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Estudo do perfil metabólico da Carapichea Ipecacuanha (brot.) L. Andersson (rubiaceae) por meio das técnicas de ressonância magnética nuclear de alta resolução assistida por ferramentas quimiométricas e de cromatografia líquida de alta eficiência

Duarte, Glauce Christian Alves 16 January 2018 (has links)
Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2018-01-16T13:45:19Z No. of bitstreams: 1 GLAUCE CHRISTIAN ALVES DUARTE.PDF: 7412666 bytes, checksum: f0301da81bceac842c42e74f9d99cf80 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-16T13:45:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GLAUCE CHRISTIAN ALVES DUARTE.PDF: 7412666 bytes, checksum: f0301da81bceac842c42e74f9d99cf80 (MD5) / Santander Universidades / A Ipecacuanha é uma planta medicinal de grande interesse da indústria farmacêutica e representatividade econômica devido à atividade dos seus principais metabólitos emetina e cefalina. Considerando que esses metabólitos são encontrados nas raízes, sua colheita foi extrativista, colocando a espécie na lista de espécies ameaçadas de erosão genética e de extinção. Desse modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio de técnicas de RMN, o efeito da sazonalidade associado a fatores agronômicos e climáticos sobre os teores de emetina e cefalina em indivíduos da espécie cultivados na região de Niterói. Os indivíduos foram cultivados sob 4 diferentes tipos de substrato e 3 diferentes graus de sombreamento. Foram realizadas 4 colheitas referentes às 4 estações do ano, no período de 1 ano. Os extratos brutos obtidos a partir das raízes foram submetidos à doseamento por CLAE-DAD e analisados por duas técnicas de RMN, a saber, RMN em solução e HRMAS. Nessa última técnica, foram realizadas análises dos extratos e das raízes pulverizadas. Os resultados de doseamento por CLAE-DAD mostraram que, no outono, os indivíduos cultivados em terra preta + areia + bokashi e 70% de sombreamento apresentaram os maiores teores de emetina e cefalina (0,63 e 1,84, respectivamente). Apesar de não ser possível quantificar os alcaloides por meio das técnicas de RMN, as análises quimiométricas vieram a corroborar com os resultados e mostraram uma tendência a agrupamento das amostras coletadas no inverno, o que sugere diferenças metabólicas nesta estação. Dessa forma, conclui-se que, tanto na técnica cromatográfica quanto na espectroscópica, a sazonalidade foi o principal fator determinante para a escolha do período ótimo de colheita na região onde o estudo foi conduzido / The Ipecac is a medicinal plant of great interest to the pharmaceutical and economic representativeness industry due to the activity of its main metabolites emetine and cephaeline. Considering that these metabolites are found in the roots, his crop was harvested by hand, placing the species on the list of species threatened by genetic erosion and extinction. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of seasonality associated with agronomic and climatic factors on the content of emetine and cephaeline in individuals grown in the Niteroi region by NMR techniques. Individuals were cultured in 4 different types of substrate and 3 degrees of shading. 4 samples were collected regarding the four seasons, in the period of 1 year. The crude extract obtained from roots were assayed by HPLC-DAD and analyzed by two NMR techniques, namely solution NMR and HRMAS. In the latter technique, analyzes were performed of extracts and powdered roots. The results of determination by HPLC-DAD showed that in the fall, the grown individuals in black soil + sand + Bokashi and 70% shading showed higher levels of emetine and cephalin (0.63 and 1.95, respectively). Although it is not possible to quantify the alkaloids by NMR techniques, chemometric analysis came to corroborate the results and showed a tendency to cluster the samples collected in winter, suggesting metabolic differences in this season. Thus, we concluded that both the chromatographic technique as in spectroscopy, seasonality was the main determining factor for choosing the optimal harvest period in the region where the study was conducted
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Memória sobre a economia extrativa da poaia – leste de Minas Gerais (primeira metade do século XIX)

Corrêa , Márcio Xavier 11 June 2012 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-29T14:29:34Z No. of bitstreams: 1 marcioxaviercorrea.pdf: 2221432 bytes, checksum: 7286324a74225fa20b31ae525dc9c85b (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-07-05T15:10:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 marcioxaviercorrea.pdf: 2221432 bytes, checksum: 7286324a74225fa20b31ae525dc9c85b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T15:10:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcioxaviercorrea.pdf: 2221432 bytes, checksum: 7286324a74225fa20b31ae525dc9c85b (MD5) Previous issue date: 2012-06-11 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Constitui esta dissertação em um estudo da economia extrativa da poaia que se desenvolveu na primeira metade do século XIX no Leste da Província de Minas Gerais. Esta economia extrativa consiste no processo histórico aqui reconstituído, e que pode ser definido como um conjunto de atividades comerciais envolvendo diferentes sujeitos históricos na constituição de uma rede de mercadorias cuja extensão ultrapassou os limites definidos pela fronteira política nacional. Para a realização deste estudo consultou-se um corpo de fontes bastante fragmentado e diversificado, possibilitando a recuperação das características farmacológicas da poaia, sua aplicação medicinal, o processo de sua extração no meio natural e sua presença nos livros de contabilidade do Registro da Barra do Pomba, juntamente com outros produtos exportados pela província de Minas Gerais. Para tanto, observa-se as características tanto da extração como do comércio da poaia desde a coleta realizada pelos indígenas nas áreas de floresta até sua exportação para a Europa a partir do porto do Rio de Janeiro. Inicialmente, são informados os usos médicos da poaia, que apresentam relação direta com a sua importância comercial. Em seguida é realizada uma investigação da atividade de coleta, pensando nos agentes envolvidos, plantas e homens, em movimento dinâmico e interativo. Finalizando, realiza-se um exercício de sistematização de dados em busca de um dimensionamento da comercialização da planta em uma perspectiva comparada em relação a outros produtos. / This dissertation is a study of the ipecac extractive economy that was developed in the first half of the nineteenth century in the East of the Province of Minas Gerais. This extractive economy consists on the historical process here reconstituted, which can be defined as a set of commercial activities involving different historical subjects in the constitution of a network of goods which extension exceeded the limits defined by national political boundaries. For this study we referred to a body of highly fragmented and diverse sources, enabling the recovery of the pharmacological characteristics of ipecac, its medical application, its extraction process in the natural environment and its presence in the account books of Records of Barra do Pomba, along with other products exported by the province of Minas Gerais. To this end, we observe the characteristics of both the extraction and the trade of ipecac from the collection held by the Indians in the areas of forest to its export to Europe from the port of Rio de Janeiro. Initially, the medical uses of ipecac are informed, which have direct relation to its commercial importance. Afterwards, an investigation of the collection activity is done, considering the agents involved, plants and men in a dynamic and interactive motion. Finally, we carried out an exercise of data systematization in search of sizing the commerce of the plant in a comparative perspective in relation to other products.
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Evolução molecular do gene metionina sintase em populações disjuntas de Carapichea ipecacuanha (Rubiaceae) / Molecular evolution of the methionine synthase gene in disjuncts populations of Carapichea ipecacuanha (Rubiaceae)

Benevenuto, Juliana 01 February 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2717003 bytes, checksum: 430ed9ce97311b4450b054a78245fcf2 (MD5) Previous issue date: 2013-02-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Cobalamin-independent methionine synthase (MetE) is a key enzyme for de novo synthesis of methionine in plants and it is also responsible for the regeneration of S-adenosylmethionine, which is a metabolite associated with the process of interaction with pathogens, plant growth and stresses response. In this study, 95 complete sequences of the gene for methionine synthase were obtained from 26 specimens of Carapichea ipecacuanha (species of Rubiaceae family, which is popularly known as ipecac) with aims to understand and model evolutionary events that occurred on MetE locus and on the specimens from three disjuncts ranges of occurrence of this species (Atlantic, Amazon and Central America ranges). Sequences of ITS and 5.8S from nrDNA and trnT-trnL spacers from cpDNA were also used for a multiloci population analysis. The sequenced region of MetE covered 3,890pb, where 2,298pb correspond to the coding region (composed of 11 exons) and 1,592pb to the noncoding region (comprising 10 introns and a portion of 3'UTR). In the entire sample were obtained 75 haplotypes and a nucleotide diversity of 0.00899. FST and AMOVA analyzes of MetE indicated no structure in three regions, opposite to detected for other loci analyzed here and in previous studies in which high divergence among the specimens from three ranges was observed. However, in the network haplotype was possible to observe the sympatric distribution of the haplotypes. Possibly, excess of tip haplotypes and the small number of mutational steps among neighboring haplotypes from the three ranges do not allow that the differentiation among these was significant. The Bayesian phylogenetic tree rooted by Carapichea lucida (outgroup) using the coding region sequences showed the formation of clades by geographic regions and provided evidence that sequences from "Atlantic" range is closer to the ancestral state of the gene MetE than sequences from others ranges. The heterogeneity of results for neutrality tests and for values of haplotype and nucleotide diversity at different loci suggests that these are evolving independently and also suggests that demographic events do not explain the pattern found. Thereby, tests for the presence of selection site-by-site were performed for the coding region of the gene MetE and protein alignment against others MetE from diferents plant species available in the Genbank was develop too. Four sites under positive selection were found, but the results show that negative selection (purifying selection) is the main force acting on the locus, favoring the conservation of protein structure and function in all gene copies from C. ipecacuanha. / Metionina sintase independente de cobalamina (MetE) é uma enzima chave na via de síntese de novo de metionina em plantas e também é responsável pela regeneração de S-adenosilmetionina, metabólito associado à vias de interação com patógenos, crescimento vegetal e resposta à estresses. Neste estudo, 95 sequências do gene para metionina sintase foram obtidas a partir de 26 indivíduos de Carapichea ipecacuanha (espécie da família Rubiaceae, popularmente conhecida com ipeca) com objetivo de entender e modelar os eventos evolutivos que ocorreram sobre o locus MetE e sobre os indivíduos de três regiões disjuntas de ocorrência desta espécie (Mata Atlântica, Amazônia e América Central). Sequências de ITS do nrDNA e dos espaçadores trnT-trnL do cpDNA também foram utilizadas para uma análise populacional multiloci. A região sequenciada de MetE abrangeu 3.890pb, sendo 2.298pb correspondentes à região codificante (composta por 11 exons) e 1.592pb à região não codificante (composta por 10 introns e uma parte da região 3 UTR). No total, foram obtidos 75 haplótipos e uma diversidade nucleotídica de 0,00899. As análises FST e AMOVA de MetE indicaram ausência de estruturação em relação às três regiões, diferentemente do observado para os demais loci aqui analisados e em estudos prévios em que elevada divergência entre as três regiões foi observada. Por meio rede de haplótipos foi possível observar a distribuição simpátrica destes; no entanto, o excesso de haplótipos de ponta e o pequeno número de passos mutacionais entre haplótipos vizinhos das três regiões não permitem que a diferenciação destes seja significativa. A árvore filogenética Bayesiana enraizada por Carapichea lucida (grupo externo) utilizando a região codificante também mostrou a formação de clados por regiões geográficas e forneceu evidências de que sequências da Mata Atlântica sejam mais próximas do estado ancestral do gene MetE que as sequências das demais regiões. A heterogeneidade dos resultados encontrados para os testes de neutralidade e para os valores de diversidade nucleotídica e haplotípica nos diferentes loci sugerem que estes estão evoluindo independentemente e que eventos demográficos não explicam o padrão obtido. Assim, análises para a presença de seleção foram conduzidas para a região codificante do gene MetE e também foi realizado alinhamento de proteínas preditas para esta espécie contra proteínas MetE de outras espécies vegetais disponíveis no GenBank. Em quatro sítios houve evidência de seleção positiva, mas os resultados sugerem que a seleção negativa (purificadora) é a principal força atuando sobre o locus, favorecendo a conservação da estrutura e função proteica em todas as cópias gênicas de C. ipecacuanha.
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POTENCIAL ANTIPROLIFERATIVO, GENOTÓXICO E FITOQUÍMICA DE Richardia brasiliensis GOMES / ANTIPROLIFERATIVE POTENTIAL, GENOTOXIC AND PHYTOCHEMISTRY OF Richardia brasiliensis GOMES

Dornelles, Rafaela Castro 13 July 2015 (has links)
The use of medicinal plants in therapy has developed over the years concurrently with the humanity evolution. With the difficulty of access to synthetic drugs, the rich plant biodiversity and the adverse economic situation that represents an obstacle to the use of traditional drugs, make the use of medicinal plants one of the main forms of therapeutic resource used by the population. In this way, studies reporting the effects of medicinal plants in living organisms, the standardization and determination of plants's quality are essential for a safe and effective use of it. The medicinal plant Richardia brasiliensis Gomes is known as white ipecac and is inserted in the Rubiaceae family, native to South America and foundin in tropical and subtropical regions. Secondary metabolites, such as volatile oils, sterols, alkaloids, tannins, flavonoids and coumarins this plant has important pharmacological activities in the treatment of diabetes, hemorrhoids and skin disease. Also, it is reported as having anthelmintic and anti-emetic actions. This study aimed to determine the vegetable parameters of quality, identify and quantify secondary metabolites, analyze the histochemistry of leaves and stems and evaluate the antiproliferative and genotoxic capacity of extracts and fractions at different concentrations on the cell cycle of Allium cepa L. R. brasiliensis was collected on the UFSM campus, in different seasons. The establishment of quality parameters and the obtainment of the extract by maceration were made from the plant drug powder. The extraneous material, percentage of water, swelling index and total and acid insoluble ash were determined by analyzing the plant material. The results showed that our findings are in line with the values recommended by the Brazilian Pharmacopoeia, although the ash contended have been high when compared to other species. The autumn extract had the highest yield (20.44%), and highest concentration of flavonoids (28.9 mg/g) as quantified by spectrophotometer. Rutin and chlorogenic acid were identified by HPLC-DAD and the highest concentration of rutin (26.25 mg/g) was in the autumn extract. Anthocyanin glycosides, tannins, amino groups, steroids and/or triterpenes, alkaloids, coumarins, organic acids and flavonoids have been reported through the characterization reactions. From the histochemistry of leaves and stems, it was determined the presence of storing and structural lipids, as well as phenolic compounds, anthocyanins and alkaloids. From the Allium cepa test concentrations of 10 and 500 μg/mL and positive, negative and diluent controls, it was possible to determined the genotoxicity and antiproliferative capacity of the plant. The crude extract of autumn and the butanol fraction at a concentration of 500 μg/mL had the lowest mitotic index (5.42 and 6.75% respectively). The extracts and fractions showed low number of altered cells (binucleated cells, micronucleus, disorganized chromosomes, chromosomes bridges and break) when compared to the positive control (glyphosate 1%). / O uso de plantas medicinais na terapêutica desenvolveu-se ao longo dos anos concomitantemente à evolução da humanidade. Com a dificuldade de acesso aos medicamentos sintéticos, a rica biodiversidade vegetal e a situação sócio econômica desfavorável, a utilização de plantas medicinais é uma das principais formas de recurso terapêutico utilizada pela população. Estudos que reportem a ação das plantas medicinais aos organismos vivos, a padronização e a determinação da qualidade da droga vegetal são essenciais para a segurança e eficácia no uso destas. A espécie medicinal Richardia brasiliensis Gomes é conhecida como poaia branca e está inserida na família Rubiaceae, nativa da América do Sul e encontrada em regiões tropicais e subtropicais. Devido a presença de metabólitos secundários como óleos voláteis, esterois, alcaloides, taninos, cumarinas e flavonoides possui atividades farmacológicas consideráveis, destacando-se no tratamento de diabetes, hemorróidas, anti-helmíntico, antiemética e em doenças na pele. Esse trabalho objetivou determinar os parâmetros de qualidade da droga vegetal, identificar e dosar metabólitos secundários, realizar a histoquímica das folhas e caules e avaliar a capacidade antiproliferativa e genotóxica dos extratos e frações, em diferentes concentrações sobre o ciclo celular de Allium cepa L. O material vegetal de R. brasiliensis foi coletado no Campus da UFSM, nas diferentes estações do ano. O estabelecimento dos parâmetros de qualidade e a obtenção do extrato por maceração foram a partir do pó da droga vegetal. Na análise da droga vegetal foram determinados os teores de matéria estranha, porcentagem de água, índice de intumescência, cinzas totais e insolúveis em ácido, sinalizando que os valores encontrados estão de acordo com os valores preconizados pela Farmacopeia Brasileira, embora os teores de cinzas tenham sido elevados quando comparados com outras espécies. O extrato de outono apresentou o maior rendimento (20,44%), e maior concentração de flavonoides (28,9 mg/g) quando quantificado por meio de espectrofotômetro. Rutina e ácido clorogênico foram identificados a partir da CLAE-DAD e a maior concentração de rutina (26,25 mg/g) foi no extrato de outono. Heterosídeos antociânicos, taninos, amino-grupos, esteróides e/ou triterpenos, alcaloides, cumarinas, ácidos orgânicos e flavonoides foram reportados através das reações de caracterização. A partir da histoquímica das folhas e caules foram determinados lipídeos de reserva e estruturais, compostos fenólicos, antocianinas e alcaloides. A partir do teste de Allium cepa nas concentrações de 10 e 500 μg/mL e controles positivo, negativo e do diluente, foi determinado a capacidade antiproliferativa e genotóxica. O extrato bruto de outono e a fração butanólica na concentração de 500 μg/mL apresentaram os menores índices mitótico (5,42 e 6,75% respectivamente). Os extratos e frações apresentaram baixo número de células com alterações (células binucleadas, micronúcleo, cromossomos desorganizados, pontes e quebra cromossômicas) quando comparados com o controle positivo (glifosato 1%).

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