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Efeitos anti-hipertensivos e microcirculatórios do extrato hidro-alcóolico de Echinodorus grandiflorus (chapéu de couro) em ratos espontaneamente hipertensos

Conceição, Fabiana Gomes da January 2011 (has links)
Submitted by Ana Paula Macedo (ensino@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-03T12:27:08Z No. of bitstreams: 1 Fabiana Gomes da Conceição.pdf: 888216 bytes, checksum: 491e32546fbc26e9a0676bfa0fdea80e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T12:27:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabiana Gomes da Conceição.pdf: 888216 bytes, checksum: 491e32546fbc26e9a0676bfa0fdea80e (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Introdução: A hipertensão arterial é um grande desafio para a saúde pública, e quando não tratada, predispõe à morbidade cardiovascular e morte prematura. É sabido que grande parte do aumento da resistência vascular na hipertensão é determinada no nível microvascular e evidências recentes sugerem que uma redução na densidade capilar pode contribuir significativamente para a elevação da resistência vascular e, conseqüentemente, a pressão arterial, tanto em humanos quanto em animais de experimentação. O Echinodorus grandiflorus (EG), uma planta distribuídas em todo o Brasil, tem sido utilizada na medicina popular para tratar hipertensão e doenças inflamatórias. No entanto, não há estudos farmacológicos sobre os efeitos biológicos do extrato. Objetivos: Investigar os efeitos do extrato hidro-alcóolico de Echinodorus grandiflorus sobre a densidade capilar funcional e estrutural da pele, músculo esquelético e do coração em ratos espontaneamente hipertensos. Métodos: Para tanto, foram utilizados 10 Wistar-Kyoto (WKY) e 40 animais SHR. Os animais foram divididos em 5 grupos que receberam veículo (SHR, o grupo controle hipertensos e Wistar, o grupo controle normotenso) e EG (dose 50 mg/kg, 100 mg/kg e 200 mg/kg) durante 28 dias por gavagem. A pressão arterial sistólica e a freqüência cardíaca foram mensurados semanalmente por pletismografia caudal. A densidade capilar funcional foi avaliada no músculo gracil e da pele da orelha, utilizando videomicroscopia intravital após a injeção intravenosa de fluoresceína acoplado ao dextran. A densidade capilar estrutural foi estudada na musculatura esquelética e do ventrículo esquerdo, utilizando análise histológica com FITC acoplado a lectina griffonia simplicifolia, que pode identificar as células endoteliais. Resultados: O tratamento oral com EG diminuiu a pressão sanguínea sistólica em diferentes doses. O tratamento com o EG nas doses de 100 mg/kg e 200 mg/kg reverteu completamente a rarefação capilar funcional no músculo esquelético e pele (316 ± 60 e 353 ± 93 capilares/mm2; 319 ± 56 e 384 ± 70 capilares/mm2, p <0,05, respectivamente) em relação ao grupo controle hipertensos (231 ± 11 e 248 ± 14 capilares/mm2). A análise histológica mostrou que o grupo SHR apresentaram uma menor relação capilar/fibra no músculo esquelético (WKY + VEI 1,94 ± 0,09 e SHR + VEI 1,46 ± 0,05 capilar/fibra no músculo, P <0,05) e o tratamento com EG reverteu a rarefação capilar estrutural nos animais tratados com a dose de 200 mg/kg. A relação capilar/fibra no ventrículo esquerdo de SHR também foi reduzida (WKY + VEI 0,27 ± 0,08 e SHR + VEI 0,20 ± 0,01, P <0,05). Tratamentos com EG não teve efeito na rarefação capilar estrutura do ventrículo esquerdo. Conclusão: O tratamento crônico com EG foi capaz de reduzir a pressão sistólica e capaz de reverter completamente a rarefação capilar funcional e estrutural, na dose mais alta, em animais espontaneamente hipertensos. / Introduction: Hypertension is a major challenge to public health, and when untreated, predisposes to cardiovascular morbidity and premature death. It is known that most of the increase in vascular resistance in hypertension, cause of damage to target organs is determined in the microvascular level and recent evidence suggests that a reduction in capillary density may contribute significantly to the elevation of vascular resistance and, consequently, the blood pressure both in humans and in animals for experimentation. The Echinodorus grandiflorus (EG), a plant and distributed throughout Brazil, has been used in folk medicine for treating hypertension and inflammatory diseases. However, no pharmacological studies on the biological effects of the extract. Objectives: Investigate the effects of an extract Echinodorus grandiflorus on the structural and functional capillary density of the skin, skeletal muscle and heart in spontaneously hypertensive rats. Methods: For that, we purpose used 10 Wistar-Kyoto (WKY) and 40 SHR animals. The animals were divided into 5 groups that received vehicle (SHR, the hypertensive and Wistar control group, the normotensive control group) and SHR that received different doses of EG (50 mg/kg, 100 mg/kg and 200 mg/kg) for 28 days by gavage. The systolic blood pressure and heart rate were measured weekly by photopletismography. Functional capillary density was evaluated in the gracilis muscle and ear’s skin using intravital videomicroscopy after intravenous injection of fluoresceine coupled to dextran. Structural capillary density was studied in the skeletal muscle and left ventricle using histological analysis with a FITC-conjugated Griffonia simplicifolia I lectin, which can identify endothelial cells. Results: The oral treatment with EG decreased the systolic blood pressure in the different groups. Treatment with EG 100 and EG 200 completely reversed the capillary rarefaction functional in skeletal muscle and skin (316 ± 60 and 353 ± 93 ± capillaries/mm2; 319 ± 56 and 384 ± 70 capillaries/mm2, p <0.05, respectively) compared to the hypertensive group (231 ± 11 and 248 ± 14 capillaries/mm2). Histological analysis showed that SHR had a lower capillary-to-fiber ratio in the skeletal muscle (WKY + VEI 1,94 ± 0,09 and SHR + VEI 1,46 ± 0,05 capillary/fiber muscular, P < 0.05) and EG reversed structural capillary rarefaction in animals treated with a dose of 200 mg/kg. Capillary volume density-to-fiber volume density ratio in the left ventricle of SHR was also reduced (WKY + VEH 0.27 ± 0.08 and SHR + VEH 0.20 ± 0.01, P < 0.05). Treatments with EG had no effect on structural capillary rarefaction. Conclusion: The chronic treatment with EG was able to reduce systolic pressure and able to completely reverse the capillary rarefaction functional and structural, at highest dose, in spontaneously hypertensive animals.
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Atividade anti-inflamatória de rizomas de Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli (“Chapéu de Couro”)

Ribeiro, Cristiane Junqueira 27 July 2012 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-27T19:39:42Z No. of bitstreams: 1 cristianejunqueiraribeiro.pdf: 1967335 bytes, checksum: ed20de7954cb03c5a1f33787b36c2944 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-27T19:53:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cristianejunqueiraribeiro.pdf: 1967335 bytes, checksum: ed20de7954cb03c5a1f33787b36c2944 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-27T19:53:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cristianejunqueiraribeiro.pdf: 1967335 bytes, checksum: ed20de7954cb03c5a1f33787b36c2944 (MD5) Previous issue date: 2012-07-27 / Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli é uma planta reconhecida popularmente por seus efeitos medicinais e teve sua monografia descrita em 2010 na 5ª edição da Farmacopeia Brasileira. Entretanto, apesar do uso de rizomas pela população, poucos são os estudos envolvendo esse órgão da planta. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade farmacológica de frações semi-purificadas do extrato bruto metanólico de rizomas de E. grandiflorus. Em princípio foi realizado o estudo de 8 cromatogramas em CLAE-UV obtidos de extratos brutos etanólicos de rizomas frescos e secos nas diferentes estações do ano. Após este estudo, foi obtido o extrato bruto metanólico de rizomas que, posteriormente, foi fracionado por partição líquidolíquido (v/v) obtendo-se três frações distintas: fração em hexano/acetato de etila 9:1, fração em acetato de etila 100% e fração residual aquosa. O extrato bruto metanólico de rizomas assim como as frações, foram estudados através de análises por CLAE-UV e análise na literatura acerca dos constituintes químicos e comparação com os já observados em folhas. A fração em acetato de etila 100% foi utilizada para a avaliação da atividade antinociceptiva e antiinflamatória in vivo. Foram realizados os testes de contorções abdominais, formalina e placa quente frente à ação antinociceptiva e os testes de edema de pata e pleurisia, ambos induzidos por carragenina, para avaliar a ação antiinflamatória. Foi realizado ainda, o teste de produção de óxido nítrico por células J774.A1, teste relacionado à ação anti-inflamatória das três frações semi-purificadas. A citoxidade das três frações testadas foi verificada no teste de MTT. Os resultados demonstraram que os extratos brutos etanólicos e o extrato bruto metanólico são constituídos principalmente por uma mistura de ácidos fenólicos derivados do ácido hidroxicinâmico, com maior produção de constituintes na primavera e no verão. As frações semi-purificadas apresentaram constituições químicas diferentes, com destaque para a fração em acetato de etila 100% que concentrou a mistura de ácidos fenólicos derivados do ácido hidroxicinâmico. A fração em acetato de etila 100% não apresentou ação analgésica central, uma vez que não agiu na primeira fase do teste de formalina e também não aumentou o tempo de latência ao estímulo térmico no teste da placa quente. Entretanto, apresentou ação anti-inflamatória, uma vez que foi capaz de inibir a formação de edema de pata e diminuiu o volume do exsudato e o número total de leucócitos no teste de pleurisia. Quanto à avaliação da produção de óxido nítrico, a fração em hexano 9:1 acetato de etila inibiu de forma mais significativa a produção desse mediador inflamatório, porém as demais frações também demonstraram possuir essa atividade. As três frações não apresentaram ação citotóxica nas concentrações testadas. / Echinodorus grandiflorus (Cham. & Schltdl.) Micheli it is a plant popularly known by its effects medicinals and had described his monograph in 2010 in the 5th edition of the Brazilian Pharmacopoeia. However, despite the use the rhizomes the population there are few studies involving this plant organ. The purpose of this study was to evaluate the activity of pharmacological semi-purified fractions of the methanolic crude extract of the rhizomes of E. grandiflorus. The principle was carried out a study of eight chromatograms in HPLC-UV obtained from crude ethanol extracts of fresh and dried rhizomes in different seasons. After this study was obtained the methanolic crude extract of rhizomes which was subsequently fractionated by liquid-liquid partition (v/v) to obtain three different fractions: fraction in 9:1 hexane ethyl acetate, ethyl acetate fraction in 100% and residual aqueous. The methanolic crude extract of rhizomes and three semi-purified fractions were studied by HPLC-UV analysis and review the literatue on the chemical constituents and comparison with literature reports with those observed in leaves. The fraction in ethyl acetate 100% was used to measure the antinociceptive and anti-inflammatory effect in vivo. Tests were performed abdominal writhing, formalin and hot plate before antinociceptive testing and paw edema and pleurisy induced by carrageenan both to evaluate the anti-inflammatory action. It was conducted further testing production nitric oxide by J774. A1 cells, test-related anti-inflammatory action of the three semipurified fractions. The cytotoxicity of the three fractions was found in the MTT assay. The results showed that the crude ethanolic and methanolic extract are mainly a mixture of phenolic acid derivative from the hidroxicicinâmic acid, with greater production of constituents in the spring and summer. The semi-purified fractions showed different chemical constitutions with emphasis on the fraction of ethyl acetate 100% to a concentrated mixture of phenolic acid derivative from the hidroxicicinâmic acid. The fraction in ethyl acetate 100% showed no central analgesic action, since it did not act in the first phase of the formalin test and did not increase the latency time to the thermal stimulus in the hot plate test. However active-inflammatory action showed, since it was able to inhibit paw edema formation and decreased exudate volume and the total number of leukocytes in the pleurisy test. The assessment of NO production, the fraction in 9:1 hexane ethyl acetate inhibited more significantly the production of inflammatory mediators, but the other fractions also showed have this activity. The three fractions showed no cytotoxic action at different concentrations.
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Avaliação do efeito do extrato aquoso de Echinodorus grandiflorus na modulação da resposta imune no modelo de alergia pulmonar induzida por OVA

Brugiolo, Alessa Sin Singer 11 March 2010 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-20T19:05:22Z No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 7024795 bytes, checksum: 9af11871ea610d9074a4267774a8aea9 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-26T20:25:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 7024795 bytes, checksum: 9af11871ea610d9074a4267774a8aea9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T20:25:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 7024795 bytes, checksum: 9af11871ea610d9074a4267774a8aea9 (MD5) Previous issue date: 2010-03-11 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A asma é uma doença caracterizada por obstrução intermitente das vias aéreas e inflamação crônica e afeta cerca de 300 milhões de pessoas em todo o mundo. É considerada um grave problema de saúde, trazendo consigo um grande encargo econômico. A resposta imunológica na asma é predominantemente de linfócitos Th2, com altos níveis de IgE total e alérgeno-específica e eosinofilia brônquica. O tratamento da asma visa ao controle da doença e os medicamentos utilizados atualmente apresentam efeitos colaterais sistêmicos e, em geral, não são eficazes nos casos de asma de difícil controle. Neste trabalho, foi investigado o efeito do extrato aquoso de Echinodorus grandiflorus, planta utilizada pela população por suas propriedades diurética e anti-inflamatória, no modelo de alergia pulmonar no qual camundongos BALB/c foram sensibilizados e desafiados com OVA. O tratamento com o extrato por via oral reduziu marcadamente o número de neutrófilos, linfócitos, macrófagos e eosinófilos no lavado bronco-alveolar (LBA), a atividade da peroxidase eosinofílica (EPO) no tecido pulmonar, os níveis de IgE específica para OVA no soro, os níveis de CCL11 e a expressão gênica de IL-4 e IL-13 no tecido pulmonar e a expressão de CD25 em células do LBA. Entretanto, o tratamento não alterou o infiltrado inflamatório e o número de eosinófilos no tecido pulmonar, os níveis das quimiocinas CCL2 e CCL5, das citocinas IL-4, IL-13, IL-10 e IL-17A e a expressão gênica de Foxp3 no tecido pulmonar e a expressão de CD28 e CD152 nas células do LBA. Esses resultados sugerem que o extrato aquoso de E. grandiflorus é capaz de modular alguns aspectos da inflamação pulmonar alérgica e pode ser útil no tratamento da asma. / Asthma is a disease characterized by intermittent obstruction of the airways and chronic inflammation and affects about 300 million people around the world. It is considered a serious health problem, bringing a large economic burden. The immune response in asthma is predominantly Th2 lymphocytes, with high levels of total and allergen-specific IgE and bronchial eosinophilia. Asthma treatment is aimed at controlling the disease and the drugs used currently have systemic side effects and generally are not effective in cases of asthma are difficult to control. In this study we investigated the effect of aqueous extract of Echinodorus grandiflorus, plant used in folk medicine for its diuretic and anti-inflammatory properties, in the model of lung allergy in which BALB/c mice were sensitized and challenged with OVA. Oral treatment with the extract markedly reduced the number of neutrophils, lymphocytes, macrophages and eosinophils in bronchoalveolar lavage (BAL), the activity of eosinophil peroxidase (EPO) in lung tissue, levels of OVA-specific IgE in serum, levels of CCL11 in lung tissue, the gene expression of IL-4 and IL-13 in lung tissue and the expression of CD25 on BAL cells. However, the treatment did not alter the inflammatory infiltrate and the number of eosinophils in lung tissue, levels of chemokines CCL2 and CCL5, levels of cytokines IL-4, IL-13, IL-10 and IL-17A and gene expression of Foxp3 in the lung tissue and the expression of CD28 and CD152 on BAL cells. These results suggest that the aqueous extract of E. grandiflorus is able to modulate some aspects of allergic pulmonary inflammation and may be useful in the treatment of asthma.
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Avaliação da toxicidade do extrato aquoso liofilizado de chapéu-de-couro (Echinodorus grandiflorus) em ratas prenhes

Brugiolo, Sonia Sin Singer 07 October 2010 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-21T11:27:36Z No. of bitstreams: 1 soniasinsingerbrugiolo.pdf: 7593587 bytes, checksum: f5fa6722540f1ba63855c34525d4e0f8 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-26T20:26:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 soniasinsingerbrugiolo.pdf: 7593587 bytes, checksum: f5fa6722540f1ba63855c34525d4e0f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T20:26:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 soniasinsingerbrugiolo.pdf: 7593587 bytes, checksum: f5fa6722540f1ba63855c34525d4e0f8 (MD5) Previous issue date: 2010-10-07 / No Brasil, existem inúmeras espécies de plantas que são utilizadas como fitoterápicos, e, dentre elas, encontra-se E. grandiflorus, uma Alismatacea herbácea, aquática ou semi-aquática, conhecida popularmente como chapéu-de-couro, muito utilizada na medicina popular como diurética e anti-inflamatória e no tratamento de doenças renais, reumatismo, afecções cutâneas e problemas do fígado. Diversos trabalhos confirmaram suas ações farmacológicas como diurética, anti-inflamatória e antinociceptiva, hipotensora, anti-hipertensiva e vasodilatadora, antimicrobiana, tripanocida in vitro, leishmanicida, antineoplásica, hipocolesterolêmica e imunossupressora, entretanto sua toxicidade ainda não foi avaliada na gestação. Inúmeros agentes podem interferir com a funcionalidade do sistema reprodutor feminino e com uma ou mais fases do desenvolvimento embriofetal, mas os fármacos e os fitofármacos, pela freqüência com que são utilizados durante o período gestacional estão na lista dos fatores mais preocupantes. Considerando que o chapéu-de-couro é componente de refrigerante de grande aceitação popular e a grande utilização do chá pela população dado ao seu potencial terapêutico, e considerando a inexistência de estudos sobre a toxicidade da planta no período gestacional torna-se necessário avaliar sua toxicidade e, no presente trabalho, pretendeu-se avaliar tal efeito em fêmeas de ratas Wistar. Durante 15 dias foram feitos esfregaços vaginais para observação da regularidade do ciclo estral. Ratas com ciclo estral regular foram distribuídas em quatro grupos experimentais (n=16): C, grupo controle, que recebeu solução salina por gavagem, durante 15 dias, e T-250, T-500 e T-1000, grupos tratados, que receberam o extrato nas doses de 250, 500 e 1000mg/kg/dia, respectivamente, período no qual também foi feito esfregaço vaginal. As ratas foram acasaladas e as gestantes foram tratadas até o 14º dia. No 15º dia foram eutanasiadas por exsanguinação total sob anestesia e laparotomizadas para exame, remoção e pesagem dos órgãos e registro das variáveis maternas, ninhadas e placentas. O sangue colhido serviu para realização de hemograma e determinação das concentrações plasmáticas de uréia, creatinina, colesterol, triglicérides, alanina transaminase e aspartato transaminase. Fígado, rins, baço, ovários e adrenais foram removidos e pesados, sendo processados para análise histopatológica fígado, rim e baço. O número de corpos lúteos, implantes, reabsorções, fetos vivos e mortos foi contado. Não foram observados sinais detectáveis de toxicidade materna, aferidos por piloereção, diarréia, alteração na deambulação no interior da gaiola e mortes. Observou-se redução da proporção de fases estrais depois do tratamento no grupo T-1000. Em todos os grupos tratados a média de corpos lúteos, implantes e reabsorções por mãe foi semelhante, assim como o índice de perda pós-implantação, proporção de implantação e reabsorção. Foram registrados anemia e aumento na concentração de aspartato transaminase nos três grupos tratados, aumento de colesterol e leucocitose na maior dose, e alterações histopatológicas no fígado nas três doses testadas, no rim, nas doses de 500 e 1000mg/kg/dia e no baço de animais tratados com 1000mg/kg/dia. Analisados em conjunto, os dados do presente trabalho são indicativos de que o extrato aquoso liofilizado de E. grandiflorus administrado a ratas prenhes nas doses de 250, 500 e 1000mg/kg/dia e nas condições deste experimento foi tóxico para as mães, mas não alterou a performance reprodutiva e nenhuma malformação externa foi observada nos fetos. / In Brazil, there are countless species that are used as phytotherapics, and among them there is E. grandiflorus, an Alismatacea aquatic or semi-aquatic herb, popularly known as chapéu-de-couro, commonly used in folk medicine as diuretic and anti-inflammatory and also in the treatment of kidney diseases, rheumatism, skin conditions and liver disorders. Several studies have confirmed its diuretic, anti-inflammatory and antinociceptive, hypotensive, antihypertensive and vasodilatory, antimicrobial, in vitro trypanocidal, leishmanicidal, antineoplastic, immunosuppressive and hypocholesterolemic pharmacological properties, though its toxicity was not evaluated during pregnancy. Numerous agents can interfere with the female reproductive system functionality and with one or more stages of embryo development, but the drugs, due to the frequency that they are used, are on the list of the most concerning factors. Considering the therapeutic potential of E. grandiflorus and the widespread utilization of its tea with curative purposes by the population and the lack of studies about this herb toxicity during pregnancy, its necessary to evaluate its toxicity and the aim of this study was to evaluate this effect on Wistar rats. During 15 days, vaginal smears were performed to observe the regularity of the estrous cycle. Rats with regular estrous cycle were separated into four experimental groups (n=16): C, control group that received saline solution by gavage, during 15 days, and T-250, T-500 and T-1000 which were treatment groups that received doses of 250, 500 and 1000 mg/kg/day of the extract, respectively, during this same period the vaginal smear was also performed. The rats were mated and the pregnant ones were treated up to the 14th day. On the 15th day they were euthanized by the method of exsanguination under full anesthesia and, then, laparotomyzed for examination, the organs were removed and weighed and the maternal, litter and placenta variables were recorded. Blood tests were made and the plasmatic concentrations of urea, creatinine, cholesterol, triglycerides, alanine transaminase and aspartate transaminase were determined. The liver, kidneys, spleen, ovaries and adrenal glands were removed and weighed. The number of corpora lutea, implants, resorptions, and live and dead fetuses were counted. The liver, the spleen, and the kidneys of pregnant rats were processed for histopathological analysis. There were no detectable signs of maternal toxicity, as measured by piloerection, diarrhea, change in ambulation in the cage and death. A reduction in the proportion of the estrous phases was observed after the treatment in the T-1000 group. In all treatment groups the average number of corpora lutea, implantations and reabsorption per dam was similar, as well as the post-implantation loss rate, the proportion of implantation and reabsorption. There were records of anemia and increased aspartate transaminase in all three treatment groups, in the highest dosage it was registered increase of cholesterol and leukocytosis, and histopathological alterations in the kidneys, liver and spleen of the dams. Taken together, this study data indicate that the administration of lyophilized aqueous extract of E. grandiflorus to pregnant rats at the dosages of 250, 500 and 1000 mg/kg/day, under this experiment conditions, was toxic to the dams, but did not affect the reproductive performance and no external malformation was observed in the fetuses.
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Efeito do extrato aquoso das folhas de Echinodorus grandiflorus, de suas frações metanólica e residual e do ácido ferúlico na modulação da resposta imune no modelo de alergia pulmonar induzida por ova

Brugiolo, Alessa Sin Singer 11 March 2016 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-07-25T12:36:24Z No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 28268825 bytes, checksum: 19819230b54e983b1d5aa62f656ce02c (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-09T13:50:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 28268825 bytes, checksum: 19819230b54e983b1d5aa62f656ce02c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T13:50:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alessasinsingerbrugiolo.pdf: 28268825 bytes, checksum: 19819230b54e983b1d5aa62f656ce02c (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A asma é uma doença heterogênea, caracterizada por inflamação crônica das vias aéreas, definida pela história de sintomas respiratórios e associada a limitação variável do fluxo expiratório. Considerada um grave problema de saúde, estima-se que afete mais de 300 milhões de pessoas em todo o mundo. A resposta imunológica na asma envolve predominantemente linfócitos Th2, com elevados níveis de IgE total e alérgeno-específica e eosinofilia brônquica. O tratamento visa ao controle da doença e os medicamentos utilizados atualmente apresentam efeitos colaterais sistêmicos e, em geral, não são eficazes nos casos de asma de difícil controle, sendo crucial o desenvolvimento de novos tratamentos. Echinodorus grandiflorus é uma espécie vegetal conhecida como chapéu-de-couro muito utilizada por suas propriedades anti-inflamatórias. Em estudo anterior, o tratamento com o extrato aquoso dessa espécie reduziu a resposta imune patogênica Th2 no modelo de alergia pulmonar induzida por OVA. O ácido ferúlico é um ácido fenólico amplamente presente no reino vegetal e encontrado em E. grandiflorus que apresenta atividades antioxidante e anti-inflamatória. Neste trabalho, foram investigados os efeitos do extrato aquoso de E. grandiflorus, de suas frações metanólica e residual e do ácido ferúlico na modulação da resposta imune no modelo de alergia pulmonar. O extrato, as frações e o ácido ferúlico foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência. Para indução da alergia pulmonar camundongos fêmeas BALB/c foram sensibilizados intraperitonealmente com OVA e alumen nos dias 0 e 14. Nos dias 21, 23, 25, 27 e 29, os animais foram desafiados com OVA 1% por 20 minutos. Os tratamentos foram administrados por gavagem, entre os dias 21 e 29 do protocolo. Foram coletados soro, lavado broncoalveolar e pulmões. Inicialmente, a análise cromatográfica revelou dois ácidos fenólicos como componentes majoritários do extrato e das frações, possivelmente relacionados às suas atividades farmacológicas, entretanto, o ácido ferúlico não foi identificado no extrato e nas frações. Todos os tratamentos foram promissores na modulação da resposta patogênica Th2, com os melhores resultados obtidos com o extrato aquoso 25 mg/kg, fração metanólica 25 mg/kg, fração residual 100 mg/kg e ácido ferúlico 25 mg/kg. Foram observadas reduções do infiltrado inflamatório pulmonar, do número de células caliciformes produtoras de muco, do número total de células e de eosinófilos, linfócitos e neutrófilos no lavado bronco-alveolar, dos níveis de TSLP, IL-25, IL-33, IL-4, IL-5, IL-13, IFN-γ, CCL5, CCL11 e CCL20 no tecido pulmonar e níveis séricos de IgE e IgG1. Juntos, esses resultados indicam que o extrato aquoso de E. grandiflorus, suas frações metanólica e residual e o ácido ferúlico, reduzem a inflamação pulmonar alérgica, atuando principalmente na fase inicial da resposta imune, reduzindo a liberação de citocinas e quimiocinas pelas células epiteliais das vias aéreas. / Asthma is a heterogeneous disease characterized by chronic airway inflammation, defined by history of respiratory symptoms and associated with variable expiratory flow limitation. Regarded as a serious health problem affecting an estimated over 300 million people worldwide. The immune response in asthma is predominantly Th2 lymphocytes, with high levels of total and allergen-specific IgE and bronchial eosinophilia. Asthma treatment is aimed at controlling the disease and the drugs used currently have systemic side effects and generally are not effective in cases of asthma are difficult to control, and it is crucial the developing new treatments. Echinodorus grandiflorus is a plant species known as “chapéu-de-couro” widely used for their anti-inflammatory properties. In previous work, the treatment with the aqueous extract of this specie reduced the pathogenic Th2 response in the OVAinduced pulmonary allergy. The ferulic acid is a phenolic acid widely present in the plant kingdom and found in E. grandiflorus which has antioxidant and antiinflammatory activities. In this study, the effect of aqueous extract of E. grandiflorus, its methanol and residual fractions, and ferulic acid in modulating the immune response of pulmonary allergy model was investigated. The aqueous extract, fractions and ferulic acid were analyzed by high-performance liquid chromatography. For induction of pulmonary allergy female BALB/c mice were intraperitoneally sensitized with OVA and alum on days 0 and 14. On days 21, 23, 25, 27 and 29, animals were challenged with OVA 1% for 20 minutes. Treatments were administered by gavage, between days 21 and 29 of protocol. The serum, bronchoalveolar lavage fluid and lungs were collected. Chromatographic analysis revealed two phenolic acids as major components of extract and fractions that possibly are related to their pharmacological activities, however ferulic acid was not identified in the extract and fractions. The treatments were promising in the modulation of pathogenic Th2 response, with the best results obtained with the aqueous extract 25 mg/kg, methanolic fraction 25 mg/kg, residual fraction 100 mg/kg and ferulic acid 25 mg/kg. The treatments reduced the inflammatory infiltration in lung tissue, the number of goblet cells in lung tissue, the number of total cells, eosinophils, lymphocytes and neutrophils in bronchoalveolar lavage, the levels of TSLP, IL-25, IL33, IL-4, IL-5, IL-13, IFN-γ, CCL5, CCL11, and CCL20 in lung tissue, and the serum levels of IgE and IgG1. Taken together, these results indicate that the aqueous extract of E. grandiflorus, methanolic and residual fractions, and ferulic acid reduced the allergic pulmonary inflammation, act primarily in the early phase of the immune response, reducing the release of cytokines and chemokines by airways epithelial cells.

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