Los objetivos de este trabajo han sido estudiar la expresión de receptores de células NK (NKR), en particular CD94/NKG2C, en relación con la infección por citomegalovirus humano (HCMV). Los resultados descritos constituyen la primera evidencia de que la infección por HCMV modifica el repertorio de NKR. El incremento en la proporción de células CD94/NKG2C+ en donantes seropositivos para HCMV sugiere que participan en la respuesta al patógeno. El receptor CD94/NKG2C no sólo estimula las funciones efectoras y la proliferación de las células NK, sino que también activa a una subpoblación minoritaria de células T CD8+. El estudio de la expansión in vitro de la subpoblación NK CD94/NKG2C+ tras la interacción con fibroblastos infectados por el HCMV, sugiere que el propio receptor está implicado en la proliferación. / The main goals of this work have been to study the influence of human cytomegalovirus (HCMV) infection on the NK cell receptor (NKR) repertoire, mainly on the CD94/NKG2C receptor. Our observations provide a first evidence indicating that human cytomegalovirus (HCMV) may selectively shape the NKR repertoire. The increased proportions of NKG2C+ cells in HCMV-seropositive donors suggest a role in the response against the virus. The CD94/NKG2C receptor triggers the effector functions and proliferation not only in NK cells but also in a subset of CD8+ T lymphocytes. The stimulation of PBL from HCMV+ donors with virus-infected fibroblasts elicited a preferential expansion of CD94/NKG2C+ NK cells; studies carried out in this experimental system suggest that the receptor is involved in driving the proliferation.

Functional analysis procedures were used to assess and treat multiple topographies of self-injurious behavior exhibited by an individual. An experimental functional analysis indicated that one topography, hand biting, appeared to be maintained by social positive reinforcement in the form of delivery of tangible items. The analysis also provided evidence that a second form of self-injury, skin picking, was automatically reinforced. To treat positively reinforced hand biting, access to a preferred tangible was arranged contingent on the omission of biting for a prespecified time interval. Hand biting was nearly eliminated, and low rates were maintained as the schedule of reinforcement was thinned to 10 min. Competing stimulus assessments identified that magazines effectively suppressed all occurrences of skin picking; therefore, noncontingent access to magazines was implemented. Using a combination of multielement and multiple baseline designs, we were able to demonstrate that the two topographies of self-injury were maintained by independent reinforcement contingencies and that interventions corresponding to each topography and function effectively treated both behaviors.

Les biopuces à ADN permettent d’étudier à une échelle génomique une très grande variété de questions sur la physiologie et la différenciation cellulaires. Elles ont ainsi contribué de manière considérable aux progrès récents de nombreux domaines de la biologie et occuperont bientôt une place de choix dans le secteur du diagnostic médical. C’est la levure Saccharomyces cerevisiae qui a servi de modèle pour le développement de la première biopuce génomique. L’application de cette approche à la levure a permis d’explorer sous un angle nouveau l’étude de ses différents états de différenciation, de son cycle cellulaire, et de sa capacité d’adaptation à diverses conditions nutritionnelles ou à des conditions environnementales induisant un stress cellulaire. Plusieurs études ont plus particulièrement examiné la réponse des cellules de levure à une carence en azote ou en acides aminés. Cependant, une étude systématique de la réponse transcriptionnelle de la cellule aux différentes sources d’azote n’a jamais été entreprise en croissance confinée à l'état de régime. S. cerevisiae est capable d’utiliser plus d’une vingtaine de substances en tant que sources uniques d’azote pour la croissance. On distingue parmi les sources d’azote celles qui permettent une croissance optimale, appelées « bonnes » sources d’azote, des autres, appelées « mauvaises » sources d’azote. La levure possède plusieurs systèmes de régulation lui permettant de s'adapter à la condition azotée. Au niveau transcriptionnel, on recense trois régulations générales – la NCR (répression catabolique azotée), le GAAC (le contrôle général de la biosynthèse des acides aminés) et le système SPS (Ssy1-Ptr3-Ssy5) – et une multitude de régulations plus spécifiques. En utilisant la technique des puces à ADN, nous avons généré une matrice d'expression de l'ensemble des gènes de la levure en croissance confinée à l'état de régime dans un milieu de culture contenant une parmi 21 sources d'azote différentes. Nous avons pu ainsi recenser systématiquement 506 gènes soumis à une régulation transcriptionnelle dépendante de l'azote. En nous basant sur ces résultats, nous avons pu décrire l'ensemble des régulations transcriptionnelles engagées dans l'adaptation à la source d'azote fournie dans le milieu de culture. Parallèlement, nous avons défini deux grands groupes de sources d'azote en fonction du transcriptome de S. cerevisiae. Le premier groupe rassemble les composés qui exercent une répression catabolique azotée forte et dont la liste a été complétée. Fait nouveau, nous montrons que ces mêmes composés enclenchent aussi l'activation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR). Au contraire, lorsque la source d'azote appartient au second groupe que nous avons défini, non seulement la croissance des levures est plus lente, la NCR levée et la réponse aux protéines mal repliées réprimée, mais nous montrons de façon inattendue que le contrôle général de la biosynthèse des acides aminés est activé. Plusieurs autres régulations qui ne sont pas impliquées dans le métabolisme azoté présentent un comportement différent en fonction de la source d'azote fournie. C'est le cas notamment des gènes dont l’expression est régulée selon l’apport en zinc et qui sont moins exprimés sur le milieu urée. De même, les gènes impliqués dans les résistances multiples aux drogues sont activés par le tryptophane. En confrontant nos résultats à ceux obtenus dans le cadre de travaux indépendants, nous avons proposé plus d'une cinquantaine de nouveaux gènes cibles de la NCR. Beaucoup d'entre eux n'ont jamais été caractérisés expérimentalement. En utilisant des techniques avancées d'analyse de séquences primaires de protéines, nous avons pu proposer une fonction pour plusieurs de ces gènes. Ces analyses bioinformatiques et la réalisation d’expériences complémentaires à l’aide de biopuces à ADN nous ont permis de proposer que l'un d'entre eux code pour une protéine impliquée dans la déstabilisation d'ARN messagers lors de la carence azotée. Nous avons aussi identifié plusieurs nouveaux gènes appartenant à des régulons spécifiquement activés en réponse à un nombre restreint de sources d'azote. Il est probable que ces gènes soient impliqués dans le catabolisme des sources d'azote sur lesquelles ils sont activés.

This doctoral thesis is a practice-led and corporate-grounded enquiry into the role of design research methods in a global technology company. The work aims to understand and communicate through a series of case studies how locally conducted participatory action research can be integrated into the processes of an in-house design team at the global NCR Corporation. It questions the current approaches taken in the design and development of consumer transaction technologies in the context of a global organisation and new markets. The thesis starts by introducing the reader to the global corporation in which the study is focused and author employed, the NCR Corporation. The contextual grounding of the corporate environment, its heritage, history and continued evolution will illustrate the dynamic yet traditional role design has played within the corporation. As a senior member of the Consumer Experience Design (Cx Design) team in the corporation the author is well placed to evaluate the role of design and how it can evolve. The immediate contextualisation is then followed by a broad examination of the literature in the field of design in a corporate culture, research methods and socially-led innovation. This will define the boundaries of interest and influence in the thesis. A participatory action research approach was taken to address the research questions. Informed by a series of hyperlocal and global community engagements framed and directed from within the corporate culture, the author defines an understanding of the levels of community engagement through design research. The resulting outputs are then applied within the context of the NCR Corporation where the impact and influence on such engagements can be understood. The author concludes that his contribution to new knowledge, the development of a Participatory Action Based Strategic Design Process, can be applied within a global technology company. The process adapts McNiff’s and Whitehead’s (2011) seven phases of action research reporting and Ravi Chhatpar’s strategic decision-making process. The thesis demonstrates the value and influence of design research methods in the design of consumer transaction technologies. The thesis provides an understanding of how design research methods have been applied in a corporate environment, how the insights are applied, and demonstrates how the research has influenced the author’s practice and therefore the wider Cx Design group.

Les biopuces à ADN permettent d’étudier à une échelle génomique une très grande variété de questions sur la physiologie et la différenciation cellulaires. Elles ont ainsi contribué de manière considérable aux progrès récents de nombreux domaines de la biologie et occuperont bientôt une place de choix dans le secteur du diagnostic médical. C’est la levure Saccharomyces cerevisiae qui a servi de modèle pour le développement de la première biopuce génomique. L’application de cette approche à la levure a permis d’explorer sous un angle nouveau l’étude de ses différents états de différenciation, de son cycle cellulaire, et de sa capacité d’adaptation à diverses conditions nutritionnelles ou à des conditions environnementales induisant un stress cellulaire. Plusieurs études ont plus particulièrement examiné la réponse des cellules de levure à une carence en azote ou en acides aminés. Cependant, une étude systématique de la réponse transcriptionnelle de la cellule aux différentes sources d’azote n’a jamais été entreprise en croissance confinée à l'état de régime. S. cerevisiae est capable d’utiliser plus d’une vingtaine de substances en tant que sources uniques d’azote pour la croissance. On distingue parmi les sources d’azote celles qui permettent une croissance optimale, appelées « bonnes » sources d’azote, des autres, appelées « mauvaises » sources d’azote. La levure possède plusieurs systèmes de régulation lui permettant de s'adapter à la condition azotée. Au niveau transcriptionnel, on recense trois régulations générales – la NCR (répression catabolique azotée), le GAAC (le contrôle général de la biosynthèse des acides aminés) et le système SPS (Ssy1-Ptr3-Ssy5) – et une multitude de régulations plus spécifiques.<p>En utilisant la technique des puces à ADN, nous avons généré une matrice d'expression de l'ensemble des gènes de la levure en croissance confinée à l'état de régime dans un milieu de culture contenant une parmi 21 sources d'azote différentes. Nous avons pu ainsi recenser systématiquement 506 gènes soumis à une régulation transcriptionnelle dépendante de l'azote.<p>En nous basant sur ces résultats, nous avons pu décrire l'ensemble des régulations transcriptionnelles engagées dans l'adaptation à la source d'azote fournie dans le milieu de culture. Parallèlement, nous avons défini deux grands groupes de sources d'azote en fonction du transcriptome de S. cerevisiae. Le premier groupe rassemble les composés qui exercent une répression catabolique azotée forte et dont la liste a été complétée. Fait nouveau, nous montrons que ces mêmes composés enclenchent aussi l'activation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR). Au contraire, lorsque la source d'azote appartient au second groupe que nous avons défini, non seulement la croissance des levures est plus lente, la NCR levée et la réponse aux protéines mal repliées réprimée, mais nous montrons de façon inattendue que le contrôle général de la biosynthèse des acides aminés est activé. Plusieurs autres régulations qui ne sont pas impliquées dans le métabolisme azoté présentent un comportement différent en fonction de la source d'azote fournie. C'est le cas notamment des gènes dont l’expression est régulée selon l’apport en zinc et qui sont moins exprimés sur le milieu urée. De même, les gènes impliqués dans les résistances multiples aux drogues sont activés par le tryptophane.<p>En confrontant nos résultats à ceux obtenus dans le cadre de travaux indépendants, nous avons proposé plus d'une cinquantaine de nouveaux gènes cibles de la NCR. Beaucoup d'entre eux n'ont jamais été caractérisés expérimentalement. En utilisant des techniques avancées d'analyse de séquences primaires de protéines, nous avons pu proposer une fonction pour plusieurs de ces gènes. Ces analyses bioinformatiques et la réalisation d’expériences complémentaires à l’aide de biopuces à ADN nous ont permis de proposer que l'un d'entre eux code pour une protéine impliquée dans la déstabilisation d'ARN messagers lors de la carence azotée. Nous avons aussi identifié plusieurs nouveaux gènes appartenant à des régulons spécifiquement activés en réponse à un nombre restreint de sources d'azote. Il est probable que ces gènes soient impliqués dans le catabolisme des sources d'azote sur lesquelles ils sont activés. / Doctorat en sciences, Spécialisation biologie moléculaire / info:eu-repo/semantics/nonPublished