Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-20T19:05:22Z No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 7024795 bytes, checksum: 9af11871ea610d9074a4267774a8aea9 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-26T20:25:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 7024795 bytes, checksum: 9af11871ea610d9074a4267774a8aea9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T20:25:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 7024795 bytes, checksum: 9af11871ea610d9074a4267774a8aea9 (MD5) Previous issue date: 2010-03-11 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A asma é uma doença caracterizada por obstrução intermitente das vias aéreas e inflamação crônica e afeta cerca de 300 milhões de pessoas em todo o mundo. É considerada um grave problema de saúde, trazendo consigo um grande encargo econômico. A resposta imunológica na asma é predominantemente de linfócitos Th2, com altos níveis de IgE total e alérgeno-específica e eosinofilia brônquica. O tratamento da asma visa ao controle da doença e os medicamentos utilizados atualmente apresentam efeitos colaterais sistêmicos e, em geral, não são eficazes nos casos de asma de difícil controle. Neste trabalho, foi investigado o efeito do extrato aquoso de Echinodorus grandiflorus, planta utilizada pela população por suas propriedades diurética e anti-inflamatória, no modelo de alergia pulmonar no qual camundongos BALB/c foram sensibilizados e desafiados com OVA. O tratamento com o extrato por via oral reduziu marcadamente o número de neutrófilos, linfócitos, macrófagos e eosinófilos no lavado bronco-alveolar (LBA), a atividade da peroxidase eosinofílica (EPO) no tecido pulmonar, os níveis de IgE específica para OVA no soro, os níveis de CCL11 e a expressão gênica de IL-4 e IL-13 no tecido pulmonar e a expressão de CD25 em células do LBA. Entretanto, o tratamento não alterou o infiltrado inflamatório e o número de eosinófilos no tecido pulmonar, os níveis das quimiocinas CCL2 e CCL5, das citocinas IL-4, IL-13, IL-10 e IL-17A e a expressão gênica de Foxp3 no tecido pulmonar e a expressão de CD28 e CD152 nas células do LBA. Esses resultados sugerem que o extrato aquoso de E. grandiflorus é capaz de modular alguns aspectos da inflamação pulmonar alérgica e pode ser útil no tratamento da asma. / Asthma is a disease characterized by intermittent obstruction of the airways and chronic inflammation and affects about 300 million people around the world. It is considered a serious health problem, bringing a large economic burden. The immune response in asthma is predominantly Th2 lymphocytes, with high levels of total and allergen-specific IgE and bronchial eosinophilia. Asthma treatment is aimed at controlling the disease and the drugs used currently have systemic side effects and generally are not effective in cases of asthma are difficult to control. In this study we investigated the effect of aqueous extract of Echinodorus grandiflorus, plant used in folk medicine for its diuretic and anti-inflammatory properties, in the model of lung allergy in which BALB/c mice were sensitized and challenged with OVA. Oral treatment with the extract markedly reduced the number of neutrophils, lymphocytes, macrophages and eosinophils in bronchoalveolar lavage (BAL), the activity of eosinophil peroxidase (EPO) in lung tissue, levels of OVA-specific IgE in serum, levels of CCL11 in lung tissue, the gene expression of IL-4 and IL-13 in lung tissue and the expression of CD25 on BAL cells. However, the treatment did not alter the inflammatory infiltrate and the number of eosinophils in lung tissue, levels of chemokines CCL2 and CCL5, levels of cytokines IL-4, IL-13, IL-10 and IL-17A and gene expression of Foxp3 in the lung tissue and the expression of CD28 and CD152 on BAL cells. These results suggest that the aqueous extract of E. grandiflorus is able to modulate some aspects of allergic pulmonary inflammation and may be useful in the treatment of asthma.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-07-25T12:36:24Z No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 28268825 bytes, checksum: 19819230b54e983b1d5aa62f656ce02c (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-09T13:50:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 28268825 bytes, checksum: 19819230b54e983b1d5aa62f656ce02c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T13:50:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 28268825 bytes, checksum: 19819230b54e983b1d5aa62f656ce02c (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A asma é uma doença heterogênea, caracterizada por inflamação crônica das vias aéreas, definida pela história de sintomas respiratórios e associada a limitação variável do fluxo expiratório. Considerada um grave problema de saúde, estima-se que afete mais de 300 milhões de pessoas em todo o mundo. A resposta imunológica na asma envolve predominantemente linfócitos Th2, com elevados níveis de IgE total e alérgeno-específica e eosinofilia brônquica. O tratamento visa ao controle da doença e os medicamentos utilizados atualmente apresentam efeitos colaterais sistêmicos e, em geral, não são eficazes nos casos de asma de difícil controle, sendo crucial o desenvolvimento de novos tratamentos. Echinodorus grandiflorus é uma espécie vegetal conhecida como chapéu-de-couro muito utilizada por suas propriedades anti-inflamatórias. Em estudo anterior, o tratamento com o extrato aquoso dessa espécie reduziu a resposta imune patogênica Th2 no modelo de alergia pulmonar induzida por OVA. O ácido ferúlico é um ácido fenólico amplamente presente no reino vegetal e encontrado em E. grandiflorus que apresenta atividades antioxidante e anti-inflamatória. Neste trabalho, foram investigados os efeitos do extrato aquoso de E. grandiflorus, de suas frações metanólica e residual e do ácido ferúlico na modulação da resposta imune no modelo de alergia pulmonar. O extrato, as frações e o ácido ferúlico foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência. Para indução da alergia pulmonar camundongos fêmeas BALB/c foram sensibilizados intraperitonealmente com OVA e alumen nos dias 0 e 14. Nos dias 21, 23, 25, 27 e 29, os animais foram desafiados com OVA 1% por 20 minutos. Os tratamentos foram administrados por gavagem, entre os dias 21 e 29 do protocolo. Foram coletados soro, lavado broncoalveolar e pulmões. Inicialmente, a análise cromatográfica revelou dois ácidos fenólicos como componentes majoritários do extrato e das frações, possivelmente relacionados às suas atividades farmacológicas, entretanto, o ácido ferúlico não foi identificado no extrato e nas frações. Todos os tratamentos foram promissores na modulação da resposta patogênica Th2, com os melhores resultados obtidos com o extrato aquoso 25 mg/kg, fração metanólica 25 mg/kg, fração residual 100 mg/kg e ácido ferúlico 25 mg/kg. Foram observadas reduções do infiltrado inflamatório pulmonar, do número de células caliciformes produtoras de muco, do número total de células e de eosinófilos, linfócitos e neutrófilos no lavado bronco-alveolar, dos níveis de TSLP, IL-25, IL-33, IL-4, IL-5, IL-13, IFN-γ, CCL5, CCL11 e CCL20 no tecido pulmonar e níveis séricos de IgE e IgG1. Juntos, esses resultados indicam que o extrato aquoso de E. grandiflorus, suas frações metanólica e residual e o ácido ferúlico, reduzem a inflamação pulmonar alérgica, atuando principalmente na fase inicial da resposta imune, reduzindo a liberação de citocinas e quimiocinas pelas células epiteliais das vias aéreas. / Asthma is a heterogeneous disease characterized by chronic airway inflammation, defined by history of respiratory symptoms and associated with variable expiratory flow limitation. Regarded as a serious health problem affecting an estimated over 300 million people worldwide. The immune response in asthma is predominantly Th2 lymphocytes, with high levels of total and allergen-specific IgE and bronchial eosinophilia. Asthma treatment is aimed at controlling the disease and the drugs used currently have systemic side effects and generally are not effective in cases of asthma are difficult to control, and it is crucial the developing new treatments. Echinodorus grandiflorus is a plant species known as “chapéu-de-couro” widely used for their anti-inflammatory properties. In previous work, the treatment with the aqueous extract of this specie reduced the pathogenic Th2 response in the OVAinduced pulmonary allergy. The ferulic acid is a phenolic acid widely present in the plant kingdom and found in E. grandiflorus which has antioxidant and antiinflammatory activities. In this study, the effect of aqueous extract of E. grandiflorus, its methanol and residual fractions, and ferulic acid in modulating the immune response of pulmonary allergy model was investigated. The aqueous extract, fractions and ferulic acid were analyzed by high-performance liquid chromatography. For induction of pulmonary allergy female BALB/c mice were intraperitoneally sensitized with OVA and alum on days 0 and 14. On days 21, 23, 25, 27 and 29, animals were challenged with OVA 1% for 20 minutes. Treatments were administered by gavage, between days 21 and 29 of protocol. The serum, bronchoalveolar lavage fluid and lungs were collected. Chromatographic analysis revealed two phenolic acids as major components of extract and fractions that possibly are related to their pharmacological activities, however ferulic acid was not identified in the extract and fractions. The treatments were promising in the modulation of pathogenic Th2 response, with the best results obtained with the aqueous extract 25 mg/kg, methanolic fraction 25 mg/kg, residual fraction 100 mg/kg and ferulic acid 25 mg/kg. The treatments reduced the inflammatory infiltration in lung tissue, the number of goblet cells in lung tissue, the number of total cells, eosinophils, lymphocytes and neutrophils in bronchoalveolar lavage, the levels of TSLP, IL-25, IL33, IL-4, IL-5, IL-13, IFN-γ, CCL5, CCL11, and CCL20 in lung tissue, and the serum levels of IgE and IgG1. Taken together, these results indicate that the aqueous extract of E. grandiflorus, methanolic and residual fractions, and ferulic acid reduced the allergic pulmonary inflammation, act primarily in the early phase of the immune response, reducing the release of cytokines and chemokines by airways epithelial cells.