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Caracterização morfofisiológica dos hemócitos do Diplópodo Rhinocricus padbergi antes e após exposição a substrato contendo lodo de esgoto

Perez, Danielli Giuliano [UNESP] 22 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-22Bitstream added on 2014-06-13T18:09:00Z : No. of bitstreams: 1 perez_dg_me_rcla.pdf: 821493 bytes, checksum: 938fad7997660774f8c919574b04e6e2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Embora os invertebrados sejam conhecidos pela grande facilidade de acúmulo de poluentes presentes em seu ambiente, e muitos serem utilizados como espécies sentinelas em estudos de biomonitoramento, pouco ainda é conhecido sobre o impacto de toxicantes sobre o sistema imune desses animais. Nesse sentido, os hemócitos desempenham um papel fundamental: estas células circulam livremente através da hemolinfa dos invertebrados e atuam no reconhecimento de materiais estranhos ao organismo, mediando e efetuando reações de defesa celular. Diferentes tipos morfológicos podem ser reconhecidos, mas ainda há controvérsia entre os pesquisadores sobre a exata classificação dos hemócitos, devido à diversidade de técnicas para preservação e observação dessas células. A classificação mais aceita atualmente agrupa os hemócitos em sete tipos principais: pró-hemócitos, plasmatócitos, granulócitos, esferulócitos, adipohemócitos, oenocitóides e coagulócitos. Por meio da utilização de técnicas histológica, histoquímica e ultra-estrutural, o presente trabalho objetivou caracterizar morfofisiologicamente os hemócitos circulantes na hemolinfa do diplópodo Rhinocricus padbergi, bem como aqueles encontrados por entre as células da camada de corpo gorduroso no intestino médio de animais expostos a substratos contendo diferentes amostras de lodo de esgoto, resíduo gerado nas Estações de Tratamento de Esgoto (ETEs). Este resíduo tem sido cogitado como um bom condicionador de solo em áreas degradadas e como um potencial fertilizante agrícola, apesar do risco de estar contaminado com patógenos e/ou metais pesados. A partir das análises realizadas, foram identificados três tipos morfológicos distintos de hemócitos circulantes na hemolinfa dessa espécie: pró-hemócitos, plasmatócitos e granulócitos (subtipos I e II). Também foram observadas células com características... / Although invertebrates are known for ease accumulation of pollutants present in their environment and several are used as sentinel species in biomonitoring studies, little is known about the impact of toxicants on the immune system of these animals. In this sense, hemocytes play an important role: these cells circulate freely through the hemolymph of invertebrates and act in the recognition of foreign materials to the organism, mediating and performing cellular defence reactions. Different morphological types are recognized, but there is still controversy among the researchers about the exact classification of the hemocytes due to the diversity of techniques for preservation and observation of these cells. Currently, the most accepted classification groups the hemocytes into seven main types: pro-hemocytes, plasmatocytes, granulocytes, spherulocytes, adipohemocytes, oenocytoids and coagulocytes. By histological, histochemical and ultra-structural techniques, the present study aimed to characterize morpho-physiologically the hemocytes circulating in the hemolymph of the diplopod Rhinocricus padbergi, as well as those found among the cells of the fat body layer of the midgut of animals exposed to substrates containing samples of sewage sludge, residue generated in the Sewage Treatment Plants (STPs). This residue has been considered as a good soil conditioner on degraded areas and as a potential agricultural fertilizer, despite the risk of being contaminated with pathogens and/or heavy metals. From the analyses carried out, it was identified three distinct morphological types of hemocytes circulating in the hemolymph of this species: pro-hemocytes, plasmatocytes and granulocytes (subtypes I and II). It was also observed cells with intermediate characteristics between pro-hemocytes and plasmatocytes, suggesting a probable cellular differentiation in the hemolymph... (Complete abstract click electronic access below)
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Efeito do parasitismo de Cotesia flavipes (Cam.) (Hymenoptera: Braconidae) sobre parâmetros imunológicos e morfofisiológicos em Diatraea flavipennella (Box) (Lepdoptera: Crambidae) / Effect of parasitism Cotesia flavipes (Cam.) (Hymenoptera: Braconidae) on immunological parameters and morphophysiological in Diatraea flavipennella (Box) (Lepidoptera: Crambidae)

PASSOS, Eliana Maria dos 04 February 2013 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T14:23:37Z No. of bitstreams: 1 Eliana Maria dos Passos.pdf: 2439142 bytes, checksum: 5cc4ce23eb07068031e4913be088cd08 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T14:23:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eliana Maria dos Passos.pdf: 2439142 bytes, checksum: 5cc4ce23eb07068031e4913be088cd08 (MD5) Previous issue date: 2013-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lepidopteran larval parasitism by endoparasitoids is associated with immune suppression and manipulation of the host physiology. This study investigated if the immune response in Diatraea flavipennella (Box) is suppressed by Cotesia flavipes (Cam.) and if changes occur in biochemical profile, haemolymph, and fat body, cytochemistry of hemocytes to ensure parasitism. Levels concentration of nitric oxide, phenoloxidase, and protein was determined. Total number of hemocytes per microliter of hemolymph and the average percentage of these cells were verified. Capacity of melanization and encapsulation by injection and ultrastructural analysis of microbeads was evaluated. Presence of apoptotic cells in fat body was investigated using TUNEL technique. Levels of carbohydrate, lipid, and protein in hemolymph and fat body were quantified, as well as the proteic profile of hemolymph was characterized. Histological sections of stained caterpillars were obtained using PAS (Periodic acid/Schiff's) reaction. Marking of acidic polysaccharides, mucin, and lipids was investigated on hemocytes. Results showed reduction in nitric oxide production, phenol oxidase activity, and total number of hemocytes. In the differential count, increase in number of plasmatocytes and reduction of spherulocytes were observed. The encapsulation capacity was affected. Apoptosis in hemocytes and fat body was registered. Reduction of proteins and lipids occurred in hemolymph and protein; reduction of carbohydrate occurred in body fat. Cytochemistry of hemocytes was changed, reducing the acidic polysaccharides in prohemocytes and oenocytoids, mucin in plasmatocytes and granulocytes, and lipids in adipohemocytes, granulocytes, and prohemocytes. It was also observed a drastic body fat degeneration. The proteic profile showed presence of four specific proteins of parasitism in the hemolymph. It is concluded that C. flavipes is effective for controlling D. flavipennella by suppressing the immune, humoral, and cellular response, altering the biochemical profile of hemolymph, fat body, and cytochemistry of hemocytes. / As espécies Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) representam um problema para cultura da cana-de-açúcar, sendo o endoparasitoide Cotesia flavipes (Cam.) introduzido em 1974 para o controle destas pragas. Nos últimos 30 anos houve inversão na população destas espécies de brocas no estado de Alagoas e hoje há predominância de D. flavipennella nos canaviais nordestinos, surgindo entre os produtores à idéia de que C. flavipes não controla satisfatoriamente esta praga. Como o parasitismo de larvas de lepidópteros por endoparasitoides esta associada com a supressão da imunidade e manipulação da fisiologia, do hospedeiro, para aumentar a disponibilidade de nutrientes. Neste trabalho investigou se a resposta imune (níveis de óxido nítrico, atividade da fenoloxidase, contagem total e diferencial dos hemócitos, capacidade de encapsulação e apoptose) em D. flavipennella seria suprimida por C. flavipes e se alterações no perfil bioquímico, da hemolinfa e do corpo gorduroso (proteínas, carboidratos e lipídeos), bem como modificações na citoquímica dos hemócitos, ocorreriam para garantir o parasitismo. Os resultados mostraram redução na produção de óxido nítrico, na atividade da fenoloxidase e no número total de hemócitos. Na contagem diferencial, observou-se aumento no número de plasmatócitos e redução de esferulócitos. A capacidade de encapsulação foi afetada. Registrou-se apoptose nos hemócitos e corpo gorduroso. Ocorreu redução de proteínas e lipídeos na hemolinfa e proteína e carboidrato no corpo gorduroso. A citoquímica dos hemócitos foi alterada, tendo reduzido polissacarídeos ácidos nos prohemócitos e oenocitóides, mucina nos plasmatócitos e granulócitos e lipídeos nos adipohemócitos, granulócitos, e prohemócitos. Observou-se também uma drástica degeneração do corpo gorduroso. Já o perfil protéico revelou a presença de quatro proteínas específicas do parasitismo na hemolinfa. Conclui-se, então, que C. flavipes é eficiente no controle de D. flavipennella por suprimir a resposta imunológica, humoral e celular, alterar o perfil bioquímico da hemolinfa e corpo gorduroso e citoquímica dos hemócitos.
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Desempenho do camarão marinho Litopenaeus vannamei (Boone,1931) cultivado com uso de probióticos quando submetido à infecção com Vibrio harveyi

DANTAS, Danielli Matias de Macêdo 08 February 2008 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-09T14:06:18Z No. of bitstreams: 1 Danielli Matias de Macedo Dantas.pdf: 243863 bytes, checksum: 12196d11f6515cb7163e69e8e9c45af9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T14:06:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Danielli Matias de Macedo Dantas.pdf: 243863 bytes, checksum: 12196d11f6515cb7163e69e8e9c45af9 (MD5) Previous issue date: 2008-02-08 / The fast expansion of farmed shrimp industry during the last decades has been offering high profitable deal to many countries. However, diseases appearing have caused lots of serious economic damage on productive sector. The effect of probiotic in Litopenaeus vannamei juveniles when submitted to the infection by Vibrio harveyi was evaluated in the present study The exposure to V. harveyi was carried out during 15 days using individuals reared for one month in a closed recirculation system with a commercial probiotic (Bacillus sp.) added to water and food (PAR), only in the water (PA), only in food (PR) and without probiotic (SP). Were examined the responses of food consumption, total concentration of hemocytes, growth and survival. The food consumption did not differ significantly among the treatments, but in the SP treatment a significant reduction occurred in the second week. The PAR and PA treatments showed inferior and more constants values in the total hemocits concentrations during the experimental period. The highest growth rates were observed in the PAR (0.34 ± 0.19 g/week) and SP (0.45 ± 0.04 g/week) treatments, but did not differ statistically within these treatments. Shrimp survival values were higher than 98% in all treatments. The results suggest that the addition of Bacillus sp. to the water or food separately, could increase the food consumption during a longer period of time in shrimp infected by V. harveyi and interfere positively in the immune response of L. vannamei. / A rápida expansão da indústria do camarão na aqüicultura durante poucas décadas tem proporcionado a muitos países altos rendimentos. Entretanto, o surgimento de doenças tem causado sérios prejuízos econômicos ao setor produtivo. Este trabalho verificou o efeito do uso de probiótico no cultivo de juvenis de Litopenaeus vannamei quando submetidos à infecção ao Vibrio harveyi. A exposição ao V. harveyi foi realizada durante 15 dias nos camarões provenientes de um cultivo de 30 dias em sistema fechado sem renovação de água com utilização de um probiótico comercial (Bacillus sp.) adicionado na água e na ração (PAR), somente na água (PA), somente na ração (PR) e sem adição de probiótico (SP). Foram analisadas as respostas de consumo alimentar, concentração total de hemócitos, crescimento e sobrevivência. A análise do consumo alimentar dos camarões não mostrou diferença significativa entre os tratamentos, sendo a única exceção o tratamento SP onde ocorreu uma redução no consumo na segunda semana. Os tratamentos PAR e PA apresentaram valores menores e mais constantes de concentração total de hemócitos durante o período do experimento. As maiores taxas de crescimento foram verificadas nos tratamentos PAR (0,34 ± 0,19 g/semana) e SP (0,45 ± 0,04 g/semana), os quais não diferiram estatisticamente entre si. Os camarões apresentaram valores de sobrevivência acima de 98% em todos os tratamentos. Os resultados sugerem que a utilização do Bacillus sp. adicionados na água ou na ração separadamente, aumentam o consumo alimentar por um maior período de tempo em camarões infectados pelo V. harveyi e interferem positivamente na resposta imune de L.vannamei.
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Respostas imunológicas e mecânicas em população suscetível e resistente Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera : Plutellidae) frente a formulações comerciais à base de Bacillus thuringiensis Berliner / Immunologicals and mecanicals responses in susceptible and resistant population of Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera : Plutellidae) stand up to commercials formulations of Bacillus thuringiensis Berliner

RIBEIRO, Lilian Maria da Solidade 01 February 2010 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T11:56:50Z No. of bitstreams: 1 Lilian Maria da Solidade Ribeiro.pdf: 1291994 bytes, checksum: 217ae867676a57b323ee75ec19d87a49 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T11:56:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lilian Maria da Solidade Ribeiro.pdf: 1291994 bytes, checksum: 217ae867676a57b323ee75ec19d87a49 (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 / The resistance of Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae) has been attributed to many mechanisms as alterations in cell membrane receptors on midgut and the immune response to Bacillus thuringiensis Berliner toxin. The research tested the possibility that after expositions to Bt formulations, insects from a susceptible population (SP) and a resistant population (RP) presented qualitative and quantitative differentiated alterations of hemocytes and nitric oxide levels in hemolymph, histopathological and histochemical differenced alterations in midgut and that RP presented capacity of recovery midgut. SP and RP were exposed to Dipel® 1,35 mg/L (SP), 64,93mg/L (RP); XenTari® 5,17 mg/L (SP), 236,24 mg/L (RP) plus witness had hemolymph collected in intervals of 1, 6 and 12 h for total and differential counting of hemocytes and quantification of nitric oxide. The midgut was collected in the intervals: 0, 1, 6, 12 h. The regenerative cells quantification was made through the ImageLab 2000 program. In spite of RP had showed less number of hemocytes, it exhibited greater quantity of plasmatocytes, prohemocytes and spherulocytes, this can be related to resistance. Dipel® was effective in reduction of total numbers of hemocytes of SP and RP, while XenTari® changed significantly the differential counting. The nitric oxide increased in both populations and it not differed between the insecticides, indicating the no participation of it in the resistance. The insecticides induced alterations in different intensities on midgut in SP and RP, Dipel® showed to be more aggressive independently of population, taking to degeneration of epithelium. The presence of spherites covering the epithelial lamina, the hypertrophy of columnar cells and mucus abundance can be involved in midgut preservation in larvae of resistant population, however these features were not sufficient to avoid the degeneration of epithelium or induce the hyperplasia of regenerative cells. / A resistência de Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Plutellidae) pode ser atribuída a vários mecanismos como alterações nos receptores de membrana celular no mesêntero e a resposta imune às toxinas do Bacillus thuringiensis Berliner. A pesquisa testou as hipóteses de que após exposição a formulações Bt: população suscetível (PS) e população resistente (PR) da traça apresentam alterações quantitativas e qualitativas diferenciadas dos hemócitos e dos níveis de óxido nítrico na hemolinfa, alterações histopatológicas e histoquímicas diferenciadas no mesêntero e de que PR apresenta capacidade de recuperação do mesêntero. PS e PR expostas ao Dipel® 1,35 mg/L (PS), 64,93mg/L (PR); XenTari® 5,17 mg/L (PS), 236,24 mg/L (PR), além da testemunha, tiveram hemolinfa coletada nos intervalos de 1, 6 e 12 h para contagem total e diferencial dos hemócitos e quantificação de óxido nítrico. O mesêntero foi coletado nosintervalos: 0, 1, 6 e 12 h. A quantificação das células regenerativas foi efetuada através do programa ImageLab 2000. Apesar de PR ter apresentado menor número de hemócitos, exibiu maior quantidade de plasmatócitos, prohemócitos e esferulócitos, podendo isto estar relacionado à resistência. Dipel® foi efetivo na redução do número total de hemócitos das PS e PR, enquanto que o XenTari® alterou significativamente a contagem diferencial. O óxido nítrico aumentou emambas as populações, não diferindo entre os inseticidas, indicando a não participação deste na resistência. Os inseticidas ocasionaram alterações, de intensidades diferentes, no mesêntero das PS e PR, Dipel® mostrou ser mais agressivo independente da população, levando a degeneração do epitélio. A presença de esferites revestindo a lâmina epitelial, a hipertrofia das células colunares e a riqueza de muco podem estar envolvidas na preservação do mesêntero em larvas da população resistente, porém essas características não foram suficientes para impedir a degeneração do epitélio ou induzir a hiperplasia das células regenerativas.

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