Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The occurrence of tuberculosis (TB) reaches much of the world's population and the prevalence is accompanied by the World Health Organization (WHO) since 1990. The same organization publishes the overall situation of the disease, as well as the situation of countries where the disease is not under control. Moreover, in recent years the number of people infected with Mycobacterium tuberculosis grows for many reasons, especially those derived from social inequality, AIDS, migration and the emergence of resistant bacilli to drugs. Moreover, the infection in the central nervous system (CNS) the bacillus is one of the most devastating clinical manifestations of the disease. This is called extrapulmonary neurotuberculosis (Ntb) and stands out with a high rate of mortality and morbidity among the extrapulmonary manifestations. The risk factors include age Ntb, coinfection with HIV, malnutrition, children with recent measles, alcoholism, malignant diseases, the use of immunosuppressant‟s in adults and in community prevalence of the disease. However, pathophysiological mechanisms of the disease need to be better understood. In this respect, more research is urgently needed to better understand the disease and to study new vaccines against the disease. Methods: On day 0 C57BL / 6 mice were challenged in the CNS of the lateral ventricle with micro stereotactic injection technique containing virulent Mycobacterium tuberculosis (H37Rv). After 30 days, the brain and lung CFU were analyzed and histology. Results: In this study, we observed large numbers of bacilli in the CNS determined by the CFU. Moreover, histological analysis showed an intense inflammatory activity in the ventricle while the animal was challenged with H37Rv. Thus demonstrating a model infection with H37Rv strain infused into the lateral ventricle of the CNS in male C57BL / 6 mice. In conclusion, this model is the closest to the normal course of disease in humans, as presented granulomatous tissue lesion characteristics therefore an important strategy for studying the pathophysiology well as mediators involved in the progression, and prevention of this disease. / A ocorrência da tuberculose (TB) atinge grande parte da população mundial e essa prevalência é acompanhada pela Organização Mundial de Saúde (OMS) desde 1990. A mesma organização publica anualmente a situação global da doença, assim como também a situação dos países onde a doença não está sob controle. Além disso, nos últimos anos o número de pessoas infectadas pelo Mycobacterium tuberculosis cresce por muitas razões, principalmente as derivadas de desigualdade social, AIDS, migração e o surgimento de bacilo resistente aos medicamentos. Além disso, a infecção no Sistema Nervoso Central (SNC) pelo bacilo é uma das manifestações clínicas mais devastadoras da doença. Esta forma extrapulmonar é denominada neurotuberculose (Ntb) e se destaca com uma elevada taxa de mortalidade e morbidade entre as manifestações extrapulmonares. Os fatores de risco para a Ntb incluem a idade, a coinfecção com o HIV, desnutrição, crianças com sarampo recente, alcoolismo, doenças malignas, o uso de imunossupressores em adultos e prevalência da doença na comunidade. Entretanto, mecanismos fisiopatológicos da doença precisam ser melhor compreendidos. Neste sentido mais pesquisas são urgentemente necessárias para uma melhor compreensão da doença e para estudar novas vacinas contra a doença. Métodos: No dia 0 camundongos C57BL/6 foram desafiados no ventrículo lateral do SNC com técnica de micro injeção estereotáxica contendo cepa virulenta Mycobacterium tuberculosis (H37Rv). Após 30 dias, o cérebro e pulmão foram analisados por CFU e histologia. Resultados: Neste estudo observou-se grande número de bacilos no SNC determinadas pelo CFU. Além disso, a análise histológica mostrou uma intensa atividade inflamatória no ventrículo, quando o animal foi desafiado com H37Rv. Demonstrando assim um modelo de infecção com a cepa H37Rvinfundida no ventrículo lateral do SNC nos camundongos machos C57BL/6. Em conclusão, este modelo é o mais próximo com o curso normal da doença em humanos, pois apresentou lesão tecidual com características granulomatosa portanto uma importante estratégia para estudar a fisiopatologia assim como mediadores envolvidos na progressão e prevenção desta doença.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:54Z : No. of bitstreams: 1 Publico-112.pdf: 513347 bytes, checksum: 17665fcf52bef2889707cb9159d6d6f7 (MD5) / Objetivo: estabelecer elementos prognósticos para a letalidade da neurotuberculose na criança a partir das manifestações clínicas, dados epidemiológicos e laboratoriais. Métodos: estudo retrospectivo de 141 pacientes internados com o diagnóstico de neurotuberculose no Hospital Infantil Nossa Senhora da Glória (HINSG), Vitória – ES, no período de 1982 a 2005. Os elementos prognósticos considerados foram: sexo, idade, vacinação com o bacilo de Calmette-Guérin (BCG), teste tuberculínico (PPD), formas de contágio, concomitância de tuberculose miliar, convulsões, estadiamento clínico, tomografia computadorizada do crânio e liquor (pleocitose, glicorraquia, proteinorraquia e presença do bacilo). Resultados: dezessete por cento dos pacientes foram a óbito. Pacientes que não apresentavam história de contágio, não apresentavam reatividade ao teste de PPD ou estavam em coma tiveram uma frequência significativamente maior de óbitos. A idade e os parâmetros do LCR não diferiram significativamente entre os pacientes que foram ou não a óbito. Análise por regressão logística múltipla foi usada para investigar as relações entre os elementos prognósticos e o desfecho óbito. A presença de coma no momento do diagnóstico (OR= 0,12, 95%IC= 0,04 a 0,35) e a ausência de história de contágio (OR= 3,47, 95%IC= 1,11 a 10,82) se relacionaram significativamente com o óbito, independentemente, dos outros fatores prognósticos. Conclusões: os fatores prognósticos na previsão de óbito nos pacientes com neurotuberculose foram a presença de coma no momento do diagnóstico e a ausência de história de contágio. Portanto, a busca exaustiva da história de contágio sempre que houver a hipótese de neurotuberculose deve fazer parte da rotina clínica diária do médico assistente. / Objective: to establish the prognostic factors of lethality in neurotuberculosis in a pediatric population according to clinical manifestations, epidemiological data and laboratory findings. Methods: retrospective study of 141 in-patients diagnosed with neurotuberculosis between 1982 to 2005, in the Nossa Senhora da Glória Children’s Hospital, Vitória –ES. The following prognostic parameters were considered for the study: sex, age, bacillus Calmette-Guérin vaccination (BCG), tuberculin test (PPD), close contact with tuberculosis, concomitant miliary tuberculosis, seizures, clinical staging, cranial computed tomography and cerebrospinal fluid parameters (pleocytosis, glucose, protein levels and bacillus presence). Results: 17% of the patients died. The determinants of poor outcome were: negative history of contact with tuberculosis, negative PPD reaction and coma. Age and cerebrospinal fluid parameters did not change the outcome. Multiple logistic regression analysis was used to investigate the relationship between the prognostic elements and the outcome death. The presence of coma at diagnosis (OR= 0.12, 95%CI= 0.04 a 0.35) and a lack of history of close contact with tuberculosis (OR= 3,47, 95%CI= 1.11 a 10.82) were significantly related to death, independently of the other prognostic factors. Conclusions: in our study, the prognostic factors of lethality among children with neurotuberculosis were coma upon hospitalization, and a lack of close contact with tuberculosis. Therefore, the extensive search for a history of close contact when seeing a child with neurotuberculosis suspicion should be part of assistant doctors’ daily routines. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Tuberculosis (TB) is caused by Mycobacterium tuberculosis and is a global public health problem and is considered one of the deadliest infectious diseases of the world. It is estimated that about one third of the world population is infected. TB in Central Nervous System (CNS) is one of the most severe forms of the disease, more common in children aged six months to five years old and among individuals with immunosuppression, particularly those with Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS). Neurotuberculosis (NTB) is associated with a high rate of mortality in children and permanent neurological sequelae in many survivors. Currently, the way to prevent TB is BCG (Bacilo Calmette-Guérin) vaccination, however, it has limitations because it only protects children and only prevents severe forms of TB, besides presenting variable protection of 0-75%. This shows the need to develop a more effective vaccine to fight TB. One of the most promising alternatives for TB is the DNA-hsp65 vaccine, made of a plasmid DNA containing the gene encoding the heat shock protein 65 kDa of mycobacteria (M. leprae). Although, it has not studied the protective effect of DNA-hsp65 vaccine against TB in the CNS, which is the most severe form of the disease and compromises the neural tissue. Thus, we evaluated the prophylactic effect of DNA-hsp65 vaccine in experimental neurotuberculosis. C57BL/6 mice were used by three experimental groups, where one of them was immunized only with plasmideal pVAX vector (vector group) by intramuscular administration of three doses every two weeks, another group received only PBS (PBS group) and the third group DNA was immunized with hsp65-pVAX plasmideal (vaccinated group). Thirty days after the last dose, the animals of each group were challenged with H37Rv laboratorial strain of Mycobacterium tuberculosis intracerebroventricularly by stereotaxy. Thirty days after the challenge with the bacilli, the mice were sacrificed and their brains and lungs removed. These organs were analyzed using histological sections stained with hematoxylin and eosin. It was also determined amounts of colony forming units (CFU) present in the brains of animals in all groups. The results show that animals of the vaccinated group exhibited brain and lung with discrete lesions of the vector and PBS groups. Furthermore, we noticed a reduced number of bacilli in the brains of animals in the vaccinated group. Therefore, our results suggest that DNA-hsp65 vaccine (pVAX-hsp65) is promising in the prevention of injuries caused by bacillus in the CNS. / A tuberculose (TB) é causada pelo Mycobacterium tuberculosis e representa um problema de saúde pública global, sendo considerada uma das doenças transmissíveis mais mortais do mundo. Estima-se que cerca de um terço da população mundial esteja infectada. A TB no Sistema Nervoso Central (SNC) é uma das formas mais graves da doença, sendo mais incidente em crianças de seis meses a cinco anos de idade e entre os indivíduos com imunodepressão, particularmente os portadores da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS). A Neurotuberculose (NTB) está associada a uma alta taxa de mortalidade em crianças e permanentes sequelas neurológicas em muitos sobreviventes. Atualmente, a forma de prevenção à TB é a vacina BCG (Bacilo Calmette-Guérin), porém, a mesma apresenta limitações, pois protege apenas as crianças e previne somente as formas graves de TB, além de apresentar proteção variável de 0 a 75%. Isso aponta a necessidade do desenvolvimento de uma vacina mais efetiva para o combate da TB. Uma das alternativas mais promissoras para o combate da TB é a vacina de DNA-hsp65, constituída por um plasmídeo de DNA contendo o gene que codifica a proteína de choque térmico de 65 kDa de micobactéria (M. leprae). Ainda não foi estudado o efeito protetor da vacina de DNA-hsp65 contra a TB no SNC, que é a forma mais grave da doença e compromete o tecido neural. Dessa forma, avaliamos o efeito profilático da vacina de DNA-hsp65 na neurotuberculose experimental. Foram utilizados camundongos C57BL/6 através de três grupos experimentais, onde um deles foi imunizado apenas com o vetor plasmideal pVAX (Grupo Vetor) através da administração de três doses quinzenais intramusculares, outro grupo recebeu apenas PBS (Grupo PBS) e o terceiro grupo foi imunizado com o DNA plasmideal pVAX-hsp65 (Grupo Vacinado). Trinta dias após a última dose, os animais de cada grupo foram desafiados com a cepa laboratorial H37Rv de Mycobacterium tuberculosis via intracerebroventricular através de estereotaxia. Passados trinta dias do desafio com o bacilo, os camundongos foram sacrificados e foram removidos cérebro e pulmão. Esses órgãos foram analisados através de cortes histológicos corados com hematoxilina e eosina. Também foram determinadas as quantidades de unidades formadoras de colônias (UFC) presentes nos cérebros dos animais de todos os grupos. Os resultados demonstram que os animais do grupo vacinado apresentaram cérebro e pulmão com lesões mais discretas do que os grupos vetor e PBS. Além disso, percebemos um número reduzido de bacilos nos cérebros dos animais do grupo vacinado. Portanto, nossos resultados sugerem que a vacina de DNA-hsp65 (pVAX-hsp65) é promissora na prevenção das lesões causadas pelo bacilo no SNC. / São Cristóvão, SE