Thesis (MS)--Montana State University--Bozeman, 2010. / Typescript. Chairperson, Graduate Committee: A. Michael Babcock. Includes bibliographical references (leaves 44-47).

Thesis (M.Sc.)--York University, 2009. Graduate Programme in Higher Education. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 76-87). Also available on the Internet. MODE OF ACCESS via web browser by entering the following URL: http://gateway.proquest.com/openurl?url_ver=Z39.88-2004&res_dat=xri:pqdiss&rft_val_fmt=info:ofi/fmt:kev:mtx:dissertation&rft_dat=xri:pqdiss:MR51589

Thesis (Ph.D.) - University of Queensland, 2003. / Includes bibliography.

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2005. / The entire dissertation/thesis text is included in the research.pdf file; the official abstract appears in the short.pdf file (which also appears in the research.pdf); a non-technical general description, or public abstract, appears in the public.pdf file. Vita. "May, 2005" Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of California, San Diego and San Diego State University, 2006. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 90-106).

Thesis (M. Phil.)--University of Hong Kong, 2006. / Title proper from title frame. Also available in printed format.

Introdução: Imunidade inata é a primeira linha de defesa do hospedeiro contra microorganismos invasores, a qual é mediada por moléculas específicas que reconhecem patógenos, chamadas receptores toll-símile (TLRs). Os TLRs são também capazes de reconhecer ligantes endógenos, tais como conteúdos de células necróticas e proteínas de choque térmico (HSP), resultando na produção de citocinas e ativação do sistema imune adquirido. A função exata dos TLRs ainda é pouco entendida em transplante de órgãos. No entanto, tem sido sugerido que eles podem estar envolvidos na rejeição aguda ou crônica e atuar na resposta do enxerto a lesão por isquemia e reperfusão. Objetivo: Examinar as alterações na expressão gênica dos TLRs durante a fase inicial do transplante pulmonar em humanos e sua relação com citocinas potencialmente envolvidas na lesão por isquemia e reperfusão em transplante de órgãos. Métodos: Foram analisadas biópsias pulmonares de 14 pacientes submetidos a transplante pulmonar (LTx). Estas amostras foram coletadas no final do período de isquemia fria (TIF, n=14), no final do período de isquemia quente (TIQ, n=13),1 hora (n=12) e 2 horas (n=8) após a reperfusão do enxerto. RNA total foi isolado a partir de tecido pulmonar e os níveis de RNA mensageiro (mRNA) dos TLRs (1-10) bem como citocinas (IL-8, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-1β) e proteína de choque térmico 70 (HSP70) foram medidos por reação em cadeia pela polimerase em tempo real. Resultados: Foi detectada a expressão de mRNA de todos TLRs em tecido pulmonar. Nas amostras no TIF, os níveis de mRNA dos TLRs apresentaram-se com diferentes expressões gênicas. Os níveis de expressão dos TLRs, com exceção para o TLR3, estavam altamente correlacionados entre si no TIF e com os níveis de mRNA de IFN-γ, IL-10 e IL-1β e menos significativamente com os níveis de IL-6 e IL-8. Houve diminuição dos níveis de mRNA na grande maioria dos TLRs após reperfusão, o que foi diferente para a maioria das citocinas e HSP70, que apresentaram tendência a aumentar após transplante. A expressão gênica de TLR4 apresentou-se correlacionada com os níveis de IL-8 e IL-1β antes e após transplante (P<0.05). Pulmões de doadores que foram intubados por períodos acima de 72 horas (n=5) apresentaram níveis mais elevados de TLR2 e TLR10 (P<0.05). Conclusão: Pela primeira vez, foi demonstrado que a expressão dos TLRs altera-se durante o período de isquemia e reperfusão em transplante pulmonar em humanos. O tempo de intubação dos doadores pulmonares pode influenciar a expressão de receptores Toll-símile específicos. A correlação entre TLR4 e IL-8/IL-1β sugere que os TLRs pulmonares podem ter alguma função na resposta precoce do enxerto. / Introduction: Innate immunity is the first line of host defense against invading microorganisms, which is mediated by specific pathogen recognition molecules called Toll-like receptors (TLRs). TLRs can also recognize endogenous ligands, such as contents of necrotic cells and heat shock proteins (HSP), resulting in cytokine production and activation of adaptive immune system. The exact role of the Toll-like receptors and their signalling pathways is still poorly understood in organ transplantation. However, it is suggested that they may be involved in either chronic or acute organ rejection and may play a role in graft response to ischemia reperfusion injury. Objective: To examine the changes in gen expression of TLRs during the early phase of human lung transplantation and their relationship with cytokines potentially involved in ischemia reperfusion injury in organ transplantation. Methods: We analyzed lung biopsies from 14 patients submitted to lung transplantation (LTx). Biopsies were collected at the end of the cold ischemic time (CIT, n=14), end of warm ischemic time (WIT, n=13), and after 1h (n=12) and 2h (n=8) of reperfusion. Total RNA was isolated from lung tissues, and messenger RNA (mRNA) levels of TLRs (TLR 1-10) as well as cytokines (IL-8, IL-6, IL-10, IFN-γ and IL-1β) and heat shock protein 70 (HSP70) were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: We observed mRNA expression of all TLRs in lung tissue. In the CIT samples, TLR mRNAs levels were differentially expressed in donor samples. In the CIT samples, the expression levels of TLRs, except for TLR3, were highly correlated with each other and with mRNA levels of IFN-γ, IL-10 and IL-1β, and less significantly correlated with IL-6 and IL-8. After reperfusion, expression of almost all TLR mRNAs decreased to lower levels what was different for most of the cytokines and HSP70, which trended to increase after LTx. TLR4 gen expression was closely correlated with IL-8 and IL-1β levels prior to and after LTX (P<0.01). Lungs from donors who were intubated longer than 72 h (n=5) expressed higher levels of TLR2 and TLR10 (P<0.05). Conclusion: For the first time, we showed that the expression of TLRs is altered during ischemia-reperfusion period of human lung transplantation. The donor length of intubation may influence the expression of specific TLRs. Correlation between TLR4 and IL-8/IL-1β suggests that pulmonary TLRs may play a role in early graft response.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-22Bitstream added on 2014-06-13T20:41:25Z : No. of bitstreams: 1 costa_ns_dr_jabo.pdf: 657826 bytes, checksum: ea3cd1fea9c1ec9dc87c6c0888f96d4d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A síndrome abdômen agudo é uma das principais doenças dos eqüinos, colocando em risco a vida do paciente quando não se institui rapidamente um tratamento adequado. Com o incremento de informações sobre lesões isquêmicas difundiu-se o conceito de que a reperfusão nestes tecidos, apesar de essencial para prevenir a morte celular por anoxia, induz efeito paradoxal de agravamento das lesões pré-existentes, o que se denomina lesão de reperfusão. Os glicocorticóides representam uma alternativa terapêutica para o tratamento das lesões de reperfusão. No estudo proposto foram utilizados 15 eqüinos adultos, machos e fêmeas, sem alterações clínicas aparentes, distribuídos aleatoriamente em três grupos de cinco animais, sob neuroleptoanalgesia e anestesia local, submetidos ou não à obstrução experimental do jejuno, mediante a colocação de um balão intraluminal, , para reproduzir a isquemia intestinal o quadro de abdômen agudo. Os eqüinos do grupo I foram submetidos a todas as manobras cirúrgicas aplicadas aos dos outros grupos, exceto a distensão do balão para provocar obstrução; os do grupo II foram submetidos à isquemia do jejuno durante 4 horas; e os grupo III foram submetidos à isquemia de 4 horas, seguida de tratamento com hidrocortisona uma hora antes da desobstrução. Para os exames laboratoriais, foram obtidas amostras de material biológico em quatro momentos: uma hora antes do procedimento cirúrgico e aplicação da neuroleptoanalgesia (M1), ao final da isquemia (M2) e uma hora (M3) e 18 horas (M4) após o início da reperfusão. Para a verificação de lesões à distância, as amostras de diversos órgãos foram colhidas na ocasião da necropsia ao término do experimento. / The acute abdomen syndrome is a common equine’s disease, which goes on risk the patient when a correct treatment is not established. The reperfusion in ischemical tissues, despite it is essential in preventing cell death by anoxia, leads a paradoxical effect in worsing the pre-existed lesions, was spread and its called reperfusion lesion. Glucocorticoids represents an alternative to treatment of reperfusion’s lesions. In the proposed study, were used 15 adults horses, male or female, without clinical apparent changes, distributed ramdonly in three groups of five animals. These animals were submitted or not to jejuni experimental obstruction through intraluminal ballon, under tranquilization and local anesthesia to imitate acute abdomen. The group I was submitted to surgical procedures, except the distention of the balloon to induce obstruction; the group II was submitted to jejuni’s ischemia for 4 hours and the group III was submitted to jejuni’s ischemia for 4 hours followed by hydrocortisone treatment one hour before desobstruction. For laboratorial tests, samples of biological material were obtained in four moments: one hour before surgical procedure and practice of drugs (M1), in the end of ischemia (M2) and one hour (M3) and 18 hours (M4) after the beginning of reperfusion. To verify distant lesions, samples of many organs were collected in the necropsy at the end of experiment.

Introdução: Imunidade inata é a primeira linha de defesa do hospedeiro contra microorganismos invasores, a qual é mediada por moléculas específicas que reconhecem patógenos, chamadas receptores toll-símile (TLRs). Os TLRs são também capazes de reconhecer ligantes endógenos, tais como conteúdos de células necróticas e proteínas de choque térmico (HSP), resultando na produção de citocinas e ativação do sistema imune adquirido. A função exata dos TLRs ainda é pouco entendida em transplante de órgãos. No entanto, tem sido sugerido que eles podem estar envolvidos na rejeição aguda ou crônica e atuar na resposta do enxerto a lesão por isquemia e reperfusão. Objetivo: Examinar as alterações na expressão gênica dos TLRs durante a fase inicial do transplante pulmonar em humanos e sua relação com citocinas potencialmente envolvidas na lesão por isquemia e reperfusão em transplante de órgãos. Métodos: Foram analisadas biópsias pulmonares de 14 pacientes submetidos a transplante pulmonar (LTx). Estas amostras foram coletadas no final do período de isquemia fria (TIF, n=14), no final do período de isquemia quente (TIQ, n=13),1 hora (n=12) e 2 horas (n=8) após a reperfusão do enxerto. RNA total foi isolado a partir de tecido pulmonar e os níveis de RNA mensageiro (mRNA) dos TLRs (1-10) bem como citocinas (IL-8, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-1β) e proteína de choque térmico 70 (HSP70) foram medidos por reação em cadeia pela polimerase em tempo real. Resultados: Foi detectada a expressão de mRNA de todos TLRs em tecido pulmonar. Nas amostras no TIF, os níveis de mRNA dos TLRs apresentaram-se com diferentes expressões gênicas. Os níveis de expressão dos TLRs, com exceção para o TLR3, estavam altamente correlacionados entre si no TIF e com os níveis de mRNA de IFN-γ, IL-10 e IL-1β e menos significativamente com os níveis de IL-6 e IL-8. Houve diminuição dos níveis de mRNA na grande maioria dos TLRs após reperfusão, o que foi diferente para a maioria das citocinas e HSP70, que apresentaram tendência a aumentar após transplante. A expressão gênica de TLR4 apresentou-se correlacionada com os níveis de IL-8 e IL-1β antes e após transplante (P<0.05). Pulmões de doadores que foram intubados por períodos acima de 72 horas (n=5) apresentaram níveis mais elevados de TLR2 e TLR10 (P<0.05). Conclusão: Pela primeira vez, foi demonstrado que a expressão dos TLRs altera-se durante o período de isquemia e reperfusão em transplante pulmonar em humanos. O tempo de intubação dos doadores pulmonares pode influenciar a expressão de receptores Toll-símile específicos. A correlação entre TLR4 e IL-8/IL-1β sugere que os TLRs pulmonares podem ter alguma função na resposta precoce do enxerto. / Introduction: Innate immunity is the first line of host defense against invading microorganisms, which is mediated by specific pathogen recognition molecules called Toll-like receptors (TLRs). TLRs can also recognize endogenous ligands, such as contents of necrotic cells and heat shock proteins (HSP), resulting in cytokine production and activation of adaptive immune system. The exact role of the Toll-like receptors and their signalling pathways is still poorly understood in organ transplantation. However, it is suggested that they may be involved in either chronic or acute organ rejection and may play a role in graft response to ischemia reperfusion injury. Objective: To examine the changes in gen expression of TLRs during the early phase of human lung transplantation and their relationship with cytokines potentially involved in ischemia reperfusion injury in organ transplantation. Methods: We analyzed lung biopsies from 14 patients submitted to lung transplantation (LTx). Biopsies were collected at the end of the cold ischemic time (CIT, n=14), end of warm ischemic time (WIT, n=13), and after 1h (n=12) and 2h (n=8) of reperfusion. Total RNA was isolated from lung tissues, and messenger RNA (mRNA) levels of TLRs (TLR 1-10) as well as cytokines (IL-8, IL-6, IL-10, IFN-γ and IL-1β) and heat shock protein 70 (HSP70) were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: We observed mRNA expression of all TLRs in lung tissue. In the CIT samples, TLR mRNAs levels were differentially expressed in donor samples. In the CIT samples, the expression levels of TLRs, except for TLR3, were highly correlated with each other and with mRNA levels of IFN-γ, IL-10 and IL-1β, and less significantly correlated with IL-6 and IL-8. After reperfusion, expression of almost all TLR mRNAs decreased to lower levels what was different for most of the cytokines and HSP70, which trended to increase after LTx. TLR4 gen expression was closely correlated with IL-8 and IL-1β levels prior to and after LTX (P<0.01). Lungs from donors who were intubated longer than 72 h (n=5) expressed higher levels of TLR2 and TLR10 (P<0.05). Conclusion: For the first time, we showed that the expression of TLRs is altered during ischemia-reperfusion period of human lung transplantation. The donor length of intubation may influence the expression of specific TLRs. Correlation between TLR4 and IL-8/IL-1β suggests that pulmonary TLRs may play a role in early graft response.

Master of Science / Department of Kinesiology / Steven Copp / Mechanical and metabolic signals arising during skeletal muscle contraction reflexly increase sympathetic nerve activity and blood pressure (i.e., the exercise pressor reflex). In a rat model of simulated peripheral artery disease (PAD) in which a femoral artery is chronically (~72 hours) ligated, the mechanically-sensitive component of the exercise pressor reflex during 1 Hz dynamic contraction is exaggerated compared to that found in normal rats. Whether this is due to an enhanced acute sensitization of mechanoreceptors by metabolites produced during contraction or involves a chronic sensitization of mechanoreceptors is unknown. To investigate this issue, in decerebrate, unanesthetized rats we tested the hypothesis that the increases in mean arterial blood pressure (MAP) and renal sympathetic nerve activity (RSNA) during 1 Hz dynamic stretch are larger when evoked from a previously “ligated” hindlimb compared to those evoked from the contralateral “freely perfused” hindlimb. Dynamic stretch provided a mechanical stimulus in the absence of contraction-induced metabolite production that replicated closely the pattern of the mechanical stimulus present during dynamic contraction. We found that the increases in MAP (freely perfused: 14±1, ligated: 23±3 mmHg, p=0.02) and RSNA were significantly greater during dynamic stretch of the ligated hindlimb compared to the increases during dynamic stretch of the freely perfused hindlimb. These findings suggest that the exaggerated mechanically-sensitive component of the exercise pressor reflex found during dynamic muscle contraction in this rat model of simulated PAD involves a chronic sensitizing effect of ligation on muscle mechanoreceptors and cannot be attributed solely to acute contraction-induced metabolite sensitization.