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Efeito antibacteriano de antissépticos bucais frente ao S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa / Antibacterial effect of oral antiseptics on S. mutants, E. faecalis and P. aeruginosa

Garrote, Marcel da Silva 11 December 2013 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-26T12:17:54Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcel da Silva Garrote - 2013.pdf: 886747 bytes, checksum: 720948391469857f66e38d70ed31bae0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-26T12:28:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcel da Silva Garrote - 2013.pdf: 886747 bytes, checksum: 720948391469857f66e38d70ed31bae0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-26T12:28:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcel da Silva Garrote - 2013.pdf: 886747 bytes, checksum: 720948391469857f66e38d70ed31bae0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-12-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Purpose:to evaluate the antibacterial effect of oral antiseptics (cetylpyridinium chloride, chlorhexidine gluconate and benzalkonium chloride) on S. mutans, E. faecalis andP. aeruginosa, determined by agar diffusion test and direct exposition test. Methods:The strains were inoculated in 7 mL BHI and incubated at 37°C for 24 hours. For agar diffusion test, 13 Petri plates with 20 mL BHIA were inoculated with 0.1 mL of microbial suspensions, aided by sterilized swabs, obtaining a confluent growth. Thirty six paper discs with 9 mm diameter were immersed in experimental solutions (cetylpyridinium chloride 0.07%, cetylpyridinium chloride 0.075%, chlorhexidine gluconate 0.12% and benzalkonium chloride 1.30 mg)for 1 minute. Following, at each plate, 3 paper discs containing irrigant solutions were put on BHIA surface. The plates were kept for 1 hour at environmental temperature and incubated at 37°C for 48 hours. Inhibition zones were measured over the paper discs containing the solutions, using two perpendicular measurements and obtaining the mean value. For direct exposition test, 516 sterilized paper points #50 were immersed on microorganisms suspension for 5 minutes, put in Petri plates and covered with 10 mL of irrigant solution. At 1, 5, 10 and 30 minutes intervals, 3 paper points were removed from substances contact, transported individually and immersed in 7 mL Letheen Broth, and incubated at 37°C for 48 hours. Bacterial growth was evaluated by medium turbidity. An inoculum of 0.1 mL Letheen Broth was transferred to 7 mL BHI, and incubated at the same conditions previously described. Bacterial growth was again evaluated by medium turbidity. Results: Inhibition zones were greater than 10 mm for all substances and in microorganisms tested. Benzalkonium chloride presented antibacterial effect against the biological markers after 12 5 minutes in direct exposition, while cetylpyridinium chloride and chlorhexidine gluconate presented antibacterial effect against all the microorganisms after 10 minutes. Conclusion:Theantiseptic solutions presented antibacterial effect against S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa. / Objetivo: avaliar o efeito antibacteriano de antissépticos bucais sobre S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa, por meio de testes de difusão em ágar e teste por exposição direta.Metodologia:Cepas de S. mutans (ATCC 25175), E. faecalis (ATCC 29212)e P. aeruginosa (ATCC 27853) foram inoculadas em 7 mL de BHI e incubadas a 37°C por 24 horas. Para o teste de difusão em ágar, 13 placas de Petri com 20 mL de BHIA foram inoculadas com 0,1 mL das suspensões microbianas, com auxílio de swab esterilizados, de modo a se obter um crescimento confluente. Trinta e seis discos de papel com 9 mm de diâmetro foram imersos nas soluções experimentais de cloreto de cetilpiridínio 0,07%, cloreto de cetilpiridínio 0,075%, gluconato de clorexidina 0,12% e cloreto de benzalcônio 0,13% mg durante um minuto. A seguir, três discos de papel contendo uma das soluções antissépticas foram colocados sobre a superfície do BHIA. As placas foram mantidas por uma hora em temperatura ambiente e incubadas a 37°C por 48 horas. Os diâmetros dos halos de inibição microbiana foram medidos valendo-se de duas medidas de forma perpendicular entre si, sendo obtida a média de seus comprimentos. Para o teste de exposição direta, 576 cones de papel absorventes esterilizados n°50 foram imersos na suspensão de micro-organismos por 5 minutos, e a seguir foram colocados em placas de Petri e cobertos com 10 mL de uma das soluções testes. Em intervalos de 1,5, 10 e 30 minutos, 3 cones de papel absorventes foram retirados do contato com as substâncias, transportados individualmente e imersos em 7 mL de Letheen Broth, e incubados a 37°C por 48 horas. O crescimento microbiano foi avaliado pela turbidade do meio de cultura. Um inóculo de 0,1 mL obtido do Letheen Broth foi transferido para 7 mL de BHI, e incubado nas mesmas condições descritas. O 10 crescimento microbiano foi novamente avaliado pela turbidade do meio de cultura. Resultados: Os halos de inibição foram maiores que 10 mm para todas as substâncias e em todos os micro-organismos. A solução de cloreto de benzalcônio apresentou efeito antibacteriano contra os indicadores biológicos após 5 minutos em teste por exposição direta, enquanto que o cloreto de cetilpiridínio e o gluconato de clorexidina apresentaram efeito antibacteriano somente após 10 minutos. Conclusão: As soluções antissépticas estudadas apresentaram efeito antibacteriano por contato direto frente S. mutans, E. faecalis e P. aeruginosa.
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Isolamento, identificação e suscetibilidade in vitro de leveduras isoladas da cavidade oral de fêmeas caninas / Isolation, identification and in vitro susceptibility test of yeasts from oral cavity of female canine

SANTIN, Rosema 26 February 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_rosema_santin.pdf: 3641963 bytes, checksum: d088da2fe7dd18329508c62dfe97ec75 (MD5) Previous issue date: 2009-02-26 / The aims of this study was the oral cavity evaluation of females stray dogs from Pelotas-RS, as well as yeast isolation and identification from three different areas of this cavity, comparison of two technique of sample collection (swabs and curettes) and test the in vitro susceptibility of isolated yeasts against common oral antiseptics used in pets. Fifty-nine randomized animals were included in the study. All of them were SRD, without age defined and from Pelotas-RS. They were divided in three groups of ages by the evaluation of dental arc, and were examined to determine the cranial morphology, presence of dental plaque, tooth fractures, malocclusion, halitosis and gingival bleeding. Measure of periodontal groove depth was also done. Samples were collected from three areas, gingival mucosa, dental biofilm and periodontal grooves, with different collection techniques: swab, curettes, millimeter periodontal probe and cellulose polymers membranes. In vitro susceptibility tests by microdilution methods was done with 15 of those yeasts against A product (0,12% chlorhexidine gluconate, 0,12% benzalkonium chloride and 0,10% chlorophila extract) and B product (0,2% benzalkonium chloride, 1% propolis and 0,5% peppermint arome). It was also evaluated chemical principles of products in separated, as chlorhexidine gluconate, benzalkonium chloride and propolis. Tooth fractures was observed in higher proportion at animals with six or more years old (p=0,0030). Dogs younger than 2 years old had lower rate of dental plaques than the others groups (p=0,0000). The association of positive areas of yeast isolation with age, tooth fracture, dental plaque, halitosis, gingival bleeding or malocclusion was not statistically significant. Sixty-one yeasts were isolated, characterized by M. pachydermatis (50,82%), Rhodotorula spp. (13,11%), C. albicans (4,92%), C. catenulata (3,28%), C. famata (1,64%), C. guilliermondii (1,64%), C. parapsilosis (1,64%), C. intermedia (1,64%), T. asahii (13,11%), T. mucoide (1,64%) and C. albidus (6,56%), from 30 (50,85%) animals. Yeasts growing inhibition was observed in all products tested and in all concentrations of them, with exception of propolis that did not show activity against yeasts. In conclusion, at oral cavity exam of female dogs, the mainly alterations found were dental plaques, tooth fractures and malocclusion. Isolated yeasts are normal habitants from the three different areas of oral cavity studied, without resulting in clinical signs. In relation to the techniques, it was not found difference between swab and curettes for oral sample collection. Yeast isolation was higher in female dogs that show halitosis. Oral antiseptics tested, as well as chlorhexidine gluconate and benzalkonium chloride were effective against yeasts isolated from canine oral cavity in all dilution tested. Propolis, at the conditions and dilutions tested, is not recommended as an oral antiseptic against yeast. / Objetivou-se avaliar a cavidade oral de fêmeas caninas errantes de Pelotas-RS, isolar e identificar leveduras de três sítios desta cavidade, comparar duas técnicas de colheita da mucosa gengival (swab e cureta) e testar a suscetibilidade in vitro destas leveduras frente a anti-sépticos orais utilizados na rotina odontológica de pequenos animais e seus princípios ativos. Foram avaliadas 59 fêmeas caninas, errantes, SRD, provenientes de Pelotas/RS. Os animais foram selecionados aleatoriamente, e distribuídos em três grupos de idade conforme avaliação da arcada dentária. Estes foram avaliados quanto à conformidade cranial, presença de cálculo dentário, fraturas dentárias, maloclusão, halitose, sangramento gengival e mensuração da profundidade de sulco peridontal. As amostras foram obtidas da mucosa gengival, biofilme dental e sulco periodontal, com diferentes formas de coletas: swab, cureta, sonda periodontal milimetrada e ponta de membrana em éster de celulose. O teste de suscetibilidade in vitro foi realizado pela técnica de microdiluição em caldo testando o produto A (0,12% de gluconato de clorexidina, 0,12% de cloreto de benzalcônio e 0,10% de extrato de clorofila) e, o produto B (0,2% de cloreto de benzalcônio, 1% de tintura de própolis e 0,5% de aroma hortelãpimenta) frente a 15 leveduras isoladas. Também foram avaliados os princípios ativos gluconato de clorexidina, cloreto de benzalcônio e tintura de própolis isoladamente. As fraturas dentárias foram mais frequentes nos animais com seis anos ou mais (p=0,0030). Nos cães com até dois anos a presença de cálculo dentário aresentou-se com menor frequência (p=0,0000) em relação aos outros dois grupos. Na relação entre o número de locais de isolamento com idade, conformidade cranial, presença de fratura, cálculo dentário, halitose, sangramento gengival e maloclusão não foi encontrada diferença estatisticamente significativa. Foram isoladas 61 leveduras, M. pachydermatis (50,82%), Rhodotorula spp. (13,11%), C. albicans (4,92%), C. catenulata (3,28%), C. famata (1,64%), C. guilliermondii (1,64%), C. parapsilosis (1,64%), C. intermedia (1,64%), T. asahii (13,11%), T. mucoide (1,64%) e C. albidus (6,56%) distribuídas em 30 (50,85%) animais. Foi observada inibição do crescimento de todas as leveduras, em todos os produtos, em todas as concentrações, com exceção da tintura de própolis que não demonstrou ação nenhuma nas concentrações testadas. Sendo assim, na avaliação da cavidade oral das fêmeas caninas predominaram presença de cálculo dentário, fraturas dentárias e maloclusões. As leveduras isoladas fazem parte da microbiota dos diferentes sítios da cavidade oral das fêmeas caninas estudadas, estando presentes sem causar alterações. O isolamento de leveduras foi maior naquelas fêmeas que tinham halitose. Não houve diferença entre as técnicas utilizadas (swab ou cureta) para colheita de material da mucosa gengival. Os anti-sépticos orais e os compostos gluconato de clorexidina e o cloreto de benzalcônio foram eficazes frente às leveduras isoladas da cavidade oral de fêmeas caninas em todas as concentrações testadas, inclusive nas abaixo da recomendada para uso. Nas condições estudadas, a tintura de própolis não é recomendada para utilização como anti-séptico oral frente às leveduras nas concentrações estudadas.

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