O nitrito pode ser reduzido a NO de forma dependente do pH ácido do estômago ou por enzimas com atividade nitrito-redutase. O tratamento com omeprazol, previne parte dos efeitos anti-hipertensivos do nitrito administrado por via oral por aumentar o pH gástrico. Contudo, nenhum estudo até o momento avaliou se, assim como o omeprazol, a ranitidina também é capaz de atenuar os efeitos anti-hipertensivos do nitrito de sódio por aumentar o pH gástrico. Nesse estudo, examinamos se a administração oral de ranitidina poderia prejudicar os efeitos anti-hipertensivos do nitrito de sódio administrados por via oral, por interferir na formação de NO e espécies nitrosiladas a partir do nitrito. A fim de verificar a influência da ranitidina no efeito hipotensor do nitrito de sódio, utilizamos animais tratados agudamente com LNAME pré-tratados com ranitidina, omeprazol e veículo e, posteriormente, com nitrito de sódio 15mg/kg. Como esperado, o tratamento com L-NAME resultou em aumento na pressão arterial média (PAM). O pH gástrico foi diferente entre os grupos, tendo um aumento no pH dos animais tratados com ranitidina e omeprazol, quando comparado ao veículo, e os tampões tinham o mesmo pH do veículo e das drogas. O nitrito de sódio exerceu efeitos anti-hipertensivos significativos nos grupos estudados. No entanto, foram observadas menores diminuições na PAM em ratos tratados com omeprazol e ranitidina em comparação aos ratos que receberam veículo. Esses achados foram associados a diminuições nas concentrações gástricas de NO e diminuições nos níveis plasmáticos de espécies nitrosiladas. Além disso, houve aumento nas concentrações de nitrito no estômago. Não foram observadas diferenças nas concentrações de nitrito no plasma. Além disso, não foram observadas diferenças nos níveis de NOx no plasma e estômago entre os grupos do estudo. Os animais tratados com tampão apresentaram resultados similares aos tratados com as drogas. Nossos resultados sugerem que a ranitidina, ao aumentar o pH gástrico, afeta as respostas anti-hipertensivas ao nitrito de sódio oral por diminuir a formação de NO e espécies nitrosiladas. Este fato é reforçado pelo aumento do nitrito no estômago, sugerindo uma diminuição na conversão de nitrito a NO e espécies nitrosiladas no ambiente gástrico. / Nitrite can be reduced to NO depending on acidic pH of the stomach or by enzymes with nitrite reductase activity. Treatment with omeprazole attenuates the antihypertensive effects of oral nitrite by increasing of gastric pH. However, studies are still necessary to further evaluate wheter ranitidine is also able to attenuate the antihypertensive effects of sodium nitrite by increasing gastric pH. In this study, we examined whether oral administration of ranitidine could impair oral antihypertensive effects of sodium nitrite by interfering with the formation of NO and nitrosylated species from nitrite. In order to analyze the influence of ranitidine under hypotensive effect of sodium nitrite, rats were treated with L-NAME and pretreated with ranitidine, omeprazole, vehicle or buffer, subsequently all the groups were treated with sodium nitrite 15 mg/kg. The L-NAME treatment increase mean arterial pressure (MAP). The gastric pH was different among the groups, there was an increased in rats gastric pH treated with ranitidine and omeprazole compared to the vehicle. The buffer group had the same pH of vehicle and drugs treatment. Sodium nitrite exerted significant antihypertensive effects in the groups studied. However, lesser decreases in MAP were observed in rats treated with omeprazole and ranitidine compared to rats that received vehicle. These findings were associated with a lower NO gastric concentrations as well as nitrosylated species plasma levels. In addition, there was an increased in nitrite concentrations in the stomach. No differences were observed in plasma nitrite levels. Moreover, there was not any significant difference in plasma and stomach NOx levels among the studied groups. The rats treated with buffer showed similar results to those treated with the drugs. Together these data demonstrated that ranitidine, through increased gastric pH, affects antihypertensive responses to oral sodium nitrite by reducing the formation of NO and nitrosylated species. This fact is reinforced by higher levels in nitrite concentrations in the stomach, thereby it suggests a lower conversion of nitrite to NO and nitrosylated species in the gastric environment.

O NO regula diversos sistemas orgânicos. No sistema cardiovascular participa ativamente na regulação do tônus vascular entre outras funções. Disfunções na produção ou disponibilidade de NO podem comprometer sua atuação fisiológica. No âmbito vascular isto pode participar da hipertensão. Além da produção de NO pelas óxido nítrico sintases, outras vias paralela de produção fisiológica de NO a partir do nitrito tem sido descritas. O nitrito é o produto inicial da oxidação do NO, sendo posteriormente oxidado a nitrato. Sabe-se que estas três moléculas formam um ciclo dentro do organismo, onde o nitrato é excretado na saliva e convertido a nitrito pelas bactérias bucais.Este nitrito é deglutido com a saliva e exerce seus efeitos, através da conversão a NO. A conversão de nitrito a NO pode ocorrer de forma enzimática ou não enzimática. Como forma não enzimática, o nitrito é convertido a NO pela reação com H+. Esta redução ocorre principalmente no estômago. Esta tese visa elucidar possíveis mecanismos responsáveis pelos efeitos anti-hipertensivos do nitrito de sódio. Avaliamos ratos 2 rins 1 clipe (2R1C) tratados com nitrito e nitrato e verificamos os efeitos anti-hipertensivo destes. De forma Interessante, o aumento do pH gástrico com omeprazol impediu o efeito anti-hipertensivo tanto do nitrito quanto do nitrato. O omeprazol não gerou qualquer diferença na concentração plasmática de nitrito e nitrato. Foi verificado que o tratamento com nitrito e nitrato resultou em aumento das espécies nitrosiladas no plasma e este aumento foi impedido pelo omeprazol. Também testamos a influência do ciclo entero-salivar no efeito do nitrito e nitrato. Verificamos que o tratamento com enxaguante bucal levou ao bloqueio do efeito anti-hipertensivo do nitrato, mas não alterou este efeito nos animais tratados com nitrito. Em todas as abordagens experimentais o efeito anti-hipertensivo do nitrito apenas ocorreu quando houve aumento da concentração plasmática de espécies nitrosiladas. / Nitric Oxide plays many functional roles in physiological systems. In the cardiovascular system it participates in a unique way in the regulation of vascular tone among other functions. Dysfunctions in the production or availability of NO may compromise their physiological activity and participate in hypertension. Besides the production of NO by the nitric oxide synthase, other physiological pathways of NO production from nitrite have been described. The nitrite and nitrate are oxidation products of NO. Further nitrite is oxidized to nitrate. These three molecules are known to forma cycle in the body. Nitrate is excreted in saliva and reduced to nitrite by oral bacteria. Nitrite then is swallowed with the saliva and exerts its effects through conversion to NO. The conversion of nitrite to NO may occur by enzymatic or non-enzymatic manner. As a non-enzymatic way nitrite is reduced to NO by reaction with H+.This reaction occurs mainly in the stomach. This thesis aims to elucidate possible mechanisms responsible for the antihypertensive effects of sodium nitrite. We studied 2K1C rats treated with nitrite and nitrate and checked anti-hypertensive effects of these molecules. The increased gastric pH by omeprazole prevented the anti-hypertensive effect of nitrite and nitrate. Omeprazole did not cause any differences in plasma nitrite and nitrate. It was found that treatment with nitrite and nitrate resulted inincreased nitrosylated species in the plasma, and this increase was blocked by omeprazole. We also tested the influence of the entero-salivarycycle effect of nitrite and nitrate. We found that treatment with mouthwash blunted the antihypertensive effect of nitrate but this effect did not change in animals treated with nitrite. Interestingly in all experimental approaches the anti-hypertensive effect of nitrite only occurred when there was an increase in the plasma concentration of nitrosylated species

O NO regula diversos sistemas orgânicos. No sistema cardiovascular participa ativamente na regulação do tônus vascular entre outras funções. Disfunções na produção ou disponibilidade de NO podem comprometer sua atuação fisiológica. No âmbito vascular isto pode participar da hipertensão. Além da produção de NO pelas óxido nítrico sintases, outras vias paralela de produção fisiológica de NO a partir do nitrito tem sido descritas. O nitrito é o produto inicial da oxidação do NO, sendo posteriormente oxidado a nitrato. Sabe-se que estas três moléculas formam um ciclo dentro do organismo, onde o nitrato é excretado na saliva e convertido a nitrito pelas bactérias bucais.Este nitrito é deglutido com a saliva e exerce seus efeitos, através da conversão a NO. A conversão de nitrito a NO pode ocorrer de forma enzimática ou não enzimática. Como forma não enzimática, o nitrito é convertido a NO pela reação com H+. Esta redução ocorre principalmente no estômago. Esta tese visa elucidar possíveis mecanismos responsáveis pelos efeitos anti-hipertensivos do nitrito de sódio. Avaliamos ratos 2 rins 1 clipe (2R1C) tratados com nitrito e nitrato e verificamos os efeitos anti-hipertensivo destes. De forma Interessante, o aumento do pH gástrico com omeprazol impediu o efeito anti-hipertensivo tanto do nitrito quanto do nitrato. O omeprazol não gerou qualquer diferença na concentração plasmática de nitrito e nitrato. Foi verificado que o tratamento com nitrito e nitrato resultou em aumento das espécies nitrosiladas no plasma e este aumento foi impedido pelo omeprazol. Também testamos a influência do ciclo entero-salivar no efeito do nitrito e nitrato. Verificamos que o tratamento com enxaguante bucal levou ao bloqueio do efeito anti-hipertensivo do nitrato, mas não alterou este efeito nos animais tratados com nitrito. Em todas as abordagens experimentais o efeito anti-hipertensivo do nitrito apenas ocorreu quando houve aumento da concentração plasmática de espécies nitrosiladas. / Nitric Oxide plays many functional roles in physiological systems. In the cardiovascular system it participates in a unique way in the regulation of vascular tone among other functions. Dysfunctions in the production or availability of NO may compromise their physiological activity and participate in hypertension. Besides the production of NO by the nitric oxide synthase, other physiological pathways of NO production from nitrite have been described. The nitrite and nitrate are oxidation products of NO. Further nitrite is oxidized to nitrate. These three molecules are known to forma cycle in the body. Nitrate is excreted in saliva and reduced to nitrite by oral bacteria. Nitrite then is swallowed with the saliva and exerts its effects through conversion to NO. The conversion of nitrite to NO may occur by enzymatic or non-enzymatic manner. As a non-enzymatic way nitrite is reduced to NO by reaction with H+.This reaction occurs mainly in the stomach. This thesis aims to elucidate possible mechanisms responsible for the antihypertensive effects of sodium nitrite. We studied 2K1C rats treated with nitrite and nitrate and checked anti-hypertensive effects of these molecules. The increased gastric pH by omeprazole prevented the anti-hypertensive effect of nitrite and nitrate. Omeprazole did not cause any differences in plasma nitrite and nitrate. It was found that treatment with nitrite and nitrate resulted inincreased nitrosylated species in the plasma, and this increase was blocked by omeprazole. We also tested the influence of the entero-salivarycycle effect of nitrite and nitrate. We found that treatment with mouthwash blunted the antihypertensive effect of nitrate but this effect did not change in animals treated with nitrite. Interestingly in all experimental approaches the anti-hypertensive effect of nitrite only occurred when there was an increase in the plasma concentration of nitrosylated species

Graduation date: 1995

The aryl hydrocarbon receptor (AHR) mediates the toxic effects of halogenated aromatic hydrocarbons (HAHs), including 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin, 2,3,4,7,8-pentachlorodibenzofuran and 2,3,7,8-tetrachlorodibenzofuran. Y322 is believed to play a role in binding-independent activation of AHR by atypical inducers, such as omeprazole. I examined AHR-mediated regulation of and coactivator recruitment to CYP1A1, CYP1B1, HES1 and TiPARP in T-47D and HuH7 cells. All compounds induced expression of each gene in both cell lines, with some temporal differences between the HAHs and omeprazole. Chromatin immunoprecipitation assays demonstrated activator-, cell line- and gene-selectivity in AHR coactivator recruitment. Omeprazole induced AHR degradation which was prevented by MG-132 pre-treatment. Y322 was found to be important for maximal AHR activation by 2,3,7,8-TCDD and 2,3,4,7,8-PeCDF, but required for 2,3,7,8-TCDF and Omp in an AHR-deficient MCF-7 cells. My findings provide further evidence for cell-, gene- and ligand-dependent differences in AHR-mediated gene expression and coactivator recruitment, and a role for Y322 in AHR activation.

The aryl hydrocarbon receptor (AHR) mediates the toxic effects of halogenated aromatic hydrocarbons (HAHs), including 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin, 2,3,4,7,8-pentachlorodibenzofuran and 2,3,7,8-tetrachlorodibenzofuran. Y322 is believed to play a role in binding-independent activation of AHR by atypical inducers, such as omeprazole. I examined AHR-mediated regulation of and coactivator recruitment to CYP1A1, CYP1B1, HES1 and TiPARP in T-47D and HuH7 cells. All compounds induced expression of each gene in both cell lines, with some temporal differences between the HAHs and omeprazole. Chromatin immunoprecipitation assays demonstrated activator-, cell line- and gene-selectivity in AHR coactivator recruitment. Omeprazole induced AHR degradation which was prevented by MG-132 pre-treatment. Y322 was found to be important for maximal AHR activation by 2,3,7,8-TCDD and 2,3,4,7,8-PeCDF, but required for 2,3,7,8-TCDF and Omp in an AHR-deficient MCF-7 cells. My findings provide further evidence for cell-, gene- and ligand-dependent differences in AHR-mediated gene expression and coactivator recruitment, and a role for Y322 in AHR activation.

O citalopram (CITA), inibidor seletivo da recaptação da serotonina, é disponível na clínica como mistura racêmica dos enantiômeros (+)-(S) e (-)-(R) ou como enantiômero puro (+)-(S)-CITA. O CITA é metabolizado pelo CYP2C19, CYP2D6 e CYP3A ao desmetilcitalopram (DCITA) e pelo CYP2D6 ao didesmetilcitalopram. O estudo investiga a influência de inibidores enzimáticos no metabolismo enantiosseletivo do CITA em ratos e em voluntários sadios. Os ratos machos Wistar (n=6 para cada grupo) foram tratados com dose única de 20 mg/Kg de CITA (grupo controle) ou pré-tratados com 80 mg/Kg de quinidina (grupo quinidina), 10 mg/Kg de fluvoxamina (grupo fluvoxamina) ou 50 mg/Kg de cetoconazol (grupo cetoconazol). As amostras de sangue foram colhidas dos ratos até 20 h após a administração do CITA. Os voluntários sadios fenotipados como metabolizadores extensivos (EM) do CYP2C19 (omeprazol como fármaco marcador), EM do CYP2D6 (debrisoquina como fármaco marcador) e com atividade normal do CYP3A (midazolam como fármaco marcador) receberam dose única p.o. de 20 mg de CITA racêmico associado ou não ao omeprazol (20 mg/dia durante 18 dias). Os enantiômeros do CITA e do DCITA foram analisados no sistema LC-MS/MS, com a coluna quiral Chiralcel OD-R e fase móvel constituída por acetonitrila:metanol:água (30:30:40 v/v/v) contendo 0,05 % de dietilamina. O método foi linear no intervalo de concentrações de 0,1 20 ng de cada enantiômero do CITA e DCITA/mL de plasma humano e de de 0,1 500 ng de cada enantiômero do CITA e DCITA/mL de plasma de rato. Os coeficientes de variação obtidos nos estudos da precisão e a inexatidão foram inferiores a 15 % para plasma humano e plasma de ratos. A disposição cinética do CITA é enantiosseletiva nos ratos dos grupos controle (razão de AUCS/R de 0,4), quinidina (razão de AUCS/R de 0,5) e cetoconazol (razão de AUCS/R de 0,8). A inibição do CYP2D pela quinidina resultou em inibição do metabolismo do CITA e do DCITA de maneira não enantiosseletiva. A inibição do CYP2C pela fluvoxamina e do CYP3A pelo cetoconazol resultou em inibição somente do metabolismo do (+)-(S)-CITA. A disposição cinética do CITA em voluntários sadios é enantiosseletiva na ausência de tratamento com o omeprazol com observação de maior proporção plasmática do enantiômero (-)-(R)-CITA. A razão de AUCS/R obtida para o CITA foi de 0,56 e para o metabólito DCITA foi de 1,06. A administração de CITA racêmico a voluntários sadios em tratamento com o omeprazol exibe perda da enantiosseletividade na farmacocinética do CITA. A razão de AUCS/R foi de 0,96 para o CITA e de 0,92 para o DCITA. A administração de omeprazol em doses múltiplas a voluntários sadios inibe de maneira enantiosseletiva o metabolismo do eutômero (+)-(S)-CITA com aumento das concentrações plasmáticas em aproximadamente 140%. / Citalopram (CITA), a selective serotonin reuptake inhibitor, is available for clinical use as a racemic mixture of the (+)-(S) and (-)-(R) enantiomers or as the pure (+)-(S)-CITA enantiomer. CITA is metabolized by CYP2C19, CYP2D6 and CYP3A to demethylcitalopram (DCITA) and by CYP2D6 to didemethylcitalopram. The present study investigated the influence of enzyme inhibitors on the enantioselective metabolism of CITA in rats and healthy volunteers. Male Wistar rats (n=6 for each group) received a single dose of 20 mg/kg CITA (control group) or were pretreated with 80 mg/kg quinidine (quinidine group), 10 mg/kg fluvoxamine (fluvoxamine group), or 50 mg/kg ketoconazole (ketoconazole group). Blood samples were collected from the animals up to 20 h after the administration of CITA. Healthy volunteers phenotyped as extensive metabolizers of CYP2C19 (omeprazole as marker drug) and of CYP2D6 (debrisoquine as marker drug) and those with normal CYP3A activity (midazolam as marker drug) received a single oral dose of 20 mg racemic CITA combined or not with omeprazole (20 mg/day for 18 days). The CITA and DCITA enantiomers were analyzed by LC-MS/MS using a Chiralcel OD-R chiral column and a mobile phase of acetonitrile:methanol:water (30:30:40, v/v/v) containing 0.05% diethylamine. The method was linear in the concentration range of 0.1-20 ng of each CITA and DCITA enantiomer/mL human plasma and of 0.1-500 ng of each CITA and DCITA enantiomer/mL rat plasma. Accuracy and precision were below the acceptance limits of 15% for human and rat plasma. The kinetic disposition of CITA was enantioselective in rats of the control (AUCS/R ratio = 0.4), quinidine (AUCS/R ratio = 0.5) and ketoconazole (AUCS/R ratio = 0.8) groups. The inhibition of CYP2D by quinidine resulted in the non-enantioselective inhibition of the metabolism of CITA and DCITA. The inhibition of CYP2C by fluvoxamine and of CYP3A by ketoconazole only inhibited the metabolism of (+)-(S)-CITA. The kinetic disposition of CITA in healthy volunteers was enantioselective in the absence of treatment with omeprazole, with the observation of a higher plasma proportion of the (-)-(R)-CITA enantiomer. The AUCS/R ratio was 0.56 for CITA and 1.06 for the DCITA metabolite. The administration of racemic CITA to healthy volunteers treated with omeprazole showed a loss of enantioselectivity in the pharmacokinetics of CITA. The AUCS/R ratio was 0.96 for CITA and 0.92 for DCITA. The administration of multiple doses of omeprazole to healthy volunteers enantioselectively inhibited the metabolism of the (+)-(S)-CITA eutomer, with an approximately 140% increase of plasma concentrations

Orientador: José Eduardo Tanus dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T18:14:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_LucasCezar_M.pdf: 747256 bytes, checksum: f428f4ab7d72c88d9b72424fba5da404 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O óxido nítrico (NO) regula diversos sistemas orgânicos. Disfunções na produção ou disponibilidade de NO podem comprometer sua atuação fisiológica. Além da produção de NO pelas óxido nítrico sintetases, outras vias de produção de NO são relatadas, entre elas a conversão de nitrito a NO. O nitrito é o produto inicial da oxidação do NO, sendo posteriormente oxidado a nitrato. Sabe-se que estas três moléculas formam um ciclo dentro do organismo. A conversão de nitrito a NO pode ocorrer de forma enzimática ou não enzimática. Como forma não enzimática, o nitrito é convertido a NO pela reação com H+. Esta reação ocorre principalmente no estômago, todavia não se sabe se este NO formado tem efeito na pressão arterial sistêmica ou atua apenas localmente. A fim de verificar a influência do pH gástrico no efeito hipotensor do nitrito de sódio, utilizamos animais tratados agudamente com LNAME e normotensos canulados acordados pré-tratados com omeprazol e, posteriormente, com nitrito de sódio 15mg/kg e 45mg/kg. Foi verificado que o nitrito de sódio reduz a pressão arterial média dos animais significativamente e de maneira dependente da dose. O pré-tratamento com omeprazol reduziu o efeito hipotensor do nitrito de sódio significativamente. Após, foram quantificados os níveis de nitrito e nitrato. Foi observado aumento em ambos após o tratamento com nitrito de sódio. A partir destes resultados podemos sugerir que o omeprazol atenua o efeito hipotensor do nitrito de sódio em ratos normotensos e hipertensos / Abstract: Many body systems are regulated by nitric oxide (NO). Dysfunctions in the production or availability of NO may impair it physiological roles. However, other routes of NO production are reported in addition to NO production by nitric oxide synthases, including the conversion of nitrite to NO. Nitrite is the initial product of oxidation of NO and is further oxidized to nitrate. It is known that these three molecules form a cycle within the body. The conversion of nitrite to NO can occur enzymatic or nonenzymatic. Non-enzymatic nitrite is converted to NO by reacting with H+. This reaction occurs mainly in the stomach, however it is unclear whether this NO affects blood pressure or simply acts locally. To study the influence of gastric pH on the hypotensive effect of sodium nitrite, we used hypertensive or normotensive cannulated animals pretreated with omeprazole and with sodium nitrite 15 mg/kg and 45 mg/kg. We found that sodium nitrite reduces mean arterial pressure of animals in a dose-dependent manner. Pretreatment with omeprazole reduced the hypotensive effect of sodium nitrite significantly. Thereafter, we quantified the levels of nitrite and nitrate. We found increase in both species after treatment with sodium nitrite. These results suggest that omeprazole attenuates the hypotensive effect of sodium nitrite in normotensive and hypertensive rats / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Existe uma relação entre o uso abrangente de inibidores da bomba de prótons (IBPs), como o omeprazol, e o aumento de risco cardiovascular. Essa relação está associada ao efeito dos IBPs de interferir na síntese e biodisponibilidade do óxido nítrico (NO), um fator importante na homeostase vascular. Também foi evidenciado que o omeprazol causa disfunção endotelial junto a um desequilíbrio redox em aortas, mediado pela ativação da enzima xantina oxidoredutase (XOR), responsável pelo catabolismo das purinas e geração de espécies reativas de oxigênio (ERO). As ERO decorrentes da atividade da XOR, podem aumentar a expressão e a atividade de metaloproteinases de matriz (MMPs), principalmente a MMP-2, que são promotoras de remodelamento tecidual. Assim, nosso objetivo foi analisar se o omeprazol causa remodelamento vascular em aorta de ratos, frente ao seu efeito de aumento do estresse oxidativo via XOR promovendo ativação de MMPs. Foram utilizados ratos wistar com peso entre 180-200 g (n=40), separados em 4 grupos de tratamento onde cada animal foi tratado com 0,5 mL de solução das drogas nas seguintes especificações: o grupo Controle (C) foi tratado com solução veículo tween 2% (vol./vol.) 1 vez ao dia por gavagem, o grupo Alopurinol (A) recebeu uma solução deste inibidor de XOR por gavagem (50 mg/kg/dia), o grupo Omeprazol (O) que recebeu uma solução de omeprazol diluída em tween 2% por via intraperitoneal (10 mg/kg/dia) e por fim, o grupo Omeprazol+Alopurinol (O+A) que recebeu as duas drogas concomitantemente. O protocolo experimental durou 4 semanas, durante as quais foram realizadas aferições da pressão arterial sistólica por pletismografia de cauda. Ao fim do tratamento, os animais foram submetidos à eutanásia, onde foi aferido o pH do lavado gástrico e foi coletada a aorta torácica para a análise de reatividade vascular, análise bioquímica de ERO, a análise morfométrica, e ensaio de atividade de MMPs. Não houve variação de pressão arterial em nenhum dos grupos. O tratamento com alopurinol não alterou nenhum dos parâmetros analisados em relação ao grupo controle neste estudo. O pH gástrico aumentou nos grupos tratados com omeprazol. Na reatividade vascular, observamos que o omeprazol diminuiu o efeito máximo da resposta vasodilatadora dos anéis de aorta à acetilcolina, mas que o tratamento associado ao alopurinol (O+A) preveniu essa diminuição. Em relação ao pD2, foi constatado que o tratamento com omeprazol resulta na diminuição da potência da acetilcolina em causar relaxamento vascular, e que a associação do tratamento com alopurinol, não foi capaz de prevenir essa diminuição. O grupo O também apresentou aumento de espécies reativas de oxigênio no leito vascular, observados no ensaio DHE e o tratamento com alopurinol preveniu este efeito. No ensaio de atividade gelatinolítica in situ observamos um aumento da atividade de MMPs no grupo O, e o tratamento com alopurinol também preveniu esse efeito. Na análise morfométrica observamos que o grupo O apresentou aumento dos parâmetros de remodelamento vascular, denotando um remodelamento hipertrófico, que foi prevenido pela associação com alopurinol. Com base nos resultados, é possível concluir que o tratamento com omeprazol causou remodelamento em aortas de ratos, e que esse efeito ocorreu paralelamente a outros prejuízos, como a diminuição da função vascular avaliada pela resposta à acetilcolina, aumento de espécies reativas de oxigênio e aumento de atividade de MMPs. Como todos esses efeitos resultantes do uso do omeprazol foram prevenidos pela associação do tratamento com alopurinol, é viável inferir que a XOR participe da via pela qual o omeprazol causa efeitos deletérios sobre a vasculatura / There is a relationship between the use of proton pump inhibitors (PPIs), such as omeprazole, and the increase of cardiovascular risk. This relation is associated with the effect of PPIs on nitric oxide synthesis and bioavailability, which is an important factor to vascular homeostasis. It also clear that omeprazole causes endothelial dysfunction by mechanisms involving xanthine oxidoreductase (XOR) mediated redox imbalance in aortas, which is responsible for purines catabolism, and generates reactive oxygen species (ROS). ROS derived from XOR activity, may increase matrix metalloproteinases expression and activity, mainly MMP-2 that are promoters of tissue remodeling. Thus, our aim was to analyze if omeprazole entails vascular remodeling in rat\'s aorta, with its effect of causing oxidative stress via XOR, promoting MMPs activation. Male rats weighing between 180-200g (n=40) were assigned to 4 groups with different treatments, where each animal was treated with 0.5 mL of drug solution, following the specification per group: Control group (C) was treated with the vehicle tween 2% (vol./vol.) 1 time a day by gavage; Allopurinol group (A) that received a solution of this XOR inhibitor by gavage (50mg/kg/day), Omeprazole group (O) which was treated by intraperitoneal route with a solution of omeprazole diluted at tween 2% (10 mg/kg/day) and at last, the Omeprazole+Allopurinol group (O+A), that received both drugs concomitantly. The experimental protocol lasted 4 weeks, during which, were performed systolic blood pressure measurements by tail cuff plethysmography. By the end of treatments, the animals were submitted to euthanasia, then the pH of the gastric washing was measured, and the thoracic aorta was collected to study vascular reactivity, biochemical analysis of ROS, morphometric analysis and MMPs activity assay. There was no blood pressure variation in any of the treatment groups. Treatment with allopurinol did not alter any of the parameters that were analyzed in the present study, in comparison to control group. Gastric washing pH increased in groups treated with omeprazole. In vascular reactivity, it was noticed that omeprazole decreased the maximum effect of the aortic ring\'s vasodilator response to acetylcholine, while the omeprazole treatment associated with allopurinol (O+A) prevented this decrease. Regarding to pD2, it was observed that omeprazole treatment results in decreased acetylcholine potency to cause vascular relaxation, and the association to allopurinol treatment was not capable of preventing this decrease. The O group also presented increased reactive oxygen species levels in the vascular bed, according to DHE assay, and the treatment with allopurinol prevented this effect. With respect to in situ gelatinolytic activity assay, we noticed an increase in MMPs activity in the O group, and the treatment with allopurinol prevented that. The morphometric analysis showed the O group with increased vascular remodeling parameters, denoting a hypertrophic remodeling, which was prevented by the association with allopurinol. Based on these results, is possible to conclude that the treatment with omeprazole caused aortic remodeling in rats, and combined to this effect, some other were observed, such as the vascular function impairment evaluated by the response to acetylcholine, the increase of ROS and increase in MMPs activity. As the effects of omeprazole treatment were prevented by the association of treatment with allopurinol, it is reasonable to infer that XOR participates of the pathway by which omeprazole exerts its deleterious effects on the vasculature

Úlceras abomasais acarretam diminuição do bem-estar e da produção de leite e carne, porém informações quanto a sua etiopatogenia, diagnóstico, prevenção e tratamento ainda são insuficientes, em especial quando acometem ruminantes adultos. Os protocolos utilizados para prevenção e tratamento desta enfermidade são extrapolados dos determinados para a lesão estomacal em monogástricos, havendo ainda incertezas sobre o efeito dos princípios ativos, doses e vias de administração mais adequados para ruminantes. Com o intuito de testar a capacidade da ranitidina e do omeprazol prevenirem o aparecimento de úlcera abomasal realizou-se administração dos antiácidos concomitantemente ao uso de fenilbutazona por sete dias (4,4 mg/kg, duas vezes ao dia, pela via intravenosa). Oito ovinos hígidos e canulados em abomaso foram distribuídos em dois quadrados latinos 4x4 e tratados com 2 mg de ranitidina/kg de peso vivo, pela via intravenosa, a cada doze horas; 0,4 mg/kg de omeprazol, pela via intravenosa, uma vez ao dia; 4 mg/kg de omeprazol em pasta, via oral, uma vez ao dia; ou nenhum medicamento antiácido (controle). Omeprazol administrado pela via intravenosa desencadeou flebite e maior número de animais apresentou lesões na mucosa abomasal. Omeprazol em pasta não foi eficaz na prevenção de úlcera do tipo 1a. Embora sem diferença entre os grupos, a ranitidina revelou o menor número de animais com lesões confirmadas pelo exame histológico; no entanto, este antagonista H2 ocasionou aumento da frequência cardíaca. O pH e a acidez do conteúdo abomasal, as concentrações séricas do pepsinogênio e da lisozima, bem como a pesquisa de sangue oculto fecal não se mostraram válidos para o diagnóstico da úlcera de abomaso do tipo 1a em ovinos adultos. / Abomasal ulcers reduce welfare and production of milk and meat, but information about their etiopathogenesis, diagnosis, prevention and treatment is still insufficient, especially for adult ruminants. Protocols used for prevention and treatment of this disease are extrapolated from those determined for gastric lesions in monogastric animals. However, there are still uncertainties about the preventive effect of these drugs, the used doses and best route of administration to ruminants. The preventive action of ranitidine and omeprazole on the development of abomasal ulcers was tested. The antacid drugs were administered concomitantly to phenylbutazone over seven days (4.4 mg/kg twice a day, intravenously). Eight healthy sheep, cannulated in abomasum, were distributed in two 4x4 Latin squares and treated with 2 mg/kg of ranitidine every 12 hours; 0.4 mg/kg of omeprazole, administered intravenously once a day; 4 mg/kg of omeprazole paste, administered orally once a day; or no antacid drug (control). Intravenously administered omeprazole caused phlebitis and a higher number of animals had lesions in the abomasal mucosa. Omeprazole paste was not effective in the prevention of type 1a ulcer. Although there was no difference between groups, ranitidine showed the lowest number of animals with lesions diagnosed by histological examination; however, this H2 antagonist caused an increase in heart rate. Measurements of pH and acidity of abomasal contents, serum pepsinogen and lysozyme concentrations, as well as fecal occult blood screening were concluded not to be valid biomarkers for type 1a abomasal ulcers in adult sheep.