Orientadores : Maria Leticia Cintra, Elemir Macedo de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T17:12:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Balthazar_AlbaBragaSalles_M.pdf: 22047979 bytes, checksum: f185302d704492b9d3b9cdf572aed954 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo : No presente estudo tentou-se estabelecer, através de uma ampla revisão dos dados clínicos e espécimes anatomopatológicos, o diagnóstico etiológico das dermatites granulomatosas sem etiologia definida, diagnosticadas no departamento de Anatomia Patológica do Hospital das Clínicas da Unicamp, Campinas, Brasil, no período de 1988 a 1993. Esses casos, que haviam sido prévia e exaustivamente estudados na histopatologia, foram revisados no presente estudo, inicialmente em lâminas arquivadas e coradas pelo HE, Ziehl Neelsen e Grocott, e, posteriormente, foram padronizados cortes seriados, com aprofundamento do bloco de parafina para realização de colorações especiais e imunoistoquímica com anticorpos policlonais. Esse último exame foi realizado no Departamento de Patologia do Hospital das Clínicas (divisão de dermatologia) da Faculdade de Medicina da USP, São Paulo, Brasil. Um total de 41 pacientes foram avaliados e divididos em seis doenças: 19 pacientes com diagnóstico clínico de LTA, 10 pacientes com esporotricose, dois pacientes com Tbc, três pacientes com hanseníase tuberculóide, dois pacientes com sífilis secundária e cinco pacientes com diagnóstico de paracoccidioidomicose. No exame imunohistoquímico, observou-se 26,3% de positividade, com o achado de amastigotas em cinco casos de LTA, não sendo encontrados parasitas em nenhum dos fragmentos no exame histológico. Quanto ao resultado histológico, observou-se 14 (34,14%) com padrão B e 27 (65,85%) com padrão C. O tempo de duração das lesões de foi de 4,9 meses no padrão B e 7,5 meses no C. A celularidade da reação inflamatória granulomatosa mostrou-se predominantemente constituída por linfócitos, histiócitos, plasmócitos, células epitelióides e células gigantes. Os critérios morfológicos clássicos de relevância da LTA em relação às outras doenças estudadas foram a plasmocitose (p = 0,0013) e o padrão histológico C (p =0,009). Concluímos que apesar da contribuição da combinação de métodos diagnósticos, o que dará o diagnóstico final nas dermatites granulomatosas infecciosas sem etiologia defmida é o conjunto dos dados clínicos e a resposta ao teste terapêutico / Abstract: The aim of this study was to make, through a large revision of clínical data and anatomopathological pieces, the correct diagnosis of granulomatous dermatitis of whith a unknown ethiology, evaluated at Pathological Anatomy Department, Hospital de Clínicas, UNICAMP, from 1988 to 1993. The cases were previously studied by histopathology. In the present study they were reviewed, initially ín slides glass, stored and staíned by hematoxylín and eosin, Ziehl-Neelsen, Grocott, and embedded paraffin tissue for special staining, imunohistochemical with policlonal antibodies. This last exam was performed at Pathology Department, dermatology divison, Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina, USP, São Paulo, BraziL There were 41 patients classitied among six diseases: 19 patients with clínical diagnosis of LTA, 10 patients with sporotrichosis, two patients with tuberculosis, three patients with Hansen' s disease and two patients with secondary syphilis. Imunohistochemical analysis showed 26,3% of positive results with amastigotes ín tive cases of LTA, where no parasites were found by histological analysis. As for the histological results, there were 14 (34,14%) cases ín the B pattem group and 27 (65,85%) in the C pattem group. The lesions were present during 4,9 months in B pattem and 7,5 months in C pattem. The cells most frequently found in the granulomatous inflamatory reaction were: lymphocytes, plasma cells, epithelioid cells and giant cells. Classical morphological criteria in LTA were plasmocitosis (p = 0,0013) and histological pattem (p = 0,009). The conclusion is that, despite the contribution of histopathological methods, the correct diagnosis of infectious granulomatous dermatitis of unknow ethiology can be given by clínical evolutive data and response to pharmacologycal therapy / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2016. ____________________________________________________________________________________________________ / Em atenção aos artigos 11 e 96 da Lei nº 9.279/96 (Lei da Propriedade Industrial) e em consonância com a Resolução CAD 005/2008 da Universidade de Brasília, informamos que o presente trabalho somente foi publicado na data indicada neste informativo. A respectiva defesa, para obtenção do título pretendido, foi realizada na modalidade de sessão fechada, conforme a documentação anexada, de forma que o requisito da novidade, exigida nos referidos artigos da Lei, foi devidamente preservado. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-12-02T16:09:04Z No. of bitstreams: 1 2016_HerickSampaioMüller_Parcial.pdf: 2537971 bytes, checksum: 0e36706acc171881428e752f4348e1a4 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-04T20:37:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_HerickSampaioMüller_Parcial.pdf: 2537971 bytes, checksum: 0e36706acc171881428e752f4348e1a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-04T20:37:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_HerickSampaioMüller_Parcial.pdf: 2537971 bytes, checksum: 0e36706acc171881428e752f4348e1a4 (MD5) / A leishmaniose é uma antropozoonose que possui diferentes manifestações clinicas, sendo transmitida durante o repasto sanguíneo de flebotomíneos e causada por várias espécies de parasitos do gênero Leishmania. Esta doença causa grandes agravos na saúde humana em escala global, com altas taxas de mortalidade anualmente. Inúmeros fatores de risco impulsionam a transmissão do parasito para áreas anteriormente não endêmicas provocados tanto pelo ser humano quanto por variações naturais do ambiente. O controle da leishmaniose visceral (LV) no Brasil se faz por meio da detecção e eliminação dos reservatórios da doença, controle das populações de vetor, prevenção do contato com vetores infectados e tratamento dos casos humanos. No entanto, essas medidas são aplicadas frequentemente de forma isolada e tem-se mostrado limitadas. Como consequência, observase a manutenção ou mesmo expansão da LV para áreas onde sua ocorrência não era registrada. Nesse contexto, medidas que visem à redução da transmissão e suas aplicações de forma integrada são de fundamental importância, tais como o diagnóstico precoce e com alta sensibilidade dos humanos e dos cães infectados, tratamento eficaz e o emprego de vacinas. O diagnóstico tradicional da LV é baseado na presença de anticorpos anti-Leishmania e o padrão-ouro é a visualização de formas amastigotas do parasito em amostras biológicas. No entanto, a introdução da vacinação de cães nos últimos anos gera a necessidade de novos métodos sorológicos capazes de diferenciar entre animais vacinados e infectados. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a metalopeptidase mitocondrial zinco dependente, secretada de L. infantum como marcador para diagnóstico sorológico de LV. A análise in sílico revelou que a proteína teria 47,35% de resíduos de aminoácidos expondo sua superfície ao solvente e nestas áreas foram encontradas possíveis zonas para epitopos de células B, sítios de glicosilação e fosforilação. A expressão das proteínas em sistemas diferentes possibilitou avaliar a imunogenicidade das proteínas heterólogas com e sem modificações pós-traducionais contra soro de cães infectados e sadios. O resultado do ensaio de ELISA mostrou altos índices de anticorpos específicos contra as proteínas heterólogas e a comparação dos resultados indicou que a proteína heteróloga expressa em modelo procarioto identificou todos os animais infectados nas diluições 1:50 e 1:100 de soro. Os dados estatísticos do teste t mostraram p value < 0.01, dando credibilidade na hipótese de uso desta proteína em possível diagnóstico para LV. O estudo realizado apresenta informações relevantes sobre o uso da metalopeptidase estudada para que possa ser associada ao melhoramento do diagnóstico da LV. Testes para definição da sensibilidade e especifidade fazem-se necessários em futuros trabalhos. / Leishmaniasis is a anthropozoonosis with different clinical manifestations, being transmitted by sandfly during blood feeding and caused by several species of parasites of the genus Leishmania. This disease causes major health problems on a global scale, with high mortality rates annually. Several risk factors drive the transmission of the parasite to areas not previously endemic due to man activities and by natural environmental variations. Control of visceral leishmaniasis (VL) in Brazil is made through the detection and elimination of disease reservoirs, control of vector populations, preventing contact with infected vectors and treatment of human cases. However, these measures are often applied in isolation and has shown limited 0efficacy. As a result, there is the maintenance or expansion of the VL to areas where their occurrence was not recorded. In this context, measures aimed to reduce transmission and its applications in an integrated manner are of fundamental importance, such as early diagnosis with high sensitivity of humans and infected dogs, effective treatment and the use of vaccines. Traditional diagnosis of VL is based on the presence of anti-Leishmania antibodies and the gold standard is the visualization of amastigote forms of the parasite in biological samples. However, the introduction of vaccination of dogs in recent years creates the need for new serological methods able to differentiate between vaccinated and infected animals. The objective of this study was to evaluate the metallopeptidase zinc dependent secreted from L. infantum, as a marker for serological diagnosis of VL. In silico analysis revealed that the protein had 47.35% of amino acid residues exposed to the solvent, exhibiting on your surface areas for possible B cell epitopes, glycosylation and phosphorylation sites. The expression of proteins in different systems allowed to assess the immunogenicity of the heterologous proteins, with and without post-translational modifications, against sera from infected and healthy dogs. The results of the ELISA assay showed high levels of specific antibodies against heterologous proteins and the comparison of the results shows that heterologous protein expressed in a prokaryotic model was able to differentiate all infected animals at dilutions 1:50 and 1: 100 serum. Statistical analysis emphasize the potential of this protein to be used in diagnosis for VL. The study presents relevant information on the use of metallo-peptidase studied so it can be associated with the improvement of the diagnosis of VL. Tests to define the sensitivity and specificity are made necessary in future work.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2016. / Submitted by Camila Duarte (camiladias@bce.unb.br) on 2017-02-06T14:14:04Z No. of bitstreams: 1 2016_FabrícioClaudinoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 1528155 bytes, checksum: 7e2bf484d829a436b7529442a92e6883 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-02-09T17:12:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_FabrícioClaudinoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 1528155 bytes, checksum: 7e2bf484d829a436b7529442a92e6883 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T17:12:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_FabrícioClaudinoEstrelaTerraTheodoro.pdf: 1528155 bytes, checksum: 7e2bf484d829a436b7529442a92e6883 (MD5) / Introdução: a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença negligenciada tanto em relação a métodos diagnósticos de baixa complexidade como em relação ao tratamento pelo uso de medicação extremamente tóxica e sem esquemas terapêuticos com associações medicamentosas há mais de 100 anos. O diagnóstico preciso das formas clínicas de LTA é importante porque a forma mucosa requer maior tempo de tratamento com drogas tóxicas, tem uma evolução crônica, uma alta taxa de recorrência, podendo gerar deformidades e morte. Métodos: nosso objetivo foi estudar o perfil clínico e exames laboratoriais de pacientes tratados em clínica de referência para LTA no HUB-UnB, no Centro-Oeste do Brasil entre 2001-2014, para diferenciar a forma mucosa (LM) da cutânea (LC), utilizando análise multivariada. Resultados: de 1019 pacientes com lesões suspeitas, 737 tiveram LTA. A análise univariada mostrou que os pacientes com LM, quando comparado aos LC, tinham maior idade média (p <0,001), maior duração da doença (p <0,001), menor número de lesões (p <0,001), maior diâmetro no teste de Montenegro (IDRM) e maiores títulos na imunofluorescência indireta (IFA) (p = 0,001). A análise multivariada mostrou que um fator de confusão pode ter influenciado os resultados da análise univariada e os valores tornaram-se não significativos. Conclusões: maior diâmetro da IDRM, títulos elevados da IFA, bem como os pacientes de maior duração idade e da doença, estão associados à forma LM, mas não podem ser utilizados como único critério para diferenciação. / Introduction: the American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is a neglected disease both in relation to low-complexity diagnostic methods as compared to treatment by the use of highly toxic drug with no therapeutic regimens in combination therapy for over 100 years. The accurate diagnosis of the clinical forms of ATL is important because the mucosal form requires longer treatment with toxic drugs, has a chronic evolution, a high recurrence rate and cause disfiguring scars and death. Methods: Our objective was to study the clinical profile and laboratory tests from patients treated at a referral clinic for ATL at HUB-UnB in Midwest Brazil from 2001 to 2014 to differentiate mucosal (ML) from cutaneous (CL) forms using a multivariate analysis. Results: Of 1019 patients with suspicious lesions, 737 had ATL. Univariate analysis showed that patients with ML, when compared to CL, were older (p<0.001), had longer disease duration (p < 0.001), lower number of lesions (p<0.001), higher values of Montenegro skin test (MST) (p=0.042) and tittles of indirect immunofluorescence assay (IFA) (p=0.001). Multivariate analysis showed that a confounder influenced the univariate analysis result. Conclusions: High titles of MST and IFA, as well as patients with higher age and disease duration, could be associated with the form ML, but this information cannot be used as the sole criterion for differentiation.

Hannover, Universiẗat, Diss., 2005.

Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1997. / Bibliogr.: f. 65-77. Publié aussi en version électronique.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-09-11T20:00:51Z No. of bitstreams: 1 2008_JacksandraFariasFrancaCampos.pdf: 1569774 bytes, checksum: 8166369e43a9689cdd652bf76794766f (MD5) / Approved for entry into archive by Luis Felipe Souza Silva(luis@bce.unb.br) on 2009-09-21T17:23:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_JacksandraFariasFrancaCampos.pdf: 1569774 bytes, checksum: 8166369e43a9689cdd652bf76794766f (MD5) / Made available in DSpace on 2009-09-21T17:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_JacksandraFariasFrancaCampos.pdf: 1569774 bytes, checksum: 8166369e43a9689cdd652bf76794766f (MD5) Previous issue date: 2008-11-28 / A droga miltefosine é uma alquilfosfocolina de uso oral já usada na índia no tratamento da leishmaniose visceral. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ação in vitro e in vivo da droga no tratamento da leishmaniose cutânea experimental. Nos testes in vitro promastigotas metacíclicas de leishmania (leishmania) amazonensis, leishmania (viannia) braziliensis e leishmania (viannia) guyanensis foram incubadas 48 horas na presença de diferentes concentrações de miltefosine (100 a 3,1?g/ml), n-metil glucamina (300 a 9,3?g/ml) e associação das duas drogas. A avaliação foi feita pelo método colorimétrico methyl thiazolyl blue. No teste in vivo, 80 camundongos, cepa c57bl/6 foram infectados com leishmania (leishmania) amazonensis e divididos em quatro grupos de tratamento (10 dias): miltefosine, n-metil glucamina, miltefosine+n-metil glucamina e controle sem tratamento. Doses: miltefosine via oral 20mg/kg/dia e n-metil glucamina intramuscular 400mg sb+5/kg/dia. Avaliação: medição da pata e parasitológico (culturas em meio novy-mcneal-nicolle, esfregaços para pesquisas de amastigotas e culturas em diluição limitante). Análises estatísticas: programa spss® versão 13.0. Resultados in vitro: a concentração inibitória capaz de destruir 50% (ic50) das promastigotas de leishmania (leishmania) amazonensis foi de 12,2?g/ml; para leishmania (viannia) braziliensis a ic50 foi de 22,9?g/ml e para leishmania (viannia) guyanensis a ic50 foi de 271,7?g/ml. Resultados in vivo: no grupo miltefosine as médias de diâmetro das patas caíram de 2,3 para 1,9 (p:0,004), no grupo controle as médias cresceram de 1,8 para 2,4 (p:0,001), nos grupos n-metil glucamina e miltefosine+n-metil glucamina não houve diferença estatística (p:0,407 e p:0,923). Nas culturas em meio novy-mcneal-nicolle e esfregaços para pesquisa de amastigotas os grupos miltefosine e miltefosine+n-metil glucamina tiveram as maiores porcentagens de exames negativos no pós-tratamento (p:0,017 e p:0,000). Nas culturas em diluição limitante não houve crescimento de formas promastigotas nos grupos miltefosine e miltefosine+n-metil glucamina. In vitro as promastigotas de leishmania (leishmania) amazonensis, leishmania (viannia) braziliensis e leishmania (viannia) guyanensis demonstraram sensibilidade ao miltefosine, sendo a leishmania (leishmania) amazonensis a mais sensível e a leishmania (viannia) guyanensis a menos sensível. In vivo a droga se mostrou eficaz no tratamento da leishmaniose cutânea experimental. Assim, conclui-se que a miltefosine parece ser uma droga potencial para o tratamento da leishmaniose cutânea no brasil. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Miltefosine is an oral hexadecylphosphocoline drug which has already been used for visceral leishmaniasis treatment in India. The objective of this study was to evaluate in vitro and in vivo drug action as a treatment on a cutaneous leishmaniasis trial. On in vitro tests metacyclic promastigotes of Leishmania (Leishmania) amazonensis, Leishmania (Viannia) braziliensis and Leishmania (Viannia) guyanensis were incubated 48 hours into concentrations of miltefosine (100 to 3.1ug/mL), N-methyl glucamine (300 to 9.3ug/mL) and a combination of both drugs. The assessment was made by Methyl Thiazolyl Blue colorimetric method. On in vivo tests 80 mice, C57BL/6 strain were infected with Leishmania (Leishmania) amazonensis and divided into four treatment groups (10 days): miltefosine, N-methyl glucamine, miltefosine + N-methyl glucamine and control with no treatment. Dosage: oral miltefosine 20mg/kg/day and intramuscular N-methyl glucamine 400mg Sb+5/Kg/day. Evaluation: measurement of foot and parasitological (Novy-McNeal-Nicolle medium cultures, smears and cultures in limiting dilution). Statistical analysis: SPSS® software version 13.0. In vitro results: Leishmania (Leishmania) amazonensis IC50=12.2ug/mL; Leishmania (Viannia) braziliensis IC50=22,9ug/ml and Leishmania (Viannia) guyanensis IC50=271,7ug/mL. In vivo results: on miltefosine group the average diameter of the feet fell from 2.3 to 1.9 (p: 0.004), on control group the mean increased from 1.8 to 2.4 (p: 0.001), on the other two groups there were no statistical difference (p: 0.407 and p: 0.923). In cultures and smears the groups miltefosine and miltefosine + N-methyl glucamine had the highest percentages of negative tests in post-treatment (p: 0.017 and p: 0,000). In limiting dilution the miltefosine and miltefosine + N-methyl glucamine groups had no growth of promastigotes on crops after treatment. Promastigotes forms of Leishmania (Leishmania) amazonensis, Leishmania (Viannia) braziliensis and Leishmania (Viannia) guyanensis had in vitro sensitivity to miltefosine (the first one had higher and the last one had lower sensitivity). The drug was effective in vivo in the treatment of cutaneous leishmaniasis trial. It’s therefore concluded that miltefosine can be considered as a potential treatment for cutaneous leishmaniasis in Brazil.

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:43:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000013.pdf: 11821845 bytes, checksum: 94301d35e16668f6243488fa8fa60808 (MD5) Previous issue date: 2006 / No presente trabalho, objetivou-se estudar alguns aspectos envolvidos na epidemiologia da leishmaniose visceral no município de Paulista, litoral norte do Estado de Pernambuco. Realizou-se um estudo retrospectivo dos casos humanos de leishmaniose visceral notificados em Paulista (1995-2006), o qual demonstrou ser a doença mais comum entre crianças e entre indivíduos do sexo masculino. Conduziuse um inquérito soroepidemiológico entre cães (semi)domiciliados (n=322), o qual revelou uma prevalência de anticorpos anti-Leishmania sp. de 40,3 porcento, a taxa mais alta já relatada em Pernambuco. A positividade no teste sorológico foi estatisticamente mais alta entre cães machos e jovens (p-valor £ 0,05). Realizaramse coletas sistemáticas com armadilhas luminosas do tipo CDC no intuito de estudar a fauna de flebotomíneos. A única espécie encontrada foi Lutzomyia longipalpis, a qual estava presente no entorno das casas (n=5), mas não dentro destas. Espera-se que os resultados obtidos a partir desse trabalho sirvam de base para a elaboração de novas estratégias para o controle da leishmaniose visceral no município de Paulista

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000015.pdf: 2487327 bytes, checksum: 6520eb85095f58fb23d5988ebeb8a27a (MD5) Previous issue date: 2007 / A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença endêmica em Pernambuco (PE), onde a espécie circulante é a Leishmania (Viannia) braziliensis. As infecções por Leishmania apresentam uma resposta imune específica por parte do hospedeiro, dependente de células T, apresentando um perfil de citocinas Th1 e Th2. Neste estudo os objetivos foram avaliar a resposta linfoproliferativa e identificar a produção das citocinas IFN-g e IL-10 em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de 15 pacientes com LTA antes e 12 meses após o término do tratamento quimioterápico com GlucantimeÒ e de 10 indivíduos saudáveis (controle). Para avaliar a linfoproliferação foi utilizada timidina tritiada e para dosagem de citocinas, ELISA de captura. A resposta linfoproliferativa, bem como a produção de citocinas foram avaliadas frente a estímulos da fração antigênica solúvel de L. (V.) braziliensis (1,25 mg/ml), fitohemaglutinina (5 mg/ml) e concanavalina A (2,5 mg/ml) durante 5 dias e 48 horas, respectivamente. Os resultados mostraram que todos os indivíduos apresentaram proliferação celular em resposta aos mitógenos, não havendo diferença significativa entre os grupos. Em relação ao antígeno, nenhum indivíduo do grupo controle apresentou linfoproliferação. Os pacientes apresentaram elevada resposta proliferativa antes e após tratamento, embora sem diferença estatística ao comparar esses dois momentos. A análise na produção das citocinas IFN-g e IL-10 identificou diferença significativa ao comparar o grupo de pacientes em relação ao controle. Após tratamento quimioterápico, embora sem diferença estatística, a dosagem dos sobrenadantes dos pacientes revelou diminuição nos níveis de IFN-g e aumento de IL-10. Estes resultados indicam que os pacientes produziram uma resposta celular específica a fração antigênica solúvel de L. (V.) braziliensis, sugerindo que mecanismos de regulação imunológica com a participação de células T de memória e células T regulatórias, além da dicotomia Th1 x Th2 estão presentes na evolução clínica desses indivíduos.

Made available in DSpace on 2012-05-07T15:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000009.pdf: 1751449 bytes, checksum: ac81ddcdfe698ad73e50c728791a4983 (MD5) Previous issue date: 2006 / O Brasil enfrenta atualmente a expansão e urbanização das leishmanioses com um grande número de casos humanos e cães positivos em várias cidades de grande e médio porte. [...] O presente trabalho avaliou aspectos epidemiológicos das leishmanioses relacionados à infecção canina e aosflebotomíneos em uma área endêmica do município de Santa Luzia/MG, com registros recentes de casos humanos autóctones de LVA e LTA. Foram realizadas coletassistematizadas mensais durante um ano, utilizando armadilhas luminosas de Falcão e não sistematizadas, com capturas manuais utilizando o capturador de Castro. As fêmeas capturadas foram identificadas e destinadas à verificação de infecção natural através da dissecção e detecção de DNA do parasito (PCR) em pools específicos contendo até 20 fêmeas cada. A densidade total de flebotomíneos foi correlacionada com dados climatológicos. No estudo da infecção canina foi verificada a soroprevalência, prevalência da infecção e da doença nos cães, utilizando técnicas sorológicas (RIFI e ELISA) e moleculares (PCR) para o diagnóstico. Foram utilizadas na PCR amostras clínicas de pele, medula óssea (de 43 cães sorologicamente positivos) e sangue periférico (202 cães). O isolamento e caracterização do parasito foram realizados utilizando amostras positivas da cultura de aspirado de medula óssea e amostras clínicas positivas dos 43 cães reativos na sorologia. Foi coletado um total de 1552 exemplares, sendo 1154 machos e 398 fêmeas, pertencentes a sete espécies de flebotomíneos, sendo a mais abundante a Lutzomyia whitmani (75 por cento) seguida por L. longipalpis (19 por cento), que são vetoras da LTA e LVA respectivamente. Não foi observada nenhuma correlação estatisticamente significativa entre a densidade total de flebotomíneos eos dados climatológicos durante o período de estudo. Foram dissecadas 102 fêmeas pertencentes a cinco espécies e em nenhuma foi observada a presença de formas flageladas.Para a detecção através da PCR foram constituídos 11pools a partir de 211 fêmeas vivas, pertencentes a cinco espécies. Em dois pools foi possível verificar infecção natural, sendo um de L. whitmani, infectado por L. braziliensis e um de L. cortelezzii infectado por L.chagasi. Estes resultados sugerem a possível participação de L. whitmani na transmissão da LTA na área de estudo e a necessidade de estudos mais aclaradores sobre o envolvimento de L. cortelezzii no ciclo de transmissão da LVA

Made available in DSpace on 2012-05-07T15:26:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000015.pdf: 2033157 bytes, checksum: f87ad8be0823333f97678083458f51b3 (MD5) Previous issue date: 2007 / Neste estudo investigou-se a eficácia da PCR para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) e o desempenho da PCR-RFLP para a identificação da espécie de Leishmania. Além disso, a técnica PCR quantitativo em tempo real (qPCR) foi padronizada para a quantificação do número de cópias de kDNA. Foram analisadas amostras de pele, sangue e medula de 217 cães classificados como assintomáticos e sintomáticos. Com base nos resultados de exames sorológicos e parasitológicos convencionais, os animais foram divididos em dois grupos: cães com exames convencionais negativos (ECN = 70) e com exames convencionais positivos (ECP = 147). A presença do parasito em amostras clínicas foi investigada através da amplificação de um fragmento de 120 pb da região conservada do kDNA de Leishmania. Os resultados mostraram que a PCR detectou DNA do parasito até a concentração de 0,1 fg. As amostras pele e medula foram as mais adequadas para a realização do diagnóstico através da PCR. No grupo ECN, 95 por cento dos cães apresentaram PCR positiva em pelo menos uma amostra clínica e no grupo ECP, aproximadamente 96 por cento dos cães foram PCR positivos. A identificação da espécie de Leishmania através da PCR-RFLP revelou que 192 cães estavam infectados por Leishmania infantum chagasi e 2 por Leishmania braziliensis. A análise do real time PCR revelou que na medula dos cães com ECP havia maior número de cópias de DNA de Leishmania do que no sangue e que a comparação da carga parasitária entre os cães sintomáticos e assintomáticos não apresentou diferença significativa. Nossos resultados revelam que a PCR é sensível e útil para detecção de Leishmania em amostras clínicas de cães naturalmente infectados e que a PCR-RFLP mostrou ser uma ferramenta rápida e sensível para identificação de espécies. Além disso, o qPCR mostrou ser uma metodologia promissora para estudos de quantificação da carga de DNA de Leishmania