Esse trabalho foi desenvolvido com o objetivo de verificar a bioatividade de extratos aquosos e orgânicos de folhas de Trichilia pallida e do extrato aquoso de sementes de Azadirachta indica (nim) sobre Tuta absoluta e seu parasitóide Trichogramma pretiosum. Procurou-se determinar os efeitos sistêmico, translaminar e de contato dos extratos sobre a praga, além do efeito sobre a biologia e comportamento do parasitóide. Primeiramente, foram realizados experimentos visando à determinação das concentrações dos extratos mais adequadas para utilização nos testes de bioatividade. Nesta etapa preliminar, foram utilizados apenas extratos aquosos de sementes de nim em concentrações variáveis de 0,5 a 10%. Esses extratos foram aplicados no solo, na superfície adaxial de folíolos de tomateiro e diretamente sobre o inseto para a determinação dos efeitos sistêmico, translaminar e de contato, respectivamente, sendo selecionadas as concentrações de 0,5; 1 e 5% para os respectivos testes. Após a escolha das concentrações, foi selecionado, dentre quatro extratos orgânicos de folhas de T. pallida (hexânico, metanólico, etanólico e clorofórmico) o extrato clorofórmico como o mais eficiente sobre a praga. Determinadas as concentrações e o extrato orgânico de T. pallida mais eficiente, este, juntamente com o extrato aquoso dessa espécie e o de sementes de nim foram submetidos aos testes de bioatividade para verificar os efeitos sobre a traça-do-tomateiro. Finalmente os extratos que apresentaram melhores resultados sobre a praga foram avaliados em relação ao parasitóide de ovos T. pretiosum. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que os extratos aquosos de sementes de nim apresentam efeitos translaminar, sistêmico e por contato sobre T. absoluta, provocando alta mortalidade mesmo em concentrações menores do que 5%. Verificou-se também, que o extrato clorofórmico é mais eficiente que o hexânico e o aquoso em relação à traça-do-tomateiro, e que extratos aquosos e clorofórmicos de folhas dessa espécie, em concentrações maiores do que 5% prejudicam o desenvolvimento de T. absoluta. Esses extratos atuam de forma translaminar, sistêmica e por contato, sendo o efeito translaminar mais pronunciado que os demais. Com relação ao parasitóide T. pretiosum, verificou-se que o mesmo é sensível ao extrato aquoso de sementes de nim na concentração de 10% e que os extratos aquosos e clorofórmicos de folhas de T. pallida na concentração de 10% não afetam o seu parasitismo e nem o seu desenvolvimento no interior do ovo hospedeiro. / This research was developed in order to verify the bioactivity of Trichilia pallida aqueous and organic leaf extracts and Azadirachta indica (neem) aqueous seed extract on Tuta absoluta and its parasitoid Trichogramma pretiosum. Besides the parasitoid's behavior and biology, were also determined the systemic, translaminar and contact effects of the extracts on the pest. Firstly, for the utilization in bioactivity tests, experiments aiming the determination of the most appropriate extract concentrations were conducted. In this preliminar stage, only neem aqueous seed extract in variable concentrations from 0.5% to 10% were used. For the determination of systemic, translaminar and contact effects, these extract were applied in the soil, in adaxial surface of the tomato plant foliole and directly over the insect, respectively. For those respective tests 0.5; 1 and 5% concentrations were selected. Afterwards, the one with the higher activity on T. absoluta was selected among four organic T. pallida leaf extract (hexanic, methanolic, ethanolic and chloroformic). In this test, the chloroformic extract was considered the most effective on the pest. After the concentrations and most effective T. pallida organic extract having been determined, this organic extract along with the aqueous extract of this specie and the neem seed were submitted to bioactivity tests in order to verify the effects on the tomato pinworm. Finally, the extracts that presented the best results over the pest were evaluated in relation to the parasitoid T. pretiosum. According to the results it was possible to conclude that the aqueous extracts of neem seed present systemic, translaminar and contact effects on T. absoluta, causing high mortality in concentration smaller than 5%. It was also observed that the chloroformic extract from T. pallida leaves is more efficient than the hexanic and aqueous ones in relation to the tomato pinworm and that chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in concentrations higher than 5% disrupt T. absoluta development. These extracts have systemic, translaminar and contact mode of action, being the translaminar effect more distinguished than the others. It was observed that T. pretiosum parasitoid is sensitive to the aqueous extract of neem seed in a concentration of 10%, and that the chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in a concentration of 10% neither affect its parasitism nor its development inside the host egg.

The goal of this project was the development of a computer-based system using artificial intelligence to classify the limonoids, protolimonoids and triterpenoids isolated from the family Meliaceae by the Natural Products Research Group of the University of Natal, Durban. A database of samples was obtained between 1991 and 1996, part of which time the author was a member of the group and isolated compounds from Turraea obtusifolia and Turraea floribunda. Over and above the problem of complexity and similarity in structures of the above mentioned natural products, are other difficulties. These include very small amounts of sample being isolated producing very weak peak signals in the C-13 NMR spectra, extraneous peaks in the NMR spectra due to different impurities and instrument noise, non-reproducible spectra due to the pulsed Fourier transform intervals and the nuclear Overhauser effect, impure samples often isolated as stereoisomeric mixtures or as mixed esters and superposition of peak signals in the NMR spectra due to carbons in the same environment within the same compound. These factors make identification by traditional computational and expert systems impossible. As a result of these shortcomings, the author has developed a novel approach using artificial neural network techniques. The artificial neural network system developed used real data from the 300 MHz NMR spectrometer in the Department of Chemistry, Durban. The system was trained to discriminate between limonoids, triterpenoids and flavonoids/coumarins from the C-13 NMR spectra of pure, impure and unseen compounds with an accuracy of better than 90%. Further differentiation of the glabretals from the rest of the protolimonoids as well as from the rest of the triterpenoids showed similarly significant results. Finally, individual limonoid discrimination within the limonoid dataset was extremely successful. Apart from its application to the extractives from Meliaceae, the methodology and techniques developed by the author can be applied to other sets of extractives to provide a robust method for the spectral classification of pre-identified natural products. / Thesis (Ph.D.)-University of Natal, Durban, 1998.

Esse trabalho foi desenvolvido com o objetivo de verificar a bioatividade de extratos aquosos e orgânicos de folhas de Trichilia pallida e do extrato aquoso de sementes de Azadirachta indica (nim) sobre Tuta absoluta e seu parasitóide Trichogramma pretiosum. Procurou-se determinar os efeitos sistêmico, translaminar e de contato dos extratos sobre a praga, além do efeito sobre a biologia e comportamento do parasitóide. Primeiramente, foram realizados experimentos visando à determinação das concentrações dos extratos mais adequadas para utilização nos testes de bioatividade. Nesta etapa preliminar, foram utilizados apenas extratos aquosos de sementes de nim em concentrações variáveis de 0,5 a 10%. Esses extratos foram aplicados no solo, na superfície adaxial de folíolos de tomateiro e diretamente sobre o inseto para a determinação dos efeitos sistêmico, translaminar e de contato, respectivamente, sendo selecionadas as concentrações de 0,5; 1 e 5% para os respectivos testes. Após a escolha das concentrações, foi selecionado, dentre quatro extratos orgânicos de folhas de T. pallida (hexânico, metanólico, etanólico e clorofórmico) o extrato clorofórmico como o mais eficiente sobre a praga. Determinadas as concentrações e o extrato orgânico de T. pallida mais eficiente, este, juntamente com o extrato aquoso dessa espécie e o de sementes de nim foram submetidos aos testes de bioatividade para verificar os efeitos sobre a traça-do-tomateiro. Finalmente os extratos que apresentaram melhores resultados sobre a praga foram avaliados em relação ao parasitóide de ovos T. pretiosum. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que os extratos aquosos de sementes de nim apresentam efeitos translaminar, sistêmico e por contato sobre T. absoluta, provocando alta mortalidade mesmo em concentrações menores do que 5%. Verificou-se também, que o extrato clorofórmico é mais eficiente que o hexânico e o aquoso em relação à traça-do-tomateiro, e que extratos aquosos e clorofórmicos de folhas dessa espécie, em concentrações maiores do que 5% prejudicam o desenvolvimento de T. absoluta. Esses extratos atuam de forma translaminar, sistêmica e por contato, sendo o efeito translaminar mais pronunciado que os demais. Com relação ao parasitóide T. pretiosum, verificou-se que o mesmo é sensível ao extrato aquoso de sementes de nim na concentração de 10% e que os extratos aquosos e clorofórmicos de folhas de T. pallida na concentração de 10% não afetam o seu parasitismo e nem o seu desenvolvimento no interior do ovo hospedeiro. / This research was developed in order to verify the bioactivity of Trichilia pallida aqueous and organic leaf extracts and Azadirachta indica (neem) aqueous seed extract on Tuta absoluta and its parasitoid Trichogramma pretiosum. Besides the parasitoid's behavior and biology, were also determined the systemic, translaminar and contact effects of the extracts on the pest. Firstly, for the utilization in bioactivity tests, experiments aiming the determination of the most appropriate extract concentrations were conducted. In this preliminar stage, only neem aqueous seed extract in variable concentrations from 0.5% to 10% were used. For the determination of systemic, translaminar and contact effects, these extract were applied in the soil, in adaxial surface of the tomato plant foliole and directly over the insect, respectively. For those respective tests 0.5; 1 and 5% concentrations were selected. Afterwards, the one with the higher activity on T. absoluta was selected among four organic T. pallida leaf extract (hexanic, methanolic, ethanolic and chloroformic). In this test, the chloroformic extract was considered the most effective on the pest. After the concentrations and most effective T. pallida organic extract having been determined, this organic extract along with the aqueous extract of this specie and the neem seed were submitted to bioactivity tests in order to verify the effects on the tomato pinworm. Finally, the extracts that presented the best results over the pest were evaluated in relation to the parasitoid T. pretiosum. According to the results it was possible to conclude that the aqueous extracts of neem seed present systemic, translaminar and contact effects on T. absoluta, causing high mortality in concentration smaller than 5%. It was also observed that the chloroformic extract from T. pallida leaves is more efficient than the hexanic and aqueous ones in relation to the tomato pinworm and that chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in concentrations higher than 5% disrupt T. absoluta development. These extracts have systemic, translaminar and contact mode of action, being the translaminar effect more distinguished than the others. It was observed that T. pretiosum parasitoid is sensitive to the aqueous extract of neem seed in a concentration of 10%, and that the chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in a concentration of 10% neither affect its parasitism nor its development inside the host egg.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-02T11:16:10Z No. of bitstreams: 1 Marcileyne Pessoa Leite de Lima.pdf: 517075 bytes, checksum: b7ddab703563527f0c2b8e77f710122c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-02T11:16:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcileyne Pessoa Leite de Lima.pdf: 517075 bytes, checksum: b7ddab703563527f0c2b8e77f710122c (MD5) Previous issue date: 2008-02-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The synthetic insecticide is the main method used to control Spodoptera frugiperda (J.E. Smith). However, the inadequate application of the insecticide has contributed to increase costs, reduction of the natural enemies, and selection of resistant populations, among other problems. Attempting to obtain alternative control of S. frugiperda more ecologically acceptable, the present work investigated the effects of neem (Azadirachta indica A. Juss) and Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (Bta) on S. frugiperda under laboratory, greenhouse and field conditions. In the field, the commercial formulations of Natuneem® (10 mL/L in 2005 and 15 mL/L in 2006) and Neemseto® (5 and 10 mL/L in 2005, and 10 and 15 mL/L in 2006) and the biological insecticide Xentari® (10 g/L in 2005 and 2006) were applied at 15, 30 and 45 and at 15, 25 e 35 days after plant emergency in 2005 and 2006, respectively. Thee evaluations consisted of using a scale of foliar injury from 0 to 5 prior each spray. In 2005, only Neemseto® 10 mL/L was efficient at 30 days. In 2006, Neemseto® 15 mL/L and Xentari® with average score of 0.93 and 0.98, respectively, were different from the control, which produced a score of 2.38 at 35 days after plant emergency. The greenhouse assay consisted of treatment of plants 40-days old with the insecticides Natuneem®, Neemseto® and Xentari® followed by artificial infestation with newly-hatched larvae of S. frugiperda. After 10 days, it was verified that the treatment were equally efficient, differing from the control, regarding to the injury score, as well as, the number of surviving larvae. In the last bioassays, in the laboratory, 10-days old S. frugiperda larvae were fed with corn leaves treated with the insecticides Natuneem®, Neemseto® and Xentari® at 2.5; 5.0; 7.5; 10 mL or g/mL and control (water). The effect of the insecticides increased as function of increasing concentration, causing higher larval mortality, longer period and lower larval weight. In some cases, reduction of pupa weight and viability and longevity of adults were also verified. Larvae 0-24 h old were more susceptible to the insecticides, as compared with 10-days old larvae. / A utilização de inseticidas sintéticos tem sido o principal método de controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith), mas o uso inadequado tem contribuindo para o aumento do custo de produção, redução de inimigos naturais, seleção de populações resistentes, entre outros problemas. Desta forma, buscando alternativas de controle mais ecológicas, estudou-se no presente trabalho os efeitos de nim (Azadirachta indica A. Juss) e Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (Bta) sobre S. frugiperda em experimentos de laboratório, casa de vegetação e campo. Foram testadas em campo formulações comerciais de inseticidas botânicos Natuneem® (10 mL/L em 2005 e 15 mL/L em 2006) e Neemseto® (5 e 10 mL/L em 2005, e 10 e 15 mL/L em 2006) e do inseticida biológico Bta (Xentari® 10 g/L em 2005 e 2006), aplicados aos 15, 30 e 45 e aos 15, 25 e 35 dias após a emergência das plantas em 2005 e 2006, respectivamente. Antes de cada pulverização foram atribuídas notas de 0 a 5 para as injúrias foliares. Em 2005, somente Neemseto® 10 mL/L foi eficiente aos 30 dias. Em 2006, Neemseto® 15 mL/L e Bta 10 g/L, com notas médias de 0,93 e 0,98, diferiram da testemunha, com nota 2,38, na avaliação realizada aos 35 dias. Plantas de milho, com cerca de 40 dias de idade, foram pulverizadas em casa de vegetação com os inseticidas Natuneem®, Neemseto e Bta, e posteriormente infestadas,artificialmente, com lagartas de S. frugiperda recém-eclodidas. Após 10 dias verificou-se que os tratamentos foram igualmente eficientes, diferindo da testemunha, tanto em relação às notas, quando ao número de lagartas sobreviventes. Nos últimos bioensaios lagartas de S. frugiperda com 10 dias de idade foram alimentadas com folhas de milho submersas na calda inseticida nas concentrações 2,5; 5,0; 7,5; 10 mL ou g/L e testemunha (água). Os efeitos dos inseticidas dependeram da concentração utilizada, pois provocaram mortalidade crescente das lagartas, alongaram o período e reduziram o peso larval. Em alguns casos, também, reduziram o peso e a viabilidade pupal e a longevidade de adultos. Lagartas com 0-24 h de idade foram mais susceptíveis aos inseticidas, em relação às com 10 dias de idade.

A família Meliaceae compreende cerca de 51 gêneros e 550 espécies distribuídas principalmente na região Neotropical. Incluídas nesta família, estão espécies de elevado interesse comercial para a produção de madeiras nobres. Há carência de informações quanto à biologia floral dessas espécies, que aliada a problemas silviculturas dificulta a elaboração de programas efetivos de melhoramento genético das espécies de interesse econômico da família. O presente trabalho visa contribuir para o entendimento do desenvolvimento floral na família Meliaceae, com destaque para sete espécies de interesse econômico e/ou ecológico: Cedrela fissilis L., Cedrela odorata L., Swietenia macrophylla R. A. King, Trichilia claussenii C. DC., Guarea guidonea (L.) Sleumer, Toona ciliata M. J. Roem e Melia azedarach L. Para os estudos morfo-anatômicos utilizaram-se técnicas de microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura. Analisou-se igualmente o padrão de expressão de genes do modelo ABC, relacionados ao desenvolvimento floral, via hibridização in situ. Os estudos morfo-anatômicos permitiram caracterizar o desenvolvimento dos primórdios dos órgãos florais e o estabelecimento de estágios arbitrários de desenvolvimento, auxiliando na caracterização da expressão gênica. Estes resultados permitiram ainda a identificação de flores funcionalmente femininas ou masculinas em S. macrophylla C. fissilis, C. odorata e T. ciliata, as quais apresentam dimorfismo sexual. O padrão de expressão dos homólogos dos genes: APETALA1 (AP1), APETALA3 (AP3) e AGAMOUS (AG) foram diferentes daqueles previstos pelo modelo ABC. A expressão dos homólogos de AP1 foi verificada em todo o meristema floral nos estágios iniciais de desenvolvimento, em todas as espécies estudadas. O sinal de expressão concentrou-se nos primórdios das sépalas e pétalas em estágios mais avançados do desenvolvimento, porém um fraco sinal de hibridização de AP1 foi verificado em todos os verticilos. A expressão dos homólogos de AP3 foi verificada nas regiões previstas pelo modelo ABC, correspondentes ao segundo e terceiro verticilos. Porém um fraco sinal de AP3 foi também observado no quarto verticilo, o que não é previsto pelo modelo teórico. A expressão dos homólogos de AG foi restrita à região central do meristema floral, correspondente ao terceiro e quarto verticilos, em todos os estágios do desenvolvimento floral de todas as espécies estudadas. Entretanto, sinais adicionais de hibridização dos homólogos de AG foram visualizados na região abaxial dos primórdios de sépalas e pétalas em C. fissilis, C. odorata e T. ciliata. Os estudos da expressão dos genes do modelo ABC em Meliaceae revelaram padrões de expressão que não concordam com o modelo teórico vigente do controle molecular da determinação da identidade dos órgãos florais._________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: The Meliaceae family comprises approximately 51 genus and 550 species mainly distributed in the Neotropical region. In this family there are many species of commercial interest for the production of noble wood. The lack of information on the floral biology associated with silvicultural problems limits the elaboration of effective breeding programs with species of economic interest. The present work aims to contribute with the understanding of floral development in Meliaceae, focusing in seven species of economical or ecological interest: Cedrela fissilis L., Cedrela odorata L., Swietenia macrophylla R. A. King, Trichilia claussenii C. DC., Guarea guidonea (L.) Sleumer, Toona ciliata M. J. Roem e Melia azedarach L. Morpho-anatomical analyses were done by light and scannning electron microscopy. The expression pattern of the ABC model genes, which are related to floral development, was analyzed by in situ hybridization. The characterization of the development of floral organ primordia and the establishment of arbitrary stages of floral development was done and was important for the characterization of gene expression. These results allowed for the identification of functionally female and male flowers in Swietenia macrophylla, Cedrela fissilis, Cedrela odorata and Toona ciliata, characterizing sexual dimorphism. The patterns of gene expression of the homologous of APETALA 1, APETALA 3 and AGAMOUS were different from those predicted by the ABC model. AP1 expression was observed in the entire floral meristem in the initial stages of development, in all seven species. The expression signal was more concentrated in sepal and petal primordia in further stages of development, although a weak hybridization signal of AP1 was verified in all four whorls. The expression of AP3 homologs was observed in the second and third whorls, as predicted by the ABC model. However, a weak signal of AP3 was also observed in the forth whorl, which was not predicted by the ABC model. AG homolog expression was restricted to the central region of the floral meristem, corresponding to the third and forth whorls, in all stages of development of all seven species. However, additional hybridization signal of AG homologs were seen in the abaxial region of sepal and petal primordia in Cedrela fissilis, Cedrela odorata and Toona ciliata. The analyses of the ABC model genes in Meliaceae revealed that the expression patterns do not agree with the theoretical currently accepted model that determines the molecular control of the identity of the floral organs.