A regeneração óssea alveolar tem sido um dos principais alvos de estudo na odontologia, tanto humana como veterinária, principalmente na implantodontia e nas cirurgias periodontais e buco-maxilo-faciais. Em função disto, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a regeneração óssea alveolar, utilizando como enxerto osso liofilizado e células-tronco mesenquimais (MSCs), oriundas da polpa dentária de um doador macho para enxerto alogênico. Foram utilizados 57 coelhas, Nova Zelândia, sendo um coelho doador das MSCs, distribuídos em sete grupos: controle (G1), osso liofilizado (G2), Matrigel (G3), Matrigel e MSC (G4), osso liofilizado e Matrigel (G5), Osso liofilizado, Matrigel e MSC (G6) e somente MSC (G7). Após a exodontia do incisivo inferior esquerdo, o alvéolo recebia o implante de acordo com cada grupo e avaliados em sete dias. As amostras foram coletadas para análise microscópica, desmineralizadas e não desmineralizadas, PCR, além de terem sido submetidas à análise radiográfica, a qual também era realizada no pré e no pós-operatório imediato. Macroscopicamente, foi observado espessamento do ramo mandibular dos animais dos grupos que receberam Matrigel e aceleração do crescimento dos dentes incisivos remanescentes nos animais que receberam terapia celular. Na análise microscópica, constatou-se que, todos os grupos que receberam como enxerto o osso liofilizado, o tempo de regeneração foi menor, embora o grupo controle tenha apresentado melhor organização na regeneração óssea, sendo que o tratamento com Matrigel resultou ainda em uma reação inflamatória exacerbada, dado este confirmado também nas amostras não desmineralizadas. As radiografias periapicais também apontaram que os grupos que foram tratados com osso liofilizado apresentavam maior área de radiopacidade, sugerindo aceleração do processo de regeneração. Porém, o teste de PCR não detectou a presença do cromossomo Y do doador nas fêmeas receptoras das MSCs. Os resultados sugerem que o uso da terapia celular diminui o tempo de regeneração óssea alveolar e, quando aliada ao osso liofilizado, acelera este processo. Entretanto, decorridos sete dias da aplicação do Matrigel, houve aumento da espessura do ramo mandibular no alvéolo onde foi aplicado, necessitando maior tempo de avaliação para melhor elucidar seu uso clínico. / The alveolar bone regeneration has been a major focus of study in dentistry, both human and veterinary medicine, especially in implant and periodontal surgery and in the bucco-maxillo facial. Because of this, this study was to evaluate alveolar bone regeneration, using lyophilized bone and implant as mesenchymal stem cells (MSCs) derived from the dental pulp of a male donor for allogeneic graft. We used 57 female New Zealand rabbits, one rabbit MSCs from donor, divided into seven groups: control (G1), lyophilized bone (G2), Matrigel (G3), Matrigel and MSC (G4), lyophilized bone and Matrigel(G5), lyophilized bone, MSC and Matrigel (G6) and MSC only (G7). After extraction of the left lower incisor, the socket receiving the implant according to each group and evaluated in seven days. The samples were collected for microscopic analysis, demineralized and non-demineralized, PCR, and they have been subjected to X-ray analysis, which was also held in pre-and postoperatively. Grossly, there was thickening of the mandibular branch of animals that received and accelerate growth of the incisor teeth remaining in the Matrigel animals that received cell therapy. Under microscopic analysis, we found that all groups that received the bone graft as lyophilized, regeneration time was lower, although the control group had a better organization in bone regeneration, and treatment with still resulted in a Matrigel exaggerated inflammatory response, since this is also confirmed in samples not demineralized. The periapical radiographs also showed that the groups were treated with lyophilized bone had a greater area of radiopacity, suggesting acceleration of the regeneration process. However, the PCR test failed to detect the presence of Y chromosome in female recipients of the donor of MSCs. The results suggest that the use of cell therapy reduces the duration and alveolar bone regeneration when combined with lyophilized bone, accelerates this process. However, Matrigel, there was increased thickness after seven days of applying of the mandibular alveolus in which it was applied, requiring longer evaluation to elucidate its clinical use.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Rocha de Oliveira Lima.pdf: 444731 bytes, checksum: f7805c76dff945571aca16f931a7c2a8 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / In veterinary medicine, skin injuries represent a significant casuistry and require expensive therapies, considerable recovery time and often lead to unfavorable resolution. To establish an effective therapeutic protocol it is essential that the professional has a solid knowledge of the healing dynamic, as its phases, triggered events, features, as well as about the biological potential of the healing process coadjutants. Regarding these ones, it is known that phytotherapy has a wide range of botanical specimens with healing potential, and, among them, the barbatiman, native species of the Brazilian cerrado, by its antiseptic and astringent activities, becomes an attractive option for skin injures therapies. The chitosan biomaterial also has potential as coadjutant of the process, once it accelerates the triggering of the healing stages by its immunomodulatory property. To clarify the mechanism proposed by these agents, numerous tests are developed using laboratory animals, in order to give reliability to the therapy modality established. To follow clinical evolution in vivo, the clinical examination becomes essential, while morphometric analysis provide accurate data regarding the percentage of centripetal contraction of the lesions. Finally, the microscopic analysis is used to analyze the ultrastructure of the injured site, predominant kinds of cells in each stage and microscopic events triggered on the search for the morphofunctional restoration of the affected tissue. Considering it, with the development of this study it was aimed to evaluate the activity of 5% barbatiman cream (CB) and 5% chitosan cream (CQ) based therapeutic formulations, on the healing process of incisional skin wounds undergone healing by secondary intention, with rabbit as experimental model. In the first chapter it was performed a wide and detailed literature review about the topic of the study, which involved description of the target tissue, skin, hysiopathology of the healing process, barbatiman phytotherapic and chitosan biomaterial activities as healing coadjutants, use of laboratory animals in scientific research and evaluation methods of skin therapies. In the second chapter, it was tested the therapeutic activity of CB and CQ on healing of incisional cutaneous wounds with rabbit as experimental model, by daily clinical evaluation and morphometric analysis performed on days three, seven, 14 and 21 post-injury. There were performed four wounds on each animal, totaling 40 rabbits. Daily, all lesions of each animal received a specific topical therapy, which lasted for 21 consecutive days. First, we performed the antiseptic with 0.9% sodium chloride solution e and further applied treatment protocols themselves. In one of the protocols employed in cream barbatiman (CQ) in another cream chitosan (QC), and these were formulations tests. In the third protocol was the use of allantoin cream (positive control) and finally the cream neutral vehicle (negative control I). In other injury effected only without topical antiseptic and associated 0.9% sodium chloride solution (negative control II). The results showed that the CB and CQ contributed to the satisfactory progress of the healing process. Although there has been no statistical differences in the contraction percentage between the two treatments (CB and CQ), it was clinically observed that the wounds treated with CB showed better clinical responses than CQ. In the third chapter it was comparatively performed, by clinical and microscopic evaluations, the analysis of the action of CQ and CB in the wounds of the same animals that received the treatments from chapter two. For histological analysis, there were considered the predetermined period for morphometry and the samples were evaluated regarding the prevalence of polymorphic and mononuclear infiltrate, presence of necrosis, crust, granulation tissue, fibroplasia, angiogenesis, collagenization and skin reepithelialization. From the results obtained it can be affirmed that the activities attributed to barbatiman and chitosan contributed similarly to the satisfactory progress of the healing process, once both treatments did not differ significantly for any parameter considered in this study. It is suggested that therapeutic protocols chitosan and barbatiman based provided acute inflammation reduction, as much as promoted fibroblast activation, early development of connective tissue, neovascularization and tissue reepithelialization, providing proved effective and economically viable alternatives in the healing process. / Na clínica médica veterinária as injúrias cutâneas representam casuística significativa e cursam com terapias dispendiosas, tempo de recuperação considerável e resolução muitas vezes desfavorável. Para instituir um protocolo terapêutico eficaz é imprescindível que o profissional tenha conhecimento sólido da dinâmica cicatricial, como suas fases, eventos desencadeados, particularidades, bem como acerca do potencial biológico dos coadjuvantes do processo cicatricial. Quanto a estes últimos, sabe-se que a fitoterapia possui um leque variado de espécimes botânicos com potencial na cicatrização e dentre estes o barbatimão, espécie nativa do cerrado brasileiro, por suas atividades, antiséptica e adstringente, torna-se opção atraente quanto às terapias das injúrias cutâneas. O biomaterial quitosana também possui potencial como coadjuvante do processo, visto que por sua propriedade imunomoduladora acelera o desencadeamento das fases da cicatrização. Para esclarecer o mecanismo proposto por estes agentes, inúmeros ensaios são desenvolvidos, utilizando animais de laboratório, a fim de conferirem confiabilidade à modalidade terapêutica instituída. Para acompanhar a evolução clínica in vivo, o exame clínico torna-se essencial, enquanto que as análises morfométricas conferem dados precisos quanto ao percentual de contração centrípeta das lesões. Por último as análises microscópicas são empregadas para analisar a ultra-estrutura do sítio lesionado, tipos celulares predominantes em cada fase e eventos microscópicos desencadeados na busca do restabelecimento morfofuncional do tecido acometido. Diante do exposto, com o desenvolvimento desse estudo objetivou-se avaliar a atividade de formulações terapêuticas a base de creme de barbatimão a 5% (CB) e creme e quitosana a 5% (CQ) frente ao processo de cicatrização de feridas cutâneas incisionais submetidas à cicatrização por segunda intenção, tendo o coelho com o modelo experimental. No primeiro capítulo efetuou-se revisão de literatura ampla e detalhada do tema do estudo que envolveu descrição do tecido alvo, pele, fisiopatologia do processo cicatricial, atividade do fitoterápico barbatimão e do biomaterial quitosana como coadjuvantes da cicatrização, emprego de animais de laboratório em pesquisas científicas e métodos de avaliação das terapias cutâneas. No segundo capítulo, testou-se a atividade terapêutica dos CB e CQ na cicatrização de feridas cutâneas incisionais, por meio da avaliação clínica efetuada diariamente e morfométrica nos dias três, sete, 14 e 21 pós-lesão. Foram realizadas quatro feridas em cada animal, totalizando 40 coelhos. Diariamente, todas as lesões de cada animal receberam uma terapia tópica específica, que se estendeu durante 21 dias consecutivos. Primeiramente, realizava-se a antissepsia com solução de cloreto de sódio a 0,9% e na sequência aplicavam-se os protocolos terapêuticos propriamente ditos. Em um dos protocolos empregou-se creme de barbatimão (CQ), em outro creme de quitosana (CQ), sendo estas as formulações testes. No terceiro protocolo fez uso do creme de alantoína (controle positivo) e por ultimo o creme base (controle negativo I). Em outra lesão efetuou-se apenas antissepsia sem terapia tópica associada com solução de cloreto de sódio a 0,9% (controle negativo II). Os resultados apontaram que os CB e o CQ contribuíram para que o processo de cicatrização evoluísse satisfatoriamente. Embora não tenham ocorrido diferenças estatísticas no percentual de contração entre os dois tratamentos (CB e CQ), clinicamente, notouse que as feridas tratadas com CB apresentaram respostas clínicas superiores ao CQ. No terceiro capítulo efetuou-se comparativamente, por meio da avaliação clínica e microscópica, a ação dos CQ e CB nas feridas dos mesmos animais submetidas aos tratamentos do capítulo dois. Para as análises histológicas foram considerados os períodos pré-definidos para morfometria e as amostras foram avaliadas quanto à predominância de infiltrado polimorfo e mononuclear, presença de crosta-necrose, tecido de granulação, fibroplasia, angiogênese, colagenização e reepitelização cutânea. A partir dos resultados obtidos pode-se afirmar que as atividades implicadas ao barbatimão e a quitosana contribuíram de forma semelhante para que o processo de cicatrização evoluísse satisfatoriamente, visto que os dois tratamentos não diferiram significativamente para nenhum parâmetro considerado neste estudo. Sugere-se que os protocolos terapêuticos à base de barbatimão e quitosana proporcionaram redução da inflamação aguda, bem como promoveram ativação fibroblástica, desenvolvimento precoce de tecido conjuntivo, neovascularização e reepitelização tecidual, conferindo alternativas comprovadamente eficazes e economicamente viáveis em relação ao processo de cicatrização.