Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Banca: Alexandre Secorun Borges / Banca: Eliane Melo Brolazo / Resumo: Na égua o ambiente uterino saudável não apresenta microflora, diferente da vagina onde se sabe existir uma flora vaginal rica em microrganismos não patogênicos. Muitas bactérias da flora vaginal normal podem ser deslocadas para o interior do útero, podendo ser esta a causa principal de endometrites em éguas doadoras de embriões. A presença de Lactobacillus spp é considerada importante na flora vaginal de mulheres e tem sido pouco investigada em éguas. O presente trabalho tem como objetivo estudar a flora vaginal de éguas, doadoras de embriões, determinar os principais microrganismos presentes, relacionar os achados microbiológicos vaginais e uterinos, assim como determinar a prevalência de Lactobacillus. No experimento 1 foram utilizadas 77 éguas doadoras de embrião, 33 foram coletadas amostras vaginais e uterinas e 77 apenas vaginais. O experimento 2 contou com dois grupos (36 éguas e 10 mulheres) de swabs vaginais sendo um para cultivo e isolamento de Lactobacillus e outro para extração do DNA e PCR. As bactérias predominantes na vagina foram: Streptococcus zooepidemicus (42%), Escherichia coli (25%), Streptococcus alfa hemolítico (15%) Candida (6%), Enterobacter spp (3%), Bacillus spp (3%), Streptococcus beta hemolítico (3%) e Pseudomonas (3%).. Das 33 amostras coletadas do útero de éguas somente 39% (n=12) não apresentaram crescimento bacteriano ou fúngico. Tendo sido Streptococcus zooepidemicus o mais frequentemente encontrado (26%), seguido de Escherichia coli (15%), Candida spp (9%), Streptococcus alfa hemolítico (6%) e Enterobacter (3%). Os microrganismos isolados da vagina e que estavam concomitantemente presentes no útero de éguas foram: Streptococcus zooepidemicus (21%), Escherichia coli (12%), Candida spp (9%) e Streptococcus alfa hemolítico (6%). Em 83,3% houve concordância entre as amostras negativas na vagina e no útero (p <0,05). Em 73,7% ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Different from the vagina, were a rich microflora is present, the uterine environment is considered free of microorganisms. One possibility for the installation of endometritis in mares is the ascendent contamination from the vagina.The presence of Lactobacillus on vaginal flora is considered important in woman however there is few information on mares. The present experiment aimed to study the vaginal microflora of embryo donnor mares, to correlate the vaginal and uterine finds and also to determine the prevalence of Lactobacillus on vaginal envirioment. On experiment 1 a total of 77 mares were used and vaginal samples collected from 33 of these mares both vaginal and uterine samples were collected. On experiment 2 vaginal swabs from 36 mares and 10 women were collected for culture and isolation of Lactobacillus, DNA extration and PCR. The predominate bacteria isolated from the vagina were: Streptococcus zooepidemicus (42%), Escherichia coli (25%), Streptococcus alfa hemolítico (15%) Candida (6%), Enterobacter spp (3%), Bacillus spp (3%), Streptococcus beta hemolítico (3%) e Pseudomonas (3%). From 33 samples collected from the uterus only 39% (n= 12) did not show any microorganism on culture. Streptococcus zooepidemicus was the most frequent isolated microorganism (26%), followed by Escherichia coli (15%), Candida spp (9%), Streptococcus alfa hemolítico (6%) e Enterobacter (3%). When evaluated the microorganisms isolated from both vaginal and uterine samples Streptococcus zooepidemicus (21%), Escherichia coli (12%), Candida spp (9%) e Streptococcus alfa hemolytic (6%) were the most frequent isolated bacteria. The agreement between swabs taken from both uterus and vagina was 83.3% (p <0,05) for negative cultures and 73,7% for positive cultures (p <0,05). From 35 samples collected on group I Lactobacillus spp was isolated in only two (5,7%) eight (20%) samples showed positive ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Raphael Lucio Andreatti Filho / Banca: Adriano Sakai Okamoto / Banca: Marcelo Vasconcelos Meireles / Resumo: Na indústria avícola, o uso de Lactobacillus spp. como probiótico tem se mostrado freqüente e com resultados satisfatórios. A seleção de lactobacillus para uso como probióticos é realizada pela avaliação de seus produtos de metabolismo, bem como pelo seu potencial de adesão ao epitélio intestinal e efeito imunomodulatório. Este estudo teve como objetivo caracterizar a adesão in vitro e in vivo e efeito imunomodulatório de cepas de Lactobacillus isolados de aves. As amostras de Lactobacillus foram isoladas de aves de 35 semanas, identificadas por métodos bacteriológicos clássicos, confirmadas por meio de PCR e sua adesão foi avaliada in vitro com o uso de matriz celular tipo BMM e in vivo através da marcação por CFDA SE, inoculação em aves de um dia e coletas de duodeno, jejuno, íleo e cecos nos tempos de uma, quatro, 12 e 24 h após inoculação. As cinco cepas com maior adesão formaram um pool (PL) para avaliação de sua imunomodulação através da mensuração da concentração de IgA e IgG em soro e lavado intestinal. As aves foram divididas em grupos de acordo com o esquema de inoculação: grupo 1 (G1) tratado com Lactobacillus no segundo dia de vida e desafiado um dia depois (terceiro dia de vida) com Salmonella Enteritidis (SE) e novamente tratado com PL no quarto dia de vida; Grupo 2 (G2) Tratado com PL no segundo e no quarto dia de vida; Grupo 3 (G3) desafiado com SE no terceiro dia de vida; Grupo 4 (G4) controle negativo. Coletas aconteceram nos períodos de 7, 14, 21, 28 e 35 dias após a primeira inoculação. Os resultados encontrados demonstram uma maior adesão das cepas em ceco e uma importante correlação dos resultados in vitro com os in vivo. Conclui-se que a utilização de BMM representa uma importante técnica para triagem de amostras para posterior avaliação in vivo e a marcação com ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In the aviculture industry, the use of Lactobacillus spp. as a probiotic has been shown to be frequent and satisfactory. Lactobacillus is selected for probiotic use by evaluating its metabolism products and assessing its potential adhesion to intestinal epithelium and immunomodulatory effect. This study aimed to characterize the in vitro and in vivo adhesion and immunomodulatory effect of Lactobacillus strains isolated from birds. Lactobacillus samples isolated from 35-week-old birds were identified by classical bacteriological methods and confirmed by PCR; their adhesion was evaluated in vitro via BMM-type cell matrix and in vivo, through CFDA SE staining, inoculation in one-day-old birds and , duodenum, jejunum, ileum and cecum collections at one, four 12 and 24 hours after inoculation. The five best adhesive samples formed a pool (PL) for IgA and IgG measurement in serum and instestinal fluid. The birds were divided into groups by inoculation scheme: group 1 (G1) treated with LP on day two of life and challenged one day later (third day of life) with Salmonella Enteritidis (SE) and treated again with LP at four days; Group 2 (G2) Treated with LP on the second and fourth day of life; Group 3 (G3) challenged with SE at day three of life; Group 4 (G4) negative control. Collections were taken 7, 14, 21, 28 and 35 days after the first inoculation. The results demonstrate greater adhesion of strains in the cecum and an important correlation between in vitro and in vivo results. It is concluded that BMM utilization represents an important technique for triage of samples for subsequent in vivo evaluation and that CFDA SE staining is efficient for identifying this bacterial characteristic. The Lactobacillus-treated groups, G1 and G2, presented the highest IgA concentrations at the end of the experiment, 12,054.6 and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Resumo: O trato gastrointestinal possui enorme variedade de bactérias aeróbias e anaeróbias, metabolicamente ativas, que interagem entre si em complexo ecossistema. Essa microbiota desempenha funções importantes no metabolismo, nutrição, imunidade e proteção contra a colonização por microrganismos patogênicos. Vários fatores podem influenciar essa microbiota, entre eles a idade, dieta, processos inflamatórios e infecciosos e utilização de antimicrobianos. Assim, este estudo foi desenvolvido com o objetivo de verificar a influência das infecções bacterianas do trato respiratório e do tratamento com amoxicilina sobre a microbiota intestinal normal do paciente. O processo infeccioso bacteriano do trato respiratório influenciou a microbiota intestinal dos pacientes. Houve redução significativa na quantidade de UFC/g de fezes de microrganismos dos gêneros Bacteroides e Lactobacillus. A utilização de amoxicilina também influenciou a microbiota intestinal. Foi observada redução significativa na quantidade de UFC/g de fezes de microrganismos dos gêneros Bifidobacterium e Lactobacillus. É importante identificar modificações na composição da microbiota intestinal, uma vez que a diminuição destes microrganismos pode representar diversos prejuízos para o hospedeiro. Um destes prejuízos é a diminuição da resistência à colonização. Esses prejuízos, quando acompanhados, podem ser minimizados pela equipe de saúde por meio de medidas relativas à conduta terapêutica e alimentar, visando reduzir a influência nociva sobre o ecossistema gastrointestinal. / Abstract: The gastrointestinal tract contains an enormous variety of metabolically active aerobic and anaerobic bacteria, that interact with each other in a complex ecosystem. That microbiota carries out important functions in the metabolism, nutrition, immunity and protection against the colonization by pathogenic microorganisms. Several factors can influence this microbiota, among them are age, diet, inflammatory and infectious processes and use of antimicrobial agents. Thus, this study was developed with the objective of verifying the influence of the bacterial infections of the respiratory tract and of the treatment using amoxicillin on the patient's normal intestinal microbiota. The bacterial infectious process of the respiratory tract influenced the patients' intestinal microbiota. There was significant reduction in the amount of CFU/g of feces of microorganisms of the Bacteroides and Lactobacillus genus. The use of amoxicillin also influenced the intestinal microbiota. Significant reduction was observed in the amount of CFU/g of feces of microorganisms of the Bifidobacterium and Lactobacillus genus. It is important to identify modifications in the composition of the intestinal microbiota, once the decrease of these microorganisms can cause damage to the host. One of these damages is the decrease in the resistance to the colonization. Those damages, when accompanied, can be minimized by the health staff using measures related to the therapeutic and alimentary conduct, seeking to reduce the noxious influence on the gastrointestinal ecosystem. / Doutor

Resumo: Crianças com anemia falciforme são submetidas à terapia antibiótica profilática prolongada com penicilina. Pouco se sabe a respeito dos efeitos desta terapia sobre a microbiota bucal. O objetivo do estudo foi avaliar a microbiota cariogênica, fluxo e capacidade tampão salivar de pacientes pediátricos com anemia falciforme, determinando o risco de cárie. Além disso, avaliar a microbiota fúngica nestes pacientes em relação ao grupo controle. Foi coletada saliva estimulada de 25 crianças (4 a 11 anos) com anemia falciforme (genótipo SS), de ambos os gêneros. Um grupo controle pareado quanto à idade e gênero foi incluído. Foi realizado exame clínico para verificação do índice ceo-d/CPO-D; o fluxo salivar e a capacidade tampão salivar foram avaliados. Alíquotas de saliva e diluições foram semeadas em meios seletivos para estreptococos do grupo mutans, lactobacilos e leveduras. Após a incubação, o número de UFC/mL de saliva foi calculado. Amostras de leveduras foram isoladas, e identificadas pelo sistema API 20C AUX, além de PCR específico para C. dubliniensis. Os dados obtidos por meio do questionário, dados salivares e microbiológicos foram analisados pelo software Cariograma. Os resultados foram comparados pelo teste t de Student, teste Z e Mann-Whitney. Não foi observada diferença estatisticamente significativa para o fluxo (p = 0,097) e capacidade tampão salivar (p = 0,103) entre os grupos de estudo. A contagem de leveduras foi significativamente mais elevada no grupo de estudo (p = 0,017). As contagens de estreptococos do grupo mutans e lactobacilos não diferiram significativamente entre o grupo teste e o grupo controle (p = 0,741 e p = 0,423, respectivamente). Considerando estes resultados em conjunto com os demais parâmetros avaliados, concluiu-se que o risco de cárie entre os grupos não diferiu (p = 0,762). No grupo de estudo foram identificados:... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Children with sickle cell anemia are under long term prophylactic antibiotic treatment with penicillin. Little is known about the effects of this therapy on oral microbiota. The aim of the study was to evaluate the cariogenic microbiota, salivary flow rate and buffering capacity of pediatric patients with sickle cell anemia, to delineate a profile of caries risk. Also, the study aimed to evaluate the fungal microbiota in these patients in relation to control individuals. Sample of stimulated saliva from 25 children (aged 4 - 11) with sickle cell anemia (genotype SS) and both genders was collected. A matched control group was included. Intra-oral examination to determine dmft/DMFT index; salivary flow rate and buffering capacity evaluation were performed. Aliquots of saliva and its dilutions were plated onto selective media to mutans streptococci, lactobacilli and yeasts. After the incubation (37ºC, 48h, 5% CO2 to mutans streptococci), the value of cfu/ml of saliva was calculated. Strains of yeasts were isolated, and identified by API 20C AUX and C. dubliniensis by PCR. Data obtained by a questionnaire, salivary and microbiological data were analyzed by Cariogram program. The results were compared by Student's t test, Z test and Mann-Whitney. No significant difference were observed for the salivary flow (p = 0.097) and salivary buffering capacity (p = 0.103) of the studied groups. Counts of yeasts were significantly higher in the study group (p = 0.017). Counts of mutans streptococci and lactobacilli were not different between test and control groups (p = 0.741 e p = 0.423, respectively). Considering these results and the other parameters studied, it could be concluded that the caries risk between the groups was not different (p = 0. 762). In the study groups the following Candida species were identified: C. albicans, C. dubliniensis, C. famata, C. rugosa, C. sphaerica... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Cristiane Yumi Koga Ito / Coorientador: Josefina Aparecida Pellegrini Braga / Banca: Maria Stella Figueiredo / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Mestre

Orientador: Nemre Adas Saliba / Banca: Doris Hissako Sumida / Banca: Eduardo Guedes Pinto / Resumo: Na Odontologia atualmente têm-se enfatizado a prática de técnicas menos invasivas para a remoção de tecido cariado, que preservem ao máximo as estruturas dentárias. O interesse clínico e laboratorial por essas técnicas tem aumentado em função da realização de estudos que comprovaram a eficácia da remoção manual de dentina infectada, bem como as vantagens da técnica conservadora e indolor. O objetivo desse estudo foi analisar e comparar os tratamentos mecânico manual (ART convencional) e químico-mecânicos (CarisolvTM e Papa-cárie®) na remoção de dentina cariada, por meio da contagem de Streptococcus mutans e Lactobacillus e avaliação clínica de sintomatologia dolorosa durante o procedimento restaurador. Para a realização do presente estudo foram selecionadas 32 crianças, de ambos os sexos, com idade entre 6 e 10 anos, que apresentavam no mínimo dois molares decíduos, com exposição de dentina cariada. As crianças foram divididas aleatoriamente em dois grupos homogêneos, totalizando 64 dentes. O grupo I foi submetido à remoção mecânica em um elemento dental e em outro dente a químico-mecânica com o uso de Carisolv e o grupo II, a remoção mecânica e a químico-mecânica com o uso do Papacárie®. Durante a realização dos tratamentos foram feitas coletas de dentina, antes e após a remoção de tecido cariado e aplicação de um questionário para a avaliação clínica. Posteriormente, foram realizadas diluições seriadas e cultivo das amostras em meios específicos, Mitis salivarius bacitracina sacarose para a contagem de Streptococcus mutans e Rogosa, para contagem de Lactobacillus ssp. Após o período de incubação, a 37º C e 72 horas, foi realizada a contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) e obtidos os valores médios do número de bactérias. / Abstract: In Dentistry, nowadays, it has been emphasizing the practice of techniques less invasive for the removal of decayed tissue that preserve the maximum the dental structure. The clinical laboratorial interest for those techniques have been increasing due to studies that proved the effectiveness of the manual removal of infected dentine, as well as the advantages of the conservative and painless technique. The objective of this study was to analyze and to compare the manual mechanic (conventional ART) and chemical-mechanic (Carisolv and Papa-carie®) treatments in the removal of decayed dentine, through the score of Streptococcus mutans and Lactobacillus and clinical evaluation of pain symptoms during the restorative procedure. For the performance of the present study 32 children were selected, of both genders, with age between 6 and 10 years that presented at least two deciduous molars, with exhibition of decayed dentine. The children were divided at random in two groups, summing 64 teeth. The group I was submitted to the mechanical and chemical-mechanical removal with the use of Carisolv and the group II, mechanical and chemical-mechanic removal with Papacárie®. During the performance of the treatments, dentine sample were collected, before and after the removal of decayed tissue and application of a questionnaire for the clinical evaluation. Later, it was carried out seriate dilutions and cultivation of the samples in Mitis- salivarius bacitracin sucrose for the score of Streptococcus mutans and Rogosa, for score of Lactobacillus ssp. After the incubation period, at 37° C and 72 hours, it was carried out the score of the ColonY Forming Units (CFU) and obtained the mean values of the bacteria number. / Mestre