Orientador: Liana Maria Cardoso Verinaud / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T14:30:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_CamilaMariaLongo_D.pdf: 7157144 bytes, checksum: 5e608dc117fd0920bfcd8bdf16a6ccd0 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Gliomas malignos são tumores de Sistema Nervoso Central extremamente freqüentes, correspondendo a 46% dos casos diagnosticados de Neoplasias Cerebrais. Segundo a Organização Mundial de saúde o glioblastoma multiforme representa aproximadamente 3,9% dos óbitos a cada 100.000 habitantes nos Estados Unidos da América e Europa. Este tipo tumoral é extremamente agressivo e os pacientes acometidos apresentam média de vida de apenas um a dois anos após ressecção cirúrgica. Os tratamentos posteriores à retirada da massa tumoral são a quimioterapia e radioterapia. Assim, há um grande interesse na busca por novas estratégias terapêuticas que se mostrem eficazes no tratamento de pacientes acometidos por glioblastomas. Neste sentido, a utilização de linhagens celulares, estabelecidas à partir de tumores brutos extraídos de pacientes, tem-se mostrado uma ferramenta útil tanto ao avanço nos conhecimentos biológicos sobre tumores primários; quanto ao desenvolvimento de novos agentes terapêuticos. Foi estabelecida em nosso laboratório uma nova linhagem derivada de glioma humano, denominada NG97. Estudos preliminares confirmaram a origem astrocitária das células e a preservação de malignização, demonstrada pelo desenvolvimento de massa tumoral a partir do xenotransplante de células cultivadas in vitro em camundongos atímicos. O presente trabalho teve como objetivo ampliar os conhecimentos biológicos acerca desta linhagem tumoral. Assim foram atribuídas as células da linhagem ultraestruturas típicas de células indiferenciadas e tumores astrocíticos. Também, elucidaram-se características mofológicas atribuídas a linhagens tumorais astrocíticas como a expressão de proteínas GFAP, vimentina, integrina a5ß1, fibronectina, laminina e CD44. Combinada a expressão destas moléculas responsáveis pela adesão célula ao substrato, foi demonstrado que as células uma vez desprovidas do contato adesivo desenvolvem uma estrutura tridimensional organotipica. Quanto a expressao de moléculas envolvidas no processo de resposta imune das células in vivo, não foram detectadas nas células NG97: HLA I,HLAII, B7 (CD80), TGF-ß e Fas (CD95). Em cultura, as células NG97 apresentam variadas aberrações numéricas com cariótipo hiperplóide e inumeros cromossomos aneuploides classificados como um de lote cromossomos murinos associados. Este ultimo, pode ser representado por um lote próximo ao triploide murino (neartriploid, i.e.; 30 cromossomos murinos mais ou menos 11 cromossomos murinos). Finalmente demonstrou-se a sensibilidade das células NG97 ao quimioterapico Cisplatina tanto in vitro quanto in vivo. Portanto a caracterização da linhagem NG97 aqui realizada fundamenta a sua utilização como modelo biológico aos mais diversos estudos. / Abstract: Astrocytomas are extremely aggressive malignancies of the Central Nervous System (CNS) and account for 46% of all primary malignant brain tumors. The perspective for patients with malignant gliomas is poor and the average survival expectancy is less than a year. Progression to a worsened prognosis occurs in 85% of the cases due to changes in cell tumor microenvironment and through biological pathways that are still unclear. These neoplasias grow rapidly and contain high cellularity with marked hyperchromatism and pleomorphism. The hystophatological identity of glioblastoma is the prominent vascularity as well as the area of necrosis surrounded by neoplastic pseudopalisading cells, as a result of microenvironment hypoxic conditions. In order to clarify those issues, cultured cell lines are valuable tools to be employed on tumor related assays as long as they are established and well characterized. Our laboratory set up the NG97 cell line derived from a human astrocytoma grade III, which was injected in the athymic nude mice flank and turned to develop and express phenotypic characteristics of an astrocytoma grade IV. This study aimed to expand the biological knowledge about this tumor cell line. In this way, clarified morphological, immunophenotypic, and cytogenetic characteristics as well as confirmed sensitivity to cisplatin chemotherapeutic agent in cells NG97. These features attributed to NG97 cell line are unique qualities that make them an important model for the study of biology and therapeutic strategies in astrocytomas. / Doutorado / Imunologia / Doutor em Genetica e Biologia Molecular