Orientador : Marcos Silveira Buckeridge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:26:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ClovisOliveira_M.pdf: 3125498 bytes, checksum: 0125c921c82fb08014159de5b5f15833 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T05:19:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T20:33:15Z : No. of bitstreams: 1 279411.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / O processo de ultrafiltração do soro de queijo, para a recuperação e concentração de suas proteínas, representa um importante avanço na utilização desde subproduto. O interesse comercial maior está na fração retida pela membrana constituída pelo concentrado. Entretanto, o permeado, que é composto basicamente por água, lactose e sais minerais, ainda representa um problema quando despejado diretamente no meio ambiente, pois a lactose que permanece no mesmo é a principal responsável pelos altos valores da demanda biológica de oxigênio (DBO). Assim, processos que visam à utilização da lactose presente no soro de queijo precisam ser investigados e implementados. Este trabalho teve por objetivo estudar a conversão da lactose pela enzima -galactosidase. Tanto a hidrólise, quanto a síntese de galacto-oligossacarídeos (GOS), foram estudadas em reatores em duas distintas configurações - fluxo perpendicular e fluxo tangencial. Para a hidrólise da lactose foram utilizadas membranas de ultrafiltração preparadas à partir de polifluoreto de vinilideno (PVDF) e polietersulfona (PES). Para a síntese de GOS foram utilizadas membranas de nanofiltração preparadas à partir de acetato de celulose (AC). Para a hidrólise da lactose utilizou-se o permeado obtido da ultrafiltração do soro de queijo. O permeado foi tratado termicamente a 80°C/20min para remoção, por precipitação, das proteínas e peptonas que, devido à baixa massa molar destes compostos, permeiam as membranas de ultrafiltração. A taxa de hidrólise no permeado foi quantificada através da massa de glicose liberada, utilizando-se de técnica colorimétrica. As maiores taxas de hidrólise foram obtidas quando foi utilizado 0.2 g.L-1 de enzima, tanto no reator com fluxo perpendicular (95%), quanto no reator com fluxo tangencial (78%). O efeito da interferência das proteínas presentes no permeado, no método analítico para determinação da glicose, também foi investigado. Verificou-se que na presença das proteínas, a quantidade de glicose medida é subestimada em até 50%, independentemente da concentração destes compostos presentes no permeado. Através de espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), constatou-se adsorção da enzima na superfície da membrana. Verificou-se que esta fração adsorvida ainda apresentava atividade enzimática residual. A síntese de GOS foi estudada utilizando-se soluções concentradas de lactose. Inicialmente, a síntese e o fracionamento de GOS foram estudados separadamente. A enzima foi imobilizada em resina Duolite A-568. Verificou-se que quanto maior a quantidade de enzima utilizada na imobilização, maior quantidade de proteína é adsorvida, mas com maior perda de sua atividade e quantidade de proteína dessorvida. A concentração de enzima de 10 U.mL-1 foi selecionada em reações descontínuas e implementada em reações contínuas, utilizando-se concentração de lactose de 150 g.L-1 e 300 g.L-1, a 40°C. A concentração total influenciou tanto a síntese, quanto no fracionamento dos GOS. Quanto maior a concentração inicial de lactose, maior foi a quantidade de GOS sintetizada. As misturas de açúcares obtidas destas reações foram fracionadas utilizando-se membranas de acetato de celulose, preparadas pela técnica de inversão de fase. O coeficiente de rejeição (Robs) dos açúcares aumentou com o aumento da pressão transmembrana utilizada na filtração e diminuiu com o aumento de sua concentração. Para a menor pressão aplicada, os valores de Robs obtidos foram 40% para monossacarídeos, 65-80% para os dissacarídeos e 100% para os trissacarídeos. A reação de síntese e fracionamento em simultâneo foi realizada com 10 U.mL-1 de enzima e 150 g.L-1 de lactose a 40°C. O efeito da pressão (20 e 24 bar) e da velocidade de circulação (1.7; 2.0 e 2.4 m.s-1) foram estudados e a quantificação dos açúcares foi feita através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O rendimento da reação e fracionamento em simultâneo foi de 60%, quando comparado com o rendimento da reação nas mesmas condições, mas sem permeação. Os coeficientes de rejeição foram distintos de acordo com as condições operacionais, sendo os monossacarídeos mais afetados que apresentaram rejeição de 40%, a 20 bar e 12% a 24 bar. A baixa rejeição dos monossacarídeos no meio reacional tem um papel fundamental na qualidade do produto final e na reação de hidrólise e síntese, uma vez que a sua presença inibe a atividade enzimática. Os GOS-4 foram totalmente retidos pela membrana e os GOS-3 apresentaram Robs em torno de 90%. Entre os dissacarídeos lactose, GOS-2 e GOS-2', os valores de Robs variaram de 41% a 84% de acordo com as condições operacionais utilizadas na filtração. Como esperado, a adsorção da enzima na membrana afeta o transporte dos sacarídeos através de sua estrutura, resultando em menor taxa de permeação.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 322859.pdf: 10872382 bytes, checksum: 0d07f647eea3fea87dfac2b70b47a73f (MD5) Previous issue date: 2013

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-06T00:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318837.pdf: 5744333 bytes, checksum: 7e7d4317f183327253ac9a1d2dfc21d0 (MD5) Previous issue date: 2013 / O objetivo principal deste trabalho é a preparação, caracterização e estudos catalítico e de detecção de lectinas por nanopartículas de prata (AgNPs) tendo compostos a base de açúcares como estabilizantes. Para atingir esse objetivo duas estratégias foram utilizadas, uma usando o polissacarídeo dextrana como estabilizante e outra usando compostos anfifílicos baseados em oligossacarídeos (maltose, lactose, maltoheptaose e xiloglucano). Em ambas estratégias, a otimização da preparação das AgNPs foi realizada utilizando-se análise multivariada baseada nas informações coletadas a partir da banda de ressonância de Plasmon de superfície (SPR) das AgNPs. Todas as AgNPs estáveis foram caracterizadas pelas técnicas de UV-Vis, TEM, SAXS e DLS. A atividade catalítica das AgNPs foram determinadas frente a reação de redução do p-nitrofenol (Nip) por NaBH4, como agente redutor, em água e misturas de água/etanol.Dois tipos diferentes de anfifílicos foram sintetizados, um com grupo alquino na junção do bloco de açucar com o bloco hidrofóbico e outro tipo com um grupo ácido carboxílico no final da parte hidrofóbica. Os anfifílicos foram caracterizados por 1H e 13C NMR e espectrometria de massas.A reação de redução do Nip por NaBH4 teve a melhor atividade catalítica com as nanopartículas AgNPs-dextran e Ag-Mal7NAcC12, com constante de velocidade normalizada para a área superfícial das NPs por unidade de volume de 1,41 e 1,11 s-1 m-2 L, repectivamente. Estes valores estão entre os maiores descritos na literatura. O efeito do solvente nesta reação foi avaliado por misturas de água e etanol. Aplicando uma reação superfícial pseudo-monomolecular como um artifício experimental, os dados cinéticos obtidos foram tratados de acordo com o modelo de Langmuir, que combinados com observações de tensão superfícial de misturas de água/etanol, revelaram que a adição de etanol inibe a reação, provavelmente pela competição com os íons BH4- pela superfície da nanopartícula, com a formação de uma monocamada de solvente. Finalmente, três sistemas diferentes (Ag-Mal7NAcC12, Ag-XGONAcC12 e Ag-LacNAcC12) foram testados como sensores para detecção de lectinas e somente Ag-Mal7NAcC12 mostrou interação específica com a Concanavalina A. <br> / The main goal of this work is the preparation, characterization and catalytic and lectins detection studies of silver nanoparticles (AgNPs) having sugar-based compounds as stabilizers. To achieve this goal two strategies were used, one using the polysaccharide dextran as stabilizer and other using amphiphile compounds based on oligosaccharides (maltose, lactose, maltoheptaose and xyloglucan). In both strategies the optimization of AgNPs preparation was realized using a multivariate analysis based in informations collected from the surface Plasmon resonance band (SPR) of AgNPs. All stable AgNPs were characterized by ultraviolet-visible spectroscopy (UV-vis), transmission electron microscopy (TEM), small angle X-ray scattering (SAXS) and dynamic light scattering (DLS) techniques. The catalytic activities of AgNPs were determined over the p-nitrophenol reduction reaction by NaBH4, as reducing agent, in water or water-ethanol mixtures. Two different types of amphiphiles were synthesized, one with an alkyne group in the junction of a sugar block with a hydrophobic block and the other with a carboxylic acid group in the end of hydrophobic part. The amphiphiles were characterized by 1H and 13C NMR and mass spectrometry.The Nip reduction reaction with NaBH4 showed the best catalytic activity with AgNPs-dextran and Ag-Mal7NAcC12 nanoparticles with the rate constant normalized to the surface area of the NPs per unit volume of 1.41 and 1.11 s-1 m-2 L, respectively. These values are among the highest ones found in literature. The solvent effect in this reaction was evaluated by mixtures of water and ethanol. Applying a pseudo-monomolecular surface reaction as an experimental artifice, the obtained kinetic data were treated according to the Langmuir model, which combined with water/ethanol surface tension observations revealed that addition of ethanol inhibit the reaction, most probably by competing with BH4- ions for the nanoparticles surface, with the formation of a solvent monolayer.Finally, three different systems (Ag-Mal7NAcC12, Ag-XGONAcC12 and Ag-LacNAcC12) were tested as sensor for lectin detection and Ag-Mal7NAcC12 nanoparticles showed specific interaction with the Concanavalin A.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-01Bitstream added on 2014-06-13T19:50:56Z : No. of bitstreams: 1 tortola_l_me_jabo.pdf: 311154 bytes, checksum: 539dc72b4296de7a2e76326a8c6c377d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Farelo de soja (FS) foi avaliado como substituto protéico da farinha de vísceras de frango (FVF) em rações extrusadas para cães, bem como a ação de enzimas exógenas sobre a digestibilidade dos nutrientes, formação de produtos de fermentação intestinal, composição da microbiota das fezes e resposta pós-prandiais de ureia. Duas formulações isonutritivas foram usadas em dois ensaios: FVF (28,9% de FVF, casca de soja como fonte de fibra) e dieta a base de FS (29,9% de FS). No experimento A, a dieta FS foi desdobrada em três dietas: FS-0, sem adição de enzimas; FS-1, 7.500U/kg de protease e 45U/kg de celulase; FS-2, 15.000U/kg de protease e 90U/kg de celulase, ambas adicionadas por cobertura após a extrusão. No experimento B, a dieta FS foi desdobrada em três dietas: FS-0, FS-1,140U/kg de protease, 8U/kg de celulase, 800U/kg de pectinase, 60U/kg de fitase, 40U/kg de betaglucanase e 20U/kg de xilanase; FS-2, 700U/kg de protease, 40U/kg de celulase, 4000U/kg de pectinase, 300U/kg de fitase, 200U/kg de betaglucanase e 100U/kg de xilanase, ambas adicionadas por cobertura após a extrusão. Cada experimento seguiu um delineamento em blocos com dois blocos de 12 cães beagle sadios e seis cães por dieta. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadoas por contrastes ortogonais e polinomiais (p<0,05). Em ambos os experimentos, a digestibilidade dos nutrientes e a energia metabolizável não diferiram entre as dietas (p>0,05). O uso de FS resultou em aumento da umidade fecal e da produção fecal (p<0,05). Altas concentrações de acetato, propionato e lactato e menor quantidade de amônia foram encontrados nas fezes de cães alimentados com FS (p<0,05). No experimento B, a adição de enzimas aumentou a concentração fecal de acetato, propionato e AGCC totais (p<0,05)... / Soybean meal (SBM) was evaluated as a protein substitute of poultry byproduct meal (PM) in extruded dog foods, as well the effects of exogenous enzymes supplementation on nutrient digestibility, fermentation end products formation, fecal microbiota composition and postprandial urea response. Two kibble isonutritive diets were used in two trials: PM based diet (28,9% of PM; soybean hulls as a fiber source); SBM based diet (29,9% of SBM). On experiment 1, the SBM diet was unfolded into three diets: SBM-0, without enzyme addition; SBM-1, covered after extrusion with 7,500Uprotease/kg and 45Ucelulase/kg; SBM-2, covered with 15,000Uprotease/kg and 90Ucelulase/kg. On experiment 2, the SBM diet was unfolded into three diets: SBM-0; SBM-1, covered with 140Uprotease/kg; 8Ucellulase/kg, 800Upectinase/kg, 60Uphytase/kg, 40Ubetaglucanase/kg and 20Uxylanase/kg; SMB-2, covered with 700Uprotease/kg, 40Ucellulase/kg, 4000Upectinase/kg, 300Uphytase/kg, 200U betaglucanase/kg and 100Uxylanase/kg. Each experiment followed a block design with two blocks of 12 health beagles, and 6 dogs per diet. Data was submitted to analysis of variance and means compared by orthogonal and polynomial contrasts (P<0.05). In both experiments, digestibility of nutrients and metabolizable energy did not differ between diets (P>0.05). The use of SBM resulted in increased faecal moisture and faecal production (P<0.05). High concentration of propionate, acetate and lactate, and lower amounts of ammonia were found in the feces of dogs fed SBM (P<0.05). In experiment 2 the addition of enzymes increased fecal concentration of propionate, acetate and total SCFA (P<0.05). Postprandial urea pick response and area under the curve were higher for dogs fed SBM diets (P<0.05). Soybean meal resulted in low faecal concentrations of total aerobes and total anaerobes (P<0.05) ... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Aulus Cavalieri Carciofi / Banca: João Martins Pizauro Júnior / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Resumo: Farelo de soja (FS) foi avaliado como substituto protéico da farinha de vísceras de frango (FVF) em rações extrusadas para cães, bem como a ação de enzimas exógenas sobre a digestibilidade dos nutrientes, formação de produtos de fermentação intestinal, composição da microbiota das fezes e resposta pós-prandiais de ureia. Duas formulações isonutritivas foram usadas em dois ensaios: FVF (28,9% de FVF, casca de soja como fonte de fibra) e dieta a base de FS (29,9% de FS). No experimento A, a dieta FS foi desdobrada em três dietas: FS-0, sem adição de enzimas; FS-1, 7.500U/kg de protease e 45U/kg de celulase; FS-2, 15.000U/kg de protease e 90U/kg de celulase, ambas adicionadas por cobertura após a extrusão. No experimento B, a dieta FS foi desdobrada em três dietas: FS-0, FS-1,140U/kg de protease, 8U/kg de celulase, 800U/kg de pectinase, 60U/kg de fitase, 40U/kg de betaglucanase e 20U/kg de xilanase; FS-2, 700U/kg de protease, 40U/kg de celulase, 4000U/kg de pectinase, 300U/kg de fitase, 200U/kg de betaglucanase e 100U/kg de xilanase, ambas adicionadas por cobertura após a extrusão. Cada experimento seguiu um delineamento em blocos com dois blocos de 12 cães beagle sadios e seis cães por dieta. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadoas por contrastes ortogonais e polinomiais (p<0,05). Em ambos os experimentos, a digestibilidade dos nutrientes e a energia metabolizável não diferiram entre as dietas (p>0,05). O uso de FS resultou em aumento da umidade fecal e da produção fecal (p<0,05). Altas concentrações de acetato, propionato e lactato e menor quantidade de amônia foram encontrados nas fezes de cães alimentados com FS (p<0,05). No experimento B, a adição de enzimas aumentou a concentração fecal de acetato, propionato e AGCC totais (p<0,05) ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Soybean meal (SBM) was evaluated as a protein substitute of poultry byproduct meal (PM) in extruded dog foods, as well the effects of exogenous enzymes supplementation on nutrient digestibility, fermentation end products formation, fecal microbiota composition and postprandial urea response. Two kibble isonutritive diets were used in two trials: PM based diet (28,9% of PM; soybean hulls as a fiber source); SBM based diet (29,9% of SBM). On experiment 1, the SBM diet was unfolded into three diets: SBM-0, without enzyme addition; SBM-1, covered after extrusion with 7,500Uprotease/kg and 45Ucelulase/kg; SBM-2, covered with 15,000Uprotease/kg and 90Ucelulase/kg. On experiment 2, the SBM diet was unfolded into three diets: SBM-0; SBM-1, covered with 140Uprotease/kg; 8Ucellulase/kg, 800Upectinase/kg, 60Uphytase/kg, 40Ubetaglucanase/kg and 20Uxylanase/kg; SMB-2, covered with 700Uprotease/kg, 40Ucellulase/kg, 4000Upectinase/kg, 300Uphytase/kg, 200U betaglucanase/kg and 100Uxylanase/kg. Each experiment followed a block design with two blocks of 12 health beagles, and 6 dogs per diet. Data was submitted to analysis of variance and means compared by orthogonal and polynomial contrasts (P<0.05). In both experiments, digestibility of nutrients and metabolizable energy did not differ between diets (P>0.05). The use of SBM resulted in increased faecal moisture and faecal production (P<0.05). High concentration of propionate, acetate and lactate, and lower amounts of ammonia were found in the feces of dogs fed SBM (P<0.05). In experiment 2 the addition of enzymes increased fecal concentration of propionate, acetate and total SCFA (P<0.05). Postprandial urea pick response and area under the curve were higher for dogs fed SBM diets (P<0.05). Soybean meal resulted in low faecal concentrations of total aerobes and total anaerobes (P<0.05) ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-28T13:08:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 YepezSilva-Santisteban_BernardoOnagar_M.pdf: 14493698 bytes, checksum: 7f730439d304de65a8b8c84f8e829215 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A enzima inulinase oferece uma alternativa interessante na produção de xaropes enriquecidos em frutose usando como matéria prima polímeros de reserva de inulina, os quais se encontram na natureza como reserva de carboidratos. Alem disso as inulinases apresentam atividade de transferase o que permite a produção de frutoligosacarídeos a partir de dímeros como a sacarose. A frutose apresenta vantagens em relação à sacarose, como um adoçante confiável e alternativo por ser mais saudável, possuir maior poder adoçante e pode dissimular o sabor amargo da sacarina. A levedura Kluyveromyces marxianus varo bulgaricus ATCC16045 tem sido amplamente estudada por ser um microrganismo hiperprodutor de inulinase. Uma ampla revisão bibliográfica revela que a produção de muitos sistemas de enzimas e influenciada pelos parâmetros de aeração e agitação, por tanto e com base em estudos prévios sobre otimização de meio de cultivo estudou-se a influencia da agitação, aeração e tipo de agitador (Rushton, hélice naval e "ptiched blade up") na produção da enzima em fermentações em batelada simples. O efeito da agitação e aeração sobre a atividade da enzima foi estudado usando sistemas com duas turbinas de Rushton. A faixa estudada foi 50 a 250 rpm e 0,5 a 2,0 wm. Os resultados experimentais mostraram que a aeração, com agitação maior de 150 rpm não influenciou a produção da enzima, portanto estudou-se o incremento da agitação hasta 550 rpm mantendo a aeração a 1,0 vvm. A melhor produção foi atingida a 450 rpm com uma produção de 121Ul/mL. O estudo com diferentes tipos de agitadores foi feito nesta condição ótima, verificando-se que o agitador "pitched blade up" apresentou o melhor desempenho, produzindo 176 UllmL. Foram também, monitorados o pH, oxigênio dissolvido (OD), viabilidade celular e o kLa. Observou-se que com as turbinas de Rushton a atividade e a biomassa foram maiores quando o kLa foi maior. No entanto, com outros tipos de agitadores esta relação foi alterada provavelmente em função dos mecanismos de fluxo e cisalhamento que provocaram a queda da viabilidade. Observou-se, através da relação o kLa e o desempenho do pH e OD, que o kLa determinou o metabolismo usado pela levedura. / Abstract: Inulinase offers an interesting alternative for the produetion of high fruetose syrups, using inulin as raw material. This enzyme can also have fructosiltransfarase activity, which enable the production of fructooligosacharides form sucrose. Fructose presents some advantages relating to sucrose, as a reliable and more healthier sweetener, as well as higher sweetness. The yeast Kluyveromyces marxianus var bulgaricus ATCC 16045 has been utilized for inulinase production since it has been proved as an excellent enzyme producer. Factorial design and response surface techniques were used to optimize the fermentation conditions for the production of inulinase by Kluyveromyces marxianus ATCC 16045. Sucrose was used as carbon source instead ofinulin. Aeration, agitation and type of impeller (disk turbine, marine and pitehed blade) were studied in a stirred reactor. Two factorial designs 22 were carried out. Agitation speed varied from 50 to 550 rpm, aeration rate from 0.5 to 2.0 vvm. From the factorial designs, it has been concluded that the aeration rate didn't influence the inulinase production, only the agitation speed has significant effect. The best result with the disk impeller at 450 rpm and aeration at 1.0 wm was an activity of 121 Ul/ml, after 72 hours of fermentation. Since only agitation is a significant factor, it was inereased up to 550 rpm, using the three impellers. High agitation velocity with disk impeller enhanced death rate and decreased enzyme production. The marine impeller didn't improve the enzyme production. The best production was achieved with the pitehed blade impeller. The enzyme production with this impeller achieved 176 Ul/ml, at 450 rpm and 1.0 wm. It has been shown that the inulinase production was strongly influenced by aeration and agitation parameters and impeller type. Also, it was observed an important relation between Kt.aand pH and dissolved oxygen through out the fermentation. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientadores: Elizete Aparecida Lomazi, Maria Ângela Reis de Góes Monteiro Antonio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T20:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beleli_CeliaAparecidaValbon_M.pdf: 5243648 bytes, checksum: 811389ed5c344cf2a94b3617554d2537 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Constipação é um sintoma comum na prática pediátrica. É usualmente definida em termos da dificuldade da passagem das fezes da consistência e frequência das evacuações. Uma dieta rica em fibras alimentares pode promover efeitos benéficos no tratamento da constipação. Além das fibras, alimentos funcionais, como os prebióticos, têm sido considerados úteis na regulação do hábito intestinal. Prebióticos são definidos como componentes alimentares não digeríveis, que afetam beneficamente o hospedeiro por estimularem de maneira seletiva o crescimento de bactérias potencialmente desejáveis no intestino, principalmente no cólon. Atualmente existem poucos ensaios clínicos avaliando prebióticos no tratamento da constipação em crianças. Este ensaio clínico teve como objetivo avaliar o efeito do Galactooligossacarídeo (GOS) em crianças constipadas. Um ensaio com duração de 75 dias, com intervenção do tipo duplo-cego, controlada por placebo e delineamento "cross over" com 2 sequências de avaliação e 2 tratamentos, placebo e galactooligossacarídeo, incluiu 20 crianças (4 a 16 anos) com constipação funcional definida pelos critérios de ROMA III. As crianças receberam 6g de GOS ou maltodextrina, as soluções foram ingeridas por 30 dias, seguidas de período de "washout" de 15 dias e, após, por mais 30 dias, utilizaram maltodextrina ou GOS, de maneira alternada com o produto ingerido nos primeiros 30 dias. O estudo foi montado segundo um delineamento crossover (GOS e PLACEBO). Onze pacientes foram avaliados de acordo com a sequência GOS/placebo e nove pacientes com a sequência PLACEBO/GOS. O escore de gravidade foi medido no início, 2ª e 4ª semanas em cada experimento. Escores clínicos, elaborados para esse ensaio, foram utilizados para avaliar o efeito dos produtos considerando: frequência das evacuações, presença de dor/desconforto/esforço na evacuação, consistência das fezes e perda de apetite/saciedade precoce. Os escores foram calculados no dia zero (D0), 15° dia (D15) e 30° dia (D30) de estudo, em cada fase do "cross over". Duas avaliações- - do tempo de trânsito oroanal com carvão ativado foram realizadas no D0 e D30 de cada sequência. Análise descritiva através de medidas de posição e dispersão foram realizadas para variáveis numéricas. Para a análise deste estudo utilizou-se ANOVA para medidas repetidas com transformação por postos. O nível de significância adotado para os testes estatísticos foi 5%. O GOS apresentou efeito significativo comparado ao placebo, diminuindo a consistência das fezes com p< 0,0001 e aumentando a frequência das evacuações, p=0,0014. Os valores dos testes de tempo de trânsito oroanal foram significantemente inferiores no período de uso do GOS com p <0,0001. A utilização do GOS em crianças com constipação funcional leve foi efetiva na melhora clínica dos sintomas dessa constipação e pode representar uma medida alternativa na terapêutica dessa condição / Abstract: Constipation is a common symptom in the pediatric clinics. It is usually defined in terms of difficulty of passage of faeces, faecal consistency and frequency of evacuation. A diet containing high amounts in fiber can promote beneficial effects constipation therapy. Beside the fiber, functional foods, such as prebiotics, have been considered useful to regulate bowel movements. Prebiotic is defined as nondigestible food components that affect the host for stimulating selectively growth of potentially beneficial bacteria in the intestines, specially the colon. Nowadays, there are few clinical trials evaluating prebiotic use for relieving constipation symptoms in children. This clinical trial aimed to evaluate the effect of Galactooligossacharide (GOS) on constipated children. The trial consisted of a 75-day period double blind intervention, controlled with placebo and cross over delimitation, with two sequences of evaluation and two treatments, placebo and galactooligossacharide. It included 20 children (4-16 years) with functional constipation defined by the ROMA III criteria. Children have received 6g of GOS or 6g Maltodextrin (placebo), the solution was ingested for 30 days, followed by a washout period of 15 days, and afterwards, 30 more days of GOS or Maltodextrin, alternately with the product ingested in the first 30 days. The study was designed according to crossover delimitation (GOS and Placebo). Eleven patients were evaluated according to the sequence GOS/placebo and nine patients with the sequence Placebo/GOS. A severity score was measured at the beginning, 2nd and 4th week in each experiment. Clinical scores, elaborated for this Trial, were used to evaluate the effect of the products considering: stool frequency, presence of pain/discomfort/effort during evacuation, consistency of stool and loss of appetite or early satiety. Scores were calculated at day zero (D0), 15th day (D15) and 30th day (D30) of the study, in each phase of the "crossover". Oroanal transit evaluation was performed on D0 and D30 of each sequence, by activated charcoal ingestion.- Descriptive analysis trough measures of position and dispersion were realized for numerical variables. ANOVA was used for the analysis of GOS effect. The significance level assumed for the statistical tests was 5%. The GOS presented significant effect compared to placebo, reducing the stool consistency p< 0,0001 and rising the stool frequency, p=0,0014. The value of the oroanal transit time were significant lower in GOS period, p<0,0001. GOS was effective at the improvement of mild constipation symptoms and may represent an alternative option for the therapy of this condition / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestra em Ciências

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Banca: Sonia Marli Zingaretti / Banca: Liliane Marcia Mertz Henning / Resumo: Com o atual cenário de mudanças climáticas, observa-se a tendência a eventos de seca mais longos e recorrentes, desta forma a obtenção de plantas mais tolerantes à seca figura como um dos principais investimentos dentro da ciência e tecnologia nacional. Os oligossacarídeos da família das rafinoses (RFOs) desempenham múltiplas funções nas plantas e sabe-se que estes são acumulados nos tecidos vegetais em situações de déficit hídrico, garantindo a estabilidade das membranas celulares, consequentemente mantendo as funções vitais da planta. Por sua vez, a enzima galactinol sintase (GolS, EC 2.4.1.123), catalisa o primeiro passo na biossíntese dos oligossacarídeos dos RFOs desempenhando um importante papel regulador na partição do carbono entre sacarose e RFOs. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi introduzir em soja, via Agrobacterium tumefaciens, a construção gênica 35S:AtGolS2 e caracterizar molecularmente e fisiologicamente os eventos obtidos sob déficit hídrico. Para o processo de transformação, a cultivar convencional de soja BRS 184 foi utilizada e os eventos obtidos foram caracterizados quanto ao número de cópias através da técnica de qPCR. Para a análise da expressão gênica constitutiva o RNA total dos eventos, em condições bem irrigadas, foi extraído e a expressão determinada via RT-qPCR. A taxa de segregação foi calculada através do teste do X2 (p≤ 0.05). Com base nos resultados obtidos, dois eventos (2Ia1 e 2Ia4) foram selecionados para serem analisados quanto a respostas moleculares e fisiológicas sob déficit hídrico induzido em condições de casa de vegetação. Os resultados mostraram que nas plantas do evento 2Ia4 o maior acumulo de água associado a menor área foliar na condição controle levou a manutenção das trocas gasosas causado pela redução na transpiração foliar, maior acúmulo de água no substrato e acúmulo de transcritos de rafinose e galactinol nos tecidos / Abstract: With the current scenario of climate change, there is a tendency to longer and recurrent drought events, thus obtaining more drought tolerant plants figure as a major investment in the national science and technology. Raffinose family oligosaccharides (RFOs) plays multiple functions in plants and it is known that these are accumulated in plant tissues in water deficit situations, guaranteeing the stability of cell membranes, thus maintaining the vital functions of the plant. In turn, galactinol synthase (GolS, EC 2.4.1.123) catalyzes the first step in the biosynthesis of RFOs plays an important regulatory role in carbon partitioning between sucrose and orphans. Thus, our objective was to introduce gene construction 35S:AtGolS2 via Agrobacterium tumefaciens in soybean plants and characterize molecularly and physiologically events obtained under water deficit. In this context, the conventional soybean BRS 184 was used in the transformation process and the soybean events were molecularly characterized in regard to the transgene copy number by qPCR technique. For the analysis of constitutive gene expression total RNA of events, well-watered conditions, was extracted and the expression determined by RT-qPCR. The segregation rate was calculated using the X2 test (p ≤ 0.05). Based on our results, two events (2Ia1 and 2Ia4) were selected to be analyzed for physiological responses under drought simulated under greenhouse conditions. The results showed that the plants 2Ia4 event the largest accumulation of water associated with lower leaf area in the control condition led to maintenance of gas exchange caused by the reduction in leaf transpiration, increased water accumulation in the substrate and accumulation of raffinose and galactinol transcripts in tissues. Thus, the increased levels of these carbohydrates would have made these act as osmoprotectors, enabling the recommendation of 2Ia4 plants breeding programs aimed at tolerance to drought / Mestre

Orientador: Maria de Lourdes Corradi Custodio da Silva / Coorientador: Ana Flora Dalberto Vasconcelos / Banca: Maria Antonia Pedrini Colabone Celligoi / Banca: Valdemiro Pereira Carvalho Junior / Resumo: Polissacarídeos e oligossacarídeos de plantas, algas, bactérias e fungos representam um grupo de moléculas com potencial para aplicação em terapia medicamentosa e em biotecnologia. Os oligossacarídeos podem ser obtidos, a partir dos respectivos polissacarídeos, por degradação química, física ou bioquímica. β-glucanas secretadas pelo fungo ascomiceto Lasiodiplodia theobromae (EPSgraviola, EPSlaranja e EPSmanga), cujas soluções apresentam elevado grau de viscosidade, dificultando os testes de atividade biológica, foram hidrolisadas parcialmente com TFA 0,2 M, 100 °C, em tempos variáveis, para a obtenção dos respectivos oligossacarídeos, que foram analisados por cromatografia líquida de íons. O EPSmanga mostrou-se, nas condições estudadas, o substrato ideal para a produção de oligossacarídeos, especialmente aos 45 minutos de hidrólise. As frações solúveis, contendo o material hidrolisado, foram submetidas, inicialmente, à cromatografia de filtração em gel Sephadex G-15, que forneceu dois picos, um composto predominantemente por mono e dissacarídeos e outro contendo oligossacarídeos maiores, de onde foi separada a Fração I, a qual foi submetida à cromatografia de adsorção em carvão-Celite, utilizando um gradiente descontínuo de etanol-água 0 a 60% (v/v). A fração etanol-água a 50%, denominada Fração II, contendo a maior proporção de oligossacarídeos com maior DP foi submetida a uma segunda condição de eluição, utilizando um gradiente contínuo de etanol-água 42-49%, gerando frações... / Abstract: Polysaccharides and oligosaccharides of plants, algae, bacteria and fungi represent a group of molecules that have potential to application in drug therapy and in biotechnology. The oligosaccharides can be obtained, from their respective polysaccharides, by chemical, physical or biochemical degradation. β-glucans secreted by the fungus Lasiodiplodia theobromae (EPSgraviola, EPSorange e EPSmango), whose solutions have high viscosity, what makes the tests of biological activity difficult, were partially hydrolyzed with TFA 0,2 M, 100 °C, in variable times, in order to obtain their respective oligosaccharides, that were analyzed by liquid chromatography of ions. The EPSmango was, in the studied conditions, the ideal substrate to the production of oligosaccharides, especially at 45 minutes of hydrolysis. The soluble fractions, that contain the hydrolyzed material, were initially submitted to gel filtration chromatography on Sephadex G-15, that provided two peaks, one peak with mono and disaccharides and the other one containing bigger oligosaccharides, named Fraction I. That fraction I was submitted to charcoal-Celite adsorption chromatography using a discontinuous gradient ethanol-water 0 to 60% (v/v). The fraction containing oligosaccharides with higher DP (ethanol-water 50%) was named Fraction II, that was submitted to charcoal-Celite adsorption chromatography using a continuous gradient ethanol-water 42-49%, generating fractions still composed of a mixture of oligosaccharides ... / Mestre