O presente trabalho teve por objetivo avaliar ex vivo a atividade antimicrobiana hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5% e 5,25%, clorexidina (CHX) gel e líquida 2% e MTAD em biofilme de Enterococcus faecalis, sobre matriz dentinária humana. 118 incisivos inferiores humanos, com canal único, foram instrumentados e seccionados transversal e longitudinalmente. Os fragmentos radiculares obtidos foram imersos em caldo TSB e autoclavados e em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 5 grupos experimentais, com 40 amostras para cada grupo, e dois grupos controle, com 3 amostras cada. O biofilme formado sobre a matriz dentinária foi submetido à ação das soluções antimicrobianas pelos tempos 1, 5, 15 e 30 minutos. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs. Após a ação das soluções antimicrobianas, os fragmentos foram imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à turbidez do meio. A avaliação do percentual de redução bacteriana em função do tempo e da solução demonstrou não haver diferença estatística entre CHX gel, NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p>0,05). Entretanto a CHX líquida e o MTAD foram menos efetivos que NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p<0,05) e semelhantes a CHX gel. O tempo de ação de 1 minuto foi o menos efetivo na eliminação bacteriana. Apenas a CHX líquida e o MTAD apresentaram diferenças na eficácia em função do tempo. A CHX foi menos efetiva em 1 e 5 minutos (p<0,05) e o MTAD, em 1 minuto de ação. Ao analisar a viabilidade bacteriana intra-dentinária, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram superiores a CHX gel, CHX líquida e NaOCl 2,5%; e o tempo de 30 minutos foi estatisticamente significativo em relação aos demais (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que o NaOCl 2,5% e 5,25% e a CHX gel 2% foram mais eficazes na eliminação de E. faecalis em todos os tempos testados. O MTAD apresentou efetiva ação antimicrobiana a partir de 5 minutos de ação. Porém quando foi avaliada a atividade antimicrobiana no interior da dentina, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram mais efetivos, sendo necessário tempo mínimo de 30 minutos para ampla eliminação bacteriana no interior dos túbulos dentinários. / The present study aimed to evaluate ex vivo the antimicrobial activity of sodium hypochlorite (NaOCl) 2.5% and 5.25%, chlorhexidine (CHX) liquid and gel 2% and MTAD in Enterococcus faecalis biofilms, on human dentin matrix. 118 mandibular human incisors, single rooted, were instrumented and sectioned transversal and longitudinally. The root sections obtained were immersed in TSB broth and autoclaved, thereafter, they were inoculated with suspensions of E. faecalis and incubated at 37C, for 72h to allow biofilm formation. Samples were randomly divided in 5 experimental groups, with 40 samples per group, and 2 control groups, with 3 samples each. The biofilm developed over the dentin matrix was placed under the action the antimicrobial solutions for 1, 5, 15 e 30 minutes. The antimicrobial activity was assessed through CFU counts. After the action of the antimicrobial solutions, the root fragments were immersed in an Enterococci selective broth, incubated at 37 C for 72 hours, and evaluated for broth turbidity. The analysis of the percentage of bacterial reduction depending on the time and on the solution demonstrated no statistic difference among the CHX gel, NaOCl 2.5% and 5.25%(p>0.05). However, the CHX liquid and MTAD were less effective than NaOCl 2,5% and NaOCl 5,25% (p<0.05) and similar to CHX gel. Only CHX liquid and MTAD had statistical differences in its efficacy depending on the time. CHX was less effective in 1 and 5 minutes (p<0.05) and MTAD in 1 minute. When analyzing the bacterial viability in the dentin, NaOCl 5.25% and MTAD were superior to CHX gel, CHX liquid and NaOCl 2,5%; and the time of 30 minutes was statistically different than the others (p<0.05). Based on the results obtained it seems licit to conclude that NaOCl 2,5% and 5,25% and CHX gel 2% were the most effective in the elimination of E. faecalis at all times tested. MTAD presented effective antimicrobial action after 5 minutes of action. However, when the bacterial survival in the dentin was assessed, NaOCl 5.25% and MTAD were the most effective, and the minimum time for wide bacterial elimination in the dentinal tubules was 30 minutes.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar ex vivo a atividade antimicrobiana hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5% e 5,25%, clorexidina (CHX) gel e líquida 2% e MTAD em biofilme de Enterococcus faecalis, sobre matriz dentinária humana. 118 incisivos inferiores humanos, com canal único, foram instrumentados e seccionados transversal e longitudinalmente. Os fragmentos radiculares obtidos foram imersos em caldo TSB e autoclavados e em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 5 grupos experimentais, com 40 amostras para cada grupo, e dois grupos controle, com 3 amostras cada. O biofilme formado sobre a matriz dentinária foi submetido à ação das soluções antimicrobianas pelos tempos 1, 5, 15 e 30 minutos. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs. Após a ação das soluções antimicrobianas, os fragmentos foram imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à turbidez do meio. A avaliação do percentual de redução bacteriana em função do tempo e da solução demonstrou não haver diferença estatística entre CHX gel, NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p>0,05). Entretanto a CHX líquida e o MTAD foram menos efetivos que NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p<0,05) e semelhantes a CHX gel. O tempo de ação de 1 minuto foi o menos efetivo na eliminação bacteriana. Apenas a CHX líquida e o MTAD apresentaram diferenças na eficácia em função do tempo. A CHX foi menos efetiva em 1 e 5 minutos (p<0,05) e o MTAD, em 1 minuto de ação. Ao analisar a viabilidade bacteriana intra-dentinária, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram superiores a CHX gel, CHX líquida e NaOCl 2,5%; e o tempo de 30 minutos foi estatisticamente significativo em relação aos demais (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que o NaOCl 2,5% e 5,25% e a CHX gel 2% foram mais eficazes na eliminação de E. faecalis em todos os tempos testados. O MTAD apresentou efetiva ação antimicrobiana a partir de 5 minutos de ação. Porém quando foi avaliada a atividade antimicrobiana no interior da dentina, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram mais efetivos, sendo necessário tempo mínimo de 30 minutos para ampla eliminação bacteriana no interior dos túbulos dentinários. / The present study aimed to evaluate ex vivo the antimicrobial activity of sodium hypochlorite (NaOCl) 2.5% and 5.25%, chlorhexidine (CHX) liquid and gel 2% and MTAD in Enterococcus faecalis biofilms, on human dentin matrix. 118 mandibular human incisors, single rooted, were instrumented and sectioned transversal and longitudinally. The root sections obtained were immersed in TSB broth and autoclaved, thereafter, they were inoculated with suspensions of E. faecalis and incubated at 37C, for 72h to allow biofilm formation. Samples were randomly divided in 5 experimental groups, with 40 samples per group, and 2 control groups, with 3 samples each. The biofilm developed over the dentin matrix was placed under the action the antimicrobial solutions for 1, 5, 15 e 30 minutes. The antimicrobial activity was assessed through CFU counts. After the action of the antimicrobial solutions, the root fragments were immersed in an Enterococci selective broth, incubated at 37 C for 72 hours, and evaluated for broth turbidity. The analysis of the percentage of bacterial reduction depending on the time and on the solution demonstrated no statistic difference among the CHX gel, NaOCl 2.5% and 5.25%(p>0.05). However, the CHX liquid and MTAD were less effective than NaOCl 2,5% and NaOCl 5,25% (p<0.05) and similar to CHX gel. Only CHX liquid and MTAD had statistical differences in its efficacy depending on the time. CHX was less effective in 1 and 5 minutes (p<0.05) and MTAD in 1 minute. When analyzing the bacterial viability in the dentin, NaOCl 5.25% and MTAD were superior to CHX gel, CHX liquid and NaOCl 2,5%; and the time of 30 minutes was statistically different than the others (p<0.05). Based on the results obtained it seems licit to conclude that NaOCl 2,5% and 5,25% and CHX gel 2% were the most effective in the elimination of E. faecalis at all times tested. MTAD presented effective antimicrobial action after 5 minutes of action. However, when the bacterial survival in the dentin was assessed, NaOCl 5.25% and MTAD were the most effective, and the minimum time for wide bacterial elimination in the dentinal tubules was 30 minutes.

Este estudo clínico analisou os efeitos dos procedimentos endodônticos e da irrigação ultrassônica passiva (PUI) em bactérias e endotoxinas de canais radiculares. Cinquenta pacientes com dentes com periodontite apical primária foram divididos de forma randomizada em dois grupos: PUI (n=25) e irrigação convencional (IC) (n=25). O preparo químico-cirúrgico (PQC) foi realizado com instrumentos reciprocantes, utilizando-se NaOCl 2,5% durante o preparo; e EDTA 17%, para remoção do magma dentinário. Os canais radiculares foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio por 14 dias e obturados. Foram realizadas coletas microbiológicas dos canais antes (S1) e após o PQC (S2), após os protocolos de irrigação (S3), após a medicação intracanal (S4) e após a reinstrumentação dos canais (S5). Durante o processamento das amostras, as coletas de 5 casos foram perdidas por fatores diversos. As amostras foram analisadas por PCR quantitativo para detecção e quantificação de bactérias e pelo teste turbidimétrico de LAL para detecção e determinação do nível de endotoxinas. Bactérias e endotoxinas foram observadas em 100% das amostras iniciais coletadas. Em ambos os grupos, houve diminuição significativa na concentração de endotoxinas entre uma etapa do tratamento e a etapa posterior (p<0,05). O mesmo foi observado quanto ao número de bactérias, exceto entre a remoção da medicação intracanal e a reinstrumentação antes da obturação (S5). A análise intergrupos demonstrou que, com relação às endotoxinas, não foram observadas diferenças significativas entre os grupos (p>0,05). Com relação à redução bacteriana, a PUI foi capaz de reduzir significativamente mais o número de bactérias do que a IC (p<0,05). A análise qualitativa dos resultados demonstrou que nenhuma das técnicas sobressaiu-se sobre a outra em relação à frequência de casos com leituras positivas, tanto para bactérias quanto para endotoxinas. Concluiu-se que a PUI foi mais eficaz do que a IC em reduzir o número de bactérias, mas não a quantidade de endotoxinas do canal radicular. Além disso, cada etapa do tratamento endodôntico foi capaz de reduzir tanto o número de bactérias quanto a quantidade de endotoxinas. / The aim of this clinical study was to compare the effects of passive ultrasonic irrigation (PUI) and intracanal medication with calcium hydroxide in bacteria and endotoxins from root canal. Fifty teeth with apical periodontitis were randomly divided into two groups according to the irrigation protocol: PUI (n = 25) and conventional irrigation (CI) (n = 25). The root canal preparation of all the teeth was carried out with reciprocating files and 2.5% NaOCl during preparation; and 17% EDTA for smear layer removal. The root canals were medicated with calcium hydroxide for 14 days. Microbiological sampling were performed before (S1) and after the preparation (S2) after irrigation protocols (S3), and after intracanal medication (S4 and S5). During the processing of the samples, five cases were lost for several factors. The samples were analyzed by real time PCR, for the detection and quantification of bacteria, and the turbidimetric LAL assay, for the detection and analysis of the endotoxin levels. Bacteria and endotoxins were observed in 100% of the initial samples. In both groups, there was a significant decrease in the concentration of endotoxins between one step and the subsequent step of treatment (p < 0.05). The same was observed for the number of bacteria, with the exception of the reinstrumentation after the removal of the medication (S5). The intergroup analysis showed no significant differences between groups in endotoxin reduction ( p > 0.05 ). PUI was able to reduce the number of bacteria significantly better than CI (p < 0.05). No significant statistical difference was observed between groups regarding the occurrence of cases wielding positive results for bacteria or endotoxin. It was concluded that PUI was more effective than CI in reducing the number of bacteria but not the amount of endotoxin in the root canal. Furthermore, each step of the endodontic therapy was effective in reducing both the number of bacteria as the amount of endotoxin.

Orientador: Regina Maria Puppin-Rontani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T23:23:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pascon_FernandaMiori_M.pdf: 4566507 bytes, checksum: 3f6c891c0673562868d8c5f467dd9f71 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Um dos principais objetivos do tratamento endodôntico é o debridamento do sistema de canais radiculares através da remoção dos restos pulpares, da smear layer e smear plugs, para eliminar a contaminação bacteriana e subprodutos da mesma, os quais podem se tornar reservatórios de irritantes no canal tratado. Além disso, as substâncias irrigadoras e os métodos de irrigação utilizados durante o preparo químico-mecânico, podem também contribuir para a remoção da smear layer e consequentemente alterar a permeabilidade dentinária. Dessa forma, os objetivos desta Dissertação foram: (1) discutir através da revisão da literatura, a eficácia de substâncias irrigadoras, bem como a influência de dois métodos de irrigação (irrigação manual ou ativação ultrasônica) utilizados durante o preparo químico-mecânico de dentes decíduos e permanentes, considerando a permeabilidade da dentina radicular; (2) correlacionar o índice de permeabilidade da dentina radicular de dentes decíduos sob a influência de substâncias irrigadoras associadas ou não a auxiliares de instrumentação (líquido de Dakin, líquido de Dakin associado ao peróxido de hidrogênio, solução salina associada à clorexidina gel e solução salina) e diferentes métodos de irrigação (irrigação manual ou ativação ultrasônica) aos seus aspectos morfológicos (presença ou ausência de smear layer). Baseando-se na revisão de literatura pôde-se concluir que as substâncias irrigadoras e associações utilizadas durante o tratamento endodôntico promoveram aumento da permeabilidade dentinária radicular de dentes permanentes e que não houve diferenças quanto à permeabilidade dentinária, quando comparada a irrigação realizada manualmente ou através de vibração ultrasônica. Não há estudos relacionados à permeabilidade radicular de dentes decíduos, quando estes são submetidos a substâncias irrigadoras e diferentes métodos de irrigação. A técnica de irrigação manual foi considerada mais efetiva do que a técnica de irrigação através de sistema de vibração ultrasônica, quanto à permeabilidade dentinária radicular de dentes decíduos. A presença da smear layer nas paredes radiculares foi um fator limitante à penetração do corante (índice de permeabilidade) para o terço médio quando dentes decíduos foram irrigados manualmente. O líquido de Dakin apresentou os maiores valores de índice de permeabilidade, nos três terços radiculares, sugerindo que essa solução irrigadora seja indicada para o tratamento endodôntico de dentes decíduos. / Abstract: One of the main goals of root canal treatment is the cleaning of the entire root canal system, through removal of pulpal debris, smear layer and smear plugs in order to avoid harbor bacteria or bacterial by-products, providing a reservoir of potential irritants in treated root canal. In addition, the cleansers and irrigation methods used in the endodontic treatment, can also contribute with the smear layer removal and with permeability alterations. Thus, the aims of this Thesis was: (1) to discuss the efficacy of some cleansers, as well as the influence of two irrigation systems used during endodontic preparation of primary and permanent teeth (manual or ultrasonic vibration) with regard to root dentin permeability, based on a literature reviewing; (2) to correlate the dye permeability to morphological aspect (presence or absence of smear layer) of the primary root dentin wall, using scanning electron microscopy (SEM), regarding the endodontic preparation and irrigation methods. Based on literature review (1) it can be concluded that among the solutions used for permanent teeth, all solutions and associations studied increased the dentin permeability. There was no difference in the dentin permeability when comparing manual and ultrasonic irrigation. There are not enough papers focusing primary teeth on this subject to definitely establish the patterns of increased dentin permeability in tooth root canal treatment regarding the irrigating solutions and irrigation systems. The results of the second study showed that manual irrigation technique was better than ultrasonic one and that Dakin's liquid, Dakin's liquid associated with hydrogen peroxide, and saline solution showed the highest permeability index averages values. Regarding the correlation study, it could be concluded that the smear layer presence on the root dentin walls was a limiting factor to dye penetration (Permeability Index), in middle third for manual irrigation. / Mestrado / Odontopediatria / Mestre em Odontologia

Objetivos: avaliar a eficácia do uso da irrigação ultrassônica passiva (IUP), do instrumento adicional e da associação de ambos na remoção da medicação intracanal de hidróxido de cálcio através da microtomografia computadorizada (micro-CT). Material e métodos: foram selecionados 32 dentes humanos unirradiculares, preparados pela técnica de instrumentação rotatória com o sistema Protaper® universal até a lima final Finishing File 4 (F4). As amostras foram preenchidas com medicação intracanal de Ca(OH)2 associada ao propilenoglicol 400. Após 30 dias, os dentes foram divididos em quatro grupos, de acordo com a técnica de remoção da medicação. Nos grupos em que foi utilizada a IUP, esta foi realizada através da irrigação-aspiração com 5 mL de NaOCl 1%, 3 mL de EDTA 17% com agitação ultrassônica por um minuto a 2 mm do CRT e 5 mL de NaOCl 1%. O instrumento adicional utilizado foi a lima F5. No grupo controle, a remoção da medicação foi feita apenas com o instrumento final (F4) e com o uso do EDTA 17%, mantido por um minuto no interior do canal, sem ativação ultrassônica. As amostras foram avaliadas por meio da micro-CT, em três momentos distintos do procedimento endodôntico: 1) após preparo químico-cirúrgico do canal, 2) 30 dias após aplicação da medicação intracanal de Ca(OH)2 e 3) após remoção da medicação intracanal. As imagens microtomográficas foram avaliadas utilizando o software CTan (SkyScan). O canal foi dividido em terços apical, médio e cervical. Os conjuntos de dados foram analisados usando a escala de cinza do software CTan para quantificar o volume (em mm3) do canal após o preparo, o volume da medicação após 30 dias, o volume de resíduos de medicação e o volume do canal após remoção da medicação. A porcentagem de resíduos também foi calculada em relação ao volume do canal e ao volume de medicação após 30 dias. Finalmente, o aumento de volume do canal após a remoção também foi avaliada. Os dados foram analisados através de ANOVA de três fatores/teste de Tukey ou Kruskal-Wallis/Student-Newman-Keuls, com nível global de significância de 5%. Resultados: Independentemente da região do canal, o uso do ultrassom resultou em um menor volume de resíduos de MIC, em termos absolutos e em relação ao volume do canal. Em relação ao volume de medicação após 30 dias, o uso do ultrassom foi marginalmente significante. O uso do instrumento adicional não apresentou influência significante sobre a eficácia da remoção da MIC. A porcentagem de resíduos foi maior na região apical, quando o ultrassom não foi utilizado. Em números absolutos, a região cervical apresentou maior volume de resíduos. Em relação ao grupo controle, o uso do ultrassom resultou em um volume final maior do canal cirúrgico no terço cervical. Em termos percentuais, todas as técnicas resultaram em aumentos estatisticamente semelhantes do volume do canal cirúrgico para os terços cervical e médio. No terço apical, o grupo controle apresentou aumento percentual estatisticamente inferior aos demais. Conclusões: houve diferenças estatisticamente significantes na eficácia de remoção da MIC entre as técnicas testadas, sendo que o uso do ultrassom resultou em um menor volume de resíduos de MIC, em todos os grupos para um dado terço. / Objectives: To evaluate the efficacy of passive ultrasonic activation (PUI), an additional instrument and the combination of both for removal of intracanal calcium hydroxide using computerized microtomography (micro-CT). Methods: 32 singlerooted human teeth were prepared using the universal Protaper® rotary instrumentation system, with Finishing File 4 (F4) as the final file. The samples were filled with intracanal Ca(OH)2 plus propyleneglycol 400. After 30 days, the samples were divided into four groups according to the medication removal technique. In the groups where PUI was used, it was done by suction-irrigation with 5 mL of 1% NaOCl, 3 ml 17% EDTA with ultrasonic agitation for one minute at 2 mm from the working length and 5 ml of 1% NaOCl. The additional instrument used was the F5 file. In the control group, removal of the medication was performed only with the final instrument (F4) and using 17% EDTA, kept for one minute in the canal without ultrasonic activation. The samples were evaluated by micro-CT, at three different stages of the endodontic procedure: 1) after chemical-surgical preparation of canal 2) 30 days after application of the Ca(OH)2 medication 3) after removal of the medication. Microtomography images were evaluated using the CTan (SkyScan) Software. The root was divided in apical, middle and cervical. Each data set was analyzed using the CTan software gray scale to determine the volume (mm3) of the canal after the preparation, the volume occupied by the medication after 30 days, the medication residue volume and the volume of the canal after medication removal. The residue percentage was also calculated in relation to the volume of the canal and the volume of medication found after 30 days. Finally, the volume increase of the canal after medication removal was also assessed. Data were analyzed using threefactor ANOVA/Tukey test or Kruskal-Wallis/Student-Newman-Keuls with overall significance level of 5% Results: Regardless of the region, the use of ultrasound resulted in a smaller volume of residue in absolute terms and in relation to the volume of the canal. In relation to the volume of medication after 30 days, the use of ultrasound was only marginally significant. The use of an additional instrument showed no statistically significant influence on the effectiveness of MIC removal. The percentage of residue was higher in the apical region, when the ultrasound was not used. In absolute numbers, the cervical region showed the highest volume of residue. In relation to the control group, the use of ultrasound resulted in a higher final volume in the cervical third. All techniques resulted in statistically similar increases in the volume of the surgical canal for the cervical and middle thirds. In the apical third, the control group showed a statistically lower increase in volume than the others thirds. Conclusions: Statistically significant differences were found among the tested techniques, the use of ultrasound resulted in a smaller volume of residue in all groups for a particular third.

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T19:11:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prado_Mairado_D.pdf: 14853217 bytes, checksum: f86be389a870042c299930884a318e11 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: O objetivo do presente trabalho foi avaliar a interação entre as diferentes substâncias químicas auxiliares, utilizadas em endodontia, e seus efeitos nas etapas do tratamento endodôntico. Métodos: Soluções de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 0,16%, 1%, 2,5% e 5,25%, clorexidina 2% solução e gel, EDTA 17%, ácido cítrico 10% e ácido fosfórico 37% foram utilizadas isoladamente ou associadas entre si na proporção 1:1. As mesmas foram analisadas quimicamente por espectrometria de massa; e microbiologicamente pelo método de difusão em ágar, contra diferentes patógenos. Adicionalmente, foram avaliados onze protocolos de irrigação em relação à formação de smear layer química por microscopia eletrônica de varredura. Por fim, foram avaliados 9 protocolos de irrigação associados a dois diferentes sistemas de obturação, guta-percha/ AH Plus e Resilon/ Real Seal SE, em relação à microinfiltração coronária e à resistência de união da dentina aos materiais obturadores. Resultados: O NaOCl, em todas as concentrações, associado à clorexidina em ambas as formulações, levou à formação de precipitado, assim como a associação entre a clorexidina e o EDTA e entre clorexidina e solução salina. Todas as associações avaliadas apresentaram algum grau de inibição contra os patógenos testados. Irrigação intermediária, com 10 mL de água destilada, entre as soluções de NaOCl e clorexidina, não foram capazes de inibir a formação de smear layer química, assim como irrigações com EDTA e ácido cítrico. Dos diferentes protocolos de irrigação avaliados, aqueles que apresentaram uma irrigação final com solução de clorexidina 2% tiveram níveis reduzidos de microinfiltração coronária. Em relação à resistência de união à dentina, no sistema obturador guta-percha/AH Plus, os grupos em que se utilizou as associações NaOCl/ácido fosfórico e clorexidina/EDTA apresentaram maiores valores de resistência de união, ao passo que no sistema Resilon/Real Seal SE, os maiores valores foram encontrados nos grupos clorexidina/ácido fosfórico. A utilização da clorexidina como irrigante final não afetou negativamente os sistemas obturadores avaliados. Conclusões: A interação entre as substâncias químicas auxiliares pode levar à formação de precipitados. As diferentes substâncias químicas auxiliares, quando associadas, possuem atividade antimicrobiana. Irrigações intermediárias entre as diferentes substâncias químicas auxiliares são necessárias para reduzir ou até mesmo impedir a formação de precipitados, visualizados na superfície dentinária como uma smear layer química. Durante o preparo químicomecânico, as diferentes substâncias químicas auxiliares geram modificações na superfície dentinária que influenciam na microinfiltração coronária e na resistência de união dos sistemas obturadores guta-percha/AH Plus e Resilon/Real Seal SE / Abstract: Introduction: The aim of the present study was to evaluate the interaction among different chemical auxiliary substances used in endodontics and their effects on different steps of endodontic treatment. Methods: 0.16%, 1%, 2.5% and 5.25% sodium hypochlorite solutions (NaOCl), 2% chlorhexidine solution and gel, 17% EDTA, 10% citric acid, 37% phosphoric acid, distilled water, and saline solution were used both associated with each other (1:1 ratio) and not associated. The solutions were chemically examined with mass spectrometry. They were microbiologically examined using the Agar Diffusion Method, against different pathogens. In addition, eleven protocols were analyzed in regards to chemical smear layer with scanning electron microscopy. Finally, nine irrigation protocols (associated with two filling systems, i.e. gutta-percha/AH Plus and Resilon / Real Seal SE) were examinated regarding coronal microleakage and were examined as well regarding their bond strength with dentin. Results: NaOCl, at all concentrations, associated with both chlorhexidine formulations, led to precipitate formation, similar to the association between chlorhexidine/EDTA, and the chlorhexidine/saline solution association. All associations had some degree of inhibition against the evaluated pathogens. Intermediate flush, with 10 mL of distilled water, between NaOCl and chlorhexidine did not inhibit chemical smear layer formation, similar to intermediate flushes with EDTA and citric acid. Among the different irrigation protocols that were evaluated, when final flush with 2% chlorhexidine was present, the lowest levels of coronal microleakage were found. Regarding the bond strength to dentin, in the gutta-percha/AH Plus system, the groups with NaOCl/phosphoric acid and chlorhexidine/EDTA associations showed higher bond strength values. In the Resilon/Real Seal SE system, the highest values were found in the chlorhexidine/phosphoric acid groups. The use of chlorhexidine as a final flush did not negatively affect the filling systems evaluated. Conclusions: The interaction among the auxiliary chemical substances may lead to precipitate formation. The association between the different substances has antimicrobial activity. Intermediate flushes are necessary to reduce or even avoid the formation of chemical smear layer on the dentin surface. During the chemo-mechanical preparation, the various auxiliary chemical substances used do modify the dentine surface. These modifications have influence in the coronal microleakage and in the bond strength of the filling systems gutta-percha/AH Plus and Resilon / Real Seal SE / Doutorado / Endodontia / Doutora em Clínica Odontológica

The irrigating solutions used in primary teeth pulpectomies are essential supporters in chemical mechanic preparation, for they come in contact with the dental and periapical tissues, evaluating their biocompatibility is necessary. The aim of this study was to evaluate the in vitro cytotoxicity and genotoxicity of irrigating solutions and pharmacological associations used for sanitizing the root canals of these teeth, by conducting four tests that evaluated the toxicity according to different parameters. Tests of Cell Viability (MTT), Lipid Peroxidation (TBARS), GEMO and Alkaline Comet Assay were performed in the evaluation of major solutions - 1% and 2.5% Sodium Hypochlorite, 2% Chlorhexidine -, auxiliary solutions - 6% Citric Acid and 17% EDTA - and of the associations between major and auxiliary solutions, exposing both human peripheral blood mononuclear cells (MTT, TBARS and Alkaline Comet Assay) in 24h and 72h, and exposing dsDNA, purified calf thymus DNA (GEMO). Data were assessed for normality by Kolmogorov-Smirnov and analyzed by ANOVA followed by post hoc Dunnett's, and Kruskal-Wallis test followed by post hoc Dunn. Values showing p<0.05 were considered statistically significant. Reduction in cell viability was observed in all groups at 24 hours. At 72 hours the reduction has continued, except for EDTA, combinations of (1% and 2.5%) sodium hypochlorite with EDTA (p<0.05) and Chlorhexidine with EDTA (p>0.05). EDTA and 2.5% sodium hypochlorite with EDTA caused lipid peroxidation in 24h, and 1% and 2.5% sodium hypochlorite and three associations with citric acid (p<0.05) had the same effect in 72h. All groups have caused breaks in DNA by Alkaline Comet Assay, 24h and 72h (p<0.05). In the GEMO Test, dsDNA damage was observed in all groups (p<0.05), except for Chlorhexidine with EDTA. Some degree of toxicity was observed in all tested groups. However, Chlorhexidine, among the major solutions, and EDTA, among the auxiliary solutions, were less cytotoxic. Also, the association of these two solutions had less potential toxicity. The results demonstrated the best in vitro biocompatibility in the combination of Chlorhexidine and EDTA. / As soluções irrigantes empregadas na pulpectomia de dentes decíduos são coadjuvantes essenciais no preparo químico mecânico, por entrarem em contato com os tecidos dentários e periapicais, é fundamental a avaliação da biocompatibilidade das mesmas. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a genotoxicidade, in vitro, de soluções irrigantes e associações farmacológicas empregadas na sanificação dos canais radiculares desses dentes, realizando quatro testes que avaliaram a toxicidade analisando diferentes parâmetros. Foram realizados os Testes de Viabilidade Celular (MTT), Peroxidação Lipídica (TBARS), GEMO e Ensaio Cometa Alcalino, na avaliação das soluções principais: Hipoclorito de Sódio 1% e 2,5%, e Clorexidina 2%; e soluções auxiliares: Ácido Cítrico 6% e EDTA 17% e das associações entre as soluções principais e auxiliares, frente às células mononucleadas do sangue periférico humano (MTT, TBARS e Ensaio Cometa Alcalino), em 24h e 72h, e frente ao dsDNA, DNA de timo de bezerro purificado (GEMO). Os dados obtidos foram avaliados quanto à normalidade pelo Kolmogorov-Smirnov e analisados por Anova seguido do post hoc de Dunnett, e Kruskal-Wallis seguido do post hoc de Dunn. Os valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Foi Observado em 24h, redução na viabilidade celular em todos os grupos. Em 72h a redução se manteve, exceto no EDTA, associações do Hipoclorito de Sódio (1% e 2,5%) com EDTA (p<0,05) e Clorexidina com EDTA (p>0,05). Causaram lipoperoxidação em 24h, EDTA e Hipoclorito de Sódio 2,5% com EDTA e, em 72h, Hipoclorito de Sódio (1% e 2,5%) e as três associações com Ácido Cítrico (p<0,05). Todos os grupos causaram quebra no DNA pelo Ensaio Cometa Alcalino, 24h e 72h (p<0,05). No Teste GEMO foi observado dano ao dsDNA em todos os grupos (p<0,05), exceto Clorexidina com EDTA. Foi observado algum nível de toxicidade em todos os grupos testados. Entretanto, a Clorexidina entre as soluções principais, e o EDTA entre as auxiliares, foram menos citotóxicas. Também, a associação dessas duas soluções apresentou menor potencial de toxicidade. A partir dos resultados ficou demonstrado a melhor biocompatibilidade in vitro da associação de Clorexidina e EDTA.

A associação dos irrigantes endodônticos hipoclorito de sódio e clorexidina forma um precipitado amarronzado e subprodutos que podem ser tóxicos aos tecidos periodontais apicais. O objetivo deste trabalho foi de avaliar qualitativamente e quantitativamente a resposta inflamatória destes irrigantes e suas associações em tecido conjuntivo no dorso do rato. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, 220 gr, cuja região dorsal foram confeccionadas quatro feridas cirúrgicas por punch de 08mm que receberam 20 mL dos irrigantes endodônticos, sendo divididos em: soro fisiológico, solução de digluconato de clorexidina a 2%, hipoclorito de sódio a 1% e a 2,5%, mistura de 10mL de hipoclorito de sódio a 1% mais 10mL de clorexidina a 2% e mistura de 10mL de hipoclorito de sódio a 2,5% mais 10mL de clorexidina a 2%. O experimento foi realizado em triplicata e os animais foram sacrificados nos tempos experimentais de 0 (imediato), 24h, 72h e 168h. Os fragmentos foram fixados e corados com hematoxilina e eosina para análise histomorfológica. Para a quantificação celular, cortes histológicos dos grupos de 24, 72 e 168h foram tratados para serem imunomarcados pelos anticorpos para linfócitos CD4 e CD8, e Anti pan-macrófago para marcação de macrófagos. Foram tomadas três fotografias num aumento de 400x de cada lâmina, para serem quantificadas através do software ImageJ. Os dados foram tabulados e submetidos ao teste estatístico ANOVA (dois critérios), com pós-teste de Bonferroni (=0,05), comparando os grupos em função dos marcadores, tempos experimentais e grupos testados. Os resultados obtidos na análise microscópica puderam identificar variações significativas entre os grupos estudados e o controle. Enquanto que no controle não foi verificado um grau de inflamação elevado, nos grupos testados foram observados destruição tecidual, aumento de número e tamanho de vasos, infiltrado inflamatório intenso, edema e início de epitelização até 168h. Na análise quantitativa, foi observado um pico celular em 72h para todos os marcadores (p<0,001). Todos os grupos testados apresentaram níveis celulares maiores que o grupo do soro fisiológico (p<0,001), exceto para o marcador de macrófagos (p>0,05). As associações das substâncias em comparação com as substâncias isoladas não apresentaram diferenças significantes (p>0,05), exceto em 72h no marcador CD4 e com hipoclorito de sódio a 2,5% (p<0,001). Estes resultados foram similares tanto para os grupos individuais bem como nas associações. Pode-se concluir, do ponto de vista biológico, que a associação entre o hipoclorito de sódio e a clorexidina mostraram resposta inflamatória semelhante as substâncias isoladas e que podem ser empregados na terapia endodôntica. / The association of endodontic irrigants sodium hypochlorite and chlorhexidine results in the formation of a brownish precipitate and its byproducts can be toxic to the periodontal tissue. The aim of this study was to evaluate qualitatively and quantitatively the inflammatory response of these drugs and their associations in the connective tissue on the back of the mouse. Four dorsal surgical wounds made by 08mm punch in twenty four male Wistar rats of 220 gr received 20 mL of each endodontic irrigants and were divided into grupos: saline solution, 2% chlorhexidine digluconate, 1% and 2,5% sodium hypochlorite, mixture of 10 ml of 1% sodium hypochlorite plus 10 ml of 2% chlorhexidine and mixture of 10 ml of 2,5% sodium hypochlorite plus 10 ml of 2% chlorhexidine. The test was performed in triplicate, the animals sacrificed at 0h (immediately), 24h, 72h and 168h and the fragments fixed, stained with hematoxylin and eosin for histomorphological analysis. To quantify cells, histological sections from 24, 72 and 168h groups were treated and immunostained by CD4, CD8 lymphocytes and Anti-pan macrophage antibodies. Three pictures were taken in a 400x magnification of each slide and quantified using the ImageJ software. Data was tabulated and submitted to ANOVA (two-way) with Bonferroni post-test (=0.05) comparing the markers, times and experimental groups. The results obtained in the microscopic analysis identified significant differences among the experimental and control groups. In control group there was not high degree of inflammation; in the experimental groups there were tissue destruction, number and size of vessels increased, intense inflammatory infiltration, edema and early epithelialization at 168h. In the quantitative analysis a peak of all cell markers was observed at 72h (p<0.001). All experimental groups showed higher cellular levels than the saline group (p<0.001) except for the macrophages marker groups (p>0.05). The associated or isolated use of the substances showed no significant differences (p> 0.05) except for 72h CD4 marker and with 2.5% sodium hypochlorite group (p<0.001). The results were similar for both individuals and associated groups. In conclusion the association between sodium hypochlorite and chlorhexidine showed inflammatory process similar to isolated substances and therefore it can be utilized in endodontic therapy.

Neste trabalho, foi realizado um estudo crítico dos modelos metodológicos in vivo e in vitro sobre a avaliação microbiológica da clorexidina empregada como agente irrigante e medicação intracanal na terapia endodôntica. Para tanto, foi realizada uma busca sistemática nas bases de dados: Medline, Lilacs e BBO nos últimos dez anos sobre o assunto em questão. Foram selecionados os trabalhos que avaliaram a clorexidina de uma maneira não combinada com outras substâncias ou fármacos, abordando sua utilização tanto como irrigante endodôntico, e como medicação intracanal. Para uma melhor análise, os trabalhos foram agrupados de acordo com a forma de uso e metodologia com seus dados tabulados, respectivamente: Clorexidina como irrigante in vitro, Clorexidina como irrigante in vivo, Clorexidina como medicação intracanal in vitro e Clorexidina como medicação intracanal in vivo. Na análise, pode-se observar a efetividade antimicrobiana da clorexidina como irrigante nos ensaios laboratoriais e clínicos, sendo nas formas de gel e líquida com variação na concentração de 0.2 a 2%. Quanto o uso da clorexidina como medicação intracanal, pode ser constatada sua atividade antimicrobiana em ambos ambientes experimentais, embora com poucos trabalhos in vivo, seu desempenho foi observado apresentando largo espectro de ação quando utilizada a 2% em gel por um período de sete dias. / In this essay, it was realized a critical study of the methodological models, in vivo and in vitro, about the microbiological assessment of the chlorhexidine employed as root canal irrigants and dressing in the Endodontics. A systematic search was carried out on the databases: Medline, Lilacs and BBO from the last ten years concerning the respective subject. There were selected the papers which evaluated the chlorhexedine as an individual group, without joined to another substances or drugs, broaching its application as root canal irrigants as much as dressing. For improved analyzed, the investigations were divided according its way of use and methodology, with its data tabulated in the respective way: Chlorhexidine as irrigant in vitro, Chlorhexidine as irrigant in vivo, Chlorhexidine as intracanal dressing in vitro and Chlorhexidine as intracanal dressing in vivo. At the analysis, it can be observed the antimicrobial effectiveness of the chlorhexidine as irrigant in the clinical and laboratories tests, being the gel and liquid form with concentration changed from 0.2 to 2%. About the chlorhexidine as root canal dressing, it can be evidenced its antimicrobial activity in both experimental methods, although a few trials in vivo, its performance was observed showing a large spectral action when used in 2% gel for a period of seven days.

Orientador: Marcia Carneiro Valera / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Banca: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Resumo: O presente estudo teve como objetivo detectar espécies bacterianas, quantificar microrganismos e endotoxinas em canais radiculares com insucesso endodôntico e presença de lesão periapical, correlacionando-os com os sinais e sintomas clínicos e, avaliar a ação do hipoclorito de sódio 1% e extrato glicólico de gengibre 20% sobre estes microrganismos e endotoxinas. Foram selecionados para o estudo dez dentes tratados endodonticamente com lesões periapicais persistentes que foram divididos em 2 grupos (n=5), de acordo com a substância química auxiliar utilizada durante o preparo biomecânico (PBM): hipoclorito de sódio 1% e extrato glicólico de gengibre 20% intercalado com solução salina fisiológica. Foram realizadas coletas do conteúdo do canal radicular imediatamente após a desobturação do dente, imediatamente após a instrumentação e, imediatamente após 14 dias da ação da medicação intracanal (MIC) de hidróxido de cálcio. Para todas as coletas foram realizados os seguintes testes: a) avaliação da atividade antimicrobiana por cultura microbiológica e através do método molecular - PCR; b) quantificação de endotoxinas verificada pelo lisado de amebócitos de Limulus. Os resultados foram submetidos a análise estatística de Wilcoxon e Mann-Whitney e mostraram que tanto o PBM quanto à MIC foram capazes de reduzir a quantidade de microrganismos e de endotoxinas, independente da solução utilizada. No entanto, endotoxinas não foram completamente neutralizadas. Espécies de E. faecalis, T. denticola, T. forsythia, P. endodontalis, P. gingivalis, P. nigrescens, P. intermedia, P. micra foram detectadas nos canais radiculares. Observou-se correlação positiva entre a quantidade de endotoxinas e o diâmetro das lesões. Concluiuse que as substâncias testadas foram eficazes na redução de microrganismos e de endotoxinas / Abstract: The aim of the present study was to detect bacterial species, quantify microorganisms and endotoxins within failed root canals presenting periapical lesion, to correlate them with clinical signs and symptoms, and to evaluate the effect of 1% sodium hypochlorite and 20% glycolic ginger extract on microorganisms and endotoxins. Ten endodontically treated teeth presenting persistent periapical lesion were selected for this study and divided into 2 groups (n=5), according to the auxiliary chemical substance employed during the biomechanical preparation (BMP): 1% sodium hypochlorite and 20% glycolic ginger extract interposed with saline solution. Root canal contents were collected right after root canal filling removal, right after instrumentation, and 14 days of calcium hydroxide intracanal medication (ICM) activity. The following tests were performed for every collection: a) antimicrobial activity evaluation by means of microbiologic culture and molecular biology - PCR; b) endotoxins quantification assessed by Limulus amebocyte lysate. The results were submitted to statistical analysis by Wilcoxon and Mann-Whitney tests. Both BMP and ICM were able to reduce microorganisms and endotoxins quantity, regardless the employed solution. However, endotoxins were not completely neutralized. E. faecalis, T. denticola, T. forsythia, P. endodontalis, P. gingivalis, P. nigrescens, P. intermedia, P. micra species were detected within root canals. A positive correlation was detected for the endotoxin quantity and the diameter of lesion. It can be concluded the tested substances were efficient for endotoxin and microorganisms reduction / Mestre