No description available.

No description available.

No description available.

No description available.

Objetivos: O objetivo do rastreio pré-natal é detetar alterações no número ou estrutura dos cromossomas ou variantes genéticas patogénicas que causem doença. As técnicas de QF-PCR (Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction) e MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification) têm sido usadas para a deteção rápida de aneuploidias cromossómicas. O cariótipo e o array-CGH (Array-comparative Genomic Hybridisation) são frequentemente usados como segundo teste. O objetivo deste estudo observacional retrospetivo foi avaliar os resultados da aplicação de métodos quantitativos MLPA e QF-PCR para a deteção rápida de aneuploidias cromossómicas no diagnóstico pré-natal e comparar o rendimento com as outras técnicas, nomeadamente o cariótipo e o array-CGH. Desenho do estudo: Entre janeiro de 2000 e janeiro de 2021, 3696 amostras foram recebidas para teste de diagnóstico pré-natal. As amostras foram estudadas utilizando, em primeiro lugar, MLPA ou QF-PCR para uma deteção rápida de aneuploidias nos cromossomas 13, 18, 21, X e Y, e, numa segunda fase, com cariótipo, array-CGH ou ambos. Foram recolhidos dados relativos à indicação de referenciação. Os resultados do MLPA ou do QF-PCR foram classificados como normais, anormais ou inconclusivos. Os resultados do cariótipo e da array-CGH foram classificados como não disponíveis ou disponíveis e esperados ou não esperados. Resultados: Dos 3696 casos identificados, 3659 foram avaliados. A indicação mais comum para os testes de diagnóstico foi um rastreio bioquímico positivo (31,4%), seguido de anomalias ecográficas (16,8%), idade materna avançada (15,9%) e a translucência da nuca aumentada (14,0%). 90,1% (3295/3659) dos resultados do MLPA ou QF-PCR foram normais e 9,9% (364/3659) apresentaram um resultado alterado. Depois do teste molecular, 3123 casos (85.4%) foram analisados apenas por cariótipo e 337 (9,2%) isoladamente por array-CGH. 79 (2.2%) das amostras foram testadas tanto pelo cariótipo como por array-CGH. Nenhum teste adicional foi realizado em 120 (3,3%) amostras. 93,3% (3414/3659) dos resultados do MLPA/QF-PCR foram concordantes com o resultado do teste subsequente. Foram detetados quatro resultados falsos negativos pelas técnicas moleculares devido a contaminação materna na amostra fetal. Conclusões: Os resultados descritos estão de acordo com os reportados na literatura e destacam a importância das técnicas rápidas de diagnóstico molecular para a deteção de alterações cromossómicas num�\xA9ricas. O cariótipo e o array-CGH desempenham um papel importante para o estudo mais aprofundado de casos específicos, especialmente quando os resultados dos testes moleculares quantitativos rápidos são normais. / Objectives: The aim of prenatal screening is to detect alterations in the number or structure of chromosomes or pathogenic genetic variants that are the cause of disease. Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction and Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification have been used for the rapid detection of aneuploidies. Karyotyping and array-comparative genomic hybridisation (array-CGH) are often used as second test. The aim of this retrospective observational study was to evaluate the results of the application of MLPA and QF-PCR quantitative methods for the rapid detection of chromosomal aneuploidies in prenatal diagnosis and to compare the diagnostics yield with the other techniques, namely karyotype and array-CGH. Study Design: Between January 2000 and January 2021, 3696 samples were received for prenatal diagnostic testing. Samples were studied using firstly MLPA or QF-PCR for a rapid detection of aneuploidies in chromosomes 13, 18, 21, X and Y, and on a second step with karyotype, array-CGH or both. Data concerning indication for referral was collected. MLPA or QF-PCR results were categorised as normal, abnormal, or inconclusive. The karyotype and array-CGH results were classified as non-available or available and expected or not expected. Results: Of the 3696 cases identified, 3659 were evaluated. The most common indication for diagnostic testing was a positive biochemical screening (31.4%), followed by ultrasound abnormalities (16.8%), advanced maternal age (15.9%) and increased nuchal translucency (14.0%). 90.1% (3295/3659) of the MLPA or QF-PCR results were normal and 9.9% (364/3659) showed an altered result. After the rapid molecular testing, 3123 cases (85.4%) were analysed by karyotype alone and 337 (9.2%) by an isolated array-CGH. 79 (2.2%) samples were tested by both karyotype and array-CGH. No other test was performed in 120 (3.3%) samples. 93.3% (3414/3659) of the MLPA/QF-PCR results were compatible with the subsequent test. Four false negative results were detected due to maternal cell contamination. Conclusions: These findings are in accordance with previous results reported in the literature and highlight the importance of the rapid molecular diagnostic tests for numerical chromosomal alterations. Karyotype and array-CGH play an important role for the further study of specific cases, especially when rapid quantitative molecular tests results are normal.

A Hipertensão Arterial Pulmonar (HAP) é uma doença vascular progressiva e fatal caracterizada por elevada pressão e remodelação da vasculatura pulmonar. Nesta doença, encontramos lesões trombóticas, resultantes da ativação plaquetária, endotelial e dos fatores-de-coagulação crónica, o que se traduz em agregação plaquetária, vasoconstrição e espessamento da média. As Neutrophil Extracellular Traps (NETs), redes de cromatina e enzimas citoplasmáticas (mieloperoxidase e elastase neutrófilica) formadas após morte celular programada, têm sido descritas em doenças cardiovasculares como mediadores pró-trombóticos - pela criação de uma base ou interação com recetores membranares. Nesta revisão, analisámos o possível envolvimento das NETs na PAH, de modo a fomentar outros estudos a explorar esta hipótese. NETs parecem ter um papel determinante na HAP através da ativação de células endoteliais e plaquetas mediada pelos recetores TLR4/TLR2. Simultaneamente, NETosis é induzida por sinalização endotelial de IL8 e interação célula-célula entre plaquetas e neutrófilos ativados - feedback positivo. Sendo os níveis de NETs mais elevados nestes doentes, a formação de NETs poderá encontrar-se aumentada ou a sua degradação inibida. A confirmação do seu papel na fisiopatologia e prognóstico da PAH pode representar uma nova oportunidade para explorar novas opções terapêuticas. / Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a progressive and fatal vascular disease characterized by high blood pressure in the pulmonary artery and remodeling of the pulmonary vasculature. This disease is characterized by the presence of thrombotic lesions, resultant from chronic platelet, coagulation factors and endothelium activation, which translate into platelet aggregation, vasoconstriction and medial thickening. Neutrophil extracellular traps (NETs), a network of chromatin and cytoplasmatic enzymes (myeloperoxidase and neutrophil elastase) formed after neutrophil programmed-cell-death, were described in multiple cardiovascular diseases as thrombotic mediators, either by creating a scaffold, either by surface receptor interaction. In this review, we analyze the possible involvement of NETs in PAH, to enlighten future studies to explore this hypothesis. NETs may have a determinant role in pulmonary hypertension through TLR4/TLR2-mediated activation of platelets and endothelial cells. Simultaneously, NETosis is induced by IL8 endothelial signaling and cell-cell interaction between platelets and primed neutrophils, creating a positive feedback loop. Because patients with PAH often present higher levels of NETs, we hypothesize that NET formation and/or its activity might be enhanced, or its degradation hindered. Confirming its role in the pathophysiology and prognosis of PAH may represent a new opportunity to explore new therapeutic options.

No description available.

No description available.

OBJETIVOS: Com este estudo procurámos clarificar e aprofundar o conhecimento existente sobre a morfologia do córtex insular, focando-nos não só na forma da ínsula, como também na organização dos seus sulcos e circunvoluções. MATERIAIS E MÉTODOS: Após a devida exposição, as ínsulas de sessenta hemisférios humanos adultos previamente fixados em formaldeído foram fotografadas. As dimensões de cada circunvolução e de cada sulco foram medidas com recurso a um software de análise de imagem. Os dados morfométricos obtidos foram depois analisados estatisticamente. RESULTADOS: A forma do córtex insular alterna entre triangular e trapezoide, sendo a primeira mais frequente (75%). O ângulo formado pelos sulcos peri-insulares posterior e inferior nas ínsulas trapezoides apresentava uma amplitude média de 131.17 (DP = 12.277). Um número mínimo de 3 e um número máximo de 6 circunvoluções por ínsula foram observadas, sendo que 5 era o número mais frequentemente observado. A circunvolução acessória estava presente em 66% das ínsulas, encontrando-se bem desenvolvida em 38% dos casos. Foi encontrada uma associação estatística entre o número de circunvoluções do lobo posterior e a presença de uma nova circunvolução no lobo anterior ou de uma circunvolução acessória mais desenvolvida (p = 0.006). A circunvolução posterior curta era a mais longa do lobo anterior (p < 0.001), sendo seguida pela circunvolução anterior curta (p < 0.001). No lobo posterior, a circunvolução anterior longa demonstrou ser mais larga que a circunvolução posterior longa (p = 0.003). A contribuição de cada circunvolução para a formação do ápex insular revelou-se muito inconsistente. O padrão mais frequentemente observado foi a combinação da circunvolução anterior curta com a circunvolução média curta. CONCLUSÕES: O presente estudo faz uma contribuição robusta e relevante para o conhecimento da anatomia do córtex insular, auxiliando os neurocirurgiões na decisão sobre as melhores formas de abordar esta área cortical. / OBJECTIVE: The purpose of this study was to clarify the morphology of the insular cortex focusing not only on the shape of the insula, but also on sulcal and gyral organization. PATIENTS AND METHODS: Sixty formalin-fixed adult brain hemispheres had their insula exposed and photographed. The dimensions of each gyrus and sulcus were measured using an image analysis software. The morphometric data obtained was statistically analysed. RESULTS: The insular cortex shape alternates between triangular and trapezoid, being the triangular shape the most common (75%). The angle between the posterior and inferior peri-insular sulcus in the trapezoid insulae had a mean range of 131.17 (SD = 12.277). A minimum of 3 and a maximum of 6 insular gyri were observed, being 5 the most common total number of gyri observed. The accessory gyrus was present in 66% of the insulae and well-developed in 38% of the cases. A statistical association between the number of gyri in the posterior lobe and the presence of a novel gyrus or a more developed accessory gyrus in the anterior lobe was found (P = 0.006). The posterior short gyrus was the longest of the short gyri (P < 0.001), followed by the anterior short gyrus (P < 0.001). The anterior long gyrus was the largest of the long gyri (P = 0.003). The contribution of each of the short gyri to the formation of the insular apex was inconstant. The most common observed apex arrangement was the combination of the anterior and of the middle short gyri. CONCLUSIONS: This study makes a strong contribution to the understanding of the insular cortex anatomy, allowing neurosurgeons to be more capable to decide the best approach to this cortical area.

Introdução: A Cardiomiopatia Séptica (CMS) é uma situação clínica de prevalência crescente, com uma alta mortalidade e escassas opções terapêuticas. Apesar da intensa atividade da investigação experimental, a translação de novas terapêuticas neste cenário clínico tem sido limitada pela existência de importantes diferenças interespécies. Nesse sentido, o estudo da CMS humana é necessário para ultrapassar as limitações dos presentes modelos experimentais. Os microARN (miR) são importantes reguladores do transcriptoma e função miocárdicos. Neste trabalho, investigámos o transcriptoma e o targetoma de pequenos ARN miocárdicos na CMS humana. Métodos: Amostras post mortem de miocárdio humano foram obtidas de pacientes com choque séptico (n=53) e controlos não sépticos (n=15). A sequenciação de pequenos ARN (Illumina) foi realizada numa subpopulação (Ctrl, n=8; Sépsis, n=16) para a obtenção do perfil de expressão de miR na CMS humana. Os resultados da análise de expressão diferencial foram confirmados por PCR quantitativo. A associação entre os níveis de expressão dos miR e o marcador de lesão miocárdica (concentração plasmática de troponina ante mortem) foi avaliada. A predição do targetoma foi realizada para identificar novas interações miR-mRNA na CMS. Um modelo experimental de murganho foi usado para a posterior validação do gene alvo no tecido miocárdico (immunoblotting). Resultados: A assinatura transcriptómica de microARN na CMS humana foi identificada e validada com sucesso. Vários miR com conhecidas funções pró-inflamatórias (miR-21, miR-146b e miR-223) estão sobreexpressos na CMS humana. No entanto, encontramos também miR com funções desconhecidas na CMS, alguns sobreexpressos (família miR-320 e miR-185) e outros subexpressos (miR-135a). De forma importante, a expressão de alguns miR correlacionou-se positiva ou negativamente com a lesão miocárdica, sendo capazes, em conjunto, de prever a variação de troponina na população séptica. Para além disso, a análise do targetoma identificou um alvo mRNA comum a praticamente todos os miR sobreexpressos na CMS, o Disrupted-in-schizophrenia 1 (DISC1), conhecido pelo papel central na regulação do metabolismo oxidativo mitocondrial. A subexpressão miocárdico do DISC1 foi validada num modelo experimental de sépsis. Conclusão: O nosso grupo identificou o perfil de expressão de microARN na CMS humana, fornecendo novos caminhos de investiga�\xA7ão e potenciais novos alvos terapêuticos. Adicionalmente, a análise do targetoma mostrou que o DISC1, um gene previamente associado a patologia psiquiátrica, pode ter um papel importante nas disfunções mitocondrial e miocárdica induzidas pela sépsis. / Background: Septic cardiomyopathy (SCM) is an increasingly prevalent clinical situation with high mortality and scarce treatment options. Despite intense experimental research activity, translation of novel therapies in this clinical scenario has been hindered by important interspecies differences. Therefore, the study of human SCM samples is needed to overcome limitations of current experimental models. MicroRNAs (miRs) are key regulators of the myocardial transcriptome and function. Herein, we investigated the myocardial small RNA transcriptome and targetome in human SCM. Methods: Human postmortem myocardial samples were obtained from septic shock (n=53) and nonseptic control patients (n=15). Small RNA sequencing (Illumina) was performed in a subpopulation (Ctrl, n=8; Sepsis, n=16) to obtain the miR expression profile in human SCM. Results from differentially expression analysis were confirmed by quantitative PCR. The association between miR expression levels and myocardial injury surrogate (antemortem troponin plasma concentration) was assessed. Targetome prediction was performed to uncover novel miR-mRNA interactions in SCM. An experimental mouse model was used for posterior validation of target gene downregulation in myocardial tissue (immunoblotting). Results: MicroRNA transcriptomic signature in human SCM was successfully identified and validated. Several miRs with known proinflammatory function were confirmed to be upregulated in human SCM (miR-21, miR-146b, miR-223). However, miRs unknown to play a role in SCM were also found to be upregulated (miR-320 family, miR-185) and downregulated (miR-135a-5p). Importantly, expression of some miRs correlated positively or negatively with myocardial injury, being able to predict troponin variation in the septic population. Moreover, targetome analysis identified a common mRNA target to the upregulated miRs in SCM, Disrupted-in-schizophrenia 1 (DISC1), a key player in the regulation of mitochondrial oxidative metabolism. An experimental mouse model of sepsis was used to validate DISC1 myocardial downregulation. Conclusion: We identified the microRNA expression signature in human SCM providing novel research avenues and potential novel therapeutic targets. Additionally, targetome analysis uncovered DISC1, a gene previously associated with psychiatric disease, as a possible important player in sepsis-induced mitochondrial and myocardial dysfunction.