tratamentos formados por um grupo controle (ausência de antibiótico), um grupo tratado com enramicina (antibiótico não-ionóforo) e outro tratado com monensina (antibiótico ionóforo). A enramicina foi administrada na dose de 20 mg/animal/dia e a monensina na dose de 300 mg/animal/dia. O experimento teve duração total de 21 dias, sendo os 10 últimos destinados à aplicação do marcador (15 g de óxido crômico/animal/dia) e os últimos 5 dias destinados à coleta de fezes e amostragem dos alimentos. O 21º dia foi utilizado para colheitas de líquido ruminal realizadas às 0, 2, 4, 6, 8, 10 e 12 horas após a 1a refeição para determinação dos AGVs, pH e nitrogênio amoniacal. A monensina aumentou a concentração total de AGVs no tempo 12 horas após a alimentação e diminuiu a relação acético:propiônico nos tempo 0 e 6 h, em relação à enramicina, mas não em relação ao controle. Nenhum dos antibióticos testados alterou a proporção molar dos ácidos acético, propiônico e butírico, bem como o pH ou a concentração ruminal de nitrogênio amoniacal. Também não alterou o comportamento de consumo, avaliado em atividades de alimentação, ruminação e ócio. Nenhum dos antibióticos testados alterou a digestibilidade da matéria seca, proteína bruta, extrato etéreo, extrativo não nitrogenado, fibra bruta, fibra em detergente ácido, fibra em detergente neutro, amido, energia bruta ou os nutrientes digestíveis totais / The objective of this trial was to study the effects of enramycin administration, compared to sodium monensin, on ruminal fermentation and on total digestibility of diet nutrients in bovine. Twelve non-pregnant and non-lactating cows (675 ± 63 kg of BW) were randomly assigned to three treatments: control group (non-antibiotic), enramycin-treated group (non-ionophore antibiotic) and monensin-treated group (ionophore antibiotic). Treatments were 20 mg/animal/day of enramycin or 300 mg/animal/day of monensin. Trial lasted 21 days, the last 10 used for external marker administration (15 g of chromic oxide/animal/day) and the last 5 for feces collection and feed sampling. The 21st day was used for ruminal fluid sampling at 0, 2, 4, 6, 8, 10 and 12 hours after 1st meal to determine VFA, pH and ammoniacal nitrogen. Monensin increased total VFA concentration 12 h after feeding and decreased the acetic:propionic ratio at times 0 and 6 h, in relation to enramycin, but not when compared to control. The two antibiotics tested did not influence the molar proportion of acetic, propionic or butiric acids, pH, ammoniacal-N concentration, or dry matter intake and intake behavior, evaluated during activities of feeding, rumination and idleness. The two antibiotics tested did not alter the digestibility of dry matter, crude protein, ether extract, nitrogen-free extract, crude fiber, acid detergent fiber, neutral detergent fiber, starch, gross energy and total digestible nutrients (TDN), or the intake of digestible dry matter or TDN

Os objetivos destes trabalhos foram avaliar a inclusão de altos níveis de monensina em suplementos proteico de baixo consumo para bovinos sobre (i) desempenho; (ii) fermentação e degradabilidade ruminal e (iii) produção de metano. Para tanto, foram realizados três experimentos distintos. Os experimentos realizados são apresentados na forma de capítulos. Nos Capítulos I e II são apresentados a introdução e a revisão de literatura. No Capítulo III (desempenho), foram utilizados 64 novilhos, distribuídos aleatoriamente em quatro tratamentos: 0, 400, 800 e 1200 mg de monensina sódica/ kg de suplemento proteico. Os animais permaneceram em quatro piquetes de Brachiaria decumbens onde eram submetidos a rodízios semanais. Amostras de pasto foram colhidas para determinação das variáveis qualitativas e quantitativas da forragem. Foram estimados o consumo médio de suplemento, consumo individual de suplemento e ganho de peso médio diário. A inclusão de monensina nos níveis estudados diminuiu o consumo de suplemento e piorou o desempenho animal. No Capítulo IV (fermentação e degradabilidade ruminal), foram utilizados quatro bovinos da raça nelore, canulados no rúmen, em experimento com delineamento quadrado latino 4x4 por 84 dias. Os animais foram arraçoados com dieta composta de feno de Brachiaria decumbens (à vontade), 500 g/cabeça/dia de suplemento proteinado de baixo consumo e monensina sódica conforme os tratamentos: 0, 200, 400 e 600 mg/dia. Os parâmetros ruminais avaliados foram: produções de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC); concentração de nitrogênio amoniacal; pH; consumo de matéria seca; degradabilidade in situ da MS e FDA do feno de B. decumbens. Os valores encontrados para a fermentação ruminal (pH, N-NH3 e AGCC) e degradabilidade in situ da MS não foram afetados pelos tratamentos. O aumento dos níveis de monensina diminuíram linearmente o consumo de matéria seca e a degradabilidade potencial da fibra. No Capítulo V (produção de metano), quatro níveis de monensina foram testados em ensaio in vitro de produção de gases com o objetivo de avaliar a cinética fermentativa, produção de AGCC, degradabilidade da matéria seca, e produção do gás metano. Para tanto, feno de Brachiaria decumbens e suplemento proteico de baixo consumo foram utilizados como substrato. Foi simulado um consumo médio de suplemento de 500g/animal/dia acrescido dos níveis de monensina: 0, 200, 400 e 600 mg. Foram coletados amostras dos gases para mensuração da produção de metano em 24 hrs de incubação. A degradabilidade da matéria seca e a produção de ácidos graxos de cadeia curta foram determinados às 24 e 96 horas de incubação. A produção potencial de gases diminuiu conforme a inclusão monensina. O tempo de colonização das amostras aumentou com a inclusão de monensina. Não foram observadas diferenças na degradabilidade da matéria seca e na produção de metano e AGCC entre os tratamentos. / The aim of this research was to evaluate the inclusion of high monensin levels on protein supplements for cattle on (i) performance, (ii) fermentation and ruminal degradability and (iii) production of methane. To this end, three different experiments were performed. The experiments are presented in the chapters form. The introduction and literature review are presented in Chapter I and II. In Chapter III (performance): 64 cattle were randomly assigned to four treatments: control, containing protein supplement and control plus three monensin levels (400, 800 or 1200 mg/kg of supplement). The animals remained in four paddocks of Brachiaria decumbens where they were undergo weekly casters. Pasture samples were collected to determination of qualitative and quantitative variables. The average supplement intake, individual supplement intake and daily weight gain were estimated. The increased monensin levels decreased the supplement consumption and the animal performance. In Chapter IV (fermentation and ruminal degradability), four male cattle with rumen cannula were utilized in a Latin Square assay design 4x4, during 84 days. The animals were fed with Brachiaria decumbens, protein supplement of low consumption (500g/animal /day) and monensina. The treatments were 0, 200, 400 and 600 mg of monensin/day. The ruminal parameters evaluated were: production of short chain fatty acids (SCFA), ammonia concentration, pH, dry matter intake, in situ degradability of DM and ADF. The values found for ruminal fermentation and degradability of DM were not affected by treatments. Increased levels of monensin decreases linearly dry matter intake and the ADF degradability. In Chapter V (production of methane), four monensin levels were tested in vitro gas production. The objectives were to evaluate the fermentation kinetics, short chain fatty acids production, dry matter degradation and methane production. For this purpose, B. decumbens hay and protein supplement low consumption were used as substrate. An average supplement intake 500g/animal/day with levels of monensin (0, 200, 400 and 600 mg) was simulated. Gas samples were collected for measurement of methane production in 24hrs of incubation. The dry matter degradability and production of short chain fatty acids were determined after 24 and 96 hours of incubation. The potential gas production decreased as increased of monensin. The colonization time of the samples increased with monensin. No differences were observed in the degradability of dry matter and in the methane and SCFA production between treatments.

Foram utilizados quatro Novilhos nelore, com peso vivo médio de 190 ± 32 kg, canulados no rúmen num experimento com delineamento Quadrado Latino 4x4, onde o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da levedura, monensina e salinomicina sobre os parâmetros ruminais e o aparecimento de protozoários ciliados ruminais.O experimento foi executado no Campus Administrativo de Pirassununga, na Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da Universidade de São Paulo. A dieta oferecida aos animais foi composta por silagem de sorgo e concentrado (30:70), onde foram submetidos a quatro tratamentos diferidos de acordo com o aditivo usado, 5,0g de Levedura (Beef Sacc®), 0,42g de salinomicina (Coxistac®), 2,0g de monensina sódica (Rumensin®) e o controle sem aditivo. Os parâmetros avaliados foram degradabilidade ruminal, in situ do volumoso e da dieta total, concentração de ácidos graxos voláteis e nitrogênio amoniacal, pH ruminal, taxa de passagem líquida, turnover e volume ruminal, e identificação e contagem dos protozoários ciliados. O período experimental foi subdividido em vinte e um dias de adaptação e sete de colheita, totalizando vinte e oito dias por período experimental. Foram mensurados os coeficientes de degradabilidade nos períodos de incubação de 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 e 96 horas. Para a colheita de liquido ruminal foram utilizados os horários 0, 2, 4, 6, 8 horas; as colheitas de marcador de fase liquida (PEG) foram realizadas ás 0; 1,5; 3; 6; 12 e 24 horas após a alimentação. Houve aumento do valor para a fração “b" na MS, no tratamento levedura (p<0,05), e no tratamento salinomicina. Também houve uma tendência a aumentar a fração “b" no FDN. O tratamento levedura aumentou significativamente o número de protozoários ciliados no rúmen (p<0,05). Os valores referentes ao pH não foram afetados pelos tratamentos (p>0,05). A concentração de amônia e os valores encontrados para a cinética ruminal não foram afetados pelos tratamentos (p>0,05). O uso de ionóforos melhorou a proporção dos ácidos acético:propiônico, propiônico e butírico enquanto a levedura aumentou a concentração de acido acético (p<0,05). / Four Nelore Steers had been used, with average alive weight of 190 ± 32 kg, rumen cannulas, in an experiment with Squared delineation Latin 4x4, where the objective of the work was to evaluate the effect of the yeast culture, monensin and salinomycin on the rumen parameters and the appearance of ciliates protozoa. The experiment was executed in the Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos of the Universidade de São Paulo. The diet offered to the animals was composed for ensilage and concentrated (30:70), where the four differed treatments had been submitted in accordance with the used additive, 5,0g of yeast culture (Beef Sacc), 0,42g of salinomycin (Coxistac), 2,0g of monensin (Rumensin) and the control without additive. The evaluated parameters had been ruminal degradability “in situ" of voluminous and the total diet, the concentration of volatile fatty acid concentration and ammoniac nitrogen concentration, pH ruminal, liquid passage, turnover and ruminal volume, and number and specie of ciliates protozoa. The experimental period was subdivided in twenty and one days of adaptation and seven of harvest, having totalized twenty and eight days for experimental period. The coefficients of degradability in the incubation periods of 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 and 96 hours had been measure. For the harvest of I eliminate ruminal had been used schedules 0, 2, 4, 6, 8 hours; the harvests of phase marker eliminate (PEG) had been carried through ace 0; 1,5; 3; 6; 12 and 24 hours after the feeding. It had increase of the value for fraction "b" in the MS, the treatment yeast culture, and the salinomycin treatment (p<0,05). Also it had a trend to increase fraction "b" in the FDN. The treatment yeast culture significantly increased the number of ciliates protozoa in rumen (p<0,05). The referring values to pH had not been affected by the treatments (p>0,05). The ammonia concentration and the values found for the kinetic ruminal had not been affected by the treatments (p>0,05). The use of ionophores improved the acid ratio of the acetic:propionic, propionic and butiric while the yeast culture increased the acids concentration of acetic (p<0,05).

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-10T14:01:11Z No. of bitstreams: 1 Saulo de Tarso Gusmao da Silva.pdf: 1395412 bytes, checksum: 9781dae1143217a1305e65c5e7588b80 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-10T14:01:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Saulo de Tarso Gusmao da Silva.pdf: 1395412 bytes, checksum: 9781dae1143217a1305e65c5e7588b80 (MD5) Previous issue date: 2012-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this study was to evaluate the use of monensin in the prevention of ruminal acidosis in goats induced by observation of clinical manifestations and biochemical and hematological parameters. We evaluated the clinical features, physical characteristics of the ruminal fluid, ruminal pH measurement, hematological, biochemical and hormonal. 20 goats were used, males, castrated crossbred Anglo-Nubian and Saanen, weighing 30 kg, clinically sadios.Todos animals underwent surgery for implantation of permanent ruminal cannulas. They were divided into two groups of 10 animals, a control group (CG) and a treatment group (GM), he received through the rumen cannula, a dose of 33 mg / animal / day of monensin during the adjustment period of 40 days. The animals were acidosis induced by intra-ruminal administration of sucrose at a dose of 10g/kg body weight at eight o'clock in the morning, before feeding rumen. Later clinical observations were made during the experiment and collection of blood samples occurred at intervals of 4h, 8h, 12h, 24h, 32h, 48h and 72h post-induction (PI). The animals began to show clinical signs such as apathy, appetite capricious and bloat from 4h PI. There was a change in color of ruminal fluid, becoming milky, and a significant decrease in rumen pH (p <0.05) to below six at 4 PI in both groups tested. There was a hemoconcentration in the early stages, a neutrophilic leukocytosis and inversion of the neutrophil: linfóvitos occurred at 4 PI in both groups, returning to normal 72h PI. The values of plasma fibrinogen, serum ALP activity, AST and creatinine remained within normal values. The activity of CK, GGT, the values of urea, glucose and cortisol values were high, but without statistical significance (p> 0.05) between groups. The monensin offered daily for 40 days at a dose of 33mg/animal, did not prevent the onset of ruminal acidosis in goats lactea this study. / Objetivou-se com esse trabalho avaliar o uso da monensina sódica na prevenção da acidose láctica ruminal induzida em caprinos, através da observação das manifestações clínicas e dos parâmetros bioquímicos e hematológicos. Foram avaliados os aspectos clínicos, as características físicas do fluido ruminal, aferição do pH ruminal, parâmetros hematológicos, bioquímicos e hormonais. Foram usados 20 caprinos, machos, castrados, mestiços Anglo Nubiana e Saanen, com peso médio de 30kg, clinicamente sadios.Todos os animais foram submetidos à intervenção cirúrgica para implantação de cânulas ruminais permanentes. Foram divididos em dois grupos de 10 animais, um grupo controle (GC) e um grupo tratamento (GM), este recebeu através da cânula ruminal, uma dose de 33 mg/animal/dia de monensina sódica, durante o período de adaptação de 40 dias. Os animais foram induzidos à acidose por meio da administração intra-ruminal de sacarose na dose de 10g/kg de peso vivo, às oito horas da manhã, antes da alimentação ruminal. Posteriormente foram realizadas observações clínicas no decorrer do experimento e a colheita das amostras de sanguíneas ocorreu com intervalos de 4h, 8h, 12h, 24h, 32h, 48h e 72h pós-indução (PI). Os animais começaram a apresentar sinais clínicos como apatia, apetite caprichoso e timpanismo a partir da 4h PI. Houve mudança na cor do fluído ruminal, tornando-se leitosa, além de uma diminuição significativa do pH ruminal (p<0,05) para valores abaixo de seis às 4h PI nos dois grupos testados. Observou-se uma hemoconcentração nos momentos iniciais, leucocitose por neutrofilia e a inversão da relação neutrófilos:linfóvitos ocorreu às 4h PI nos dois grupos, voltando aos valores normais às 72h PI. Os valores do fibrinogênio plasmático, a atividade sérica da FA, AST e creatinina mantiveram-se dentro dos seus valores normais. A atividade da CK, GGT, os valores de uréia, glicose e cortisol, apresentaram valores elevados, porém sem significância estatística (p>0,05) entre os grupos. A monensina sódica oferecida diariamente, durante 40 dias, na dose de 33mg/animal, não previne o desencadeamento da acidose lactea ruminal nos caprinos deste estudo.

Foram utilizados quatro Novilhos nelore, com peso vivo médio de 190 ± 32 kg, canulados no rúmen num experimento com delineamento Quadrado Latino 4x4, onde o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da levedura, monensina e salinomicina sobre os parâmetros ruminais e o aparecimento de protozoários ciliados ruminais.O experimento foi executado no Campus Administrativo de Pirassununga, na Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da Universidade de São Paulo. A dieta oferecida aos animais foi composta por silagem de sorgo e concentrado (30:70), onde foram submetidos a quatro tratamentos diferidos de acordo com o aditivo usado, 5,0g de Levedura (Beef Sacc®), 0,42g de salinomicina (Coxistac®), 2,0g de monensina sódica (Rumensin®) e o controle sem aditivo. Os parâmetros avaliados foram degradabilidade ruminal, in situ do volumoso e da dieta total, concentração de ácidos graxos voláteis e nitrogênio amoniacal, pH ruminal, taxa de passagem líquida, turnover e volume ruminal, e identificação e contagem dos protozoários ciliados. O período experimental foi subdividido em vinte e um dias de adaptação e sete de colheita, totalizando vinte e oito dias por período experimental. Foram mensurados os coeficientes de degradabilidade nos períodos de incubação de 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 e 96 horas. Para a colheita de liquido ruminal foram utilizados os horários 0, 2, 4, 6, 8 horas; as colheitas de marcador de fase liquida (PEG) foram realizadas ás 0; 1,5; 3; 6; 12 e 24 horas após a alimentação. Houve aumento do valor para a fração “b” na MS, no tratamento levedura (p<0,05), e no tratamento salinomicina. Também houve uma tendência a aumentar a fração “b” no FDN. O tratamento levedura aumentou significativamente o número de protozoários ciliados no rúmen (p<0,05). Os valores referentes ao pH não foram afetados pelos tratamentos (p>0,05). A concentração de amônia e os valores encontrados para a cinética ruminal não foram afetados pelos tratamentos (p>0,05). O uso de ionóforos melhorou a proporção dos ácidos acético:propiônico, propiônico e butírico enquanto a levedura aumentou a concentração de acido acético (p<0,05). / Four Nelore Steers had been used, with average alive weight of 190 ± 32 kg, rumen cannulas, in an experiment with Squared delineation Latin 4x4, where the objective of the work was to evaluate the effect of the yeast culture, monensin and salinomycin on the rumen parameters and the appearance of ciliates protozoa. The experiment was executed in the Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos of the Universidade de São Paulo. The diet offered to the animals was composed for ensilage and concentrated (30:70), where the four differed treatments had been submitted in accordance with the used additive, 5,0g of yeast culture (Beef Sacc), 0,42g of salinomycin (Coxistac), 2,0g of monensin (Rumensin) and the control without additive. The evaluated parameters had been ruminal degradability “in situ” of voluminous and the total diet, the concentration of volatile fatty acid concentration and ammoniac nitrogen concentration, pH ruminal, liquid passage, turnover and ruminal volume, and number and specie of ciliates protozoa. The experimental period was subdivided in twenty and one days of adaptation and seven of harvest, having totalized twenty and eight days for experimental period. The coefficients of degradability in the incubation periods of 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 and 96 hours had been measure. For the harvest of I eliminate ruminal had been used schedules 0, 2, 4, 6, 8 hours; the harvests of phase marker eliminate (PEG) had been carried through ace 0; 1,5; 3; 6; 12 and 24 hours after the feeding. It had increase of the value for fraction "b" in the MS, the treatment yeast culture, and the salinomycin treatment (p<0,05). Also it had a trend to increase fraction "b" in the FDN. The treatment yeast culture significantly increased the number of ciliates protozoa in rumen (p<0,05). The referring values to pH had not been affected by the treatments (p>0,05). The ammonia concentration and the values found for the kinetic ruminal had not been affected by the treatments (p>0,05). The use of ionophores improved the acid ratio of the acetic:propionic, propionic and butiric while the yeast culture increased the acids concentration of acetic (p<0,05).

Os objetivos destes trabalhos foram avaliar a inclusão de altos níveis de monensina em suplementos proteico de baixo consumo para bovinos sobre (i) desempenho; (ii) fermentação e degradabilidade ruminal e (iii) produção de metano. Para tanto, foram realizados três experimentos distintos. Os experimentos realizados são apresentados na forma de capítulos. Nos Capítulos I e II são apresentados a introdução e a revisão de literatura. No Capítulo III (desempenho), foram utilizados 64 novilhos, distribuídos aleatoriamente em quatro tratamentos: 0, 400, 800 e 1200 mg de monensina sódica/ kg de suplemento proteico. Os animais permaneceram em quatro piquetes de Brachiaria decumbens onde eram submetidos a rodízios semanais. Amostras de pasto foram colhidas para determinação das variáveis qualitativas e quantitativas da forragem. Foram estimados o consumo médio de suplemento, consumo individual de suplemento e ganho de peso médio diário. A inclusão de monensina nos níveis estudados diminuiu o consumo de suplemento e piorou o desempenho animal. No Capítulo IV (fermentação e degradabilidade ruminal), foram utilizados quatro bovinos da raça nelore, canulados no rúmen, em experimento com delineamento quadrado latino 4x4 por 84 dias. Os animais foram arraçoados com dieta composta de feno de Brachiaria decumbens (à vontade), 500 g/cabeça/dia de suplemento proteinado de baixo consumo e monensina sódica conforme os tratamentos: 0, 200, 400 e 600 mg/dia. Os parâmetros ruminais avaliados foram: produções de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC); concentração de nitrogênio amoniacal; pH; consumo de matéria seca; degradabilidade in situ da MS e FDA do feno de B. decumbens. Os valores encontrados para a fermentação ruminal (pH, N-NH3 e AGCC) e degradabilidade in situ da MS não foram afetados pelos tratamentos. O aumento dos níveis de monensina diminuíram linearmente o consumo de matéria seca e a degradabilidade potencial da fibra. No Capítulo V (produção de metano), quatro níveis de monensina foram testados em ensaio in vitro de produção de gases com o objetivo de avaliar a cinética fermentativa, produção de AGCC, degradabilidade da matéria seca, e produção do gás metano. Para tanto, feno de Brachiaria decumbens e suplemento proteico de baixo consumo foram utilizados como substrato. Foi simulado um consumo médio de suplemento de 500g/animal/dia acrescido dos níveis de monensina: 0, 200, 400 e 600 mg. Foram coletados amostras dos gases para mensuração da produção de metano em 24 hrs de incubação. A degradabilidade da matéria seca e a produção de ácidos graxos de cadeia curta foram determinados às 24 e 96 horas de incubação. A produção potencial de gases diminuiu conforme a inclusão monensina. O tempo de colonização das amostras aumentou com a inclusão de monensina. Não foram observadas diferenças na degradabilidade da matéria seca e na produção de metano e AGCC entre os tratamentos. / The aim of this research was to evaluate the inclusion of high monensin levels on protein supplements for cattle on (i) performance, (ii) fermentation and ruminal degradability and (iii) production of methane. To this end, three different experiments were performed. The experiments are presented in the chapters form. The introduction and literature review are presented in Chapter I and II. In Chapter III (performance): 64 cattle were randomly assigned to four treatments: control, containing protein supplement and control plus three monensin levels (400, 800 or 1200 mg/kg of supplement). The animals remained in four paddocks of Brachiaria decumbens where they were undergo weekly casters. Pasture samples were collected to determination of qualitative and quantitative variables. The average supplement intake, individual supplement intake and daily weight gain were estimated. The increased monensin levels decreased the supplement consumption and the animal performance. In Chapter IV (fermentation and ruminal degradability), four male cattle with rumen cannula were utilized in a Latin Square assay design 4x4, during 84 days. The animals were fed with Brachiaria decumbens, protein supplement of low consumption (500g/animal /day) and monensina. The treatments were 0, 200, 400 and 600 mg of monensin/day. The ruminal parameters evaluated were: production of short chain fatty acids (SCFA), ammonia concentration, pH, dry matter intake, in situ degradability of DM and ADF. The values found for ruminal fermentation and degradability of DM were not affected by treatments. Increased levels of monensin decreases linearly dry matter intake and the ADF degradability. In Chapter V (production of methane), four monensin levels were tested in vitro gas production. The objectives were to evaluate the fermentation kinetics, short chain fatty acids production, dry matter degradation and methane production. For this purpose, B. decumbens hay and protein supplement low consumption were used as substrate. An average supplement intake 500g/animal/day with levels of monensin (0, 200, 400 and 600 mg) was simulated. Gas samples were collected for measurement of methane production in 24hrs of incubation. The dry matter degradability and production of short chain fatty acids were determined after 24 and 96 hours of incubation. The potential gas production decreased as increased of monensin. The colonization time of the samples increased with monensin. No differences were observed in the degradability of dry matter and in the methane and SCFA production between treatments.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-13T17:57:06Z No. of bitstreams: 1 thaisbarrosrispoli.pdf: 1300847 bytes, checksum: 5286992b6dd88da252179302aabe7aff (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-07-14T10:35:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 thaisbarrosrispoli.pdf: 1300847 bytes, checksum: 5286992b6dd88da252179302aabe7aff (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T10:35:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thaisbarrosrispoli.pdf: 1300847 bytes, checksum: 5286992b6dd88da252179302aabe7aff (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / Os protozoários ciliados fazem parte da microbiota ruminal e juntamente com as bactérias fungos e protozoários flagelados desempenham funções bioquímicas e fisiológicas importantes para os ruminantes, principalmente no metabolismo dos nutrientes. Entretanto, seu papel no rúmen, ainda não é totalmente claro, podendo trazer tanto efeitos benéficos como prejudiciais para a produção animal. O presente estudo objetivou caracterizar as populações de protozoários ciliados no rúmen de novilhos alimentados com dietas adicionadas de monensina ou produtos à base de própolis LLOS, avaliando o impacto da suplementação desses aditivos em curto prazo de tempo sobre as populações de ciliados. Cinco novilhos, fistulados no rúmen e distribuídos no delineamento quadrado latino (5X5) receberam dieta constituída por 47% de silagem de milho e 53% de concentrado à base de milho moído e farelo de soja. Foram testadas dietas sem aditivos (controle), com adição de monensina ou produtos à base de própolis LLOSB1+, LLOSC1+ ou LLOSC1++. As amostras do conteúdo ruminal foram coletadas antes do inicio de cada período amostral (dia 0) e 8, 15 e 21 dias após o início de cada período amostral, sendo que, no dia de cada coleta foram retiradas amostras antes do fornecimento da dieta experimental (0h) e 3 e 6 horas depois da suplementação. O gênero predominante nas dietas foi o Entodinium, representando valor acima de 97% da densidade total de ciliados. As populações de ciliados no rúmen dos novilhos não foram alteradas pela suplementação com o aditivo monensina ou produtos à base de própolis LLOS. O pH ruminal alterou-se apenas entre os tempos de amostragem. As populações de Entodinium aumentaram após 15 dias da adição do produto à base de propolis LLOSB1+ e após 21 dias foi verificado um efeito negativo desse aditivo sobre os ciliados, que aumentaram, retornando aos níveis iniciais. Os ciliados diminuíram após 8 dias de adição de monensina na dieta, restabelecendo-se apos 15 da suplementação e tornando a diminuir no final do experimento. As populações do gênero Entodinium ao longo do experimento foram alteradas durante os períodos experimentais, especialmente com a suplementação dos produtos à base de própolis LLOS o que pode ter influenciado os resultados encontrados. Sugere-se assim, o aumento do período experimental e substituição do delineamento quadrado latino em trabalhos futuros. / The ciliated protozoa are part of the rumen microbial and together with bacteria, fungi and flagellate protozoa play important biochemical and physiological functions for ruminants, especially in the metabolism of nutrients. However, its role in the rumen yet is not entirely clear, and it may bring both beneficial and harmful effects to animal production. This study aimed to characterize the ciliated protozoa population in the rumen of steers fed with diets containing monensin or products based on propolis LLOS, evaluating the impact of supplementation of these additives in a short period of time on the abundance of ciliates. Five steers, fistulated in the rumen and distributed in Latin square design (5X5) were fed with a diet consisting of 47% corn silage and 53% concentrate based on grinded corn and bran soybean. Diets were tested without additives (control), with the addition of monensin or products based on propolis LLOSB1+, LLOSC1+ and LLOSC1++. The samples of rumen contents were collected before the start of each sampling period (day 0) and 8, 15 and 21 days after the start of each sampling period, whereas, on each collect day were collected samples before the supply of experimental diet (0 h) and 3 and 6 hours later supplementation. The predominant genus in the diets was the Entodinium, representing a value above 97% of the total density of ciliates. The ciliate population in the rumen of steers were not altered by supplementation with the additive monensin or products based on propolis LLOS. Rumen pH changed only between times of sampling. The Entodinium population increased after 15 days of the products addition based on propolis LLOSB1+ and after 21 days it was observed a negative effect of this additive on the ciliates. They increased, returning to their initial levels. The ciliates got shorter after 8 days of monensina addition in the diet, reestablishing after 15 days of supplementation and getting shorter again at the end of the experiment. The genus Entodinium population throughout the experiment were altered during the experimental periods, especially with the addition of the products based on propolis LLOS which may have affected the results. It is therefore suggested, an increase of the experimental period and the replacement of the Latin square design in future works.

A imunidade passiva surge como uma alternativa para a manipulação da fermentação ruminal e anticorpos de origem aviária contra bactérias específicas começam a ser pesquisados. Objetivou-se com este trabalho avaliar um preparado de anticorpos policlonais contra Streptococus bovis, Fusobacterium necrophorum e algumas cepas de bactérias proteolíticas (Peptostreptococcus anacrobius, Clostridium aminophilum e Clostridium sticklandii) sobre a diversidade microbiana ruminal e degradabilidade in situ de alguns alimentos. Foram utilizadas nove vacas mestiças portadoras de cânula ruminal. O delineamento experimental foi o quadrado latino 3 x 3 replicado 3 vezes, com arranjo fatorial de tratamentos 3 x 3 referente a 2 modificadores ruminais representados pela monensina (MON) e pelo preparado de anticorpos policlonais (PAP) mais o grupo controle e 3 fontes energéticas suplementadas na dieta, representadas pelo milho seco moído (MSM), silagem de grão úmido de milho (SGUM) e polpa cítrica (PC). Cada subperíodo experimental foi composto de 21 dias, sendo 16 dias para adaptação aos tratamentos e 5 para coleta de dados. A degradabilidade in situ dos alimentos testados foi mensurada através da técnica de saco de náilon. A coleta de amostras para a análise quantitativa de protozoários ocorreu no 21° dia de cada período, às 0 e 4 horas pós-alimentação, sendo estas coletadas por varredura do assoalho ruminal. O conteúdo ruminal foi coletado no 21° dia de cada período, às 4 h pós-alimentação, para análise da diversidade microbiana através de técnica de eletroforese em gel com gradiente de desnaturação. Observou-se que dietas contendo PC apresentaram aumento de 80,6%; 75,4% e 66,8% da degradabilidade efetiva da FDN da cana-de-açúcar para as taxas de passagem de 2, 5, 8%/h, respectivamente, em relação ao grupo tratado com SGUM, mas não em relação ao grupo com MSM. O tratamento com PAP demonstrou efeito sobre a fração solúvel (a) do amido do MSM, diminuindo esta em 45,26% e 45,37% em relação ao grupo CON e grupo MON, respectivamente. Observou-se que o tratamento com MON diminuiu em 16,14% o valor da fração potencialmente degradável (b) da MS da SGUM em relação ao grupo CON, mas não em relação ao grupo tratado com PAP. Já sobre a taxa de degradação (c), a MON aumentou o valor desta em 63,18% e 60,65% em relação ao grupo CON e PAP, respectivamente. Também a MON diminuiu a degradabilidade potencial (Dp) da MS da SGUM em 3,40% em relação ao grupo CON, mas não em relação ao grupo tratado com PAP. Observou-se que o PAP aumentou em 93,65% a contagem relativa de Isotricha em relação ao grupo CON, mas não em relação ao grupo MON. Já a PC aumentou em 334,42% (0h) e 399,75% (4h) a contagem relativa de protozoários do gênero Isotricha em relação às dietas de MSM e SGUM. Observou-se que o tratamento com PC aumentou em 52% a contagem do número de bandas em DGGE para a comunidade Archaea, em relação ao grupo MSM, sem diferir do grupo SGUM. Em linhas gerais, no presente experimento, não foi possível atribuir um padrão na estrutura de amplificação das comunidades Bacteria ou Archaea do conteúdo ruminal de animais tratados com dois diferentes modificadores ruminais ou 3 fontes energéticas distintas. / Passive immunity arises as an alternative for ruminal fermentation manipulation and aviary antibodies against specific bacteria starts to be studied. The objective of the present study was to evaluate a polyclonal antibody preparation (PAP) against Streptococus bovis, Fusobacterium necrophorum and some proteolytic bacteria (Peptostreptococcus anacrobius, Clostridium aminophilum and Clostridium sticklandii) on ruminal microbial community diversity and in situ degradability of some feedstuffs. Nine ruminally fistulated cows were used in a latin square 3 x 3 replicated 3 times with factorial arrangement of treatments 3 x 3 regarding to two rumen modifiers [monensin (MON) and (PAP) plus a control group (CON)] and three energetic sources supplemented in the diet represented by the dry-grounded corn grain (CG), high moisture corn silage (HMCS) and citrus pulp (CiPu). Each trial lasted 21 days where 16 days were for treatments adaptation and 5 for data collection. In situ degradability of the experimental diets was measured by nylon bag in situ technique. The collection of samples for quantitative protozoa analysis occurred on day 21 of each trial at 0 and 4 h after feeding by scanning the ruminal floor. The ruminal content was collected in the day 21 of each trial at 0 and 4 h after feeding for the analysis of microbial ruminal diversity by the denaturing gradient gel electrophoresis. Diets with CiPu presented an increase of 80.6%; 75.4% and 66.8% in effective degradability of NDF of sugar cane for outflow rates of 0.02, 0.05, 0.08/h, respectively, in relation to group treated with HMCS but not to the group CG. The group treated with PAP showed effect on soluble fraction (a) of starch of CG decreasing it in 45.26% and 45.37% in relation to CON and MON group respectively. It was observed that the treatment with MON decreased in 16.14% the value of potentially soluble fraction (b) of DM from HMCS in relation to CON group but not in relation to PAP. For the degradation rate (c) the MON increased it values in 63.18% and 60.65% in relation to CON and PAP group respectively. Also, MON treatment decreased potential degradability (Pd) of DM of HMCS in 3.40% in relation to CON group but not to PAP. It was observed that PAP treatment increased in 93.65% the relative counting of Isotricha in relation to CON group but not in relation to MON group. It was observed that CiPu diet increased in 334.42% (0h) and 399.75% (4h) the relative counting of Isotricha in relation to CG and HMCS. It was observed that CiPu increased in 52% the counting of the numbers of bands in DGGE for Archaea community in relation to CG without difference to HMCS group. In general lines, in the present experiment, it was not possible to assign that there was a pattern in the structures of amplification by Bacteria and Archaea communities of the ruminal content of animals treated with two different rumen modifiers or three distinct energetic sources.