Made available in DSpace on 2015-04-14T13:09:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 389286.pdf: 1859740 bytes, checksum: 5056bcedea79433eb88e0c64523c9659 (MD5) Previous issue date: 2007-03-26 / Angiostrongil?ase abdominal ? uma infec??o zoon?tica causada por Angiostrongylus costaricensis, um nemat?deo com uma localiza??o intra-vascular no mesent?rio. O diagn?stico ? realizado somente com exame patol?gico de fragmentos do tecido ressecado, durante o tratamento cir?rgico de curso cl?nico complicado (perfura??o intestinal e/ou obstru??o). M?todos de imunodiagn?stico mostram muitas dificuldades com rea??o cruzada de anticorpos e a diversidade de resposta humoral. Esfor?os t?m sido direcionados para uma contribui??o na identifica??o e purifica??o de ant?genos espec?ficos de parasitos no desenvolvimento de m?todos sorodiagn?sticos. No presente estudo, foi analisado o uso de uma prote?na recombinante de A. costaricensis, a prote?na de choque t?rmico (HSP 20), em ELISA como sorodiagn?stico. Um dos clones de cDNA, obtido e expresso como uma pequena prote?na de choque t?rmico HSP 20 com 147 amino?cidos, apresentou identidade com seq??ncias de pequenas prote?nas de choque t?rmico de outros nemat?deos. A seq??ncia correspondente foi sub-clonada no vetor de express?o pET-23a-d (+), utilizando a t?cnica de PCR para a constru??o da prote?na recombinante HSP 20. O alto n?vel de express?o de HSP 20 em Escherichia coli BL 21 (DE3), clonado no vetor de express?o, foi observado ap?s indu??o com 1 mM de IPTG a 37 ?C. A etapa da purifica??o do recombinante HSP 20 foi realizada com a resina de Ni-NTA. An?lise do Western blot utilizando soro de um paciente com diagn?stico confirmado para angiostrongil?ase abdominal, indicou que o produto de express?o purificado foi imunog?nico. A sensibilidade da HSP 20 foi de 33%. Entretanto, 100% de especificidade da prote?na recombinante sugere o uso de um painel de ant?genos, na tentativa de m?ltiplos testes de varredura, para um sorodiagn?stico melhor e preciso da angiostrongil?ase abdominal