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EFEITOS DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE APLICAÇÃO NA LONGEVIDADE DE SISTEMAS ADESIVOS CONVENCIONAIS E AUTOCONDICIONANTES:“IN VITRO” E “IN VIVO” / Effects of different application protocols on the longevity of etch-and-rinse and self-etch adhesives systems: "in vitro" and "in vivo"

Zander-grande, Christiana 18 October 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Christiana Zander- Grande.pdf: 3394468 bytes, checksum: ba3c2add0422346076ce6340c05c537d (MD5) Previous issue date: 2012-10-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The purpose of this study was to evaluate the effect of different protocols of application of conventional and self-etch adhesive systems over the years, in a laboratory study and two clinical studies. Objective 1: to evaluate the microtensile bond strengths (microTBS) of 1-step vs. 2-step self-etch systems to dentin after 24 hours and after 6 months of water storage. Objective 2: to evaluate the 24-month clinical performance of resin–based composites in noncarious cervical lesions (NCCLs) in teeth restored with two etch-and-rinse adhesives that had been applied with a vigorous rubbing action to both dry and rewet dentin. Objectives 3: to evaluate the clinical performance of two one-step self-etch adhesives in non carious cervical lesions (NCCL) under active or passive application mode. Methods 1: resin composite buildups were bonded to occlusal dentin of third molars using the following adhesives: Xeno IV (XE, Dentsply), G-Bond (GB, GC Inc), Clearfil S3 Bond (CS3, Kuraray); Adper Prompt L-Pop (AD, 3M ESPE); Go (GO, SDI), All Bond SE (ABSE 1-step or ABSE 2-step, Bisco) and Clearfil SE Bond (CSE, Kuraray). The bonded sticks (cross-sectioned area of 0.8-0.9 mm2) originated from the same teeth were randomly divided to be tested after 24 hours or after 6 months of water storage. The data was submitted to two-way repeated measures ANOVA and Tukey's test with and without the inclusion of premature failures (PF) (alpha = 0.05). Methods 2: were enrolled 40 patients in this study. They inserted 160 restorations and evaluated them at baseline and at six, 12 and 24 months of service. They divided the restorations into four groups: One-Step (OS) Universal Dental Adhesive System (Bisco, Schaumburg, Ill.) (acetone-based adhesive) with rewet dentin; OS with dry dentin; Adper Single Bond (SB) Plus Adhesive (3M ESPE, St. Paul, Minn.) (ethanol/water–based adhesive) with rewet dentin; and SB with dry dentin. The authors used the same resin–based composite for all restorations. They evaluated the restorations according to modified U.S. Public Health Service criteria. Methods 3: 31 patients with 4 NCCL were enrolled in this study. One hundred and twenty four restorations were placed according to one of the following conditions: (1) APA (Adper Prompt L Pop, active application), (2) APP (Adper Prompt L-Pop - passive application); (3) XEA (Xeno III - active application) and (4) XEP (Xeno III - passive application). The restorations were evaluated by the FDI criteria at baseline, after 6, 12 and 24 months of clinical service. The effects of adhesive, mode of application and recall period were assessed via mixed generalized linear model (alfa=0.05). Results 1: the inclusion of PF resulted in different statistically significant means for CS3, CSE and AD (P<0.05). Results 2: the 24-month retention rates for the rewet and dry conditions, respectively, were 95.0 percent and 97.5 percent for SB and 97.5 percent and 91.9 percent for OS. The authors detected no significant difference between rewet and dry groups for either adhesive (P > .05). In terms of marginal discoloration, OS performed significantly worse than did SB, irrespective of dentin moisture (P > .05). Results 3: the adhesive AP and the passive application mode showed significant higher marginal staining than XE and active application, respectively (p < 0.05). In regard to the retention rates, the active application mode yielded higher retention rates at the 24-month recall compared to the passive application, regardless of the material. The individual retention rates (%, 95% confidence interval) of both adhesive in the active application mode were the same 96.8% (83.8– 99.4), while in the passive application were 87.1% (71.2–94.9) and 80.7% (63.7–90.8), respectively, for XE and AP. Conclusions 1: only the ABSE2 showed stable bonds after 6 months of water storage (P>0.05). Conclusions 2: dentin moisture seems not to be important for the retention of etch-and-rinse adhesives as long as the adhesives have been rubbed vigorously onto the dentin surface. The ethanol/water–based adhesive showed a better overall performance than did the acetone–based system. Conclusions 3: the active application improved the retention rates of both adhesives after 24 months and minimized the marginal staining at enamel margins. / O propósito deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes protocolos de adesão na longevidade de diferentes sistemas adesivos, convencionais e autocondicionantes em um estudo laboratorial e dois estudos clínicos. Sendo os objetivos específicos, para cada um dos três estudos respectivamente: avaliar a resistência de união, ao longo do tempo, de sistemas adesivos autocondicionantes de um passo e dois passos, aplicados de acordo com as recomendações do fabricante. Avaliar clinicamente a retenção de restaurações de classe V realizadas com sistemas adesivos convencionais de dois passos aplicados de maneira vigorosa em dentina seca ou úmida. Avaliar clinicamente a retenção de restaurações de classe V realizadas com sistemas adesivos autocondicionantes aplicados de forma ativa ou passiva. Metodologia 1: foram utilizados 24 terceiros molares, cuja a dentina foi exposta e sobre ela foram construidas de maneira incremental coroas em resina composta utilizando os seguintes adesivos: Xeno IV (XE, Dentsply), G-Bond (GB, GC Inc), Clearfil S3 Bond (CS3, Kuraray); Adper Prompt L- Pop (AD, 3M ESPE); Go (GO, SDI), All SE Bond (ABSE um passo, ABSE dois passos, Bisco) e Clearfil SE Bond (CSE, Kuraray). Os “palitos” obtidos (0,8mm2) originados a partir dos mesmos dentes foram divididos aleatoriamente para serem testados, após 24 h ou 6 m de armazenamento em água. Os dados foram submetidos a análise de variância ANOVA dois critérios e teste de Tukey com e sem a inclusão de falhas prematuras (PF) (α=0,05). Metodologia 2: 40 pacientes com 4 lesões cervicais não cariosas (LCNC) semelhantes foram incluidos neste estudo. Foram colocadas 160 restaurações, de acordo com os seguintes grupos: One-Step/acetona (Bisco) Seco ou Reumedecido (OSS ou OSR) e Adper Single Bond/etanol Seco ou Reumedecido (SBS ou SBR) (3M ESPE). As restaurações foram avaliadas pelos critérios USPHS modificados nos tempos imediatos, após, 6, 12 e 24 meses. Em cada estudo clínico, as diferenças nos índices dos diferentes grupos no mesmo período de avaliação e as diferenças para um mesmo grupo nos diferentes períodos de avaliação (imediato, 6, 12 e 24 meses) foram submetidas ao teste de medidas repetidas de Friedman (α = 0,05) e, para as diferenças encontradas, os grupos foram comparados pelo teste de Wilcoxon (α = 0,05). Metodologia 3: 31 pacientes com 4 LCNC semelhantes foram incluídos neste estudo. Foram colocadas 124 restaurações de acordo com as seguintes condições: (1) APA (Adper Prompt L Pop, aplicação ativa), (2) APP (Adper Prompt L-Pop - aplicação passiva), (3) XEA (Xeno III - aplicação ativa) e (4) XEP (Xeno III - aplicação passiva). As restaurações foram avaliadas pelos critérios da FDI imediatamente e após 6, 12 e 24 meses. Os efeitos do adesivo e o modo de aplicação foram avaliados através de um modelo linear generalizado misto associado a uma função de ligação. Resultados 1: a inclusão de falhas prematuras resultou em diferença estatisticamente significativas para CS3, CSE e AD (P <0,05). Resultados 2: as taxas de retenção após 24 meses de avaliação para os seguintes grupos foram: SBR 95%, SBS 97,5%, OSS 91,9% e OSR 97,5%. Nenhuma diferença significativa foi detectada entre os grupos (P> 0,05). Em termos de descoloração marginal, o desempenho do OS foi significativamente pior do que SB, independentemente da umidade da dentina (P> 0,05). Resultados 3: O adesivo AP e a aplicação passiva demostraram uma significativa descoloração quando comparados com o adesivo XE e a aplicação ativa, respectivamente (p < 0.05). No que diz respeito às taxas de retenção, o modo de aplicação ativa produziu maiores taxas de retenção na avaliação de 24 meses em comparação com a aplicação passiva, independentemente do adesivo. As taxas de retenção individuais (%, intervalo de confiança de 95%) de ambos os adesivos no modo de aplicação ativa foram os 96,8% mesmo (83,8-99,4), enquanto na aplicação passiva foram 87,1% (71,2-94,9) e 80,7% (63,7- 90,8), respectivamente, para XE e AP. Conclusão: novos protocolos de aplicação podem melhorar os resultados clínicos em longo prazo dos diferentes sistemas adesivos, quando comparados aos protocolos recomendados pelos fabricantes; que a aplicação ativa melhorou as taxas de retenção dos sistemas adesivos testados, ao longo do tempo, para ambos os estudos clínicos.
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Avaliações clínica e clínica/fotográfica de restaurações adesivas, realizadas em lesões cervicais não cariosas: efeitos dos materiais restauradores, tipos e tempos de avaliação

Oliveira, Fernanda Garcia de [UNESP] 22 February 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:30:43Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_fg_me_araca.pdf: 2551755 bytes, checksum: 87cfaf51056a1808db592481a611efb3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo desse trabalho foi avaliar através das análises clínica e clínica/fotográfica o comportamento de 124 restaurações de lesões cervicais não cariosas, realizadas com uma resina composta ou com um ionômero de vidro modificado por resina, nos períodos de 6 e 12 meses após suas realizações. Foram formados 3 grupos de estudo, de acordo com os materiais e técnicas empregadas. Previamente à aplicação dos materiais adesivos, todos os dentes receberam o condicionamento com ácido fosfórico a 37% em esmalte e dentina. Após, os dentes pertencentes ao grupo I receberam o sistema adesivo convencional Scotchbond Multi Uso, seguido pela resina composta Filtek Z350; os do grupo II apenas o material ionomérico modificado por resina Fuji II L.C., enquanto que os do grupo III foram restaurados com o mesmo material ionomérico, entretanto, previamente à sua inserção, receberam a aplicação de duas camadas do primer do sistema adesivo ScotchBond Multi Uso. Após o acabamento e polimento, as restaurações foram fotografadas, bem como aos 6 e 12 meses após suas realizações. Os dentes foram avaliados por 2 examinadores, quanto aos fatores retenção, adaptação marginal, descoloração marginal, alteração de cor, presença de lesão de cárie marginal, forma anatômica e sensibilidade na análise clínica; e na análise clínica/fotográfica quanto aos fatores retenção, descoloração marginal, localização da gengiva marginal, alteração de cor e forma anatômica da restauração. Os resultados foram submetidos ao teste de Kappa observando um grau de concordância acima de 80% entre os examinadores. A aplicação do Teste de Kruskal-Wallis não apontou diferença estatisticamente significante, na análise clínica, para as variáveis forma anatômica, descoloração marginal, alteração de cor, lesão de cárie, adaptação... / The aim of this study was to evaluate the performance of 124 restorations of non-carious cervical lesion through clinical and clinical/photographic analyses. The restorations were made in composite resin or resin-modified glass ionomer and evaluated after 6 and 12 months. Three groups were obtained according to the materials and techniques. Previously to the application of the adhesive materials, all teeth were submitted to acid etching with 37% phosphoric acid in enamel and dentine. Then, the teeth of group I received the conventional adhesive system Scotchbond Multi-Purpose followed by the composite resin Filtek Z350; the teeth of group II received only the resin-modified ionomeric material Fuji II L.C.; and the teeth of group III were restored with the same ionomeric material after application of two layers of the primer of the adhesive system Scotchbond Multi-Purpose. The restorations were photographed immediately after this procedure and after 6 and 12 months. The teeth were evaluated by 2 examiners regarding retention, marginal fit, marginal discoloration, color alteration, presence of marginal caries and sensitivity during the clinical evaluation. The clinical/photographic analysis evaluated retention, marginal discoloration, localization of the marginal gingiva, color alteration and anatomy of the restoration. The results were submitted to the Kappa test that revealed degree of agreement above 80% between the examiners. The Kruskal-Wallis test showed no statistically significant difference in the clinical analysis for anatomy, marginal discoloration, color alteration, caries, marginal fit and sensitivity among the three groups for each period of evaluation. However, there was statistically significant difference for retention at the 12-month follow-up considering that the group III was superior in comparison to the group II. The... (Complete abstract, click electronic address below)
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Influência do fator mecânico na formação de lesões cervicais não cariosas / Influence of the mechanical factor on the formation of non-carious cervical lesions

Solis, Myriam Katherine Zurita 14 November 2018 (has links)
Lesões cervicais não cariosas têm etiologia multifatorial, com ênfase na ação de ácidos, abrasivos e cargas mecânicas aplicadas à distância do local da lesão, mas que concentram tensão na região cervical, que é o local da lesão. O mecanismo de ação das cargas aplicadas à distância não foi ainda elucidado. Pensou-se que seria mediado por micro fraturas que fariam se desprender fragmentos de tecido (abfração); mas isto não explicaria a formação de lesões produzidas na presença de compressão, mesmo concentrada, nem a interação sinérgica na presença de ácidos. Além disso, as fraturas nunca foram localizadas no tecido. Uma outra hipótese considera os tecidos dentários como esponjas rígidas, deformáveis, capazes de expelir a sua própria água quando comprimidos ou absorver fluidos circundantes quando tracionados. Quando a carga fosse removida e o tecido recuperasse sua forma original, o fluido faria o caminho inverso. Assim, a ciclagem mecânica forçaria a circulação de fluidos circundantes no tecido e, se fossem ácidos, facilitaria a dissolução do tecido, tanto sob tração quanto sob compressão. A proposta do estudo foi avaliar a penetração de fluido traçador (nitrato de prata a 10 %) no esmalte de espécimes submetidos ou não a cargas cíclicas excêntricas que provocam compressão ou tração. Os espécimes foram construídos a partir de incisivos bovinos, cortados em paralelepípedos de 3x3x8,2 mm, com entalhe na dentina para formar um pescoço de 2x2 mm de seção transversal. Os espécimes, exceto uma faixa central do esmalte vestibular de 1,5x5 mm foram protegidos da penetração do traçador com verniz. Foram aplicados 1.200 ciclos mecânicos de carga excêntrica para produzir tensões de tração ou compressão no esmalte, com 5 s de carga de 40 N e 25 s sem carga. Um grupo controle não recebeu nem carga nem exposição ao traçador; outro controle recebeu apenas exposição ao traçador, sem carga; outros dois grupos controles receberam carga (de tração ou compressão) enquanto imersos em água e, imediatamente depois, foram expostos ao traçador durante 600 min. Os dois grupos teste foram expostos simultaneamente aos ciclos de carga (de tração ou de compressão) e ao traçador. A prata do traçador foi precipitada por exposição a fixador radiográfico e, posteriormente, à luz de fotopolimerizador (5 min). Para localizar o traçador os espécimes foram micro tomografados, radiografados e, posteriormente, foram cortados longitudinalmente para obter uma fatia central de 1 mm de espessura para avaliação em lupa, com luz refletida ou transmitida. A micro tomografia foi ineficaz devido aos artefatos formados. As radiografias marcaram apenas as regiões de maior concentração do traçador. A avaliação dos cortes em lupa binocular permitiu concluir que existem variações de padrão de coloração natural do esmalte de incisivos bovinos, que todos os espécimes expostos ao traçador, independentemente do grupo experimental, apresentaram alguma infiltração, pelo menos numa camada fina e uniforme da superfície exposta. Além da fina camada marcada, existe variação de padrões de penetração do traçador, mesmo entre os que receberam um mesmo tratamento experimental, o que pode ser devido a variações inevitáveis no histórico de cada dente. Isto, apesar de se tornar um inconveniente para identificar um possível efeito de bombeamento, poderia ser identificado também como um indicador de que podem existir diferenças na velocidade e profundidade de penetração no esmalte de outras moléculas como, por exemplo, as dos ácidos. Em resumo, o corante traçador penetrou no esmalte dos espécimes de incisivos bovinos sem diferenças claras de padrão de penetração entre os diferentes grupos e pode ser um método eficaz para comprovar a hipótese de circulação forçada, mas exigirá novos estudos. / Non-carious cervical lesions have a multifactorial aetiology, with emphasis on the action of acids, abrasives and mechanical loads applied at a distance from the site of the lesion, which concentrates tension at the lesion site. The mechanism of action of loads applied at a distance has not yet been elucidated. It was thought that it would be mediated by microfractures that would cause fragments of tissue (abfração) to be released, but this would not explain the formation of lesions produced in the presence of compression, even concentrated, nor the synergistic interaction in the presence of acids. Also, no fractures were located in the tissue. Another hypothesis considers dental tissues as rigid, deformable sponges capable of expelling their water when compressed or absorbing surrounding fluids under traction. When the load was removed, and the tissue regained its original shape, the fluid would do the reverse way. Thus, mechanical cycling would force the circulation of surrounding fluids into the tissue and, if they were acidic, would facilitate dissolution of the tissue, both under traction and under compression. The study aimed to evaluate the penetration of tracer fluid (10% silver nitrate) in the enamel of specimens subjected or not to eccentric cyclic loads that cause compression or traction. The specimens were constructed from bovine incisors, cut in parallelepipeds of 3x3x8.2 mm, with a notch in dentin to form a neck of 2x2 mm cross-section. The specimens, except a central vestibular enamel strip of 1.5x5 mm, were protected from penetration of the tracer with varnish. 1,200 eccentric load mechanical cycles were applied to produce tension or compression in the enamel, with 5 s of 40 N load and 25 s without load. A control group received neither load nor exposure to the tracer; another control received only exposure to the tracer, without load; two other control groups received loading (tensile or compression) while immersed in water and immediately exposed to the tracer for 600 min. The two test groups were exposed simultaneously to the load (traction or compression) cycles and the tracer. The silver from the tracer was precipitated by exposure to a radiographic fixer and, subsequently, by the light of a curing light source (5 min). To locate the tracer the specimens were micro-scanned, radiographed and later cut longitudinally to obtain a central slice of 1 mm thickness for evaluation in a magnifying glass, light reflected or transmitted. Microtomography was ineffective due to artefacts formed. The radiographs marked only the regions with the highest concentration of the tracer. The evaluation with stereo microscopy allowed to conclude that there are variations in the natural staining pattern of bovine incisor enamel; that all the specimens exposed to the tracer, independently of the experimental group, showed some infiltration, at least in a thin and uniform layer of the exposed surface. In addition to the thin layer marked, there is a variation of tracer penetration patterns, even among those who received the same experimental treatment, which may be due to inevitable variations in the history of each tooth. This fact, although an inconvenience to identify a possible pumping effect, could also be identified as an indicator that there may be differences in the speed and depth of enamel penetration of other molecules, such as those of acids. In summary, tracer dye penetrated the enamel of bovine incisor specimens without clear differences in penetration pattern between the different groups and may be an effective method to prove the hypothesis of forced circulation, but will require further studies.
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Determinação da expressão de MMP-2 e MMP-9 na saliva de pacientes portadores de lesões cervicais não cariosas e da influência das MMPs sobre lesões radiculares artificiais através de EDX / Gelatinase expression in saliva of patients with noncarious cervical lesions and EDX assessment of the influence of matrix metalloproteinases on artificial root lesions

Hannas, Angélica Reis 19 October 2007 (has links)
As metaloproteinases da matriz (MMPs) foram identificadas na saliva, na placa dental, na dentina e no cemento. Este trabalho teve como objetivos: Estudo I (I) - avaliar a expressão de MMP-2 e MMP-9 presentes na saliva total e parotidiana e no fluido gengival crevicular (FGC) de pacientes portadores e não portadores de lesões cervicais não cariosas (LCNC); Estudo II (II) - investigar se a presença de MMP-8 e -9/TIMPs poderia influenciar a remineralização de lesões artificialmente criadas na superfície radicular, com ou sem desgaste por abrasão. Os métodos utilizados foram: (I) Coleta de amostras de saliva e do FGC de 32 pacientes, com (n=16) e sem LCNC (n=16). A atividade gelatinolítica das MMPs foi avaliada através de análise zimográfica e Western Blot. (II): Espécimes de dentina humana radicular foram obtidos. O grupo controle G1(10) não sofreu nenhum tratamento. Os demais segmentos radiculares foram desmineralizados G2(60). O Grupo A não foi submetido à escovação e o Grupo B foi submetido à abrasão por escovação em uma máquina de escovação simulada. G2(10) foi apenas desmineralizado, G3(10) desmineralizado e remineralizado, e os Grupos G4(10), G5(10), G6(10), G7(10) foram desmineralizados e remineralizados em presença de tampão neutro, TIMP, MMP-8 e -9, MMP-8,-9 e TIMP, respectivamente. Para a análise elemental, as concentrações de Ca+2, P, Mg+2 assim como a relação molar Ca/P e Mg/Ca foram determinadas através de uma sonda eletrônica para microanálise (EPMA). A análise qualitativa por retrodispersão (BSE) foi realizada para demonstrar a distribuição global da densidade mineral. Os resultados (I) mostraram que a principal gelatinase presente, tanto na saliva total quanto no FGC, é a proMMP-9. Na saliva secretada pela glândula parótida, não foram detectadas bandas indicando a presença de gelatinases. Os resultados do estudo (II) indicaram que os espécimes escovados apresentaram maior conteúdo de Ca+2 a 20µm e maior conteúdo de Mg+2 a 30 e 50µm. Em presença de TIMPs, ocorreu uma redução do conteúdo de Ca+2 a 20µm. Para os espécimes não escovados, em todas as profundidades, as amostras incubadas com MMPs apresentaram maiores valores de Ca+2. Portanto, pode-se concluir que (I) a comparação entre pacientes com e sem LCNC mostrou não haver diferença estatisticamente significante quanto à atividade gelatinolítica; (II) quando não inibidas pelos TIMPs, as MMPs degradaram o colágeno completamente desmineralizado na superfície radicular, permitindo melhor recalcificação na superfície subjacente. Esse fenômeno foi também facilitado pela abrasão por escovação. / Matrix metalloproteinases (MMPs) have been identified in saliva, plaque, gingival crevicular fluid (GCF), dentin and cementum. Study (I) aimed at evaluating the presence and quantity of gelatinases MMP-2 and MMP-9 in total and parotid saliva and in GCF (GCF) of subjects with and without NCCL. Study (II) aimed at investigating whether the presence of matrix metalloproteinase (MMP)-8 and - 9/TIMPs would influence the remineralization of artificial root lesions with and without mechanical wear. (I) Total stimulated saliva, parotid saliva, and GCF from patients with (n=16) and without NCCL (n=16) were collected and assessed for gelatin zymography and for western immunoblot analysis. (II) Human root segments from Group A (n=35) were not brushed and from Group B (n=35) were subjected to machine-controlled brushing, simulating mechanical wear. Specimens from Group 1 (control, n=10) were left untreated. Group 2 (n=10), was just demineralized; Group 3 (n=10) was demineralized and remineralized. The other samples G4 (n=10), G5 (n=10), G6 (n=10), G7 (n=10) were subjected to remineralization with HEPES buffer, tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2 (TIMP-2), activated MMP-8 and MMP-9 and activated MMP-8, MMP-9 and TIMP-2, respectively. Ca+2, P, Mg+2 concentrations as well as Ca/P and Mg/Ca molar ratios were determined through an Electron Probe Microanalyser (EPMA). (I) Densitometric analysis revealed that the main gelatinase was proMMP-9. No statistically significant difference was observed for MMP-2 and MMP-9 levels, separately. In parotid saliva, gelatinolytic activity was very low or absent. Western immunoblots revealed that, while little immunoreactivity was detected for MMP-2, there was positive immunoreaction for MMP-9, both in total saliva and in GCF. Gelatinases do not seem to originate from parotid gland. (II) The results indicated that the brushed specimens presented higher Ca+2 levels at 20 µm and higher Mg+2 content at 30 and 50 µm. Ca+2 content at 20 µm decreased in the presence of TIMPs. For the non-brushed specimens, in all depths, samples incubated with MMPs showed highest Ca+2 values. It can be concluded that (I) the main gelatinase present in the oral cavity is MMP-9. No significant differences were found in total gelatinolytic activity among NCCL+ and NCCL- patients. (II) When not inhibited by TIMPs, MMPs degraded the completely demineralized collagen in the root surface, allowing for better recalcification in the deeper areas. This phenomenon was also facilitated by the brushing procedure.
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Associação de fadiga cíclica, biocorrosão e fricção na formação microestrutural de lesões cervicais não cariosas

Zeola, Livia Fávaro 12 February 2015 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Non carious cervical lesions (NCCLs) are routine findings in clinical practice and are described as the loss of tooth tissue close to the cementum enamel junction. NCCLs have multifactorial etiology with main factors involved are stress, biocorrosion and friction. The different associations of these factors can lead to the weakening of the tooth structure in the cervical region, generating NCCLs. The aim of this study was to evaluate the association of etiologic factors (stress, biocorrosion and friction) on the microstructural formation of NCCLs, using finite element analysis, laser confocal microscopy and computed microtomography (micro-CT). Two three dimensional (3D), linear and elastic models of mandibular premolars were generated for stress distribution evaluation, using the finite element analysis (FEA). Two oblique loadings (50 N), were applied on the buccal cusp slope of the model. The occlusal loading (CO) was applied on the grinding region of the buccal cusp and the buccal loading (CV) on the smooth region of the same cusp. Both loads were applied at 45&#778; to the tooth long axis, simulating mandibular excursive movements. The displacement restriction was applied on the base and lateral surface of the model and the results were analyzed by the maximum principal criteria. Then, for analysis by confocal microscopy, forty intact human mandibular premolars were selected and allocated randomly into four groups, according to the factor association type (n=10): (TB) stress-biocorrosion, (TF) stress-friction, (BF) biocorrosion-friction, and (TBF) stress-biocorrosion-friction. In each group, the challenges were performed in an alternate way. The stress was simulated by cyclic fatigue loading, with specimens positioned in mechanical fatigue machine and subjected to oblique load (50N), on the smooth region of the buccal cusp for 6 x 105 cycles. The biocorrosive challenge was performed using the application of hydrochloric acid (2mL/10s). The friction (abrasion) was reproduced by using electric/powered toothbrushes (300g/20s), with Colgate Total 12 toothpaste. The roughness surface, angle and height of steps were measured before and after the treatments, using a 3D laser confocal microscope. The data were analyzed using the paired t-test, two-way analysis of variance and Tukey s test (&#945;=0.05). Then, three specimens of each group were taken to a micro-CT for the qualitative analyses. The CV loading promoted higher concentration of tensile stress in the cervical region compared to CO. The presence of biocorrosion was an important factor to roughness changes and abrasion promoted similar behavior among the groups. The TBF association promoted the greatest alterations in tooth structures. Enamel and dentin showed distinct performance according to the different interactions. The FEA results presented relationship with the experimental findings for TF,TB, TBF groups. The TBF was the more influent association on the microstructural formation of NCCLs, for enamel. For dentin, the association of at least two factors was sufficient to generate significant tissue degradation. All studied associations of etiological factors showed potential to promote NCCLs formation. / As lesões cervicais não cariosas (LCNCs) são achados rotineiros na prática clínica odontológica e são descritas como a perda de tecido dentário próximo à junção amelo cementária (JAC). Essas lesões apresentam etiologia multifatorial e tem como principais fatores envolvidos nesse processo tensão, biocorrosão e fricção. As associações desses fatores levam ao enfraquecimento da estrutura dental na região cervical, promovendo o surgimento de LCNCs. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das associações de fatores etiológicos (tensão, biocorrosão e fricção) na formação microestrutural de LCNCs, empregando método de elementos finitos (MEF), microscopia confocal a laser e microtomografia computadorizada (micro-CT). Dois modelos tridimensionais (3D), lineares e elásticos de pré-molares inferiores foram gerados para análise do padrão de distribuição de tensões na região cervical, pelo método de elementos finitos (MEF). Dois tipos de cargas de 50N, foram aplicadas obliquamente a cúspide vestibular do modelo. A carga oclusal (CO), foi aplicada na vertente triturante da cúspide vestibular e a carga vestibular (CV), na vertente lisa da mesma cúspide. As cargas foram posicionadas a 45º do longo do eixo do dente, e simularam interferências oclusais nos movimentos excursivos da mandíbula. A restrição do deslocamento foi realizada na base e laterais do modelo e a análise dos resultados conduzida por meio do critério de Tensão Máxima Principal. Para a análise por microscopia confocal, quarenta pré-molares inferiores humanos hígidos foram selecionados e distribuídos aleatoriamente em quatro grupos, de acordo com as seguintes associações de fatores (n=10): tensão-biocorrosão (TB), tensão-fricção (TF), e biocorrosão-fricção (BF) e tensão-biocorrosão-fricção (TBF). Para cada grupo, os desafios foram realizados de forma alternada. A tensão foi simulada por meio de ciclagem mecânica, com os espécimes posicionados em máquina de fadiga cíclica e submetidos a carregamentos oblíquos de 50N, na frequência de 2Hz, na vertente lisa e na vertente triturante da face vestibular, por 6 x 105 ciclos. Os desafios biocorrosivos foram realizados pela aplicação de 2mL de ácido hidroclorídrico por 10s. E os desafios de fricção (abrasão) foram reproduzidos com escovas elétricas (300g / 20s), com a utlização de pasta Colgate Total 12. A rugosidade da superfície, ângulo e altura dos degraus foram medidos antes e após os tratamentos, utilizando microscópio confocal a laser 3D. Para avaliação da distribuição e homogeineidade dos dados, foram realizados os testes de Shapiro Wilk e Levene. E posteriormente, aplicados o teste t-pareado, análise de variância em fator (ANOVA) e teste de Tukey (&#945; = 0,05). Em seguida, três amostras de cada grupo foram analisadas no micro-CT para as análises qualitativas de perda estrutural. O CV promoveu maior concentração de tensões de tração na região cervical do que o CO. A presença da biocorrosão foi fator importante na alteração de rugosidade e a abrasão resultou em comportamento semelhante entre os grupos. A associação TBF promoveu as maiores alterações nas estruturas dentais. Esmalte e dentina mostraram desempenho distinto de acordo com as diferentes interações. Foi verificada relação entre os resultados gerados pelo MEF e os achados experimentais para os grupos TF, TBF, TB. O grupo TBF foi mais influente na formação microestrutural das LCNCs, para esmalte. Para dentina, a associação de pelo menos dois fatores foi suficiente para gerar degradação significativa de tecido na região cervical. Todos as associações de fatores estudadas mostraram potencial para promover a formação de LCNCs. / Mestre em Odontologia
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Determinação da expressão de MMP-2 e MMP-9 na saliva de pacientes portadores de lesões cervicais não cariosas e da influência das MMPs sobre lesões radiculares artificiais através de EDX / Gelatinase expression in saliva of patients with noncarious cervical lesions and EDX assessment of the influence of matrix metalloproteinases on artificial root lesions

Angélica Reis Hannas 19 October 2007 (has links)
As metaloproteinases da matriz (MMPs) foram identificadas na saliva, na placa dental, na dentina e no cemento. Este trabalho teve como objetivos: Estudo I (I) - avaliar a expressão de MMP-2 e MMP-9 presentes na saliva total e parotidiana e no fluido gengival crevicular (FGC) de pacientes portadores e não portadores de lesões cervicais não cariosas (LCNC); Estudo II (II) - investigar se a presença de MMP-8 e -9/TIMPs poderia influenciar a remineralização de lesões artificialmente criadas na superfície radicular, com ou sem desgaste por abrasão. Os métodos utilizados foram: (I) Coleta de amostras de saliva e do FGC de 32 pacientes, com (n=16) e sem LCNC (n=16). A atividade gelatinolítica das MMPs foi avaliada através de análise zimográfica e Western Blot. (II): Espécimes de dentina humana radicular foram obtidos. O grupo controle G1(10) não sofreu nenhum tratamento. Os demais segmentos radiculares foram desmineralizados G2(60). O Grupo A não foi submetido à escovação e o Grupo B foi submetido à abrasão por escovação em uma máquina de escovação simulada. G2(10) foi apenas desmineralizado, G3(10) desmineralizado e remineralizado, e os Grupos G4(10), G5(10), G6(10), G7(10) foram desmineralizados e remineralizados em presença de tampão neutro, TIMP, MMP-8 e -9, MMP-8,-9 e TIMP, respectivamente. Para a análise elemental, as concentrações de Ca+2, P, Mg+2 assim como a relação molar Ca/P e Mg/Ca foram determinadas através de uma sonda eletrônica para microanálise (EPMA). A análise qualitativa por retrodispersão (BSE) foi realizada para demonstrar a distribuição global da densidade mineral. Os resultados (I) mostraram que a principal gelatinase presente, tanto na saliva total quanto no FGC, é a proMMP-9. Na saliva secretada pela glândula parótida, não foram detectadas bandas indicando a presença de gelatinases. Os resultados do estudo (II) indicaram que os espécimes escovados apresentaram maior conteúdo de Ca+2 a 20µm e maior conteúdo de Mg+2 a 30 e 50µm. Em presença de TIMPs, ocorreu uma redução do conteúdo de Ca+2 a 20µm. Para os espécimes não escovados, em todas as profundidades, as amostras incubadas com MMPs apresentaram maiores valores de Ca+2. Portanto, pode-se concluir que (I) a comparação entre pacientes com e sem LCNC mostrou não haver diferença estatisticamente significante quanto à atividade gelatinolítica; (II) quando não inibidas pelos TIMPs, as MMPs degradaram o colágeno completamente desmineralizado na superfície radicular, permitindo melhor recalcificação na superfície subjacente. Esse fenômeno foi também facilitado pela abrasão por escovação. / Matrix metalloproteinases (MMPs) have been identified in saliva, plaque, gingival crevicular fluid (GCF), dentin and cementum. Study (I) aimed at evaluating the presence and quantity of gelatinases MMP-2 and MMP-9 in total and parotid saliva and in GCF (GCF) of subjects with and without NCCL. Study (II) aimed at investigating whether the presence of matrix metalloproteinase (MMP)-8 and - 9/TIMPs would influence the remineralization of artificial root lesions with and without mechanical wear. (I) Total stimulated saliva, parotid saliva, and GCF from patients with (n=16) and without NCCL (n=16) were collected and assessed for gelatin zymography and for western immunoblot analysis. (II) Human root segments from Group A (n=35) were not brushed and from Group B (n=35) were subjected to machine-controlled brushing, simulating mechanical wear. Specimens from Group 1 (control, n=10) were left untreated. Group 2 (n=10), was just demineralized; Group 3 (n=10) was demineralized and remineralized. The other samples G4 (n=10), G5 (n=10), G6 (n=10), G7 (n=10) were subjected to remineralization with HEPES buffer, tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2 (TIMP-2), activated MMP-8 and MMP-9 and activated MMP-8, MMP-9 and TIMP-2, respectively. Ca+2, P, Mg+2 concentrations as well as Ca/P and Mg/Ca molar ratios were determined through an Electron Probe Microanalyser (EPMA). (I) Densitometric analysis revealed that the main gelatinase was proMMP-9. No statistically significant difference was observed for MMP-2 and MMP-9 levels, separately. In parotid saliva, gelatinolytic activity was very low or absent. Western immunoblots revealed that, while little immunoreactivity was detected for MMP-2, there was positive immunoreaction for MMP-9, both in total saliva and in GCF. Gelatinases do not seem to originate from parotid gland. (II) The results indicated that the brushed specimens presented higher Ca+2 levels at 20 µm and higher Mg+2 content at 30 and 50 µm. Ca+2 content at 20 µm decreased in the presence of TIMPs. For the non-brushed specimens, in all depths, samples incubated with MMPs showed highest Ca+2 values. It can be concluded that (I) the main gelatinase present in the oral cavity is MMP-9. No significant differences were found in total gelatinolytic activity among NCCL+ and NCCL- patients. (II) When not inhibited by TIMPs, MMPs degraded the completely demineralized collagen in the root surface, allowing for better recalcification in the deeper areas. This phenomenon was also facilitated by the brushing procedure.

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