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Avaliação de lesões periapicais induzidas experimentalmente em camundongos knockout para molécula adaptadora para ativação de receptores Toll-like (MyD88) / Evaluation of experimentally induced periapical lesions in knockout mice for toll-like receptor activation adaptor molecule (MyD88)

Marília Pacifico Lucisano 26 March 2013 (has links)
A molécula adaptadora myeloid differentiation primary response gene 88 (MyD88) está envolvida na ativação de receptores Toll-like (TLRs), os quais são responsáveis pelo reconhecimento precoce pelas células do hospedeiro de patógenos invasores e pelo desencadeamento da resposta imunológica. O objetivo do presente estudo foi caracterizar o desenvolvimento e a progressão de lesões periapicais induzidas experimentalmente em dentes de camundongos knockout (KO) para a molécula MyD88 (MyD88 KO), comparados a animais wild-type (WT). Lesões periapicais foram induzidas nos primeiros molares inferiores de 30 camundongos WT e de 30 camundongos MyD88 KO. Decorridos 7, 21 e 42 dias, os animais foram submetidos à eutanásia em câmara de CO2 e as mandíbulas foram removidas e submetidas ao processamento histotécnico. A seguir, cortes representativos foram corados com hematoxilina e eosina (HE), para descrição das características do canal radicular e das regiões apical e periapical e para contagem do número de células inflamatórias (neutrófilos), em microscopia de luz, e para mensuração da área das lesões periapicais, em microscopia de fluorescência. Espécimes sequenciais foram analisados por meio de: histoenzimologia para a atividade da TRAP, para contagem de osteoclastos; coloração de Brown & Brenn, para localização de bactérias; e imunohistoquímica, para identificação de marcadores da osteoclastogênese (RANK, RANKL e OPG). Os dados foram submetidos à análise estatística por meio dos testes não-paramétricos de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn, utilizando o programa SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) versão 17.O, com nível de significância de 5%. As demais análises foram expressas de maneira qualitativa. Com relação à extensão das lesões periapicais, o grupo MyD88 KO apresentou valores significantemente maiores do que o grupo WT nos períodos de 7 (p=0,001) e 21 dias (p=0,05), sendo que após 42 dias foi observada tendência de maiores valores, porém sem diferença significante (p=0,09). Foi observada maior quantidade de neutrófilos no grupo MyD88 KO, em comparação aos animais WT (p=0,01 em 7 dias; p=0,004 em 21 dias; e p<0,001 em 42 dias). Por outro lado, com relação à quantidade de osteoclastos, não foi observada diferença significante entre ambos os grupos, em todos os períodos experimentais (p=0,884 em 7 dias; p=0,506 em 21 dias; e p=0,211 em 42 dias). A análise microscópica descritiva do grupo MyD88 KO revelou um infiltrado inflamatório mais intenso, com presença abundante de células porlimorfonucleadas e mononucleadas e com grande destruição tecidual, após 7, 21 e 42 dias. A coloração de Brown e Brenn evidenciou uma maior disseminação bacteriana, inclusive nos tecidos periapicais, no grupo MyD88 KO, quando comparado aos animais WT. Com relação à imunohistoquímica, foram observadas marcações para RANK, RANKL e OPG de forma semelhante entre os dois grupos de animais. Com base nas metodologias e nos resultados obtidos no presente estudo pode-se concluir que na ausência da MyD88 os animais apresentaram lesões periapicais mais extensas, com um infiltrado inflamatório severo e com número significantemente maior de neutrófilos, quando comparados aos animais WT, sugerindo o importante papel desta molécula na resposta imune e inflamatória no combate à infecção de origem endodôntica. / The adaptor molecule myeloid differentiation primary response gene 88 (MyD88) is involved in the activation of toll-like receptors (TLRs), which are responsible for the early recognition by the host cells of invading pathogens and for triggering the immune response. The aim of the present study was to characterize the formation and progression of experimentally induced periapical lesions in teeth of MyD88 knockout (MyD88 KO) mice compared with wildtype (WT) mice. Periapical lesions were induced in the mandibular first molars of 30 WT and 30 MyD88 KO mice. After 7, 21 and 42 days, the animals were euthanized in a CO2 chamber and the mandibles were removed and subjected to histotechnical processing. Representative histological sections were stained with hematoxylin and eosin (HE) for description of the features of the root canal and the apical and periapical regions, and for counting of inflammatory cells (neutrophils) under conventional light microscopy and for determination of the size of the periapical lesions under fluorescence microscopy. Sequential specimens were evaluated by: TRAP histoenzymology, for osteoclast counting; Brown & Brenn staining, for localization of bacteria; and immunohistochemistry for identification of osteoclastogenesis markers (RANK, RANKL, OPG). Data were subjected to statistical analysis by the nonparametric Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests and the Dunn post-test, using the SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) software, version 17.0. The significance level was set at 5%. The other analyzes were displayed qualitatively. Regarding the periapical lesion size, the MyD88 KO group presented significantly higher values than the WT group in the periods of 7 (p=0.001) and 21 days (p=0.05). Tendency for higher values was observed after 42 days, though without significant difference (p=0.09). A larger number of neutrophils in the MyD88 KO group were observed compared with the WT animals (p=0.01 at 7 days, p=0.004 at 21 days and p<0.001 at 42 days). On the other hand, regarding the number of osteoclasts, no statistically significant difference was observed between the groups at any of the experimental periods (p=0.884 at 7 days, p=0.506 at 21 days and p=0.211 at 42 days). Descriptive microscopic analysis of the MyD88 KO group revealed a more intense inflammatory infiltrate, with abundant presence of polymorphonuclear and mononuclear cells and wide tissue destruction, after 7, 21 and 42 days. Brown & Brenn staining showed an increased bacterial dissemination, including the periapical tissues in the MyD88 KO group, when compared with the WT animals. As for immunohistochemistry, RANK, RANKL and OPG immunostainings were similar between the two groups of animals. Based on the employed methodology and the obtained results, it may be concluded that in the absence of MyD88, the animals showed larger periapical lesions, with a severe inflammatory infiltrate and a significantly larger number of neutrophils, when compared with WT animals, suggesting the important role of this molecule during the immune and inflammatory response against infections of endodontic origin.
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Técnicas adesivas de obturação - Avaliação microscópica quantitativa da reparação apical e periapical pós-tratamento de canais radiculares de dentes de cães com lesão periapical / Adhesive root canal filling techniques A quantitative microscopic evaluation of apical and periapical repair after root canal treatment of dog\'s teeth with periapical lesion

Kleber Cortes Bonifacio 19 September 2013 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar quantitativamente, in vivo, a resposta dos tecidos apicais e periapicais de dentes de cães com lesão periapical crônica, induzida experimentalmente, após tratamento de canal radicular e obturação endodôntica empregando os seguintes cimentos: EndoREZ, Real Seal e Sealapex. Canais radiculares não obturados (curativo de demora) foram utilizados como controle. Após a obtenção de lesões periapicais experimentalmente induzidas, os dentes foram submetidos à abertura coronária, neutralização do conteúdo necrótico, preparo biomecânico, curativo de demora com uma pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen) e obturação dos canais radiculares com os diferentes cimentos obturadores citados. Decorridos os períodos de 30 e 90 dias, os animais foram mortos e o material submetido ao processamento histotécnico. A análise microscópica pelo método quantitativo de avaliação foi realizada em microscópio Axio Imager.M1 (Zeiss), acoplado a uma câmera AxioCam MRc5 (Zeiss). Foi registrada a descrição completa das características dos tecidos apicais e periapicais e efetuada a quantificação do número de células inflamatórias e das extensões das áreas da lesão periapical em mm2, a presença de reabsorção óssea e a presença de selamento biológico apical, em imagens microscópicas obtidas de cortes histológicos corados por hematoxilina e eosina, utilizando o Software AxioVision Rel.4.6 (Automatic Measurements Programs Program Wizard). Os valores obtidos foram avaliados quanto ao tipo de distribuição e comparados por meio da análise de variância (ANOVA), seguido pelo pós-teste de Tukey, com nível de significância de 5%. A presença e extensão do infiltrado inflamatório além da metade do ligamento periodontal foi observada em todos os cimentos avaliados, tanto no período de 30 quanto 90 dias, sendo predominantemente mononuclear. Não houve modulação do infiltrado inflamatório em nenhum dos cimentos, pois a quantidade de células inflamatórias foi semelhante em ambos os períodos, 30 e 90 dias (p>0,05). Em relação as áreas de reabsorções óssea e radicular, nos cimentos EndoREZ e Real Seal, a presença foi de aproximadamente 50% dos casos aos 90 dias; enquanto no cimento Sealapex, as mesmas estiveram presentes em 30% dos casos tanto aos 30 quanto aos 90 dias. A extensão da lesão periapical foi semelhante em ambos períodos experimentais (30 e 90 dias), em todos os cimentos avaliados. Por fim, selamento biológico foi observado aos 90 dias, em, aproximadamente, 20%, 30% e 50% dos casos nos cimentos EndoREZ, Real Seal e Sealapex, respectivamente; e em 15% dos casos, no período de 30 dias, apenas no cimento do Sealapex. Dentro das limitações deste experimento, pode-se concluir que os cimentos resinosos EndoREZ e Real Seal, não foram bem tolerados pelos tecidos apicais e periapicais. Ainda, reparo dos tecidos apicais, com deposição de cemento, foi encontrado nos dentes obturados com o cimento Sealapex, embora não tenha sido observado reparo total das lesões periapicais. / The aim of this study was to evaluate quantitatively, in vivo, the response of apical and periapical tissues of dog\'s teeth with experimentally induced chronic periapical lesion, after endodontic treatment and root canal filling using the following sealers: EndoREZ, Real Seal and Sealapex. Non-filled root canals (intracanal dressing) were used as control. After induction of the experimental periapical lesions, the teeth were subjected to coronal access, neutralization of the necrotic content, biomechanical preparation, placement of an intracanal dressing with a calcium hydroxide paste (Calen), and root canal filling with the different endodontic sealers mentioned above. After 30 and 90 days, the animals were euthanized and the material was subjected to histotechnical processing. A quantitative microscopic analysis was performed using an Axio Imager.M1 (Zeiss) microscope coupled to an AxioCam MRc5 (Zeiss) camera. A complete description of the characteristics of the apical and periapical tissues was performed and the number of inflammatory cells, size of the periapical lesions (in mm2), presence of bone resorption and presence of sealing of the apical opening with mineralized tissue deposition was determined on microscopic images obtained from hematoxylin and eosin-stained histological sections, using the Software AxioVision Rel.4.6 (Automatic Measurements Programs Program Wizard). Data were examined for their distribution and the compared using analysis of variance (ANOVA) followed by Tukeys post-test with a 5% significance level. Presence and extension of an inflammatory infiltrate, predominantly mononuclear, beyond half of the periodontal ligament was observed for all sealers, at both 30-day and 90-day periods. There was no modulation of the inflammatory infiltrate for any of the sealers because the number of inflammatory cells was similar at both 30-day and 90-day periods (p>0.05). Bone and radicular resorption areas were found in approximately 50% of the cases at 90 days for EndoREZ and Real Seal, and in 30% of the cases at the 30-day and 90-day periods for Sealapex. The periapical lesion size was similar at both experimental periods (30 and 90 days) for all evaluated sealers. Finally, sealing of the apical opening with mineralized tissue deposition was observed at 90 days in approximately 20%, 30% and 50% of the cases for EndoREZ, Real Seal and Sealapex, respectively; and in 15% dos cases, at the 30-day period, only for Sealapex. Within the limitations of this experiment, it may be concluded that the resin-based sealers EndoREZ and Real Seal were not well tolerated by the apical and periapical tissues. Periapical tissue repair, with cementum deposition, was found in the teeth filled with Sealapex, although complete repair of the periapical lesions was not observed.
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MEV - Biofilme apical em dentes decíduos de humanos, com e sem vitalidade pulpar / Scanning electron microscopic study of apical biofilm in vital and nonvital human primary teeth

Cristiane Tomaz Rocha 02 July 2007 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV), a presença de microrganismos sob a forma de biofilme na região do ápice radicular de dentes decíduos de humanos, com diferentes graus de patologia pulpar e periapical. Dezoito dentes foram selecionados em três situações clínicas específicas: dentes decíduos portadores de vitalidade pulpar (Grupo I), portadores de necrose pulpar sem lesão periapical visível radiograficamente (Grupo II) e portadores de necrose pulpar e nítida lesão periapical visível radiograficamente (Grupo III). Após exodontia, os dentes foram lavados com solução salina e imersos em solução de tripsina a 0,03 g/mL por 20 minutos. A seguir, foram lavados com solução tampão de cacodilato de sódio a 0,1M e armazenados em solução de Karnowsky modificada. Após cinco dias, os dentes foram seccionados e desidratados em soluções crescentes de etanol e submetidos à secagem no ponto crítico, fixados em \"stubs\" e metalizados para análise em MEV. Nos dentes do Grupo I e II, a superfície radicular estava recoberta por fibras colágenas, sem a presença de bactérias, em 100% das amostras. Nos dentes portadores de necrose pulpar e nítida lesão periapical visível radiograficamente (Grupo III), o ápice radicular apresentava ausência de fibras e presença de áreas de reabsorção com microrganismos em seu interior, representados predominantemente por cocos e bacilos, porém filamentosos e espiroquetas também foram observados, em 100% dos casos. Assim, observou-se que houve a presença de microrganismos sob a forma de biofime apical na região do ápice radicular apenas nos dentes decíduos portadores de necrose pulpar e nítida lesão periapical visível radiograficamente. / The purpose of this study was to evaluate, by scanning electron microscopy (SEM), the presence of microorganisms organized as biofilms in the apical root third of vital and nonvital human primary teeth. Eighteen teeth were selected in three clinical situations: Group I - pulp vitality, Group II - pulp necrosis without periapical lesion and Group III - pulp necrosis with well defined radiographically visible periapical lesion. After extraction, the teeth were washed with saline and immersed in 0.03 g/mL trypsin solution during 20 minutes. Next, the teeth were washed in 0,1M sodium cacodilate buffer and stored in receptacles containing modified Karnovsky solution. After 5 days, the teeth were sectioned, dehydrated in an ethanol series, critical-point dried with CO2, sputter-coated with gold and examined by SEM. The results showed that in the teeth of Groups I and II, the root surface was covered by collagen fibers, without the presence of bacteria in all specimens (100%). In the teeth with pulp necrosis with well defined radiographically visible periapical lesion (Group III), the root apex showed no collagen fibers and presence of resorption areas containing microorganisms (cocci, bacilli, filaments and spirochetes) in all cases (100%). The presence of microorganisms organized as biofilms was detected only in the primary teeth with pulp necrosis and radiographically visible periapical lesion.
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Técnicas adesivas de obturação - Avaliação microscópica quantitativa da reparação apical e periapical pós-tratamento de canais radiculares de dentes de cães com lesão periapical / Adhesive root canal filling techniques A quantitative microscopic evaluation of apical and periapical repair after root canal treatment of dog\'s teeth with periapical lesion

Bonifacio, Kleber Cortes 19 September 2013 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar quantitativamente, in vivo, a resposta dos tecidos apicais e periapicais de dentes de cães com lesão periapical crônica, induzida experimentalmente, após tratamento de canal radicular e obturação endodôntica empregando os seguintes cimentos: EndoREZ, Real Seal e Sealapex. Canais radiculares não obturados (curativo de demora) foram utilizados como controle. Após a obtenção de lesões periapicais experimentalmente induzidas, os dentes foram submetidos à abertura coronária, neutralização do conteúdo necrótico, preparo biomecânico, curativo de demora com uma pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen) e obturação dos canais radiculares com os diferentes cimentos obturadores citados. Decorridos os períodos de 30 e 90 dias, os animais foram mortos e o material submetido ao processamento histotécnico. A análise microscópica pelo método quantitativo de avaliação foi realizada em microscópio Axio Imager.M1 (Zeiss), acoplado a uma câmera AxioCam MRc5 (Zeiss). Foi registrada a descrição completa das características dos tecidos apicais e periapicais e efetuada a quantificação do número de células inflamatórias e das extensões das áreas da lesão periapical em mm2, a presença de reabsorção óssea e a presença de selamento biológico apical, em imagens microscópicas obtidas de cortes histológicos corados por hematoxilina e eosina, utilizando o Software AxioVision Rel.4.6 (Automatic Measurements Programs Program Wizard). Os valores obtidos foram avaliados quanto ao tipo de distribuição e comparados por meio da análise de variância (ANOVA), seguido pelo pós-teste de Tukey, com nível de significância de 5%. A presença e extensão do infiltrado inflamatório além da metade do ligamento periodontal foi observada em todos os cimentos avaliados, tanto no período de 30 quanto 90 dias, sendo predominantemente mononuclear. Não houve modulação do infiltrado inflamatório em nenhum dos cimentos, pois a quantidade de células inflamatórias foi semelhante em ambos os períodos, 30 e 90 dias (p>0,05). Em relação as áreas de reabsorções óssea e radicular, nos cimentos EndoREZ e Real Seal, a presença foi de aproximadamente 50% dos casos aos 90 dias; enquanto no cimento Sealapex, as mesmas estiveram presentes em 30% dos casos tanto aos 30 quanto aos 90 dias. A extensão da lesão periapical foi semelhante em ambos períodos experimentais (30 e 90 dias), em todos os cimentos avaliados. Por fim, selamento biológico foi observado aos 90 dias, em, aproximadamente, 20%, 30% e 50% dos casos nos cimentos EndoREZ, Real Seal e Sealapex, respectivamente; e em 15% dos casos, no período de 30 dias, apenas no cimento do Sealapex. Dentro das limitações deste experimento, pode-se concluir que os cimentos resinosos EndoREZ e Real Seal, não foram bem tolerados pelos tecidos apicais e periapicais. Ainda, reparo dos tecidos apicais, com deposição de cemento, foi encontrado nos dentes obturados com o cimento Sealapex, embora não tenha sido observado reparo total das lesões periapicais. / The aim of this study was to evaluate quantitatively, in vivo, the response of apical and periapical tissues of dog\'s teeth with experimentally induced chronic periapical lesion, after endodontic treatment and root canal filling using the following sealers: EndoREZ, Real Seal and Sealapex. Non-filled root canals (intracanal dressing) were used as control. After induction of the experimental periapical lesions, the teeth were subjected to coronal access, neutralization of the necrotic content, biomechanical preparation, placement of an intracanal dressing with a calcium hydroxide paste (Calen), and root canal filling with the different endodontic sealers mentioned above. After 30 and 90 days, the animals were euthanized and the material was subjected to histotechnical processing. A quantitative microscopic analysis was performed using an Axio Imager.M1 (Zeiss) microscope coupled to an AxioCam MRc5 (Zeiss) camera. A complete description of the characteristics of the apical and periapical tissues was performed and the number of inflammatory cells, size of the periapical lesions (in mm2), presence of bone resorption and presence of sealing of the apical opening with mineralized tissue deposition was determined on microscopic images obtained from hematoxylin and eosin-stained histological sections, using the Software AxioVision Rel.4.6 (Automatic Measurements Programs Program Wizard). Data were examined for their distribution and the compared using analysis of variance (ANOVA) followed by Tukeys post-test with a 5% significance level. Presence and extension of an inflammatory infiltrate, predominantly mononuclear, beyond half of the periodontal ligament was observed for all sealers, at both 30-day and 90-day periods. There was no modulation of the inflammatory infiltrate for any of the sealers because the number of inflammatory cells was similar at both 30-day and 90-day periods (p>0.05). Bone and radicular resorption areas were found in approximately 50% of the cases at 90 days for EndoREZ and Real Seal, and in 30% of the cases at the 30-day and 90-day periods for Sealapex. The periapical lesion size was similar at both experimental periods (30 and 90 days) for all evaluated sealers. Finally, sealing of the apical opening with mineralized tissue deposition was observed at 90 days in approximately 20%, 30% and 50% of the cases for EndoREZ, Real Seal and Sealapex, respectively; and in 15% dos cases, at the 30-day period, only for Sealapex. Within the limitations of this experiment, it may be concluded that the resin-based sealers EndoREZ and Real Seal were not well tolerated by the apical and periapical tissues. Periapical tissue repair, with cementum deposition, was found in the teeth filled with Sealapex, although complete repair of the periapical lesions was not observed.
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Tomografia computadorizada de feixe cônico como método de avaliação pós-tratamento endodôntico em sessão única ou em duas sessões / Cone beam computed tomography as an evaluation method of singlesession and two-session endodontic treatment

Maia, Claudia de Castro Rizzi 08 September 2014 (has links)
Resumo Introdução: Estudos epidemiológicos reportam elevada prevalência de lesão periapical em diferentes países, concluindo que esta constitui um problema de saúde que afeta grande parte da população. Proposição: O objetivo deste estudo clínico randomizado foi efetuar uma avaliação comparativa pós-tratamento endodôntico de dentes permanentes com lesão periapical crônica, realizado em sessão única ou em duas sessões com o uso de hidróxido de cálcio, por 14 dias, como curativo de demora entre sessões, por meio de exames de Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico (TCFC). Metodologia: Foram selecionados 26 dentes pareados de 13 pacientes atendidos na clínica de Endodontia da Universidade Ceuma (UniCeuma), de São Luís - MA, os quais foram divididos randomicamente em dois grupos (n=13/grupo) empregando a técnica de amostragem casual simples (sorteio). No Grupo I os dentes foram instrumentados e obturados na mesma sessão, enquanto no Grupo II, após a instrumentação, foi utilizado curativo de demora entre sessões com a pasta Calen®, por 14 dias, quando então foi efetuada a obturação dos canais radiculares. As imagens de TCFCs foram obtidas em dois momentos distintos: (1) antes do tratamento; e (2) após doze meses do tratamento. O volume das lesões foi obtido pré e pós-tratamento endodôntico, em mm&sup3;, e foi calculada a porcentagem de redução volumétrica das lesões periapicais para cada grupo. A redução volumétrica dos dentes dos Grupos I e II foram comparadas por meio do teste t de Student para amostras pareadas. Foi avaliado também se havia diferença estatisticamente significante na frequência de casos com redução volumétrica maior que 50% entre os Grupos (&alpha;&sup2; likelihood ratio). Os testes foram realizados empregando o programa estatístico SPSS 19.0, com nível de significância de 5%. Resultados: Os volumes tomográficos médios iniciais e finais das lesões periapicais dos Grupos I e II foram, respectivamente, GI - 73,47 mm&sup3;; 27,73 mm&sup3; e GII - 65,94 mm&sup3;; 12,84 mm&sup3;. A redução percentual média das lesões periapicais foi maior para o Grupo II (79,25%), em comparação ao Grupo I (68,35%), embora sem apresentar diferença significante (p>0,05). Não foi observado reparo completo, após 12 meses, em nenhum caso, em ambos os grupos. Observou-se redução superior a 50% em todos os dentes do Grupo II, enquanto que apenas 69,2% dos dentes do Grupo I atingiram esse percentual, evidenciando que a redução volumétrica da lesão periapical superior a 50% foi maior com o uso do curativo de demora entre sessões (p<0,05). Conclusão: A avaliação pelo método da TCFC, no período de 12 meses, não evidenciou reparação completa em nenhum dos casos tratados em sessão única ou com o uso de curativo de demora entre em sessões, demonstrando que esse período de acompanhamento não é suficiente para a regressão total da lesão periapical. Em ambos os grupos foi observada redução volumétrica das lesões periapicais semelhante após 12 meses, sendo que foi evidenciado reparo mais avançado (mais de 50% de redução volumétrica), no grupo onde foi utilizado curativo de demora entre sessões à base de hidróxido de cálcio por 14 dias, fornecendo subsídios para sua indicação do ponto de vista clínico, em dentes portadores de lesão periapical crônica, previamente à obturação dos canais radiculares. / Abstract Introduction: Epidemiological studies have demonstrated a high prevalence of periapical lesion in different countries, stating that it is a health problem that affects great part of the world population. Aim: The aim of this randomized clinical study was to conduct a comparative evaluation after endodontic treatment of permanent teeth with chronic periapical lesion completed in a single session or in two sessions with 14-day calcium hydroxide interappointment intracanal medication, using cone beam computed tomography (CBCT). Methodology: Twenty-six pairs of teeth from 13 patients treated at the Endodontics Clinic of Ceuma University (UniCeuma), São Luís, MA, Brazil, were selected and randomly assigned to two groups (n=13/group) by simple random sampling (draw). In Group I, the teeth were instrumented and filled in the same session, while in Group II, after instrumentation, an intracanal medication (Calen® paste) was used for 14 days between sessions, and then the root canals were filled. CBCT scans were obtained at two moments: (1) before endodontic treatment; and (2) 12 months after treatment. The pre- and postoperative volume of the periapical lesions was measured in mm&sup3;, and the percentage of lesion volume reduction was calculated for each group. Periapical lesion volume reduction in Groups I and II were compared using Students t-test for paired samples. The existence of statistically significant difference in the frequency of cases with >50% lesion volume reduction between the groups (&alpha;&sup2; likelihood ratio) was also assessed. SPSS 19.0 statistical software was used and a significance level of 5% was set for analyses. Results: The mean pre- and postoperative tomographic volumes of the periapical lesions were, respectively: GI: 73.47 mm&sup3;; 27.73 mm&sup3; and GII 65.94 mm&sup3;; 12.84 mm&sup3;. The mean percentage of volume reduction of the periapical lesions was greater in Group II (79.25%) than Group I (68.35%), though without statistically significant difference (p>0.05). After 12 months, complete repair was not observed in ay specimen of neither of the groups. Volume reduction >50% was observed in all teeth of Group II, while only 69.2% of Group Is teeth presented such reduction, indicating that lesion volume reduction >50% was significantly greater with the use of an interappointment intracanal medication (p<0.05). Conclusion: CBCT imaging 12 months post-endodontic treatment did not show complete repair in any of the teeth treated in a single session or medicated with an intracanal dressing between sessions, suggesting that this follow-up period is not sufficient for complete lesion regression. In both groups, similar periapical lesion volume reduction was observed after 12 months, with a more advanced repair (>50% volume reduction) in the group in which a calcium hydroxide interappointment intracanal medication was used, providing clinical evidence to indicate its use in teeth with chronic periapical lesion prior to definitive root canal filling.
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Estudo do papel do eixo IL-33/ST2 na progressão da lesão periapical experimental / Study of the role of the IL-33/ST2 axis in experimental periapical lesion induced in mice

Bignardi, Letícia Andreotti 11 July 2014 (has links)
A citocina IL-33 apresenta papel dual e está envolvida com a resolução ou progressão de inúmeras doenças, além disso, acredita-se que a via IL-33/ST2 esteja envolvida no equilíbrio entre a atividade de osteoclastos e osteoblastos. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel do receptor ST2 no desenvolvimento e progressão de lesões periapicais experimentalmente induzidas em camundongos. Lesões periapicais foram induzidas em primeiros molares inferiores de camundongos WT e ST2 knockout (KO). Decorridos 7 e 14 dias, as amostras de mandíbula foram submetidas às análises: determinação da área de lesão periapical em cortes histológicos e do volume por microtomografia computadorizada (&mu;CT); contagem de osteoclastos submetidos ao ensaio de histoenzimologia (TRAP); expressão gênica de marcadores osteogênicos e osteoclastogênicos por q-PCR; quantificação de neutrófilos por ensaio de mieloperoxidases. Os linfonodos foram submetidos à análise da expressão dos fatores transcricionais T-bet, GATA-3, RORc e Foxp-3 por q-PCR. Análise estatística utilizada foi One-way ANOVA, seguido de pós-teste de Bonferroni. Aos 14 dias, observou-se maior extensão da lesão periapical em animais WT que em ST2KO (p<0,05). O tamanho da lesão nos animais ST2KO permaneceu igual em função do tempo. Foi observada maior quantidade de neutrófilos na lesão do grupo WT aos 7 dias, em comparação aos animais ST2KO (p<0,05). Na expressão de T-bet, GATA-3, RORc e Foxp-3 não foram observadas diferenças estatisticamente significantes. O número de osteoclastos contados nos animais ST2KO foi maior que o observado em WT aos 7dias e aos 14 dias (p<0,05). A expressão de Runx2 foi maior no grupo lesão dos animais ST2KO quando comparado a seu respectivo controle. Os outros marcadores relacionados com a formação óssea não apresentaram diferenças estatisticamente significantes. Dentre os marcadores relacionados com a reabsorção óssea, a catepsina K e o MMP-9 apresentaram maior expressão aos 14 dias, na lesão dos animais WT quando comparada à expressão na lesão dos animais ST2KO (p<0,05). Com base nos resultados obtidos no presente estudo, pode-se concluir que na ausência do receptor ST2 as lesões periapicais são menos extensas e embora em maior quantidade, os osteoclastos são menos ativos. Nossos resultados sugerem um importante papel da via IL-33/ST2 na ativação dos osteoclastos e desenvolvimento da lesão periapical. / The IL -33 cytokine presents a dual role and is involved either in the resolution and progression of many diseases. Furthermore, it is believed that this pathway is involved between osteoclast and osteoblast activity balance. The aim of this study was to evaluate the role of ST2 receptor in the development and progression of experimentally induced periapical lesions in mice. Periapical lesions were induced in first molars of WT and ST2 knockout (KO) mice. After 7 and 14 days, jaw samples were subjected to various analysis: determination of periapical lesions area by histology and volume by computed microtomography (&mu;CT); osteoclasts number by TRAP histoenzymology; osteogenic and osteoclastogenic markers expression by q-PCR; neutrophil quantification by myeloperoxidase activity. The expression of transcription factors T-bet, GATA-3, RORC and Foxp-3 in lymph nodes were analysed by q-PCR. Statistical analysis was done by One-way ANOVA and Bonferroni post-test. It was observed a greater extent in periapical lesions of WT compared to ST2KO animals at 14 days (p<0.05). There is no progression in the lesion of ST2KO mice with the time. A larger number of neutrophils in WT group was observed, compared to ST2KO mice evaluated at 7 days (p<0.05). The expression of T-bet, GATA-3, RORc and Foxp-3 were not statistically significant different among the groups. The number of osteoclasts in lesions of ST2KO animals were greater than the observed in WT, at 7 and 14 days (p<0.05). Although, other osteogenic markers showed no statistically significant difference, Runx2 expression in ST2KO was higher in lesion side compared to control side at 14 days. The markers related to bone resorption, cathepsin K and MMP-9, were significantly abrogated in the lesion side of ST2KO mice, at 14 days (p<0.05). Based on the results, it can be concluded that although larger amounts of osteoclast were counted in ST2KO, the lesion was less extensive and osteoclasts less active. It all suggests that the IL-33/ST2 pathway play an important role in osteoclasts activation and periapical lesion development.
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MEV - Avaliação morfológica do ápice radicular em dentes decíduos de humanos, com diferentes graus de patologia pulpar e periapical / SEM - Morphological evaluation of the root apex in human primary teeth with different degrees of pulpal and periapical pathology

Patrícia Motta Fernandes 03 July 2007 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar a morfologia da superfície externa de ápices radiculares de dentes decíduos de humanos com necrose pulpar, com e sem lesão periapical visível radiograficamente, e de dentes com vitalidade pulpar, por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV). Dezenove dentes foram extraídos sendo cinco dentes com vitalidade pulpar (Grupo I), seis com necrose pulpar sem lesão periapical (Grupo II) e oito com necrose pulpar e lesão periapical (Grupo III). Os dentes (incisivos e molares) foram lavados com solução salina e imersos em solução de tripsina 0,03g/mL por 20 minutos. Decorrido esse período, os dentes foram lavados com solução tampão de cacodilato de sódio 0,1M e armazenados em solução de Karnovsky modificada. Após 5 dias, os ápices radiculares foram seccionados, desidratados em série crescente de etanol, submetidos à secagem pelo método do ponto crítico com dióxido de carbono, fixados em \"stubs\" e metalizados com ouro puro para análise em MEV. A superfície do ápice radicular foi avaliada com relação à presença de fibras e áreas de reabsorção dentinária e cementária. Na superfície radicular apical dos dentes com vitalidade pulpar e com necrose pulpar sem lesão periapical foi observada a presença de fibras e ausência de reabsorção em todos os casos (100%). Por outro lado, todos os espécimes (100%) com necrose pulpar e presença de lesão periapical apresentaram ausência total de fibras e áreas de reabsorção cementária. Áreas de reabsorção dentinária foram observadas em 2 espécimes. Os resultados obtidos demonstraram a presença de diferenças morfológicas na região apical de dentes decíduos com diferentes graus de patologia pulpar e periapical. A presença de áreas de reabsorção cementária e ausência de fibras nos dentes decíduos com lesão periapical indicam a necessidade da aplicação de medidas terapêuticas específicas. / The objective of this study was to evaluate, by scanning electron microscopy (SEM), the morphology of the outer surface of root apexes of human primary teeth with pulp vitality and teeth with pulp necrosis, with and without radiographically visible periapical lesion. Nineteen teeth were extracted, being five teeth with pulp vitality (Group I), six with pulp necrosis without periapical lesion (Group II) and eight with pulp necrosis and periapical lesion (Group III). The teeth (incisors and molars) were washed in saline and immersed in 0.03 g/mL trypsin solution during 20 minutes. After this period, the teeth were washed in 0.1 M sodium cacodylate buffer solution and stored in modified Karnovsky\'s solution. After 5 days, the root apexes were sectioned, dehydrated in an ascending ethanol series, critical-point dried with CO2, mounted on stubs, and sputter-coated with gold for SEM analysis. The root apex surface was examined with respect to the presence of fibers and areas of dentinal and cemental resorption. In the apical root surface of the teeth with pulp vitality and teeth with pulp necrosis without periapical lesion presence of fibers and absence of resorption were observed in all cases (100%). On the other hand, all specimens (100%) with pulp necrosis and periapical lesion showed total absence of fibers and areas of cemental resorption. The results of this study demonstrated the existence of morphological differences in the apical region of primary teeth with different degrees of pulpal and periapical pathology. The presence of areas of cemental resorption and absence of fibers in the primary teeth with periapical lesion indicate the need for application of specific therapeutic measures.
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Efeito do ultrassom na eliminação de micro-oganismos e endotoxinas em dentes com infecção endodôntica primária / Ultrasound effect in eliminating microorganisms and endotoxins in teeth with primary endodontic infection

Flores Orozco, Esteban Isai [UNESP] 07 December 2016 (has links)
Submitted by ESTEBAN ISAI FLORES OROZCO null (esteban_cuacua@hotmail.com) on 2017-01-30T12:31:02Z No. of bitstreams: 1 Tese EIF Orozco 2016.pdf: 3857078 bytes, checksum: 8192b396024e2af0be54f979f7662431 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-02-02T18:44:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 floresorozco_ei_me_sjc.pdf: 3857078 bytes, checksum: 8192b396024e2af0be54f979f7662431 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-02T18:44:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 floresorozco_ei_me_sjc.pdf: 3857078 bytes, checksum: 8192b396024e2af0be54f979f7662431 (MD5) Previous issue date: 2016-12-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os objetivos do presente estudo foram: a) Verificar a carga microbiana e quantificar endotoxinas presentes nos canais radiculares de dentes com infecção endodôntica primária; b) Comparar a efetividade antibacteriana e sobre endotoxinas do preparo biomecânico com dois métodos de irrigação final: com ou sem irrigação ultrassônica passiva; c) Correlacionar sinais e sintomas com a microbiota presente e complexos bacterianos; d) Relacionar níveis de endotoxinas e carga microbiana com sinais e sintomas clinicos. Foram selecionados para o estudo 20 dentes uniradiculares, que apresentavam infecção endodôntica primária e lesão periapical, sendo estes submetidos a TCFC. Os canais foram preparados com sistema reciprocante e irrigação com NaOCl 2.5%, seguido de dois protocolos de irrigação final: com e sem uso de ultrassom. Todos os canais foram preenchidos com MIC com hidróxido de cálcio + soro fisiológico e após 14 dias foram obturados com cones de guta-percha e cimento AH Plus. Foram realizadas coletas do conteúdo do canal, logo após a abertura coronária (1ª Coleta); após PBM (2ª Coleta) e após limpeza final dos canais com NaOCl seguido de EDTA por 5 min (grupo sem PUI); ou irrigação com NaOCl + PUI e EDTA + PUI (3ª Coleta) (grupo com PUI) . Foram avaliados sinais/sintomas clínicos previo ao tratamento.O conteúdo das coletas foi analisado a partir de sondas de DNA pelo método de hibridização DNA-DNA checkerboard e foi realizado teste de avaliação da atividade antimicrobiana por cultura microbiológica. Alem disso foi realizado quantificação de endotoxinas pelo Lisado de Amebócitos de Limulus (LAL). E a volumetria dos canais foi feita através da TCFC utilizando o software Nemotec®. Os resultados foram submetidos a análise estatístico pelos testes Mann Whitney e teste ANOVA a dois fatores de medidas repetidas (5%). Valor de p < 0.05 foi considerado estatisticamente significante. Houve associação entre dor à percussão e complexos laranja principal e laranja periférico. Fístula foi associada ao complexo laranja principal e laranja periférico. Foi observada redução de bactérias após o tratamento endodôntico. Ao utilizar o método de hibridização DNA-DNA checkerboard, as bactérias mais prevalentes foram S. constellatus, E faecalis, F. nucleatum, P. gingivalis, P. melaninogenica e S. intermedius na primeira coleta. Os métodos de irrigação diminuíram número de espécies bacterianas comparado à coleta inicial. A irrigação ultrassônica passiva apresentou diferença estatística significativa sobre bactérias anaeróbias. PUI não apresento diferença significativa sobre bactérias aeróbias nem endotoxinas comparado com irrigação convencional. Concluiu-se que todos os canais apresentaram micro-organismos sendo que anaeróbios estiveram presentes em grande quantidade. Após preparo biomecânico do canal radicular e irrigação com PUI, houve redução significante da carga de micro-organismos anaeróbios. Os micro-organismos mais resistentes ao preparo biomecânico com e sem PUI foram S. constellatus , E. faecalis, S. intermedius e L. bucalis. Houve associação positiva entre sinais e sintomas clínicos com complexo laranja e com micro-organismos. Os níveis de endotoxinas diminuíram após o preparo biomecânico não foram inferenciados por PUI a irrigação convencional. / The objective of this study were: a) to check the microbial load and to quantify endotoxin present in the root canals of teeth with primary endodontic infection; b) to compare the effectiveness of bacteria and endotoxin reduction of the biomechanical preparation with final irrigation methods: with or without passive ultrasonic irrigation (PUI); c) to correlate signs and symptoms with the present microbiota and bacterial complexes; d) to relate endotoxin and microbial load levels with signs and symptoms before biomechanical preparation. Twenty single-root teeth were selected for the study, presenting primary endodontic infections and periapical lesion, which underwent CBCT. The canals were prepared with reciprocating system and irrigation with 2.5% NaOCl, followed by two final irrigation protocols: with and without ultrasound. All canals were filled with MIC with calcium hydroxide + saline and after 14 days were filled with gutta percha and AH Plus. Samples from the content of canal were harvested, after coronal opening (1st Sample); after PBM (2nd Sample) and after final cleaning of the canals with NaOCl followed by EDTA for 5 min (group without PUI); or irrigation with NaOCl + PUI and EDTA + PUI (3rd Sample) (group with PUI). The contents of the samples were analyzed from DNA probes by the DNA-DNA checkerboard hybridization method and a test was performed to evaluate the antimicrobial activity by microbiological culture. In addition, quantification of endotoxins by Limulus Amebocyte Lysate (LAL) was performed. The canal volumetry was assessed through the CBCT using Nemotec® software. The results were submitted to statistical analysis by Mann Whitney and repeated measures two-way ANOVA (5%). Value of p <0.05 was considered statistically significant. There was an association between pain at percussion and main orange and peripheral orange complexes. Fistula was associated with the main orange and peripheral orange complex. A reduction of bacteria was observed after endodontic treatment. When using the DNA-DNA checkerboard hybridization method, the most prevalent bacterias were S. constellatus, E faecalis, F. nucleatum, P. gingivalis, P. melaninogenica and S. intermedius in the first collection. Irrigation methods decreased number of bacterial species compared to initial collection. The passive ultrasonic irrigation presents statistically significant difference on anaerobic bacteria. PUI did not present significant difference on aerobic bacteria or endotoxins compared to conventional irrigation. In conclusion, all canals had microorganisms, and anaerobes were present in large quantities. The most frequent microorganisms were S. constellatus, E. faecalis, F. nucleatum SP, P. gingivalis e S. intermedius. After biomechanical preparation of root canal and irrigation with PUI, there was a significant reduction of the anaerobic microorganism load. The microorganisms most resistant to biomechanical preparation with and without PUI were S. constellatus , E. faecalis, S. intermedius e L. bucalis. There was a positive association between clinical signs and symtoms with orange complex and with microorganisms. Endotoxin levels decreased after biomechanical preparation, while not influenced by PUI in comparison to conventional irrigation.
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Prevalência de lesões periapicais em imagens de tomografia computadorizada de feixe cônico / Prevalence of periapical lesions in cone beam computed tomography images

Luciana Maria Paes da Silva Ramos Fernandes 25 April 2011 (has links)
A lesão periapical de origem endodôntica é consequência de necrose pulpar causada pela presença de microorganismos no interior do sistema de canais radiculares. Essa lesão é geralmente crônica e assintomática e, portanto, os exames de imagem são importantes para sua detecção. A tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) é uma tecnologia avançada, de grande utilidade para a avaliação de lesões periapicais e suas características. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência de lesões periapicais no complexo maxilo-mandibular detectadas em imagens de TCFC e classificar as lesões encontradas, de acordo com os seguintes critérios: idade e gênero do paciente; indicação do exame de TCFC; localização e extensão da lesão; grau de comprometimento de cortical óssea e condição do dente associado. Para isso, foram interpretadas imagens de 300 pacientes obtidas em tomógrafo i-CAT Classic da FOB-USP e de um centro radiológico. Em uma primeira etapa, os exames foram selecionados de acordo com os critérios de inclusão (pacientes &#x2265; 12 anos de idade; arcos dentários com pelo menos 1 dente não-retido e protocolos de escaneamento dos exames de FOVs de 6, 8 ou 13cm e tamanhos de voxel de 0,25 ou 0,3) e analisados no software i-CAT Vision. Os dados do paciente como idade e gênero foram anotados, bem como o motivo para realização do exame. Procedeu-se a avaliação individual de cada dente por meio de cortes parassagitais ao arco, anotando a quantidade total de dentes e destacando os que apresentaram lesão periapical para posterior análise. Na segunda etapa do estudo, 2 examinadores, sendo uma radiologista e um endodontista avaliaram apenas os exames nos quais foram detectadas lesões periapicais. Cada lesão foi vista em 3 planos (sagital, axial e coronal) e medidas do maior diâmetro no corte mais expressivo foram feitas, usando ferramenta do software. Localização da lesão, comprometimento de cortical e condição do dente relacionado também foram anotados nessa etapa. Como resultado, obteve-se que 51,40% do total de pacientes cujo exame de TCFC permitia observar apenas 1 arco com lesão ou ambos os arcos dentários (n=214) apresentaram lesão periapical. Do total de 5.585 dentes avaliados de 300 pacientes, 192 apresentaram lesão (3,44%). Em relação à idade dos pacientes com lesão, o grupo de 60-69 anos apresentou maior prevalência (73,07%) e o grupo de 12-19 anos apresentou menor prevalência (15%). Em relação a gênero, a prevalência foi similar entre homens e mulheres, sendo a diferença estatisticamente não-significativa. Os exames solicitados como complementação de avaliação endodôntica apresentaram maior prevalência de lesão. A localização mais frequente de lesões periapicais foi em molares inferiores (5,91%) e a menos frequente em incisivos e caninos inferiores (0,63%). As lesões com dimensão entre 4-8mm de diâmetro foram as mais frequentemente encontradas (30,72%, kappa intra=0,87, kappa inter=0,79). A maioria das lesões não apresentou comprometimento de cortical óssea (76,28%, kappa intra=0,97, kappa inter=0,96). Dentes com tratamento endodôntico inadequado apresentaram maior quantidade de lesões (78,18%, kappa intra=0,95, kappa inter=0,85). A partir da análise da amostra estudada, concluiu-se, portanto, que lesões periapicais são frequentemente encontradas em exames de TCFC com diferentes prescrições e que a presença de lesões periapicais tem associação significativa entre idade do paciente, tipo e condição do dente relacionado. / Periapical lesion of endodontic origin is a consequence of the pulp necrosis caused by the presence of microorganisms within the root canal system. This lesion is usually chronic and asymptomatic and, therefore, the image examinations are important for its detection. Cone beam computed tomography (CBCT) is an advanced new technology, which can be very useful for the assessment of periapical lesions and their features. The aim of this study was to determine the prevalence of periapical lesions in jaws detected in CBCT images, as well as to classify the found lesions into the following criteria: patients age and gender; purpose of the CBCT scan; location and size of the lesion, as well as cortical bone and related tooth condition. The images of 300 patients who underwent a Classic i-CAT CBCT scan in Bauru Dental School (FOB-USP) and in a private radiologic office were assessed. The first part of the study involved the selection of the exams according to the inclusion criteria (patients &#x2265; 12 years old; maxilla/ mandible with at least 1 present tooth and scanning protocols using 6, 8 or 13 cm FOV and 0.25 or 0.3 voxel) using i-CAT Vision software. Data about patients age and gender were recorded, as well as the reason for the CBCT scan. Each tooth has been individually assessed in transversal slices. The total amount of teeth in each jaw and the presence or absence of periapical lesion have been recorded. In the second part of the study, 2 examiners (Dental Radiology and Endodontics experts) assessed the examinations in which periapical lesions have been detected. Each lesion has been evaluated in 3 dimensions (sagittal, axial and coronal) and the measurement was performed using specific tool of the software in the largest diameter (mm) in the most representative slice. The lesion location, cortical bone condition and related tooth condition were also recorded. Periapical lesion was found in 51.40% of the patients who presented CBCT images of a single jaw with lesion or both jaws (n=214). From the total amount of 5585 evaluated teeth of 300 patients, 192 presented lesion (3.44%). Concerning patients age, the 60-69 years old group presented the higher prevalence (73.07%) and the 12-19 years old group presented the lower prevalence (15%). As far as gender is concerned, the prevalence has been similar between men and women and the difference was not statistically significant. The scans performed in order to complement endodontic assessment presented the higher prevalence of periapical lesion. The most frequent location of the lesions was mandibular molars (5.91%) and the less frequent was mandibular incisors and canines (0.63%). The lesions with 4-8mm size were the most frequently found (30.72%, intra kappa=0.87, inter kappa=0.79). The most part of the lesions has not presented cortical bone changes (76.28%, intra kappa=0.97, inter kappa=0.96). The higher prevalence of lesion has been found in teeth with inadequate endodontic treatment (78.18%, intra kappa=0.95, inter kappa=0.85). It is possible to conclude that periapical lesions may be frequently found in CBCT examinations of different purposes and that the presence of periapical lesions has significant association with patients age and tooths type and condition.
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Ausência da interleucina-22 interfere na microbiota bucal e na progressão de lesões periapicais induzidas em dentes de camundongos / Absence of IL-22 interferes with the oral microbiota and the progression of induced periapical lesions in mice teeth

Oliveira, Katharina Morant Holanda de 10 May 2013 (has links)
Introdução: O objetivo deste trabalho foi caracterizar a composição da microbiota bucal e a formação e progressão de lesões periapicais induzidas experimentalmente em dentes de camundongos knockout para IL-22 (IL-22 KO) comparados com animais wild-type (WT). Material e Métodos: Inicialmente, foi realizada a avaliação do perfil microbiano da cavidade bucal dos animais (40 espécies de micro-organismos), no dia das exposições pulpares, por meio de técnica de biologia molecular (Checkerboard DNA-DNA hybridization). Em seguida, lesões periapicais foram induzidas nos primeiros molares inferiores dos camundongos e, decorridos os períodos de 7, 21 e 42 dias, os animais foram submetidos à eutanásia em câmara de CO2. As mandíbulas foram então removidas e submetidas ao processamento histotécnico. A seguir, cortes representativos de cada dente foram corados com hematoxilina e eosina (HE), para descrição do tecido pulpar e das regiões apical e periapical, em microscopia óptica convencional e mensuração da área das lesões periapicais em microscopia de fluorescência. Além disso, cortes sequenciais foram avaliados por meio de: histoenzimologia para a marcação de osteoclastos (TRAP), coloração de Brown & Brenn (para identificação de bactérias) e imunohistoquímica (para identificação de RANK, RANKL e OPG). Os escores da quantidade de células bacterianas, para cada uma das 40 espécies avaliadas, foram submetidos à analise estatística empregando o teste não-paramétrico de Mann-Whitney para amostras independentes, para comparação entre os grupos. Os resultados numéricos obtidos na análise morfométrica da área das lesões periapicais e do número de osteoclastos foram submetidos à análise estatística \"one-way\" ANOVA e pós-teste de Bonferroni. Para todas as análises foi adotado o nível de significância de 5%. Resultados: Em relação ao perfil microbiano encontrado na cavidade bucal dos animais, foi possível observar diferença estatisticamente siginificante entre os dois grupos de animais para 6 espécies bacterianas (p<0,05), sendo 5 dessas espécies mais encontradas nos animais WT e apenas 1 encontrada em maior quantidade nos animais IL-22 KO. Já em relação à análise microscópica, o grupo dos animais WT mostrou diferença estatisticamente significante entre 7 e 42 dias e entre 21 e 42 dias, com aumento progressivo no tamanho das lesões e no número de osteoclastos (p<0,05). No grupo dos animais IL-22 KO, houve um aumento do tamanho da lesão e do número de osteoclastos entre 7 e 21 dias, seguido de diminuição desses parâmetros entre 21 e 42 dias, com diferença significante (p<0,05) entre 7 e 21 dias. Além disso, na comparação entre os dois tipos de animais, foram encontradas diferenças significantes (p<0,05) em relação ao tamanho das lesões periapicais e ao número de osteoclastos aos 42 dias, sem diferenças em relação à localização de bactérias e imunohistoquímica. Conclusões: Esse estudo demonstrou diferenças na composição da microbiota bucal dos animais WT e IL-22 KO, o que pode ter influenciado na formação das lesões periapicais. Além disso, a ausência da IL-22 em camundongos interferiu na progressão das lesões periapicais, assim como no número de osteoclastos, sugerindo a participação da IL-22 na resposta imune e inflamatória do hospedeiro à infecção dos canais radiculares. / Introduction: The aim of this study was to evaluate the participation of the IL-22 on the formation and progression of experimentally induced periapical lesions in teeth of IL-22 knockout (IL-22 KO) compared to wild-type (WT) mice. Methods: Initially, it was performed the evaluation of the microbial profile present in the oral cavity of animals (40 bacterial species), on the day of pulpal exposures, by means of molecular biology technique (checkerboard DNA-DNA hybridization). Then, the periapical lesions were induced in the inferior first molars of the mice and, after the periods of 7, 21 and 42 days, the animals were euthanized in a CO2 chamber. The jaws were removed and subjected to histotechnical processing. The following sections were representative stained with hematoxylin and eosin (HE) for description of the pulp tissue, apical and periapical regions in conventional optical microscopy and measurement of the area of periapical lesions in fluorescence microscopy. Moreover, sequential specimens were evaluated through: histoenzimology for osteoclasts (TRAP) Brown & Brenn staining (for bacteria identification) and immunohistochemistry (for RANK, RANKL and OPG identification). The scores of the amount of bacterial cells, for each one of the 40 species assessed, were subjected to statistical analysis using the nonparametric Mann-Whitney test for independent samples for comparison between groups. The numerical results of the morphometric analysis of the area of the periapical lesions and the number of osteoclasts were subjected to statistical analysis one-way ANOVA and Bonferroni\'s post-test. For all the statistical analysis the significance level of 5% was adopted. Results: Regarding the microbial profile found in the oral cavity of the animals, it was observed statistically siginificant differences between the two groups of animals for 6 bacterial species (p<0.05), with 5 species showing higher levels in the WT group and only 1 specie found in higher levels in the IL-22 KO animals. Concerning the microscopical analysis, the group of WT mice showed a statistically significant difference between 7 and 42 days and between 21 and 42 days, with a gradual increase in the size of periapical lesions and number of osteoclasts (p<0.05). In the group of IL-22 KO animals, an increase in lesion size and number of osteoclasts between 7 and 21 days was observed, followed by a decrease of these parameters between 21 and 42 days, with significant differences between 7 and 21 days (p <0.05). Moreover, when comparing the two types of animals, significant differences were found (p <0.05) about to the size of periapical lesions and number of osteoclasts at 42 days, without differences in localization of bacteria and immunohistochemistry. Conclusions: This study showed differences in the composition of the oral microbiota of the two types of animals that may have influenced the progression of periapical lesions. Moreover, the absence of IL-22 in mice interfered with the progression of periapical lesions, as well as in the number of osteoclasts, suggesting the involvement of this cytokine in host\'s immune and inflammatory response to the infection of root canals.

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