Orientador: Lourenço Sbragia Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T11:31:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nassr_AzizeCristinaCapelli_D.pdf: 6642584 bytes, checksum: 60fb43046c34664559a19ebb364b282b (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A Hérnia Diafragmática Congênita (HDC) é um defeito da formação do músculo diafragma que incide em aproximadamente 1:2500 nascidos vivos e apresenta altos índices de mortalidade fetal e neonatal decorrentes da hipoplasia e da hipertensão pulmonares. Este defeito pode ser induzido experimentalmente em ratas grávidas administrando o herbicida nitrofen que causa HDC em 24% dos fetos. A análise microscópica do pulmão da HDC demonstra a presença de hipolasia pulmonar além de alveolização e vascularização alterada. Um dos fatores de crescimento envolvidos no desenvolvimento vascular é o VEGF (vascular endothelial growth factor) e seus receptores, no entanto ainda não se conhece como a expressão desta glicoproteína e de seus receptores varia ao longo do desenvolvimento pulmonar fetal nesta doença. Utilizando o modelo experimental de HDC induzido pelo nitrofen (2,4-dicloro-4'nitrodifenil éter) investigamos o grau de hipoplasia pulmonar e por meio de análise imunoistoquímica, comparamos a expressão dos receptores para o VEGF em três fases do desenvolvimento pulmonar, pseudoglandular, canalicular e sacular de fetos de ratos normais e com HDC. Dividimos o experimento em ratas da raça Sprague-Dawley em três grupos: controle externo (CE), exposto ao óleo de oliva (OO) e expostas ao nitrofen com e sem HDC. Estudamos quatro grupos de 20 fetos cada em cinco dias gestacionais (DG) diferentes 17,5, 18,5, 19,5, 20,5 e 21,5. As variáveis morfológicas estudadas foram: peso corporal (PC), peso pulmonar total (PPT), peso do pulmão esquerdo (PPE), relação PPT/PC, volume pulmonar total (VPT) e volume do pulmão esquerdo (VPE). As variáveis histométricas estudadas foram: parênquima pulmonar (Par), espaço aéreo (EA), densidade do parênquima (DAP) e volume do parênquima do pulmão esquerdo. A avaliação imumohistoquímica foi realizada por meio da contagem de pontos de receptor de VEGFR-1 e 2. Obtivemos 37 % (100/270) de HDC nas ratas expostas ao nitrofen, todas variáveis morfológicas e histométricas indicam diminuição dos resultados no grupo nitrofen com e sem HDC em relação aos demais, mas que se acentuam mais ainda no grupo HDC. Essas alterações são mais evidentes a partir dos DG 18,5 e 19,5. A imunomarcação para os receptores VEGFR-1 aumentou nos grupos nitrofen e foram progressivamente maiores no grupo nitrofen com HDC (p<0,005) que os fetos dos grupo CE e OO a partir do dia gestacional 17,5, fase pseudoglandular com pico máximo no dia gestacional 19,5. O mesmo ocorreu com os receptores de VEGFR-2 a partir do dia gestacional 17,5, fase pseudoglandular até o dia 21,5 fase sacular do desenvolvimento pulmonar. Concluímos que o modelo é valido e que os fetos expostos ao nitrofen com e sem HDC apresentam hipoplasia pulmonar primária sendo mais acentuada nos fetos portadores de HDC. O mesmo resultado ocorre com imunomarcação para os receptores de VEGFR-1 e 2 que foram maiores na HDC. / Abstract: The Congenital Diaphragmatic Hernia (CDH) is a defect in the embryogenesis of the diaphragm with an incidence of 1:2500 liveborns and high fetal and neonatal mortality due to pulmonary hypoplasia and hypertension. This defect can be experimentally induced in fetuses of pregnant rats by the administration of Nitrofen, an herbicide that causes CDH in 24% of the fetuses. The histology of lungs in CDH shows pulmonary hipoplasia and not only the alveolarization but also the vascularization are affected. These changes lead to a high neonatal mortality because of the thickening of the middle layer of the arterioles causing pulmonary hypertension. One of the factors involved in the growth of the arterioles is VEGF (vascular endothelial growth factor) and its receptors; however, it is not known how the expression of this glycoprotein and its receptors change during lung development in this disease. In Brazil, the experimental model has never been tested. So, we tested the model and verified the degree of pulmonary hipoplasia and, using imunohystochemistry, we compared the expression of the receptor of VEGF in three different stages of lung development, pseudoglandular, canalicular and saccular, of normal rat fetuses and fetuses with CDH. Female Sprague-Dawley rats were divided in three groups: external control (EC), exposed to olive oil (OO) and exposed to nitrofen (N). We studied four groups - EC, OO, N with CDH and N without CDH - with 20 fetuses in each five different gestational days (GD) 17,5, 18,5, 19,5, 20,5, 21,5. The morphologic variables studied were: body weight (BW), total lung weight (TLW), left lung weight (LLW), relationship TLW/BW, total lung volume (TLV) and left lung volume (LLV). The hystometric variables studied were: lung parenchyma (LP), air space (AS), left lung parenchyma density (PD) and left lung parenchyma volume (PV). The immunohystochemistry variables were: points positive and negative for the receptor for VEGF 1 and 2. We had 37% (100/270) of CDH frequency in the fetuses exposed to nitrofen. All the morphological and hystometrical variables show a reduction in the nitrofen group with and without CDH, which were more pronounced in the group of fetuses with CDH. These changes are more evident from the GD 18,5 and 19,5 on. The receptors VEGFR-1 e 2 are increased in the nitrofen groups with and without CDH, but this increase is higher in the fetuses with CDH. We conclude that the model is valid and that the fetuses exposed to nitrofen with and without CDH show primary pulmonary hypoplasia that is more pronounced in CDH, the same is also observed in the receptors of VEGFR-1 and 2. / Doutorado / Pesquisa Experimental / Doutor em Cirurgia