Made available in DSpace on 2018-08-01T22:33:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9005_Lorena Contarini Machado.pdf: 1011484 bytes, checksum: 715a0de641a122d30f8b5a2f4b111aa5 (MD5) Previous issue date: 2016-07-18 / O canibalismo é um dos principais problemas para biofábricas e laboratórios, pois alguns microrganismos entomopatogênicos como o vírus Spodoptera frugiperda multiple nucleopolyedrovirus (SfMNPV) tem como hospedeiro específico lagartas de S. frugiperda, dificultando a produção massal deste agente biológico in vivo. Desta forma, objetivou-se aperfeiçoar o método de produção in vivo de SfMNPV em lagartas de S. frugiperda baseado na densidade de lagartas e no período de exposição ao vírus. Foram utilizadas lagartas de S. frugiperda com 4 dias de idade inoculando-as em duas densidades (50 lagartas/recipiente e 100 lagartas/recipiente) e cinco períodos de exposição (48, 72, 96, 120 e 144 horas) em dieta artificial contendo a suspensão viral do isolado 6 (1 x 108 OB/mL) de SfMNPV, mantidas a 31 ºC. Para a testemunha a dieta artificial estava isenta de SfMNPV. Assim, 48 horas após a exposição com vírus, os recipientes de ambas densidades foram congelados recolhendo todas as lagartas por repetição e contabilizando, pesando e armazenando-as a 4 °C, para posterior purificação, quantificação de poliedros e cálculos dos parâmetros. O mesmo procedimento foi realizado para cada período de exposição. Os dados foram submetidos a análise de variância ao nível de 5% de probabilidade e para verificar o efeito do período de exposição os dados foram submetidos a análise de regressão. Com base nos parâmetros avaliados, a densidade de 100 lagartas/recipiente no período de exposição de 96 horas é um método indicado para a produção in vivo do isolado 6 de Spodoptera frugiperda multiple nucleopolyedrovirus (SfMNPV) em lagartas de S. frugiperda. Palavras-chave: Controle biológico. Inseticida biológico. Baculoviridae.

Esse trabalho foi desenvolvido com o objetivo de verificar a bioatividade de extratos aquosos e orgânicos de folhas de Trichilia pallida e do extrato aquoso de sementes de Azadirachta indica (nim) sobre Tuta absoluta e seu parasitóide Trichogramma pretiosum. Procurou-se determinar os efeitos sistêmico, translaminar e de contato dos extratos sobre a praga, além do efeito sobre a biologia e comportamento do parasitóide. Primeiramente, foram realizados experimentos visando à determinação das concentrações dos extratos mais adequadas para utilização nos testes de bioatividade. Nesta etapa preliminar, foram utilizados apenas extratos aquosos de sementes de nim em concentrações variáveis de 0,5 a 10%. Esses extratos foram aplicados no solo, na superfície adaxial de folíolos de tomateiro e diretamente sobre o inseto para a determinação dos efeitos sistêmico, translaminar e de contato, respectivamente, sendo selecionadas as concentrações de 0,5; 1 e 5% para os respectivos testes. Após a escolha das concentrações, foi selecionado, dentre quatro extratos orgânicos de folhas de T. pallida (hexânico, metanólico, etanólico e clorofórmico) o extrato clorofórmico como o mais eficiente sobre a praga. Determinadas as concentrações e o extrato orgânico de T. pallida mais eficiente, este, juntamente com o extrato aquoso dessa espécie e o de sementes de nim foram submetidos aos testes de bioatividade para verificar os efeitos sobre a traça-do-tomateiro. Finalmente os extratos que apresentaram melhores resultados sobre a praga foram avaliados em relação ao parasitóide de ovos T. pretiosum. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que os extratos aquosos de sementes de nim apresentam efeitos translaminar, sistêmico e por contato sobre T. absoluta, provocando alta mortalidade mesmo em concentrações menores do que 5%. Verificou-se também, que o extrato clorofórmico é mais eficiente que o hexânico e o aquoso em relação à traça-do-tomateiro, e que extratos aquosos e clorofórmicos de folhas dessa espécie, em concentrações maiores do que 5% prejudicam o desenvolvimento de T. absoluta. Esses extratos atuam de forma translaminar, sistêmica e por contato, sendo o efeito translaminar mais pronunciado que os demais. Com relação ao parasitóide T. pretiosum, verificou-se que o mesmo é sensível ao extrato aquoso de sementes de nim na concentração de 10% e que os extratos aquosos e clorofórmicos de folhas de T. pallida na concentração de 10% não afetam o seu parasitismo e nem o seu desenvolvimento no interior do ovo hospedeiro. / This research was developed in order to verify the bioactivity of Trichilia pallida aqueous and organic leaf extracts and Azadirachta indica (neem) aqueous seed extract on Tuta absoluta and its parasitoid Trichogramma pretiosum. Besides the parasitoid's behavior and biology, were also determined the systemic, translaminar and contact effects of the extracts on the pest. Firstly, for the utilization in bioactivity tests, experiments aiming the determination of the most appropriate extract concentrations were conducted. In this preliminar stage, only neem aqueous seed extract in variable concentrations from 0.5% to 10% were used. For the determination of systemic, translaminar and contact effects, these extract were applied in the soil, in adaxial surface of the tomato plant foliole and directly over the insect, respectively. For those respective tests 0.5; 1 and 5% concentrations were selected. Afterwards, the one with the higher activity on T. absoluta was selected among four organic T. pallida leaf extract (hexanic, methanolic, ethanolic and chloroformic). In this test, the chloroformic extract was considered the most effective on the pest. After the concentrations and most effective T. pallida organic extract having been determined, this organic extract along with the aqueous extract of this specie and the neem seed were submitted to bioactivity tests in order to verify the effects on the tomato pinworm. Finally, the extracts that presented the best results over the pest were evaluated in relation to the parasitoid T. pretiosum. According to the results it was possible to conclude that the aqueous extracts of neem seed present systemic, translaminar and contact effects on T. absoluta, causing high mortality in concentration smaller than 5%. It was also observed that the chloroformic extract from T. pallida leaves is more efficient than the hexanic and aqueous ones in relation to the tomato pinworm and that chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in concentrations higher than 5% disrupt T. absoluta development. These extracts have systemic, translaminar and contact mode of action, being the translaminar effect more distinguished than the others. It was observed that T. pretiosum parasitoid is sensitive to the aqueous extract of neem seed in a concentration of 10%, and that the chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in a concentration of 10% neither affect its parasitism nor its development inside the host egg.

Esse trabalho foi desenvolvido com o objetivo de verificar a bioatividade de extratos aquosos e orgânicos de folhas de Trichilia pallida e do extrato aquoso de sementes de Azadirachta indica (nim) sobre Tuta absoluta e seu parasitóide Trichogramma pretiosum. Procurou-se determinar os efeitos sistêmico, translaminar e de contato dos extratos sobre a praga, além do efeito sobre a biologia e comportamento do parasitóide. Primeiramente, foram realizados experimentos visando à determinação das concentrações dos extratos mais adequadas para utilização nos testes de bioatividade. Nesta etapa preliminar, foram utilizados apenas extratos aquosos de sementes de nim em concentrações variáveis de 0,5 a 10%. Esses extratos foram aplicados no solo, na superfície adaxial de folíolos de tomateiro e diretamente sobre o inseto para a determinação dos efeitos sistêmico, translaminar e de contato, respectivamente, sendo selecionadas as concentrações de 0,5; 1 e 5% para os respectivos testes. Após a escolha das concentrações, foi selecionado, dentre quatro extratos orgânicos de folhas de T. pallida (hexânico, metanólico, etanólico e clorofórmico) o extrato clorofórmico como o mais eficiente sobre a praga. Determinadas as concentrações e o extrato orgânico de T. pallida mais eficiente, este, juntamente com o extrato aquoso dessa espécie e o de sementes de nim foram submetidos aos testes de bioatividade para verificar os efeitos sobre a traça-do-tomateiro. Finalmente os extratos que apresentaram melhores resultados sobre a praga foram avaliados em relação ao parasitóide de ovos T. pretiosum. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que os extratos aquosos de sementes de nim apresentam efeitos translaminar, sistêmico e por contato sobre T. absoluta, provocando alta mortalidade mesmo em concentrações menores do que 5%. Verificou-se também, que o extrato clorofórmico é mais eficiente que o hexânico e o aquoso em relação à traça-do-tomateiro, e que extratos aquosos e clorofórmicos de folhas dessa espécie, em concentrações maiores do que 5% prejudicam o desenvolvimento de T. absoluta. Esses extratos atuam de forma translaminar, sistêmica e por contato, sendo o efeito translaminar mais pronunciado que os demais. Com relação ao parasitóide T. pretiosum, verificou-se que o mesmo é sensível ao extrato aquoso de sementes de nim na concentração de 10% e que os extratos aquosos e clorofórmicos de folhas de T. pallida na concentração de 10% não afetam o seu parasitismo e nem o seu desenvolvimento no interior do ovo hospedeiro. / This research was developed in order to verify the bioactivity of Trichilia pallida aqueous and organic leaf extracts and Azadirachta indica (neem) aqueous seed extract on Tuta absoluta and its parasitoid Trichogramma pretiosum. Besides the parasitoid's behavior and biology, were also determined the systemic, translaminar and contact effects of the extracts on the pest. Firstly, for the utilization in bioactivity tests, experiments aiming the determination of the most appropriate extract concentrations were conducted. In this preliminar stage, only neem aqueous seed extract in variable concentrations from 0.5% to 10% were used. For the determination of systemic, translaminar and contact effects, these extract were applied in the soil, in adaxial surface of the tomato plant foliole and directly over the insect, respectively. For those respective tests 0.5; 1 and 5% concentrations were selected. Afterwards, the one with the higher activity on T. absoluta was selected among four organic T. pallida leaf extract (hexanic, methanolic, ethanolic and chloroformic). In this test, the chloroformic extract was considered the most effective on the pest. After the concentrations and most effective T. pallida organic extract having been determined, this organic extract along with the aqueous extract of this specie and the neem seed were submitted to bioactivity tests in order to verify the effects on the tomato pinworm. Finally, the extracts that presented the best results over the pest were evaluated in relation to the parasitoid T. pretiosum. According to the results it was possible to conclude that the aqueous extracts of neem seed present systemic, translaminar and contact effects on T. absoluta, causing high mortality in concentration smaller than 5%. It was also observed that the chloroformic extract from T. pallida leaves is more efficient than the hexanic and aqueous ones in relation to the tomato pinworm and that chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in concentrations higher than 5% disrupt T. absoluta development. These extracts have systemic, translaminar and contact mode of action, being the translaminar effect more distinguished than the others. It was observed that T. pretiosum parasitoid is sensitive to the aqueous extract of neem seed in a concentration of 10%, and that the chloroformic and aqueous extracts of T. pallida leaves in a concentration of 10% neither affect its parasitism nor its development inside the host egg.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T11:56:50Z No. of bitstreams: 1 Lilian Maria da Solidade Ribeiro.pdf: 1291994 bytes, checksum: 217ae867676a57b323ee75ec19d87a49 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T11:56:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lilian Maria da Solidade Ribeiro.pdf: 1291994 bytes, checksum: 217ae867676a57b323ee75ec19d87a49 (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 / The resistance of Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae) has been attributed to many mechanisms as alterations in cell membrane receptors on midgut and the immune response to Bacillus thuringiensis Berliner toxin. The research tested the possibility that after expositions to Bt formulations, insects from a susceptible population (SP) and a resistant population (RP) presented qualitative and quantitative differentiated alterations of hemocytes and nitric oxide levels in hemolymph, histopathological and histochemical differenced alterations in midgut and that RP presented capacity of recovery midgut. SP and RP were exposed to Dipel® 1,35 mg/L (SP), 64,93mg/L (RP); XenTari® 5,17 mg/L (SP), 236,24 mg/L (RP) plus witness had hemolymph collected in intervals of 1, 6 and 12 h for total and differential counting of hemocytes and quantification of nitric oxide. The midgut was collected in the intervals: 0, 1, 6, 12 h. The regenerative cells quantification was made through the ImageLab 2000 program. In spite of RP had showed less number of hemocytes, it exhibited greater quantity of plasmatocytes, prohemocytes and spherulocytes, this can be related to resistance. Dipel® was effective in reduction of total numbers of hemocytes of SP and RP, while XenTari® changed significantly the differential counting. The nitric oxide increased in both populations and it not differed between the insecticides, indicating the no participation of it in the resistance. The insecticides induced alterations in different intensities on midgut in SP and RP, Dipel® showed to be more aggressive independently of population, taking to degeneration of epithelium. The presence of spherites covering the epithelial lamina, the hypertrophy of columnar cells and mucus abundance can be involved in midgut preservation in larvae of resistant population, however these features were not sufficient to avoid the degeneration of epithelium or induce the hyperplasia of regenerative cells. / A resistência de Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae) pode ser atribuída a vários mecanismos como alterações nos receptores de membrana celular no mesêntero e a resposta imune às toxinas do Bacillus thuringiensis Berliner. A pesquisa testou as hipóteses de que após exposição a formulações Bt: população suscetível (PS) e população resistente (PR) da traça apresentam alterações quantitativas e qualitativas diferenciadas dos hemócitos e dos níveis de óxido nítrico na hemolinfa, alterações histopatológicas e histoquímicas diferenciadas no mesêntero e de que PR apresenta capacidade de recuperação do mesêntero. PS e PR expostas ao Dipel® 1,35 mg/L (PS), 64,93mg/L (PR); XenTari® 5,17 mg/L (PS), 236,24 mg/L (PR), além da testemunha, tiveram hemolinfa coletada nos intervalos de 1, 6 e 12 h para contagem total e diferencial dos hemócitos e quantificação de óxido nítrico. O mesêntero foi coletado nosintervalos: 0, 1, 6 e 12 h. A quantificação das células regenerativas foi efetuada através do programa ImageLab 2000. Apesar de PR ter apresentado menor número de hemócitos, exibiu maior quantidade de plasmatócitos, prohemócitos e esferulócitos, podendo isto estar relacionado à resistência. Dipel® foi efetivo na redução do número total de hemócitos das PS e PR, enquanto que o XenTari® alterou significativamente a contagem diferencial. O óxido nítrico aumentou emambas as populações, não diferindo entre os inseticidas, indicando a não participação deste na resistência. Os inseticidas ocasionaram alterações, de intensidades diferentes, no mesêntero das PS e PR, Dipel® mostrou ser mais agressivo independente da população, levando a degeneração do epitélio. A presença de esferites revestindo a lâmina epitelial, a hipertrofia das células colunares e a riqueza de muco podem estar envolvidas na preservação do mesêntero em larvas da população resistente, porém essas características não foram suficientes para impedir a degeneração do epitélio ou induzir a hiperplasia das células regenerativas.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-02T11:16:10Z No. of bitstreams: 1 Marcileyne Pessoa Leite de Lima.pdf: 517075 bytes, checksum: b7ddab703563527f0c2b8e77f710122c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-02T11:16:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcileyne Pessoa Leite de Lima.pdf: 517075 bytes, checksum: b7ddab703563527f0c2b8e77f710122c (MD5) Previous issue date: 2008-02-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The synthetic insecticide is the main method used to control Spodoptera frugiperda (J.E. Smith). However, the inadequate application of the insecticide has contributed to increase costs, reduction of the natural enemies, and selection of resistant populations, among other problems. Attempting to obtain alternative control of S. frugiperda more ecologically acceptable, the present work investigated the effects of neem (Azadirachta indica A. Juss) and Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (Bta) on S. frugiperda under laboratory, greenhouse and field conditions. In the field, the commercial formulations of Natuneem® (10 mL/L in 2005 and 15 mL/L in 2006) and Neemseto® (5 and 10 mL/L in 2005, and 10 and 15 mL/L in 2006) and the biological insecticide Xentari® (10 g/L in 2005 and 2006) were applied at 15, 30 and 45 and at 15, 25 e 35 days after plant emergency in 2005 and 2006, respectively. Thee evaluations consisted of using a scale of foliar injury from 0 to 5 prior each spray. In 2005, only Neemseto® 10 mL/L was efficient at 30 days. In 2006, Neemseto® 15 mL/L and Xentari® with average score of 0.93 and 0.98, respectively, were different from the control, which produced a score of 2.38 at 35 days after plant emergency. The greenhouse assay consisted of treatment of plants 40-days old with the insecticides Natuneem®, Neemseto® and Xentari® followed by artificial infestation with newly-hatched larvae of S. frugiperda. After 10 days, it was verified that the treatment were equally efficient, differing from the control, regarding to the injury score, as well as, the number of surviving larvae. In the last bioassays, in the laboratory, 10-days old S. frugiperda larvae were fed with corn leaves treated with the insecticides Natuneem®, Neemseto® and Xentari® at 2.5; 5.0; 7.5; 10 mL or g/mL and control (water). The effect of the insecticides increased as function of increasing concentration, causing higher larval mortality, longer period and lower larval weight. In some cases, reduction of pupa weight and viability and longevity of adults were also verified. Larvae 0-24 h old were more susceptible to the insecticides, as compared with 10-days old larvae. / A utilização de inseticidas sintéticos tem sido o principal método de controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith), mas o uso inadequado tem contribuindo para o aumento do custo de produção, redução de inimigos naturais, seleção de populações resistentes, entre outros problemas. Desta forma, buscando alternativas de controle mais ecológicas, estudou-se no presente trabalho os efeitos de nim (Azadirachta indica A. Juss) e Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (Bta) sobre S. frugiperda em experimentos de laboratório, casa de vegetação e campo. Foram testadas em campo formulações comerciais de inseticidas botânicos Natuneem® (10 mL/L em 2005 e 15 mL/L em 2006) e Neemseto® (5 e 10 mL/L em 2005, e 10 e 15 mL/L em 2006) e do inseticida biológico Bta (Xentari® 10 g/L em 2005 e 2006), aplicados aos 15, 30 e 45 e aos 15, 25 e 35 dias após a emergência das plantas em 2005 e 2006, respectivamente. Antes de cada pulverização foram atribuídas notas de 0 a 5 para as injúrias foliares. Em 2005, somente Neemseto® 10 mL/L foi eficiente aos 30 dias. Em 2006, Neemseto® 15 mL/L e Bta 10 g/L, com notas médias de 0,93 e 0,98, diferiram da testemunha, com nota 2,38, na avaliação realizada aos 35 dias. Plantas de milho, com cerca de 40 dias de idade, foram pulverizadas em casa de vegetação com os inseticidas Natuneem®, Neemseto e Bta, e posteriormente infestadas,artificialmente, com lagartas de S. frugiperda recém-eclodidas. Após 10 dias verificou-se que os tratamentos foram igualmente eficientes, diferindo da testemunha, tanto em relação às notas, quando ao número de lagartas sobreviventes. Nos últimos bioensaios lagartas de S. frugiperda com 10 dias de idade foram alimentadas com folhas de milho submersas na calda inseticida nas concentrações 2,5; 5,0; 7,5; 10 mL ou g/L e testemunha (água). Os efeitos dos inseticidas dependeram da concentração utilizada, pois provocaram mortalidade crescente das lagartas, alongaram o período e reduziram o peso larval. Em alguns casos, também, reduziram o peso e a viabilidade pupal e a longevidade de adultos. Lagartas com 0-24 h de idade foram mais susceptíveis aos inseticidas, em relação às com 10 dias de idade.