Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T05:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dantas_DeniseConceicaoMesquita_D.pdf: 3363409 bytes, checksum: 45e0f5535d4bc39dc990f5f2b9bb1047 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Neste trabalho estudamos os efeitos imunofarmacológicos do extrato da Chlorella vulgaris (ECV), sobre a resposta imunológica de camundongos BALB/c _infectados com a bactéria Usteria monocytogenes. . O efeito do ECV foi verificado sobre o número de células progenitoras hematopoiéticas da medula óssea para a série granulócito-macrófago (CFU-GM) e sobre a atividade estimuladora de colônia (CSA), presente no soro de animais infectados com a L. monocytogenes, tratados com o ECV e tratados e infectados. Além disso, investigamos nestes animais os efeitos do ECV sobre a atividade de células "Natural Killer" (NK) e sobre a resposta específica 'a infecção através das citocinas produzidas pelas sub-populações de células T auxiliares "T helper-1" (Th1) através dos níveis de interleucina-2 (IL-2) e interferon-gama (IFN-y), e de "Thelper-2"(Th2) pelos níveis de interleucina-4 (IL-4) e interleucina-10 (IL-10). Para a realização dos experimentos os animais foram tratados por via oral durante cinco dias consecutivos com o ECV na dose de 50 mg/Kg/dia. Ao final do tratamento, os animais foram infectados com uma dose sub-letal da bactéria (1x104 bactérias/animal). Os animais inoculados com a bactéria apresentaram uma mielosupressão que foi revertida pelo tratamento prévio com o ECV, observada nos animais tratados e infectados em relação àqueles somente infectados. Essa mesma relação também foi verificada quanto a atividade estimuladora de colônia (CSA), investigada no soro destes animais, nas 48 e 72 horas após a infecção. Com relação a atividade de células NK, o ECV produziu uma estimulação dessas .células mesmo em animais controle (sem infecção), promovendo um aumento mais pronunciado, na vigência da infecção; entretanto, quando os animais foram previamente tratados com o ECV e infectados um aumento adicional pôde ser detectado. o ECV também demonstrou ter um efeito estimulador sobre a produção de citocinas. Nossos resultados apresentaram um aumento da IL-2 em animais tratados com o ECV e infectados em relação aos controles. Em resposta à infecção, todos os grupos demonstraram um aumento de IFN-y que, entretanto, observou-se serem mais elevados nos animais que receberam tratamento prévio com o ECV e foram infectados, do que em animais apenas inoculados com a bactéria. Porém, o aumento significativo de IFN-y foi detectado 72 horas após a infecção, comparado ao respectivo grupo somente infectado. Das citocinas produzidas por Th2 (IL-4 e IL-1 O) e em relação ao grupo controle, a L-4 apresentou um ligeiro aumento, verificado apenas no grupo tratado e infectado (48h), contrariamente à IL-10 que não apresentou níveis alterados em grupo algum. Para avaliar a resistência dos animais à infecção, realizamos uma curva de sobrevida utilizando uma dose letal da L. monocytogenes (3x105 bactérias/animal), e duas doses do ECV, 50 e 500 mg/Kg/dia durante cinco dias de tratamento prévio à infecção. A dose de 50 mg/Kg protegeu 20% dos animais infectados e a de 500 mg/Kg do ECV conferiu a estes animais uma sobrevida de 52%, quando comparados aos animais controle, apenas infectados, onde a mortalidade foi de 100%. Diante dos resultados obtidos neste trabalho, podemos sugerir que o ECV aumenta a resistência dos camundongos BALB/c infectados com a L. monocytogenes .Através da modulação da resposta imunológica inespecífica verificada pelo aumento dos precursores hematopoiéticos da medula óssea, da atividade de células NK; como também pelo aumento da resposta Th1, através dos níveis de IFN-y e IL-2 que se sobrepôs sobre a resposta Th2 / Abstract: In the present study, we have investigated the effects of the Ch/orella vu/garis extract (CVE) on the growth and differentiation of bone marrow hematopoietic cells (CFU-GM), and on serum colony stimulating activity (CSA) in normal and Usteria monocytogenes infected mice. We have also investigated the effects of the CVE on Natural Killer cells and on Th1 cells activity (by IL-2 and IFN-y production) and Th2 activity (by IL-4 and IL-10) in normal and infected mice.Mice were pre-treated with dive doses of CVE (50 mg/Kg/day) and then infected with a sub lethal dose (1x104 bacterialanimal) of L monocytogenes. The treated mice showed an increased number of CFU-GM in the bone marrow and increased serum colony stimulating activity, at 48 and 72 hours after the infection, when compared to the infected mice. In relation to the NK cells activity, the CVE produced a significant increase in normal (non-infected) animals compared to the controls. Similarly, the infection alone praduced a signiticant increase on NK activity at 48 and 72 hours after the infection. When the animais were pre-treated with CVE and infected, an additional increase on the NK activity was observed. Regarding the cytokines production, in the treated and infected animals there was an increase on IL-2 and IFN-y compared to the contrails. However, the IFN-y showed an increase in the treated and infected group in relation to the infected group at 72 hours after the inoculation of the bacteria. The Th2 activity was not significant. Just the IL-4 showed an increase in the treated and infected group (48h) compared to the control group. The CVE treatment (50 and 500 mg/Kg) of mice infected with a dose of 3x105 bacterialanimal, which was lethal for all the non-treated contrails, has produced a dose response protection which led to a 20% and 52% survival, respectively / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Maria Lucia Furlan Wada / Texto em ingles e portugues / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T20:50:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Haas_VeradaRosa_M.pdf: 5069943 bytes, checksum: 4bd884484141aaef6d2214bdb72ce74a (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: As células Vero, uma linhagem estabelecida a partir de células renais de macaco verde africano (Cercopithecus aethiops), foram mantidas utilizando a técnica de cultivo em sanduíche. Dois tipos de sanduíche foram utilizados vidro/colágeno e colágeno/colágeno, com 10% e 20% de soro feta! bovino (SFB), com o objetivo de se verificar o comportamento das células Vero neste método de cultivo. As células foram avaliadas quanto a morfologia utilizando-se a coloração com hematoxilina-eosina (HE), citoquimicamente por meio de azul de toluidina pH 4,0 (A T) e xylidine Ponceau pH 2,5 (XP), e imunocitoquimicamente com anticorpos anti-colágeno IV e anti-Iaminina. As células cultivadas durante um período de 7 dias, no sanduíche vidro-colágeno com 10% e 20% de SFB cresceram em ambos os substratos. As células que permaneceram sobre o vidro apresentaram morfologia variada com predomínio de células alongadas, sendo que em vários locais as lamínulas não apresentavam células mostrando que as mesmas foram capazes de migrar contra a força da gravidade em direção à matriz colagênica. Essas células que migraram para o colágeno I apresentaram formato alongado ou arredondado, sendo que este último predominou quando houve infiltração para o interior do gel colagênico. Observou-se também a contração do mesmo, ou seja, a redução do tamanho e a formação de dobras no gel de colágeno. Nas regiões onde as células não infiltraram, estas cresceram formando uma lâmina basal. No cultivo com a técnica de sanduíche colágeno/colágeno as células aderiram, proliferaram e infiltraram no colágeno existente abaixo e sobre as células, apresentando alterações na forma celular, caracterizando um processo de diferenciação induzido pelo substrato. O colágeno apresentou contração nas duas camadas do sanduíche. Nas regiões em que não houve infiltração das células Vero para o interior do gel, houve a formação de um tecido com características semelhantes as de um epitélio, com produção de uma lâmina basal, sendo este resultado igual ao observado no sanduíche vidro/colágeno. Na análise cito química, as células Vero, em ambos os sanduíches, quando coradas com A T mostraram núcleos, nucléolos e citoplasma basófilos e em algumas regiões evidenciou-se grânulos basófilos no meio extracelular. Quando as amostras foram coradas com XP , as células Vero apresentaram intensa coloração vermelho-alaranjado, onde pôde ser visualizada uma região acelular mais intensamente corada, entre as células e o colágeno, representando uma lâmina basal, que em algumas regiões era evidente e em outras não. Nesta região, os resultados imunocitoquímicos confirmaram a presença de uma membrana basal rica em colágeno IV e laminina. Tendo por base estes resultados, conclui-se que as células Vero apresentam comportamento similar quando cultivados sobre o colágeno ou quando cultivadas pela técnica de sanduíche. As células em contato com o colágeno diferenciaram-se e passaram a exibir características de um tecido epitelial, inclusive com a formação de uma lâmina basal, ou se infiltraram para o interior do gel colagênico. O comportamento celular é similar quando se usa 10% ou 20% de SFB no meio de cultivo, sendo que neste último caso, a formação de uma membrana basal foi mais evidente e ocorreu menor infiltração das células para o interior do gel / Abstract: Vero cells were cultured using the sandwich technique. Two sandwich types, the glass/collagen and collagen/coUagen variations, were used with 10% and 20% fetal calf serum (FCS), intending to define Vero cell behavior in these conditions. The cells were morphologically analyzed with hematoxilin-eosin staining, while cytochemical information was obtained with Toluidine blue at pH 4.0 (TB) and xylidine Ponceau at pH 2.5 (XP), and immunocytochemical data with anti-coUagen IV and anti-Iaminin antibodies. Cells cultured in the glass/collagen sandwich with 10% and 20% FCS grew on both substrata after 7 days. The cells on the glass surface had varied shapes but were predominantly elongated. In some regions of the coverslip, there were no ceUs, showing that these were able to migrate against gravity into the collagen covering. The migrated cells were elongated or rounded, with a greater number of rounded cells as they moved into the collagen I gel. The contraction, seen as folding and shrinkage of the collagen gel, was observed in this case. In the regions where cells did not penetrate the collagen layer, a basal lamina was produced. During cultivation in the collagen/collagen sandwich, the cells adhered, proliferated and infiltrated into the upper and lower gels, resulting in altered shapes, typical of substrate induced differentiation. Both collagen substrata contracted. In regions where cells did not penetrate the collagen layer, they formed a separating basal lamina as observed in the glass/collagen sandwich. Cytochemical analysis in both types of sandwich, with TB staining showed basophilic nuclei, nucleoli, and cytoplasm. In some regions, there were also extracellular vbasophilic granules. When the samples were XP stained, the Vero cells were stained strongly orange-red, bordered by a more intensely staining, acellular basallamina, although this layer was not always present. In the basal lamina, the presence of collagen IV and laminin was immunocytochemically confirmed. With these results, it can be concluded that Vero cells behave similarly when cultured on collagen or with the sandwich technique. Vero cells in contact with collagen undergo differentiation, expressing epithelial cell characteristics, including the formation of a basal lamina, or they may infiltrate into the collagen gel. Cell behavior is similar when 10% or 20% FCS is added to the culture medium, although the basal lamina is more evident, and there is less cellular penetration into the collagen in the higher serum concentration / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Nora Marcela Haun Quiros / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:40:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_MaristelaFreitas_M.pdf: 5394098 bytes, checksum: 196918fd6013613b4ad87f3241daf8bf (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: A Doença de Chagas é uma infecção parasitária que afeta milhões de latino-americanos, causando nas ares endêmicas, uma entre 10 mortes nos indivíduos de 25 a 64 anos de idade. A quimioterapia da doença é baseada principalmente no uso de dois medicamentos, Nifurtimox (Bay 2502 : Lampit) e Benznidazole (Ro 7-1051 ; Radanil, Rochagan). Ambas as drogas possuem atividade genotóxica comprovada tanto in vitro, quanto in vivo. Assim sendo, resolvemos investigar os efeitos citóxicos do pigmento biossintético de Chromobacterium violaceum (Cepa BB-78), o 1,3-dihidro-2H-inol-2 ona, comumente denominado como Violaceína, bem como de seus derivados, Bromo-Violaceína e Matilol-Violaceína, já que este composto apresentou um perfil biológico interessante, mostrando-se com baixo poder hemolítico, ação microbiana e o mais importante, atividade tripanocida in vitro. Entretanto, Violaceína exibiu uma alta toxidade para células V79/M8, assim como Bromo-Violaceína. Já o derivado Metilol-Violaceína exibiu uma citotoxidade baixa em relação aos outros 2 compostos. A atividade citotóxica de Nifrutimox e Benznidaole também foi testada em células V79/M8. Entretanto, estes 2 compostos se comportaramde maneira similar ao Metilol-Violaceína, tanto na sobrevivência celular, quanto para a inibição da síntese de DNA. Sabe-se no entanto, que os efeitos tóxicos dos medicamentos são devidos à sua biotransformação niotrorredutiva para radicais que possam reagir com constituintes celulares, causando efeitos deletérios. Dosagens preliminares realizadas durante o tratamento das células com Violaceína, indicaram a presença de 'H IND. 2¿'O IND. 2¿ no meio reacional, apontando assim, para uma possibilidade de ser uma espécie pesponsável pelos efeitos cito e genotóxicos encontrados nestes estudos. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Chagas¿Disease is a parasitic infection that effects million of Latinamericans, inducing in endemic areas one in ten deaths in humans between 25 to 64 years old. Disease¿s chemotherapy is based on the use of two drugs, Nifurtimox (Bay 2502 : Lampit) and Benznidazole (Ro 7-1051 ; Radanil : Rochagen). Both drugs have a confirmed genotoxic activities in vitro and in vivo. We decided to test the cytotoxic effects of the biosynthetic pigment of Chromobacterium violaceum (strain BB-78), usually knowm as Violacein. This last compound has interesting biological profiles as low hemolytic effect, microbian action and principally in vivo trypanocide activity. Violacein and Br-Violacein exhibited a high toxity in V79/M8 cell. The Methhyl-Violacein derivative showed a low cytotoxicity compared to the other two compounds. Nifurtimox and Benznidazole cytotoxic activity was also tested in V79/m8 cells. However, the profile of both was similar to Methyl-Violacein in cellular survival and DNA inhibition synthesis experiments. It is known that the toxic effects of those drugs are due to their nitroreductive biotransformation to reactive free radicals, interacting with cellular constituents causing the deleterious effects. On prelimary studies using incubation medium of Violacein treatments in V79/M8 cells we observed 'H IND. 2¿'O IND. 2¿ formation, a reactive species that may be responsible for the detected cyto and genotoxic effects. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-11-25T16:31:14Z No. of bitstreams: 1 2014_AndressaFabioLucianodosSantos.pdf: 2463096 bytes, checksum: 0f94b500d050b15c1c40a228929105d3 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-11-26T11:09:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_AndressaFabioLucianodosSantos.pdf: 2463096 bytes, checksum: 0f94b500d050b15c1c40a228929105d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-26T11:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_AndressaFabioLucianodosSantos.pdf: 2463096 bytes, checksum: 0f94b500d050b15c1c40a228929105d3 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade transdentinária de sistemas adesivos universais sobre cultura primária de células pulpares. Setenta discos de dentina foram obtidos de dentes terceiros molares humanos íntegros e divididos em sete grupos considerando sua condutância hidráulica. Os discos foram montados em câmaras pulpares artificiais e sob sua superfície pulpar, foram cultivadas células por 48 horas. Os grupos foram definidos da seguinte forma: G1 - controle (PBS), G2 - convencional de 3 passos (Adper™ Scotchbond™ Multi-purpose); G3 - autocondicionante de passo único (Clearfil™ SE3 Bond); G4 e G5 - autocondicionante de passo único e convencional de 2 passos, respectivamente (Scothbond™ Universal); G6 e G7 - autocondicionante e convencional de 2 passos, respectivamente (Peak® Universal Bond). Decorridos 24 horas, foram avaliados o metabolismo celular pelo teste do MTT e a morfologia pela MEV. O meio de cultura em contato com as células foi coletado e utilizado para análise de morte celular utilizando o sistema de imagem celular GE InCell Analyzer 2000. Os dados foram avaliados pelos testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis seguido do teste comparativo de Mann-Whitney (p<0,05). Todos os sistemas adesivos testados reduziram a porcentagem do metabolismo celular, comparados com o grupo controle. Os mais citotóxicos foram os grupos G5 e G2. Os grupos G2, G3, G4, G5, G6 e G7 reduziram o metabolismo em 33,7%, 19,2%, 16,83%, 42,27%, 28,83% e 8,86%, respectivamente. O potencial citotóxico dos adesivos foi G5 > G2 > G6 > G3 > G4 > G7. O G6 produziu o efeito mais fraco de indução de morte por apoptose nas células da polpa, por outro lado, os grupos G2 e G7 resultaram nos maiores valores (16,58% e 15,03%), respectivamente. A maior porcentagem de necrose foi induzida pelo grupo G2 (63,44%), sendo esta estatisticamente diferente de todos os grupos, exceto para o G4. Morte celular por necrose foi o tipo mais prevalente induzida pelos adesivos estudados. Todos os sistemas adesivos testados causaram morte (apoptose e necrose), lesão celular e alterações de morfologia, o que indica potencial citotóxico para as células pulpares. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this study was to evaluate the transdentinal cytotoxicity of universal adhesive systems using pulp cells culture. Seventy dentin disks were obtained from intact human third molars and divided into seven groups considering their hydraulic conductance. The disks were adapted on artificial pulp chamber and cells were seeded over their pulpal surface. After 48 hours, the chambers were inverted and the adhesive procedures were performed according to the groups: G1 - control (PBS), G2 – etch-and-rinse 3 step (Adper ™ Scotchbond ™ Multi-purpose); G3 – self-etch single step (Clearfil ™ SE3 Bond); G4 and G5 – etch-and-rinse single step and self-etch 2 steps, respectively (Scothbond ™ Universal); G6 and G7 – etch-and-rinse and self-etch 2 steps, respectively (Peak Universal Bond ®). After 24 hours, cell metabolism was evaluated by MTT assay and morphology by SEM. The culture medium in contact with the cells was collected and used to analyze death cell using the system image GE Incell Cell Analyzer 2000. Data were analyzed by non-parametric Kruskal-Wallis test followed by comparison Mann-Whitney (p <0.05). All adhesive systems reduced the percentage of cell metabolism compared with the control group. The lowest value of SDH production was observed for G5, followed by G2. The reduction of cell metabolism were of 33.7%, 19.2%, 16.83%, 42.27%, 28.83% and 8.86% for G2, G3, G4, G5, G6 and G7, respectively. The cytotoxic potential of the adhesive systems were G5> G2> G6> G3> G4> G7. G6 produced the weakest effect of inducing cell death by apoptosis. On the other hand, G2 and G7 groups produced the highest values (16.58% and 15.03%), respectively. The highest percentage of necrosis was induced by G2 (63.44%), statistically different from all groups, except from the G4. Necrotic cell death was the most prevalent type of cell death for all adhesives tested. All adhesive systems caused cell death (apoptosis and necrosis), reduction of cellular metabolism and alterations on cell morphology, indicating their cytotoxic potential for pulp cells.

Orientador: Nora Marcela Haun Quiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T13:00:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodriguezCarvajal_JaimeAntonio_D.pdf: 7418205 bytes, checksum: 44f4a47d48d171c03138c929be69d78f (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Foi estudada a atividade antiulcerogênica, a toxidade aguda e subcronica e a citoxicidade da trans-desidrocrotomina (DHC) um pequeno diterpno isolado da arvore Cróton cajucara Benth. As propriedades antiulcerogênicas da DHC foram estudadas em quatro modelos de úlcera gástrica induzida em rato. A administração oral de DHC 100mg/Kg mostrou um significativo efeito antiulcerogênico nos modelos de úlcera induzida por estresse hipotérmico, etanol e ligadura do piloro. Não foram observados efeitos significativos sobre as lesões gástricas induzidas pela indometacina nem modificações em alguns parâmetros gástricos como conteúdo de muco, taxa de secreção gástrica, pH e conteúdo de ácido depois do tratamento com DHC.OS efeitos toxicológicos agudos da DHC foram avaliados em camundongos. Os valores das 'LD IND. 50¿ foram 876,0 mg/Kg e 47,2 mg/Kg para as mudanças oral e intraperitoneal respectivamente. No experimento de toxicidade subcrônica ratos machos e fêmeas Wistar foram tratados oralmente durante 35 dias com doses de DHC 25,50, 100 mg/Kg. Ao término do tratamento foi observado aumento significativo, do peso dos fígados, dose ¿ dependente nos ratos de ambos os sexos e redução significativa no nível plasmático da fosfotalase alcana e do colesterol além do aumento da enzima gama glutamil transpeptidase na dose alta (100mg/Kg) em ratos fêmeas / Abstract: The major diterpene isolated from Cróton cajucar Benth trans-Dehydrocrotonin (DCD), was assayed for antiulcerogenic activity, acute and subcronic and toxicity and citotoxicity. The antiulcerogenic properties of DHC were studied on four induced gastric models in rat. The oral dose of 100 mg/Kg DHC showed a dignificance antiulcerogenic effect on hypothermic restrain stress, ethanol and pylorus ligature ulcers. No significance changes were found after DHC treatment on indomethacin-induced gastric lesions r on some gastric parameters such as wall mucus secretion rate, pH and total acid content. Acute toxilogical effects of DHC were assessed in mice. The 'LD IND.50¿ values were 876,0 mg/Kg and 47,2 mg/Kg for oral and intraperictoned administrations, respectively.In the subchoronic toxicity experiment rats were orally a significant dose-dependent increase in liver weighth was observed in both male and femele rats. Whereas in felefe rats a significance reduction in plasma alkaline.phospate and cholesterol levels and a increase sof gamma glutamyl trasnspeptasee and cholesterol levls and an icrease aos ggamma glutamyl transpeptidase was found only at high as doses (100 mg;/Kg ). The subcronic admintration of DHC also induc, noted by turgid tume-faction, microvamuete degeneration and cuclear alternatives . Depise the good ant-ucerogenic ou results suggest that the long term use of DHC my induce damage / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Selma Candelaria Genari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:42:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Petinari_Leandro_M.pdf: 1891620 bytes, checksum: 00620df0a905704b914a9cf8decf8855 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Liana Verinaud / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_CamilaMariaLongo_M.pdf: 3207491 bytes, checksum: b6086bc544c5ddab7233a9e3d8fba20d (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientadores: Angela Maria Moraes, Carlos Augusto Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:03:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_FabianaReginaXavier_M.pdf: 2519549 bytes, checksum: 9a767f56a5012a084b651731c3577e7f (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientador: Rolf Dieter Illg / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T11:08:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_RicardoTadeude_D.pdf: 3297661 bytes, checksum: 563e2b374e865ef1c7518e9a5ff157ae (MD5) Previous issue date: 1998 / Doutorado / Genetica Vegetal / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Jose Mauro Granjeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:03:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Takamori_EstherRieko_M.pdf: 4278363 bytes, checksum: 0d831343742c2db28de42970dad8d707 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Dentre os biomateriais que visam auxiliar a regeneração óssea, destacam-se os de origem bovina. Têm sido avaliados diferentes protocolos de tratamento químico do osso bovino com a finalidade de preservar os componentes orgânicos (colágeno) e inorgânicos (hidroxiapatita), resultando no Osso Bovino Misto (OBM), a fim de aumentar a resistência mecânica do material. Apesar do OBM apresentar-se como um material promissor para uso na clínica médico-odontológica, por conciliar resistência e resiliência, deve-se certificar a ausência de efeitos tóxicos ou ativação do sistema imune do organismo, ou seja, sua biocompatibilidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a citocompatibilidade do OBM por meio de testes de citotoxicidade (Norma ISO 10993), análise morfológica e estudo da interação célula-material. Os ensaios de citotoxicidade consistiram de contagem de células, redução do MTT e captação do Vermelho Neutro. Nesses testes, células da linhagem Balb/c 3T3 foram incubadas com diferentes concentrações do extrato puro do OBM (100mg/mL), a 37oC, 24 h. Nesses ensaios, verificamos diferença estatisticamente significante entre o grupo controle (não tratado) e as concentrações superiores a 50 mg/mL (p<0,01, Análise de Variância, teste de Tukey), similar à proporcionada pelo GENOX ® orgânico e GEN-OX® inorgânico, comercialmente disponíveis. Estes resultados foram confirmados pela análise da morfologia das células tratadas nas diferentes condições, utilizando microscopia óptica de luz. A análise da interação célula-material (por microscopia eletrônica de varredura) somente foi possível após diálise do material (água deionizada) e condicionamento (72 h) em Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) + 10% Soro Fetal Bovino (SFB). Concluímos que concentrações do extrato do OBM acima de 50 mg/mL diminuem significativamente o número de células, as funções mitocondrial e lisossomal. Provavelmente isto se deve à presença de resíduos do processamento do material, indicando a necessidade de otimização do processo / Abstract: Biomaterials have been developed and investigated aiming to help bone regeneration. Xenografts of bovine origin stand out due to their biocompatibility, low cost and availability. Some protocols have been tested to develop a chemically treated material containing the anorganic (hydroxiapatite) and the organic (collagen) components of bovine boned: the mixed bovine bone (MBB). In spite of the MBB has been shown as a promising material for dental and medical applications, due to its resistance and resilience, it must be certified that this material is atoxic and do not activate the immunological system of the organism. The purpose of this investigation was to evaluate the MBB cytocompatibility by the use of cytotoxicity tests (ISO 10993), morphological analysis and cell-material interaction studies. The cytotoxicity assays consisted of cell number determination, MTT reduction and Neutral Red uptake. In these tests, Balb/c 3T3 cell lines were treated with different concentrations of MBB extract (100mg/mL, 37oC, 24h). Statistically significant differences were observed among control group (no treatment) and concentrations higher than 50 mg/mL (p< 0.01, ANOVA, Tukey¿s test), similar to results observed for organic and inorganic bovine bone (Gen-Ox®). Morphological analysis (optical microscopy) confirmed these results. Cell-material interaction (scanning electron microscopy) was studied only after material dialysis and 72 h conditioning (Dulbecco Modified Eagle Medium, DMEM, plus 10% Fetal Calf Serum, FCS). Fibroblast proliferation and cell adhesion to the material were observed. We conclude that concentrations of MBB extract higher than 50mg/mL decreased significantly the cell number, mitochondrial and lisosomal function. Probably toxic residues from manufacturing procedures remain in the material, indicating that process optimization should be considered. / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular