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Estudo in vitro dos efeitos do laser de baixa potência nas células osteoblásticas derivadas da sutura palatina de ratos após expansão rápida da maxila. / In vitro study of the effects of low-level laser therapy on maxilar derived osteoblast cells rats palate suture after rapid maxillary expansion.

Silva, Ana Paula Ramos Bernardes da 17 September 2009 (has links)
O laser de baixa potência é utilizado no tratamento odontológico visando diminuir o tempo do reparo ósseo. O osteoblasto quando diferenciado pouco prolifera, são as células precursoras que o fazem. Células precursoras de osteoblastos exercem um papel essencial nesse processo e o sucesso da formação óssea depende da sua adesão, proliferação celular e diferenciação osteoblástica. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a capacidade de adesão, proliferação e síntese de proteínas (proteína total e fosfatase alcalina), expressão do fenótipo osteoblástico (BSP, COL, OC e RUNX2) e formação de matriz mineralizada em células osteoblásticas derivadas da sutura palatina mediana de ratos e submetidos à disjunção ortopédica maxilar e aplicação de laser de baixa intensidade As-Ga-Al (DMC®-Laser de aplicação pontual, com λ = 830 ηm, 56 J/cm2). Após 24 horas, 48 horas e 7 dias da disjunção palatina e aplicação do laser de baixa potência, fragmentos ósseos da sutura palatina mediana foram submetidos à digestão enzimática para extração das células. As células foram cultivadas em garrafas T75 na presença de meio essencial mínimo suplementado com soro fetal bovino e substâncias que favorecem a diferenciação em osteoblastos: dexametasona, ácido ascórbico e β-glicerol fosfato (MTS 10%). Após confluência na superfície da garrafa, um número estimado de células (2 x 104/poço) foi transportado para as placas de cultura, com 24 poços. Os grupos não irradiados serviram como controles. A avaliação da proliferação celular dos animais sacrificados após expansão rápida da maxila e aplicação do laser de baixa potência indicou que o grupo tratado com laser teve um aumento no número de células assim como na atividade de fosfatase alcalina, na expressão gênica e na mineralização em todos os períodos estudados. Portanto os resultados obtidos indicam que o laser de diodo As-Ga-Al estimulou a formação de células osteoblásticas. Podemos concluir com esses resultados que a radiação do laser diodo de As-Ga-Al estimula a expressão do fenótipo osteoblástico em células derivadas do osso alveolar de ratos após expansão rápida da maxila. / The low-power laser is used in dental treatment to reduce the time of bone healing. Differentiated osteoblasts have poor proliferation. It is rather done by osteoblast cell precursors. Precursor cells of osteoblasts exert a key role in the process of bone formation and its success depends on its adhesion, proliferation and differentiation. The objectives of this study were to evaluate the ability of adhesion, proliferation and synthesis of proteins (total protein and alkaline phosphatase) of osteoblastic cells derived from palatine suture median of rats that underwent orthopedic maxillary disjunction and application of low-intensity laser As- Ga-Al (DMC® Laser-off of application, with λ = 830 ηm, 56 J/cm2), as well as the expression of the osteoblast phenotype (BSP, COL, OC and RUNX2) and the formation of mineralized matrix..After 24 hours, 48 hours and 7 days of the palate disjunction and application of the low-energy laser, bone fragments of the median palatine suture were submitted to enzyme digestion in order to extract the cells. The cells were grown in T75 bottles in the presence of minimum essential medium supplemented with fetal bovine serum and substances which favour the differentiation into osteoblasts: dexamethasone, ascorbic acid and β-glycerol phosphate (10% MTS). After confluence on the surface of the cylinder, an estimated number of cells (2 x 104/poço) were transported to the culture plates with 24 wells. The non-irradiated groups served as controls. The assessment of cell proliferation in animals sacrificed after the rapid expansion of maxilla application of low-energy laser indicated that the group treated with laser had an increase in the number of cells as well as of the activity of alkaline phosphatase, gene expression and mineralization in all periods studied. Therefore, the results indicate that the laser diode of the As-Ga-Al stimulated formation of osteoblastic cells. We conclude that the radiation of the laser diode As-Ga-Al stimulates expression of osteoblast phenotype in cells derived from alveolar bone of rats after rapid expansion of the maxilla.
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Estudo histomorfométrico da ação do laser de baixa potência na reabsorção radicular ortodonticamente induzida em ratos / Histomorphometric study of low-level laser action on orthodontic induced root resorption

Eliziane Cossetin Vasconcelos 27 February 2013 (has links)
A reabsorção radicular inflamatória induzida pela movimentação dentária é uma consequência da lesão dos cementoblastos devido à aplicação da força sobre o dente deixando a raiz exposta à ação dos osteoclastos. Estudos vêm sendo feitos a fim de se desenvolver um meio de evitar, controlar ou reduzir este tipo de reabsorção. A fototerapia com laser tem demonstrado efetividade como agente antiinflamatório e, considerando a origem inflamatória desta patologia este estudo se propôs a avaliar a ação do laser sobre as reabsorções radiculares. Para isto realizou-se uma análise histomorfométrica da raiz disto-vestibular dos primeiros molares superiores de ratos após a indução da sua movimentação mecânica, sendo irradiados ou não com laser de baixa potência. Para a fototerapia foi utilizado um laser diodo, calibrado com comprimento de onda de 808 nm, potência de saída de 100mW, energia total de 2,1J ou 96J e área de 0,0028cm2. A aplicação foi contínua, pontual e com contato. Foram utilizados 54 ratos Wistar, machos, com aproximadamente 80 dias, pesando entre 280±40g. Para a movimentação utilizou- se uma mola fechada super-elástica, com força constante, pré-calibrada em 25g. Os espécimes foram irradiados a cada 48 horas conforme o grupo a que pertenciam. O sacrifício se procedeu no sétimo ou décimo dia após o início da movimentação. O exame histológico foi realizado com cortes de 6 μm corados em HE. Os resultados revelaram que, com as dosimetrias estudadas, o laser de baixa potência, não teve efeito estatisticamente significante sobre as reabsorções radiculares. Concluindo-se que não há diferença na área reabsorvida, espessura ou extensão da reabsorçãoradicular entre os grupos controle e experimental. / Inflammatory root resorption induced by tooth movement is a consequence of the cementoblasts injury due to application of force on the tooth leaving the root exposed to the action of osteoclasts. Studies have been made to develop a means of preventing, controlling or reducing this kind of resorption. Phototherapy by laser has demonstrated effectiveness as an antiinflammatory and considering the inflammatory origin of this pathology this study evaluated the effects of laser on root resorption. For this we carried out a histomorphometric analysis of maxillary first molars distobuccal root of rats after being moved, irradiated or not with low-level laser. Order to phototherapy it was used a diode laser, calibrated with a wavelength of 808 nm, output power of 100mW, 2.1J or 96J of energy and area of 0.0028 cm2. The application was continuous, punctual and with contact. It was used 54 male Wistar rats, approximately 80 days, weighing 280 ± 40g. For tooth movement, it was used a super elastic closed spring, with pre-calibrated and constant force of 25g. The specimens were irradiated every 48 hours depending on the group they belonged to. The sacrifice was made in the seventh or tenth day after the onset of movement. Histological examination was performed with sections of 6 μm stained with HE. The results revealed that, considering the dosimetry studied, low-level laser, has no effect statistically significant on the root resorption. Concluding it does not have difference in the root reabsorption area, thickness or extension, between the control and the experimental groups.
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Avaliação da influência do laser de baixa intensidade na movimentação ortodôntica e supressão da dor / Influence of low-level laser irradiation on orthodontic movement and pain level

Juliana Moura Storniolo de Souza 05 December 2014 (has links)
Analisou-se a velocidade de movimentação ortodôntica e sensibilidade dolorosa de caninos superiores e inferiores submetidos à irradiação com o laser de baixa intensidade (LBI) em dose única mensal, comparados aos caninos contralaterais não irradiados (controle). Foram selecionados 11 indivíduos, portadores de má oclusão de Classe I com indicação de extração dos primeiros pré-molares superiores e inferiores. O laser de baixa intensidade foi aplicado após a ativação da retração inicial dos caninos, realizada através de mola Niti com uma força de 150g. A aplicação do laser foi realizada em 10 pontos (5 por vestibular e 5 por lingual) nos caninos superiores e inferiores, utilizando o seguinte protocolo: Canino inferior por vestibular e lingual e canino superior por vestibular: Potência de 40mW; densidade de energia de 10J/cm2; 10 segundos por ponto; energia por ponto de 0,4J, uma energia total de aplicação de 4J para o canino inferior e 2J por vestibular dos caninos superiores e para o canino superior por palatino o protocolo foi: Potência de 70mW; densidade de energia de 35J/cm2; 20 segundos por ponto; 1,4J de energia por ponto, energia total de 7J. A retração durou 3 meses, num total de 3 aplicações de laser. Foi obtido um par de modelo de gesso inicial após as extrações dentárias e mensalmente antes da aplicação do laser que posteriormente foram escaneados com scanner 3Shape Ortho SystemTM \"(3ShapeTM Copenhagen, Dinamarca) e as imagens tridimensionais avaliadas por meio do software OrthoAnalyzer (3Shape) para mensuração da quantidade de movimentação dos caninos retraídos. Os pacientes preencheram uma escala visual após 12, 24, 48 e 72 horas da ativação da retração inicial dos caninos para avaliação da sensibilidade dolorosa. Para comparação da velocidade da movimentação ortodôntica e o nível de dor entre os lados irradiado e não irradiado nos três períodos avaliados, foi utilizado a Análise de Variância a um critério de medidas repetidas. Em todos os testes adotou-se nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram diferença estatisticamente significante entre a quantidade de retração dos caninos irradiados comparados aos caninos não irradiados somente para os caninos inferiores no primeiro mês de aplicação do LBI. Em relação à sensibilidade dolorosa o LBI não foi efetivo em nenhum dos tempos avaliados. Concluiu-se assim que o LBI no protocolo utilizado só foi eficiente na aceleração da movimentação dentária dos caninos inferiores no primeiro mês de aplicação, porém não gerou redução da dor experimentada pelos pacientes frente às forças ortodônticas. / It was analyzed the orthodontic tooth movement and painful sensibility of maxilary and mandibular canine teeth submitted to irradiation with low-level laser (LLL) in an only monthly dose, compared to the non-irradiated contralateral canines (control). Eleven individuals with Class I malocclusion with indication of extraction of the first maxillary and mandibular premolars were selected. The low-level laser was applied after the activation of initial retraction of the canine teeth, performed with Niti coil springs with force of 150g. The laser application was performed in 10 points (5 buccal and 5 lingual) in the maxillary and mandibular canines, using the following protocol: Mandibular canine buccal and lingual and maxillary canine buccal: 40mW power; an energy density of 10 J/cm2; 10 seconds per point; energy per point 0,4J, a total energy of 4J applying to the mandibular canine and 2J the buccal of the maxillary canines and maxillary canine palatally: 70mW of power; an energy density of 35J/cm2; 20 seconds per point; 1,4J energy per point, the total energy 7J. The retraction lasted three months, a total of three laser applications. It was obtained a couple of dental casts after dental extractions and monthly model before applying the laser which were subsequently scanned with scanner \"3Shape\'s Ortho SystemTM\" (3ShapeTM - Copenhagen, Denmark) and three-dimensional images evaluated through OrthoAnalyzer software (3Shape) to measure the amount of movement of canines retracted. Patients completed a visual scale after 12, 24, 48 and 72 hours of initial activation of canine retraction for evaluation of pain sensitivity. To compare the speed of orthodontic tooth movement and the level of pain between the irradiated and non-irradiated sides at the three movement stages, repeated measures one-way analysis of variance was used. In all tests we adopted a significance level of 5%. The results showed statistically significant difference between the amount of retraction of the irradiated canines compared to the non-irradiated ones only for the mandibular canines in the first month of application of LLL. Regarding the soreness LLL was not effective in anytime evaluated. It was therefore concluded that LLL in the protocol used was effective only in the acceleration of tooth movement of the mandibular canines in the first month of application, but it did not cause reduction of pain experienced by patients ahead to orthodontic forces.
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Avaliação da influência do laser de baixa intensidade na movimentação ortodôntica e supressão da dor / Influence of low-level laser irradiation on orthodontic movement and pain level

Souza, Juliana Moura Storniolo de 05 December 2014 (has links)
Analisou-se a velocidade de movimentação ortodôntica e sensibilidade dolorosa de caninos superiores e inferiores submetidos à irradiação com o laser de baixa intensidade (LBI) em dose única mensal, comparados aos caninos contralaterais não irradiados (controle). Foram selecionados 11 indivíduos, portadores de má oclusão de Classe I com indicação de extração dos primeiros pré-molares superiores e inferiores. O laser de baixa intensidade foi aplicado após a ativação da retração inicial dos caninos, realizada através de mola Niti com uma força de 150g. A aplicação do laser foi realizada em 10 pontos (5 por vestibular e 5 por lingual) nos caninos superiores e inferiores, utilizando o seguinte protocolo: Canino inferior por vestibular e lingual e canino superior por vestibular: Potência de 40mW; densidade de energia de 10J/cm2; 10 segundos por ponto; energia por ponto de 0,4J, uma energia total de aplicação de 4J para o canino inferior e 2J por vestibular dos caninos superiores e para o canino superior por palatino o protocolo foi: Potência de 70mW; densidade de energia de 35J/cm2; 20 segundos por ponto; 1,4J de energia por ponto, energia total de 7J. A retração durou 3 meses, num total de 3 aplicações de laser. Foi obtido um par de modelo de gesso inicial após as extrações dentárias e mensalmente antes da aplicação do laser que posteriormente foram escaneados com scanner 3Shape Ortho SystemTM \"(3ShapeTM Copenhagen, Dinamarca) e as imagens tridimensionais avaliadas por meio do software OrthoAnalyzer (3Shape) para mensuração da quantidade de movimentação dos caninos retraídos. Os pacientes preencheram uma escala visual após 12, 24, 48 e 72 horas da ativação da retração inicial dos caninos para avaliação da sensibilidade dolorosa. Para comparação da velocidade da movimentação ortodôntica e o nível de dor entre os lados irradiado e não irradiado nos três períodos avaliados, foi utilizado a Análise de Variância a um critério de medidas repetidas. Em todos os testes adotou-se nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram diferença estatisticamente significante entre a quantidade de retração dos caninos irradiados comparados aos caninos não irradiados somente para os caninos inferiores no primeiro mês de aplicação do LBI. Em relação à sensibilidade dolorosa o LBI não foi efetivo em nenhum dos tempos avaliados. Concluiu-se assim que o LBI no protocolo utilizado só foi eficiente na aceleração da movimentação dentária dos caninos inferiores no primeiro mês de aplicação, porém não gerou redução da dor experimentada pelos pacientes frente às forças ortodônticas. / It was analyzed the orthodontic tooth movement and painful sensibility of maxilary and mandibular canine teeth submitted to irradiation with low-level laser (LLL) in an only monthly dose, compared to the non-irradiated contralateral canines (control). Eleven individuals with Class I malocclusion with indication of extraction of the first maxillary and mandibular premolars were selected. The low-level laser was applied after the activation of initial retraction of the canine teeth, performed with Niti coil springs with force of 150g. The laser application was performed in 10 points (5 buccal and 5 lingual) in the maxillary and mandibular canines, using the following protocol: Mandibular canine buccal and lingual and maxillary canine buccal: 40mW power; an energy density of 10 J/cm2; 10 seconds per point; energy per point 0,4J, a total energy of 4J applying to the mandibular canine and 2J the buccal of the maxillary canines and maxillary canine palatally: 70mW of power; an energy density of 35J/cm2; 20 seconds per point; 1,4J energy per point, the total energy 7J. The retraction lasted three months, a total of three laser applications. It was obtained a couple of dental casts after dental extractions and monthly model before applying the laser which were subsequently scanned with scanner \"3Shape\'s Ortho SystemTM\" (3ShapeTM - Copenhagen, Denmark) and three-dimensional images evaluated through OrthoAnalyzer software (3Shape) to measure the amount of movement of canines retracted. Patients completed a visual scale after 12, 24, 48 and 72 hours of initial activation of canine retraction for evaluation of pain sensitivity. To compare the speed of orthodontic tooth movement and the level of pain between the irradiated and non-irradiated sides at the three movement stages, repeated measures one-way analysis of variance was used. In all tests we adopted a significance level of 5%. The results showed statistically significant difference between the amount of retraction of the irradiated canines compared to the non-irradiated ones only for the mandibular canines in the first month of application of LLL. Regarding the soreness LLL was not effective in anytime evaluated. It was therefore concluded that LLL in the protocol used was effective only in the acceleration of tooth movement of the mandibular canines in the first month of application, but it did not cause reduction of pain experienced by patients ahead to orthodontic forces.
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Avaliação in vitro da biomodulação de células de linhagem odontoblástica (MDPC-23) de camundongos com laser de baixa potência / Mouse odontoblastic cell behavior after bioestimulation with low-level laser therapy

Luciana Batista Pereira 22 May 2009 (has links)
O laser de baixa intensidade ou terapêutico promove a biomodulação das respostas reparadoras naturais de células pulpares como os odontoblastos, sendo uma estratégia de tratamento a ser utilizada na terapia pulpar. O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro o efeito da irradiação do laser terapêutico de arseniato de gálio e alumínio (GaAlAs) no comportamento da linhagem odontoblástica (MDPC-23) de camundongos. Células odontoblásticas foram plaqueadas na concentração de 104 células/poço (n=5) e submetidas às irradiações nos dias 0, 1, 2 e 3 após o plaqueamento. Foram avaliadas as doses de 0,2 e 1,0 J/cm2 e comparadas ao grupo controle não irradiado. Os parâmetros analisados foram proliferação e viabilidade celular, quantidade de proteína total, atividade de fosfatase alcalina após 3, 7, 10 e 14 dias; detecção e quantificação de matriz mineralizada após 14 dias e quantificação do fator de crescimento VEGF no sobrenadante das culturas após 7 e 10 dias. Imunofluorescência para proteínas colágenas e não-colágenas após 3, 7 e 10 dias foi realizada para verificar sua expressão qualitativa nos grupos propostos. Os resultados mostraram que o laser não afetou a viabilidade celular que ficou acima dos 90% em todos os grupos e períodos experimentais. De modo geral, os grupos irradiados apresentaram redução na proliferação, maior conteúdo de proteína total e maior atividade de ALP em relação ao observado no grupo controle. A marcação com vermelho de alizarina mostrou maior quantidade de áreas nodulares de matriz calcificada no grupo irradiado com 0,2 J/cm2, dados comprovados pela análise quantitativa. Uma maior concentração de VEGF no sobrenadante da cultura foi observada no grupo irradiado com a menor dose. A imunofluorescência revelou que a menor dose favoreceu a secreção de proteínas colágenas e não colágenas Portanto, o laser de baixa potência, dentro dos parâmetros empregados, favoreceu a expressão do fenótipo odontoblástico. / Low-level laser therapy (LLLT) has been studied as a strategy to be used in pulp therapy through biomodulation of its cells, like odontoblasts. The purpose of this investigation was to evaluate the effect of biomodulation on odontoblastic cells using low-level GaAlAs laser. Odontoblastic cells were cultured in a concentration of 104 cells/well (n=5) and submitted to the energy fluencies of 0,2 and 1,0 J/cm2 and compared to control group. There were evaluated cell proliferation and viability, total protein content and alkaline phosphatase activity ( 3, 7, 10 and 14 days), as well as detection and quantification of mineralized nodules after 14 days and VEGF quantification after 7 and 10 days. Immunofluorescence for collagen and non-collagen proteins was performed to verify their qualitative expression in the proposed groups after 3, 7 and 10 days. The results showed that LLLT did not affect cell viability in all the experimental groups. The irradiated cultures presented reduction in the proliferation, higher total protein content and ALP activity compared to the control group. Staining with red alizarin showed greater amount of nodular areas of calcified matrix in the group irradiated with 0,2 J/cm2, data confirmed by quantitative analysis. It was also observed a higher concentration of VEGF in the culture of the cells irradiated with the lowest energy fluence as well as an enhancement of the secretion of collagen and non-collagen proteins revealed through immunofluorescence. It was concluded that therapy with LLLT favors the expression of odontoblastic phenotype.
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Estudo dosimétrico do efeito do laser de baixa potência na mucosite oral induzida por 5-Fluorouracil em hamsters / Dosimetric study of Low Level Laser Therapy in oral mucositis induced by 5-Fluorouracil in hamsters

Cotomácio, Cláudia Carrara 28 September 2016 (has links)
A Mucosite Oral (MO) é uma consequência debilitante do tratamento oncológico, que pode ser tratada com o uso do laser de baixa potência (LBP). Entretanto, ainda não há consenso na literatura a respeito de parâmetros dosimétricos para o reparo da mucosa oral. Dessa forma, o objetivo do estudo foi comparar diferentes protocolos com laser de baixa potência (FLBP) para o tratamento da MO, através de análises clínicas e histológicas. Quinze hamsters foram usados, em um modelo de indução de MO por 5-Fluorouracil (5-FU) e ranhuras superficiais na mucosa oral, com 7 dias de acompanhamento clínico. Os animais foram divididos em cinco grupos: Controle (C), que recebeu apenas anestesia e o veículo do quimioterápico, Controle-Quimioterapia (CQ) que recebeu anestesia, 5-FU e ranhuras, Laser Protocolo 1 (L1) que recebeu o mesmo do grupo CQ + FLBP 6 J/cm²/0,24 J (um ponto), Laser Protocolo 2 (L2) o mesmo do grupo CQ + FLBP 25 J/cm²/1 J (um ponto) e Laser Protocolo 3 (L3), o mesmo do grupo CQ + FLBP 6 J/cm²/0,96 J (4 pontos de 0,24J). O laser foi utilizado em ?=660 nm, com área do spot de 0,04 cm² e 40 mW de potência. O melhor protocolo de FLBP para manter os graus de MO mais baixos, em relação ao grupo CQ, foi o L1, seguido dos protocolos L2 e L3. Os resultados histológicos demonstraram padrão semelhante entre os grupos L1, L2 e C, com alguns vasos sanguíneos e a presença de um fino epitélio de aspecto contínuo no dia 7. Nossos resultados sugerem que o modo de aplicação do LBP e a energia entregue por área pode interferir na reparação da MO. / Oral mucositis (OM) is a dose-limited debilitating consequence from cancer treatment that could be treated with low level laser therapy (LLLT); however, there is no consensus about its dosimetric parameters for oral mucosa healing. Thus, the aim of this study is to compare different LLLT protocols on the treatment of OM, through clinical and histological analysis. Fifteen hamsters were used, in an induced model of OM by 5-Fluorouracil (5-FU) and superficial scratching in oral mucosa, in seven days of follow-up. The animals were divided into 5 groups: Control (C) which received only anesthesia and chemotherapic vehicle; Control-Chemotherapy (Ch) which received anesthesia, 5-FU and scratches; Laser Protocol 1 (L1) the same as Ch group + LLLT 6 J/cm²/0.24J (one point); Laser Protocol 2 (L2) the same as Ch group + LLLT 25J/cm²/1J (one point); and Laser Protocol 3 (L3) the same as Ch group + LLLT 6 J/cm²/0.96 J (4 points of 0.24J). The laser that was used has ?=660 nm, 0.04 cm² of spot area and 40 mW of power. The best LLLT protocol to maintain lowest OM levels compared to Ch group was L1, followed by L2 and L3. Histological results demonstrated a similar pattern among L1, L2 and C groups, with some blood vessels presence and continuous aspect of a thin epithelium, on day 7. Our results suggest that the application mode of LLLT and the energy delivered per area could interfere in the oral mucositis healing.
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Influência de diferentes doses e número de aplicações do laser em baixa intensidade no reparo de defeitos ósseos em calvária de ratas Wistar com modelo experimental para a osteoporose / Influence of different doses and different number sessions of low-level laser irradiation in the repair of bone defects in calvaria of Wistar female rats model of osteoporosis

Scalize, Priscilla Hakime 28 November 2014 (has links)
A laserterapia em baixa intensidade (LLLI) é uma nova metodologia com comprovada eficácia na formação e na diminuição da reabsorção óssea, porém ainda não existe uma padronização quanto à sua utilização, sendo, portanto, necessários mais estudos para investigar o efeito de diferentes parâmetros como o comprimento de onda, duração da aplicação e número de sessões. Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da LLLI em defeitos ósseos críticos em calvária de ratas Wistar com modelo experimental para osteoporose. A qualidade do tecido ósseo neoformado foi analisada por meio da microscopia de luz, e por meio da estereologia, foram estimados os seguintes parâmetros: volume do tecido de reparação do defeito (Vtr - μm3), densidade de volume das trabéculas (Vvt), volume total das trabéculas ósseas neoformadas (Vtot - μm3), densidade numérica de osteócitos (Nvost - μm-3), número total de osteócitos (Ntoost), volume médio dos osteócitos (Vnost - μm3), densidade de superfície das trabéculas (Svt - μm-1) e superfície de área das trabéculas (Sαt - μm2). A quantidade total de colágeno também foi analisada (Ac - μm2). Foram utilizadas 54 ratas que foram submetidas à ovariectomia bilateral. Após 150 dias, foram realizados defeitos ósseos na calvária. Os animais foram divididos em 9 grupos (n=6) e 24 horas após a confecção do defeito iniciou-se o tratamento com laser de Arseneto Gálio-Alumínio (AsGaAl; 780 nm). Os Grupos 1, 2 e 3 (G1, G2 e G3) receberam a dose ou densidade de energia de 0 J/cm2, 20 J/cm2 e 30 J/cm2 respectivamente, por 3 sessões; os grupos 4, 5 e 6 (G4, G5 e G6) receberam 0 J/cm2, 20 J/cm2 e 30 J/cm2 respectivamente, por 6 sessões e os grupos 7, 8 e 9 (G7, G8 e G9) receberam 0 J/cm2, 20 J/cm2 e 30 J/cm2 respectivamente, por 12 sessões. Comparando os grupos G2 e G1 os resultados estereológicos foram significantes para Vtr (p=0,023), Vvt (p=0,003), Vtot (p=0,04), Ntoost (p=0,048), Svt (p=0,000), Sαt (p=0,001) e Ac (p=0,000). Na comparação de G3 e G1 encontrou-se resultados significantes para Vvt (p=0,002) e Vtot (p=0,02). Na comparação de G5 e G4 os resultados foram significantes para Svt (p=0,041) e Sαt (p=0,043) e na comparação de G6 e G4 os resultados foram significantes para Vtr (p=0,005), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,011), Svt (p=0,034), Sαt (p=0,028) e Ac (p=0,001). A comparação de G8 e G7 mostrou que a Sαt foi significante (p=0,047) e na comparação entre G9 e G7 os resultados foram significantes para Vtr (p=0,014), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,024), Svt (p=0,042), Sαt (p=0,014) e Ac (p=0,023). Pôde-se concluir que houve neoformação óssea nos grupos que receberam as doses de 20 e 30 J/cm2 quando comparados com os respectivos grupos controles, porém, ao longo do tempo, a dose de 30 J/cm2 mostrou parâmetros estereológicos melhores quando comparada à dose de 20 J/cm2 / Low-level laser irradiation (LLLI) is a new methodology with proven clinical benefits in increased formation and decreased resorption of bone, however, the use of LLLI still needs to be clarified and standardized. Therefore, more studies are needed to analyze the effects of different parameters, such as wavelength, duration of application and number of sessions. This study aimed to assess the effects of LLLI on critical bone defects in rat calvaria used as an experimental model of osteoporosis. Light microscopy was used to analyze the quality of newly formed bone tissue and stereology was used to calculate the following parameters: tissue repair volume (Vtr - μm3), volume density of trabecular bone (Vvt), total volume of newly formed trabecular bone (Vtot - μm3), numerical density of osteocytes (Nvost - μm-3), total number of osteocytes (Ntoost), mean volume of osteocytes (Vnost - μm3), surface density of trabecular bone (Svt - μm-1) and area surface of trabecular bone (Sαt - μm2). The total amount of collagen was also examined (Ac - μm2). Fifty-four Wistar rats were subjected to bilateral ovariectomy. The bone defects were created in calvaria after 150 days. The animals were divided into 9 groups (n=6) and 24 hours after creating the defect, the treatment started with 780nm low intensity gallium-aluminum-arsenide (GaAlAs) laser: Groups 1, 2 and 3 (G1, G2 and G3) received the energy density of 0 J/cm2, 20 J/cm2 and 30 J/cm2 respectively, in 3 sessions; Groups 4, 5 and 6 (G4, G5 and G6) received 0 J/cm2, 20 J/cm2 and 30 J/cm2 respectively, in 6 sessions; Groups 7, 8 and 9 (G7, G8 and G9) received 0 J/cm2, 20 J/cm2 and 30 J/cm2 respectively, in 12 sessions. For the comparison between groups G2 and G1, the results obtained were significant for Vtr (p=0,023), Vvt (p=0,003), Vtot (p=0,04), Ntoost (p=0,048), Svt (p=0,000), Sαt (p=0,001) and Ac (p=0,000). For the comparison between G3 and G1, the results were significant for Vvt (p=0,002) and Vtot (p=0,02). For the comparison between G5 and G4, the results were significant for Svt (p=0,041) and Sαt (p=0,043) and for the comparison between G6 and G4, the results were significant for Vtr (p=0,005), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,011), Svt (p=0,034), Sαt (p=0,028) and Ac (p=0,001). The comparison between G8 and G7 was significant for Sαt (p=0,047) and for the comparison between G9 and G7, the results were significant for Vtr (p=0,014), Vvt (p=0,000), Vtot (p=0,000), Nvost (p=0,025), Ntoost (p=0,024), Svt (p=0,042), Sαt (p=0,014) and Ac (p=0,023). In conclusion, there was new bone formation in the groups that received doses of 20 and 30 J/cm2 when compared with the respective control groups, but over time, the dose of 30 J/cm2 showed better stereological parameters when compared to 20 J/cm2
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Estudo histomorfométrico da ação do laser de baixa potência na reabsorção radicular ortodonticamente induzida em ratos / Histomorphometric study of low-level laser action on orthodontic induced root resorption

Vasconcelos, Eliziane Cossetin 27 February 2013 (has links)
A reabsorção radicular inflamatória induzida pela movimentação dentária é uma consequência da lesão dos cementoblastos devido à aplicação da força sobre o dente deixando a raiz exposta à ação dos osteoclastos. Estudos vêm sendo feitos a fim de se desenvolver um meio de evitar, controlar ou reduzir este tipo de reabsorção. A fototerapia com laser tem demonstrado efetividade como agente antiinflamatório e, considerando a origem inflamatória desta patologia este estudo se propôs a avaliar a ação do laser sobre as reabsorções radiculares. Para isto realizou-se uma análise histomorfométrica da raiz disto-vestibular dos primeiros molares superiores de ratos após a indução da sua movimentação mecânica, sendo irradiados ou não com laser de baixa potência. Para a fototerapia foi utilizado um laser diodo, calibrado com comprimento de onda de 808 nm, potência de saída de 100mW, energia total de 2,1J ou 96J e área de 0,0028cm2. A aplicação foi contínua, pontual e com contato. Foram utilizados 54 ratos Wistar, machos, com aproximadamente 80 dias, pesando entre 280±40g. Para a movimentação utilizou- se uma mola fechada super-elástica, com força constante, pré-calibrada em 25g. Os espécimes foram irradiados a cada 48 horas conforme o grupo a que pertenciam. O sacrifício se procedeu no sétimo ou décimo dia após o início da movimentação. O exame histológico foi realizado com cortes de 6 μm corados em HE. Os resultados revelaram que, com as dosimetrias estudadas, o laser de baixa potência, não teve efeito estatisticamente significante sobre as reabsorções radiculares. Concluindo-se que não há diferença na área reabsorvida, espessura ou extensão da reabsorçãoradicular entre os grupos controle e experimental. / Inflammatory root resorption induced by tooth movement is a consequence of the cementoblasts injury due to application of force on the tooth leaving the root exposed to the action of osteoclasts. Studies have been made to develop a means of preventing, controlling or reducing this kind of resorption. Phototherapy by laser has demonstrated effectiveness as an antiinflammatory and considering the inflammatory origin of this pathology this study evaluated the effects of laser on root resorption. For this we carried out a histomorphometric analysis of maxillary first molars distobuccal root of rats after being moved, irradiated or not with low-level laser. Order to phototherapy it was used a diode laser, calibrated with a wavelength of 808 nm, output power of 100mW, 2.1J or 96J of energy and area of 0.0028 cm2. The application was continuous, punctual and with contact. It was used 54 male Wistar rats, approximately 80 days, weighing 280 ± 40g. For tooth movement, it was used a super elastic closed spring, with pre-calibrated and constant force of 25g. The specimens were irradiated every 48 hours depending on the group they belonged to. The sacrifice was made in the seventh or tenth day after the onset of movement. Histological examination was performed with sections of 6 μm stained with HE. The results revealed that, considering the dosimetry studied, low-level laser, has no effect statistically significant on the root resorption. Concluding it does not have difference in the root reabsorption area, thickness or extension, between the control and the experimental groups.
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Efeitos da radiação laser de baixa intensidade em células osteoblásticas humanas cultivadas sobre titânio / Effects of low-level laser radiation on human osteoblastic cells grown on titanium

Petri, Alice Dias 23 January 2009 (has links)
O sucesso do tratamento com implantes osseointegráveis dependente do processo de reparo da ferida e do potencial osteogênico das células. Com o objetivo de aumentar a formação óssea na superfície dos implantes, vários tratamentos têm sido propostos, entre eles, a terapia com laser de baixa intensidade. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do laser diodo de Arseneto-Gálio-Alumínio (AsGaAl) em culturas osteogênicas humanas crescidas sobre titânio. Após exposição das culturas, aos 3 e 7 dias, a uma dose de 3 J/cm2, foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) proliferação celular aos 10 e 14 dias; 2) atividade de fosfatase alcalina (ALP) em 10, 14 e 17 dias; 3) formação de matriz mineralizada em 17 dias; 4) imunolocalização de proteínas não-colágenas e do antígeno nuclear Ki-67 por fluorescência indireta em 8, 10, 14 e 17 dias; 5) expressão de genes relacionados ao desenvolvimento do fenótipo osteoblástico aos 14 dias. Os resultados dos ensaios de proliferação celular mostraram que a radiação laser aumentou a proliferação de 10 para 14 dias, mas tanto a atividade de ALP como a formação de matriz mineralizada aparentemente não foram afetadas. A análise das culturas por epifluorescência mostrou que as culturas controle e irradiadas apresentaram comportamento distintos. Aos 14 dias, foi demonstrado que a exposição à radiação laser, na dose utilizada, promoveu aumento na expressão relativa dos genes ALP, OC, BSP, BMP-7 e OPG e redução dos níveis de expressão de Runx2 e osteopontina, mas não afetou a expressão gênica de COL I, RANK-L e ICAM. As culturas irradiadas apresentaram áreas sem células após 24 h da última irradiação, que posteriormente foram repovoadas por células mais proliferativas e menos diferenciadas. Em conclusão, os resultados indicam que a radiação do laser diodo de AsGaAl estimula a expressão do fenótipo osteoblástico de culturas osteogênicas humanas crescidas sobre titânio. / The success of treatment with osseointegrated implants depends on wound healing and the osteogenic potential of cells. Aimed at increasing bone formation onto implant surfaces, several treatments have been proposed and low-intensity laser therapy is one of them. Thus, the purpose of this study was to investigate the effect of the Gallium-Aluminum-Arsenic (GaAlAr) diode laser on human osteogenic cultures grown on titanium. After irradiation of osteogenic cultures with 3 J/cm2 of GaAlAr laser at the days 3 and 7, the following parameters were evaluated: 1) cell proliferation at 10 and 14 days; 2) alkaline phosphatase activity (ALP) at 10 days; 3) mineralized matrix formation at day 17, 4) non-collagenous bone proteins and nuclear antigen Ki-67 immunolocalization by indirect fluorescence at 8, 10, 14 and 17 days; and 5) Expressions of a panel of genes related to osteoblastic phenotype at day 14. Apparently cell proliferation, ALP activity and mineralized matrix formation were not significantly different between irradiated and control cultures in any period. Epifluorescence revealed that control and irradiated cultures had presented different behaviors. At 24 h after irradiation procedures, irradiated cultures displayed areas with no cells, which were repopulated later on by proliferative and apparently less-differentiated cells. Laser radiation increased relative gene expression of ALP, OC, BSP, BMP-7, and OPG; reduced the gene expression of Runx2 and OPN; and did not affect the expression of COL-1, RANK-L and ICAM. Altogether these results indicated that the GaAlAr laser stimulates the expression of osteoblastic phenotype of human osteogenic culture cells grown on titanium.
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Efeito do laser de baixa intensidade sobre as células odontoblastóides

Oliveira, Camila Fávero de [UNESP] 01 August 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-01Bitstream added on 2014-06-13T20:17:13Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_cf_me_arafo.pdf: 444703 bytes, checksum: 9ede9f0590ee9d328107f7e49cda8549 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O laser de baixa intensidade, também conhecido como laser terapêutico, tem sido recomendado para uma variedade de procedimentos clínicos, dentre eles o tratamento da hipersensibilidade dentinária. Pesquisas in vivo, onde dentes foram tratados com laser, demonstraram aumento na síntese de matriz de dentina e menor intensidade na reação inflamatória pulpar. Entretanto, o mecanismo que rege este processo permanece desconhecido. Mediante ao exposto, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar, in vitro, o metabolismo (MTT assay), expressão de fosfatase alcalina e síntese de proteínas quando células de linhagem odontoblástica MDPC-23 foram submetidas à irradiação com laser de baixa intensidade. A expressão dos genes que codificam para colágeno tipo-1 (Col-I) e fibronectina (FN) foi analisada por meio de RT-PCR. Para isto, células foram previamente cultivadas em placas de Petri (15.000 células/cm2) e submetidas a condições de estresse pelo período de 12 horas. Subseqüentemente, 6 aplicações do laser em parâmetros específicos foram realizadas em intervalos de 12 horas. Como grupo controle foi utilizado células não irradiadas. Tanto os valores do MTT quanto os níveis de proteína total não apresentaram valores estatisticamente diferentes daqueles observados para o grupo controle. Em contrapartida, as células irradiadas reduziram sua atividade de fosfatase alcalina. Os resultados de RT-PCR demonstraram haver uma tendência à redução específica, porém não estatística, na expressão dos genes avaliados após irradiação das células. Desta maneira, foi possível concluir, dentro das condições experimentais, que os parâmetros do laser de baixa intensidade utilizados na presente pesquisa não influenciaram o metabolismo celular, porém reduziram discretamente a expressão de algumas proteínas específicas. / Low-level laser therapy (LLLT), also referred to as therapeutic laser, has been recommended for a wide array of clinical procedures, among which the treatment of dentinal hypersensitivity. In vivo studies in which teeth were treated with LLLT have demonstrated an increase in dentin matrix synthesis and lower intensity of pulp inflammatory reaction. However, the mechanism that guides this process remains unknown. Therefore, the objective of this study was to evaluate in vitro the effects of LLL irradiation on cell metabolism (MTT assay), alkaline phosphatase (ALP) expression and total protein synthesis. The expression of genes that encode for collagen type-1 (Col-I) and fibronectin (FN) was analyzed by RT-PCR. For such purposes, odontoblast-like cell line (MDPC-23) was previously cultured in Petri dishes (15,000 cells/cm2) and submitted to stress conditions during 12 h. Thereafter, 6 applications with a monochromatic near infrared radiation (GaAlAs) set at predetermined parameters were performed at 12-h intervals. Non-irradiated cells served as a control group. Neither the MTT values nor the total protein levels of the irradiated group differed significantly from those of the control group (Mann-Whitney test; p>0.05). On the other hand, the irradiated cells showed a decrease in ALP activity (Mann-Whitney test; p<0.05). RT-PCR results demonstrated a trend to a specific reduction in gene expression after cell irradiation, though not significant statistically (Mann- Whitney test; p>0.05). It may be concluded that, under the tested conditions, the LLLT parameters used in the present study did not influence cell metabolism, but reduced slightly the expression of some specific proteins.

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