Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: Erika da Silva Carvalho Morani / Resumo: Nos protocolos de múltipla ovulação e transferência de embriões (MOTE) diversos tratamentos têm sido testados com intuito de aumentar a eficiência desta biotécnica, dentre eles, os que visam a superestimulação iniciada próxima às emergências de ondas foliculares. No entanto, estas provocam modificações endócrinas e ovarianas, como pico de LH. O conhecimento do momento da manifestação de estro, pico de LH e ovulação, são essenciais para garantir o avanço e eficiência desta biotécnica da reprodução. O momento e a amplitude do pico pré-ovulatório de LH tem sido um dos melhores parâmetros para prever o tempo da ovulação. De acordo com esta problemática o presente estudo objetivou investigar o início do estro, o momento e amplitude do pico pré-ovulatório de LH em ovelhas submetidas a tratamentos superovulação com FSH, iniciados próximo a emergência da primeira e última ondas foliculares, nos períodos de ciclicidade, transição e anestro. Para tanto foram utilizados dois protocolos hormonais para superestimulação de primeira onda e três protocolos para última onda folicular, em diferentes períodos, sendo eles, anestro, transição e ciclicidade. Todos os animais receberam um dispositivo intravaginal e administração de D-Cloprostenol no D0. As aplicações de FSHp em oito doses decrescentes começaram 48 horas antes da retirada do dispositivo intravaginal e das aplicações de eCG associado com o D-Cloprostenol. A coleta de sangue para dosagem de LH ocorreu a cada três horas e foram dosados através da técnica de radioimunoensaio, assim verificou-se o momento e amplitude do pico pré-ovulatório de LH. Os resultados mostraram que o melhor tratamento a ser realizado é a superestimulação da primeira onda folicular no momento de ciclicidade, onde obteve maior amplitude do pico pré-ovulatório de ... / Abstract: In the protocols of multiple ovulation and embryo transfer (MOET) various treatments have been tested in order to increase the efficiency of biotech, including those aimed at overstimulation started next to follicular waves of emergencies. However, these cause endocrine ovarian and modifications as LH surge. Knowing the time of estrus, LH surge and ovulation, are essential to ensure the advancement and efficiency of biotech reproduction. The timing and amplitude of the pre-ovulatory LH surge has been one of the best parameters to predict the time of ovulation. According to this problem the present study aimed to investigate the onset of estrus, the timing and extent of the pre-ovulatory LH surge in sheep subjected to superovulation treatments with FSH, started near the emergence of the first and last follicular waves during the periods of cyclicity , transition and anoestrus. For this we used two hormonal protocols to overstimulation of the first wave and three protocols for last follicular wave in different periods, namely, anestrus, transition and cyclicality. All animals received an intravaginal device and administration of D-cloprostenol on D0. The application FSHp eight decreasing doses started 48 hours before removal of the intravaginal device and applications associated with eCG D-cloprostenol. The blood collection for LH dosage occurred every three hours and were measured by radioimmunoassay, and there was the time and amplitude of the pre-ovulatory LH surge. The results showed that the best treatment is to be performed follicular overstimulation of the first wave at the time of cyclicity, which obtained the highest amplitude of the pre-ovulatory LH surge and ovulation rates best. Keyword: overstimulation, hormonal protocols; LH peak; Sheep / Mestre

Introdução A Fertilização in Vitro (FIV) é o principal tratamento para casais inférteis e tem como etapa inicial o processo de indução da ovulação. Os fármacos utilizados para o estímulo ovariano contêm variadas combinações de hormônios (FSH, LH e hCG). Os mais utilizados no nosso meio são a gonadotrofina menopausal humana (hMG) e hormônio folículo estimulante recombinante (FSHr). Eles diferem na sua composição, tendo o hMG os hormônios FSH e LH em iguais proporções além de uma pequena parcela de hCG, enquanto o FSHr contém apenas o FSH. Sabe-se que a interação do LH e do FSH é fundamental para o ciclo ovulatório espontâneo, no entanto, já se comprovou a efetividade do rFSH na estimulação ovariana da FIV. Os estudos são controversos em relação a taxas de gestação e outros desfechos relacionados ao estímulo ovariano, como dose de gonadotrofinas utilizadas, número de oócitos capturados, número de embriões e qualidade embrionária. Grande parte dos ensaios clínicos, publicados até então, pesquisou as diferenças entre essas duas medicações tendo como desfecho principal a taxa de gravidez ou o número de nascidos vivos após a FIV. No entanto, analisando com cuidado, vemos que a grande maioria desses estudos não recrutou um número suficiente de pacientes para detectar uma diferença estatisticamente significativa nesses desfechos. Ainda, os poucos estudos que arrolaram um número importante de pacientes se declararam patrocinados pela indústria farmacêutica, o que torna a análise de seus resultados prejudicada por um importante conflito de interesse. Objetivo Comparar as gonadotrofinas rFSH e hMG no protocolo de fertilização in vitro com o antagonista do GnRH tendo como desfecho principal a qualidade embrionária. Os desfechos secundários incluídos foram número e tamanho de folículos ao final da indução da ovulação, dose de gonadotrofina utilizada, número de oócitos capturados, número de embriões e taxas de gestação. Método Foi realizado um estudo randomizado onde foram recrutadas 168 mulheres com indicação de FIV. Foram randomizadas 85 pacientes para o uso de FSHr e 83 para o uso de hMG. Os embriões foram transferidos entre o terceiro e o quinto dia após a fertilização in vitro. O escore de graduação embrionário (GES) foi realizado através de avaliação de todos os embriões por 3 vezes, nos tempos: 16 – 18 horas, 25 – 27 horas e 64 – 67 horas, sempre pelo mesmo embriologista. Para pontuação do GES, avaliaram-se: citoplasma, morfologia pronuclear, fragmentação, alinhamento nucleolar, posição do corpo polar, número de blastômeros/morfologia e simetria. Resultados O escore total embrionário não diferiu entre os dois grupos (214.01 x 170.43, rFSH e hMG respectivamente, P = 0.13) , no entanto encontramos um escore de melhor embrião significativamente mais alto no grupo do FSHr (77,33 x 65,07 P = 0,03). Também foi estatisticamente maior o número de embriões nesse mesmo grupo (4,17 x 3,26 p=0,04). Não houve diferença na dose de gonadotrofinas, no número de folículos ao final da indução, no número de oócitos capturados ou nas taxas de gestação. Conclusão Concluímos que o tipo de gonadotrofina utilizada para o estímulo ovariano pode ter um impacto na qualidade embrionária. Esse achado pode ser relacionado à presença do LH, hipótese que deve ser explorada em novos estudos, para melhor compreensão e otimização do estímulo ovariano na FIV.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2014. / Submitted by Larissa Stefane Vieira Rodrigues (larissarodrigues@bce.unb.br) on 2014-10-07T19:26:07Z No. of bitstreams: 1 2014_CarolleVieiraMuterlle.pdf: 3129264 bytes, checksum: 514930811a03ba37dd26808e1050875e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-08T11:27:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_CarolleVieiraMuterlle.pdf: 3129264 bytes, checksum: 514930811a03ba37dd26808e1050875e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-08T11:27:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_CarolleVieiraMuterlle.pdf: 3129264 bytes, checksum: 514930811a03ba37dd26808e1050875e (MD5) / Este estudo teve como objetivo caracterizar a dinâmica folicular em ovelhas da raça Santa Inês sob a influencia de diferentes genótipos do gene GDF-9, homozigotas mutantes (EE), heterozigotas (EW) e homozigotas selvagens (WW) para a mutação FecGE no desenvolvimento folicular e luteal do ciclo estral. Alem, de avaliar dois diferentes períodos no ano no Distrito Federal. Ovelhas Santa Inês (n=26), sendo 10 ovelhas WW, 11 EW e 5 EE foram sincronizadas com duas doses de PGF2α (Veteglan Luteolitico, 0,5 mL via intramuscular, 37,5 μg de D+cloprostenol) com intervalos de 7 dias entre as doses. Apos 48 horas a segunda dose foi iniciado o acompanhamento diário com ultrassom (US-MyLab™30Gold, Esaote 6 e 8 MHz) e observadas desde a primeira ovulação, ate a ovulação seguinte (aproximadamente 17 dias entre as ovulações), segunda ovulação confirmada posteriormente pela detecção do corpo lúteo (CL) sete dias depois do desaparecimento do maior folículo. Foram avaliados 30 e 40 ciclos completos nos períodos de seca e chuva, respectivamente. Os experimentos foram analisados por meio de Modelos Lineares Generalizados, de modo que se aplicou um modelo de Analise de Deviance. A duração do ciclo estral foi maior (P<0,05) no período de seca, com media de 17,27 } 0,79 contra 16,78 } 0,98 dias no período de chuva. A fase lútea foi maior no período de seca (P<0,05). As ovelhas apresentaram um padrão de 3 e 4 ondas foliculares. A frequência de ovulação foi maior na época de chuva (P<0,05), comparada a seca. Também foi observado que ovelhas do genótipo recessivo EE apresentavam maior frequência de ovulação comparada aos outros genótipos (P<0,05). As observações revelaram que houve uma maior freqüência de ovulação (P<0,5) no ovário esquerdo (P<0,05). As medias dos diâmetros dos folículos ovulatórios na seca foram maiores (P<0,05). Também foram maiores (P<0,05) as médias do diâmetro dos folículos ovulatórios em ovelhas de genótipo WW. A média da população folicular de folículos pequenos foi maior (P<0,05) durante a seca. Em ovelhas de 3 ondas foi observado na segunda e terceira ondas uma fase de crescimento maior (P<0,05) durante a seca. Com relação ao genótipo, o mesmo aconteceu na terceira onda em ovelhas WW (P<0,05). O diâmetro máximo folicular, em ovelhas de 3 ondas, foi maior (P<0,05) na primeira e terceira ondas, nas ovelhas WW. Em ovelhas de 4 ondas, foi observado um maior diâmetro (p<0,05) na quarta onda, em ovelhas de genótipo WW. Esta observação ocorreu somente no período de chuva. O volume total dos CLs provenientes de ovulação simples foi maior (P<0,05), comparados aos CLs de múltiplas ovulações. O diâmetro folicular foi maior (P<0,05) em ovulações simples. Conclui-se que os animais homozigotas mutantes (EE) sao mais prolífico que os demais (EW e WW), e na época de chuva o efeito de ovulações múltiplas e mais frequente. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to characterize follicular dynamics in Santa Ines sheep under the influence of different genotypes of the GDF-9 gene, homozygous mutant (EE), heterozygous (EW) and wild homozygous (WW) for FecGE mutation in follicular development and luteal phase of the estrous cycle. In addition, to evaluate two different periods of the year in the Federal District. Santa Ines ewes (n = 26), WW (n=10), EW (n=11) and EE (n=5) were synchronized with two PGF2a with 7 days intervals between doses. At 48 hours after the second dose ultrasound (USMyLab ™30Gold, Esaote 6-8 MHz) was observed daily from the first ovulation until the next ovulation (approximately 17 days between ovulations). The second ovulation was confirmed later by detection of corpora lutea (CL), seven days after the disappearance of the largest follicle. A total of 30 and 40 complete cycles were evaluated in periods of drought and rainfall, respectively. The experiments were analyzed by Generalized Linear Models. The duration of the estrous cycle was greater (P<0.05) in the dry season, averaging 17.27 }0.79 versus 16.78 }0.98 days in the rain. The luteal phase was higher in the dry season (P<0.05). The sheep had a pattern of 3 and 4 follicular waves. The ovulation rate was higher in the rainy season (P<0.05) compared to dry. It was also observed that recessive genotype sheep (EE) had a higher ovulation frequency compared to other genotypes (P<0.05). The observations revealed that there was an increased in the ovulation rate (P<0.05) in the left ovary (P<0.05). The average diameters of the dry ovulatory follicles and the mean diameter of the follicles in ovulatory sheep genotype WW were higher (P<0.05) when compared to rainy season or to the other genotypes. The mean follicular population of small follicles was higher (P<0.05) during drought. In the 3 folicular waves sheep it was observed in the second and third waves a higher growth phase (P<0.05) during the drought. The same happened in the third wave in WW sheep (P<0.05) compared to the others genotypes. The maximum follicular diameter of 3 waves sheep was higher (P<0.05) in the first and third waves in sheep WW. In 4 waves sheep, there was a greater diameter (p<0.05) in the fourth wave in WW genotype. This observation occurred only during the rainy season. The total CLs volume from a single ovulation was higher (P<0.05) compared to CL from multiple ovulations. Follicular diameter was greater (P<0.05) in single ovulations. We conclude that the homozygous mutant animals (EE) are more prolific than others (EW and WW), and in the rainy season the occurance of multiple ovulations is more frequent.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2014. / Submitted by Cristiane Mendes (mcristianem@gmail.com) on 2014-11-19T19:12:47Z No. of bitstreams: 1 2014_EmanuelMouraoDoroteu.pdf: 581109 bytes, checksum: caa4de1424cfe656624b00f49713b66b (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-11-20T12:21:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_EmanuelMouraoDoroteu.pdf: 581109 bytes, checksum: caa4de1424cfe656624b00f49713b66b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-20T12:21:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_EmanuelMouraoDoroteu.pdf: 581109 bytes, checksum: caa4de1424cfe656624b00f49713b66b (MD5) / A eficiência econômica da pecuária de corte está vinculada à produção de bezerros, sendo estes destinados à produção de carne ou reposição do rebanho. A fim de proporcionar uma segunda chance para as vacas que foram diagnosticadas como vazias na IATF, o uso da ressincronização tem sido difundido nas criações de gado de corte. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficiência do uso ou não do eCG na ressincronização em vacas Nelore pluríparas lactantes com intervalo de 35-75 dias pós parto, conhecer a interação entre dose, presença ou não de cio, presença ou não do corpo lúteo e taxa de prenhez. Foram utilizadas 775 fêmeas na primeira IATF e as vazias (449) 30 dias após, foram alocadas em 3 grupos homogêneos de forma equilibrada. O exame ultrassonográfico para observar a presença ou não de corpo lúteo foi realizado antes da primeira IATF e no momento da ressincronização. Todos os animais do experimento receberam o mesmo protocolo, porém com diferentes doses de eCG. No dia 0 foi inserido um dispositivo intravaginal novo com 1 g de progesterona (Sincrogest®, Ouro Fino, Brasil) e aplicação por via intramuscular de 2 mg de Benzoato de Estradiol (Sincrodiol®, Ouro Fino, Brasil). No dia 8 os dispositivos foram retirados e aplicado simultaneamente 1 mg de cipionato de estradiol (ECP®, Pfizer Saúde Animal, Brasil); 0,530 mg de Cloplostenol sódico (Sincrocio®, Ouro Fino, Brasil), Grupo-0 não recebeu eCG, Grupo-200 recebeu 200 UI de eCG (Folligon®, Intervet/Schering-Plough, Brasil) e o Grupo-300 recebeu 300 UI. Foi observado cio e todas as vacas foram inseminadas 48 horas após a retirada do dispositivo intravaginal. O diagnóstico de gestação foi realizado 30 dias após a inseminação artificial. Empregou-se o teste da razão de verossimilhança para determinar a importância de cada variável ou interação no modelo. Considerou-se significativo P < 0,05 e o programa SAS 9.3 foi empregado na análise. Para se comparar a proporção de vacas com corpos lúteos, usou-se o teste de McNemar. Nos animais que apresentaram cio após a retirada do dispositvo de progesterona, os diferentes tratamentos (0 UI, 200 UI, 300 UI de eCG) não alteraram ocorrência de prenhez. Além disso, as 2 doses de eCG não diferiram entre si em relação a taxa de prenhez. Nos animais que não apresentaram cio não existe diferença na ocorrência de prenhez entre o Grupo-200 e o Grupo-300. A porcentagem de vacas que tiveram o 1۔º corpo lúteo (16,26 %) é significativamente menor daquelas que tiveram o 2۔º corpo lúteo (67,26 %). A taxa acumulada de prenhez após 40 dias da estação de monta foi de 77,54%. De acordo com esse estudo as doses de 200 UI e 300 UI de eCG quando utilizadas na ressincronização 30 dias após a primeira IATF, não tiveram diferença na probabilidade de prenhez. A taxa cumulativa de prenhez em 40 dias de estação de monta viabiliza essa ferramenta como uma forma de otimizar o manejo reprodutivo nas fazendas de gado de corte. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The economic efficiency of livestock beef cattle is linked to the production of calves, which are destined for meat production or herd replacement. In order to provide a second chance for the cows that were diagnosed as not pregnant, the use of resynchronization has been widespread in livestock beef cattle. The objective of this study was to evaluate the efficiency of the use or not of eCG in resynchronization in lacting pluriparous Nelore cows with interval of 35-75 days postpartum, to understand the interaction between dose, presence or absence estrus, presence or absence of the corpus luteum and rate pregnancy. 775 cows were used in the first fixed-time artificial insemination (FTAI) and the not pregnancy (449) were used after 30 days, they were divided into 3 homogeneous groups in a balanced way. The ultrasonographic examination to observe the presence or absence of corpus luteum was performed before the first FTAI and the resynchronization moment. All the experimental animals received the same protocol, however with different doses of eCG. On the day 0 the cows received a new intravaginal device containing 1 g of progesterone (Sincrogest®, Ouro Fino, Brazil) and was administrated intramuscularly 2 mg of oestradiol benzoate (Sincrodiol®, Ouro Fino, Brazil). On the day 8 the devices were removed and was administrated IM 1 mg of oestradiol cypionate (ECP®, Pfizer Saúde Animal, Brazil), 0,530 mg cloplostenol sodium (Sincrocio®, Ouro Fino, Brazil), Group-0 did not received eCG, Group-200 did received 200 IU of eCG (Folligon®, Intervet / Schering-Plough, Brazil), and Group-300 did received 300 IU. Heat was observed and all the cows were inseminated 48 hours after the removal of the progesterone intravaginal device. Pregnancy diagnosis was performed 30 days after artificial insemination. The likelihood ratio test was applied to determine the importance of each variable or interaction model. The McNemar test was used to compare the proportion of cows with corpus luteum. In animals in estrus after withdrawal of progesterone device, the different treatments (0 IU, 200 IU, 300 IU eCG) did not alter the occurrence of pregnancy. Also the 2 doses of eCG did not differ in relation to pregnancy rate. In animals that did not show estrus there were no difference in incidence of pregnancy among the Group -200 and Group- 300. The percentage of cows that had the first corpus luteum (16.26%) is significantly lower than those who had the second corpus luteum (67.26 %). The cumulative pregnancy rate after 40 days of breeding season was 77.54 %. According to this study, doses of 200 IU and 300 IU eCG resynchronization when used in the first 30 days after FTAI, had no difference in the probability of pregnancy. The cumulative pregnancy rate at 40 days of breeding season enables this tool as a way to optimize the reproductive management of beef cattle farms.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências Animais, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-02-25T20:02:50Z No. of bitstreams: 1 2014_DemisCarlosRibeiroMenezes.pdf: 819592 bytes, checksum: f0061e94c0ca41843fe15bcaf6a45109 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-03-02T17:29:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_DemisCarlosRibeiroMenezes.pdf: 819592 bytes, checksum: f0061e94c0ca41843fe15bcaf6a45109 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-02T17:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_DemisCarlosRibeiroMenezes.pdf: 819592 bytes, checksum: f0061e94c0ca41843fe15bcaf6a45109 (MD5) / Realizaram-se três experimentos com objetivo de avaliar os efeitos da utilização de doses reduzidas e diminuição do número de administrações de FSH, além da utilização exógena de progesterona na resposta superovulatoria e produção de embriões em ovelhas. Nos experimentos 1 e 2 fez-se uma pré-sincronização do estro e 84 h após iniciou-se a estimulação ovariana utilizando FSH em 8 aplicações. No experimento 1 os tratamentos diferiram quanto a dose de FSH, sendo T1: 200 mg, T2: 133 mg e T3: 80 mg. Para o experimento 2 no T1 sem P4 e no T2 com P4 inserido 12h antes do início da SOV. No experimento 3 para o protocolo de SOV a sincronização do estro foi obtida com CIDR por 14 dias. Para a estimulação ovariana utilizou-se 133mg de FSH, no T1 em 8 aplicações a cada 12 horas e no T2 em 4 aplicações a cada 24 horas. As IA foram realizadas com sêmen congelado por via laparoscópica e a coleta de embriões por hemilaparoscopia. No experimento 1 o percentual de doadoras que responderam a SOV foi menor (p < 0,01) quando utilizada a dose de 80 mg de FSH do que quando utilizadas as doses de 133 e 200 mg, que foram semelhantes entre si. Observou-se que a média de estruturas coletadas (T1 = 3,92; T2 = 4,29; T3 = 2,23), de embriões viáveis (T1 = 1,54; T2 = 3,86; T3 = 0,33), embriões congeláveis (T1 = 1,38; T2 = 3,29; T3 = 0,33) e a média de CL das ovelhas que responderam a SOV (T1 = 8,46; T2 = 8,14; T3 = 5,67) foram similares entre os tratamentos (p > 0,05). No experimento 2 observou-se que a média de estruturas coletadas (T1 = 3,43; T2 = 4,0), de embriões viáveis (T1 = 1,43; T2 = 1,83), embriões congeláveis (T1 = 1,29; T2 = 1,33), a taxa de resposta das doadoras à SOV (T1 = 48,28%; T2 = 41,38%) e a média de CL (T1 = 6,29; T2 = 7,0) foram semelhante (p > 0,05). No experimento 3 observou-se que a média de estruturas coletadas (T1 = 3,47; T2 = 2,55) e a taxa de resposta das doadoras à SOV (T1 = 88,24%; T2 = 64,70%) foram similares entre os tratamentos (p > 0,05). No que se refere a embriões viáveis (T1 = 2,40; T2 = 0,82), embriões congeláveis (T1 = 2,07; T2 = 0,82) e média de CL (T1 = 7,47; T2 = 5,73) o grupo oito doses foi melhor que o grupo quatro doses (p < 0,05). As doses de 200, 133 e 80 mg de FSH para realização da SOV em ovelhas Santa Inês apresentaram resultados semelhantes na produção de embriões, sendo 80 mg pior na resposta superovulatória. A utilização de progesterona exógena durante a SOV não melhora a resposta superovulatória e produção de embriões. O protocolo oito doses de FSH a intervalos de 12 horas se mostra como a melhor opção para SOV em ovelhas Santa Inês. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / There were three experiments to evaluate the effects of using low doses and reducing the number of FSH administration, in addition to the exogenous use of progesterone in superovulatory response and embryo production in sheep. In Experiments 1 and 2 was made a pre-synchronization of estrus and 84 h after started ovarian stimulation using FSH in 8 applications. In experiment 1 the treatments differ in the FSH dose: T1: 200 mg, T2: T3 133 mg and 80 mg. For experiment no 2 at T1 and T2 P4 P4 inserted 12h before the SOV. Experiment 3 SOV protocol for synchronization of oestrus was obtained with CIDR for 14 days. For ovarian stimulation is used 133mg of FSH in 8 T1 applications every 12 hours in 4 and T2 applications every 24 hours. The inseminations were performed with frozen semen by laparoscopy and embryo collection by hemilaparoscopia. In experiment 1 the percentage of donors who responded to SOV was lower (p <0.01) when used at a dose of 80 mg of FSH when used at doses of 133 and 200 mg were similar. It was observed that the mean collected structures (T1 = 3.92, T2 = 4.29, T3 = 2.23), of viable embryos (T1 = 1.54, T2 = 3.86, T3 = 0.33 ), freezable embryos (T1 = 1.38; T2 = 3.29; T3 = 0.33) and the average CL of the sheep who responded to SOV (T1 = 8.46; T2 = 8.14; T3 = 5 67) were similar between treatments (p> 0.05). In Experiment 2, we observed that the mean collected structures (T1 = 3.43, T2 = 4.0), viable embryos (T1 = 1.43, T2 = 1.83), freezable embryo (T1 = 1.29; T2 = 1.33), the donor response rate to the SOV (T1 = 48.28%; T2 = 41.38%) and CL medium (T1 = 6.29, T2 = 7.0) were similar (p> 0.05). Experiment 3 showed that the average collected structures (T1 = 3.47; T2 = 2.55) and the response rate of donors to SOV (T1 = 88.24%; T2 = 64.70%) were among treatments (p> 0.05). With regard to viable embryos (T1 = 2.40, T2 = 0.82), freezable embryo (T1 = 2.07, T2 = 0.82) and mean CL (T1 = 7.47, T2 = 5 73) the eight-dose group was better than the four-dose group (p <0.05). Doses of 200, 133 and 80 mg of FSH to perform the SOV in Santa Ines ewes showed similar results in the production of embryos, 80 mg worst in superovulatory response. The use of exogenous progesterone during SOV does not improve superovulatory response and embryo production. The protocol eight FSH doses to 12 hours intervals shown as the best option for SOV in Santa Ines sheep.

A individualização do tratamento é o desafio atual no campo da reprodução assistida. Fatores prognósticos clássicos como idade ou testes de avaliação da reserva ovariana não são suficientes para predizer completamente a resposta das pacientes à indução da ovulação. Essa tese investiga se polimorfismos do receptor do Hormônio Folículo Estimulante ou do receptor do Hormônio Anti-Mulleriano influenciam na resposta ovariana à administração de uma dose padrão de gonadotrofinas para Fertilização In Vitro numa população caucasiana francesa altamente selecionada. Para avaliação correta da resposta à indução da ovulação, usamos parâmetros clássicos como número de oócitos recuperados ou embriões obtidos e também a relação entre o número de folículos que atingem a maturidade ao final do ciclo de indução e o número basal de folículos antrais – taxa de maturação folicular. Como resultados, apresentamos que a presença do alelo G para o receptor do Hormônio Anti Müllleriano está associado com um número menor de oócitos recuperados na punção ovariana. Já o polimorfismo do receptor do FSH Ser 680, apesar de associado com um nível de FSH basal mais elevado, não altera a taxa de maturação folicular. Esses dados podem ajudar, no futuro, a escolha correta do melhor protocolo de indução da ovulação assim como a dose de gonadotrofina a ser utilizada. / Tailoring for a single patient the use of controlled ovarian stimulation is the next challenge in the field of reproductive technology. Classic prognostic factors such as age or ovarian reserve tests have shown to be limited to predict patient’s response towards ovulation induction. This thesis searches to investigate if whether FSH or AMH receptor polymorphisms influence ovarian response to standard gonadotropins administration in a high selected French Caucasian population. In order to correctly evaluate the real ovarian response of each patient, we make use of classical parameters like the number of oocytes retrieved or number of embryos obtained at the end of an IVF cycle, and also the relationship between the number of follicles that reach maturity criteria and the total number of pre antral follicles – follicular output rate. Our results show that the presence of the G allele in the AMH receptor is associated with a lower number of oocytes retrieved. In addition, although FSHR Ser680 genotype is associated with higher basal FSH levels, this polymorphism as well as the Ala307 does not influence the follicular output rate. Our data can help to choose the best protocol and initial dose of gonadotrophin for ovulation induction in the future.

A gemelaridade em humanos é um evento de etiologia complexa, cujas causas ainda não são totalmente conhecidas. Fatores ambientais como idade materna avançada, aumento da paridade, fatores hormonais e reprodução assistida, entre outros, estão associados a gestações de gêmeos dizigóticos (DZ). Ao contrário, há poucas evidências de fatores ambientais relacionados a gemelaridade monozigótica (MZ). Apesar dos avanços tecnológicos na área da genética, ainda é escasso o conhecimento sobre os fatores genéticos envolvidos na etiologia da gemelaridade. Não existem claras associações de fatores genéticos com gestações de gêmeos MZ. Por outro lado, estudos mostram a influência de vários genes na gemelaridade DZ e genes que possam influenciar a poli-ovulação, a implantação e o desenvolvimento dos embriões são bons candidatos para estudos genéticos. A cidade de Cândido Godói (CG), localizada no noroeste do Rio Grande do Sul, é conhecida como a “Terra dos Gêmeos” devido a sua alta incidência de nascimentos gemelares. Recentemente a teoria de que os gêmeos de CG são produto de experimentos do médico nazista Josef Mengele ganhou ampla divulgação pela imprensa. Porém, a história de CG sugere que fatores genéticos, potencializados por um efeito fundador ocorrido durante a colonização do município, sejam responsáveis pelos recorrentes nascimentos duplos na cidade. Esse trabalho teve como objetivos testar a plausibilidade da “teoria do médico nazista” e investigar possíveis genes relacionados com a gemelaridade em CG. Para isso, foram analisados os livros de batismos das Igrejas católicas do município, os sobrenomes e as histórias familiares da amostra de mulheres coletadas para os testes genéticos. Foram investigados polimorfismos em genes envolvidos no mecanismo de ovulação (Ser680Arg do gene FSHR), no desenvolvimento do embrião (677 C!T do gene MTHFR) e na implantação do blastocisto (P72R do gene TP53, rs1563828 no gene MDM4, SNP309 do gene MDM2, rs1529916 no gene USP7 e rs929271 do gene LIF, todos da rota da p53) em 42 mães de gêmeos e 101 mulheres que só tiveram gestações únicas, todas naturais de CG.Todos os polimorfismos foram identificados pelo sistema TaqMan de discriminação alélica através de PCR em tempo real. Foram realizados testes de zigosidade em 41 pares de gêmeos residentes de CG com o kit Identifilier da Applied Bisystems. A partir das análises epidemiológicas, demonstrou-se que a ocorrência de nascimentos de gêmeos em CG é frequente desde o início do século XX, mais especificamente em uma comunidade deste município, chamada Linha São Pedro, o que reforça a idéia de um efeito fundador. Não há associação entre gemelaridade em Cândido Godói e os polimorfismos estudados dos genes FSHR e MTHFR. Em compensação, foi observada associação dos alelos P72 do gene TP53 e o alelo T do gene MDM4 com gemelaridade. Estudos sugerem que esses alelos, além de estarem envolvidos nos mecanismos de supressão tumoral, estariam relacionados com infertilidade, sendo este, portanto, um resultado bastante interessante. Por serem alelos que resultam em apoptose menos eficiente, uma hipótese é que esses polimorfismos possuam um papel importante no período pós-implantação, “permitindo” o desenvolvimento de dois embriões quando o mais comum seria a eliminação de pelo menos um. Trabalhos demonstrando que camundongos com apoptose deficiente mantêm em maior porcentagem suas gestações e que, a combinação do alelo P72 com genótipos selvagens de MDM2 e LIF altera a probabilidade de sobrevivência de bebês do sexo masculino, são evidências que contribuem para essa hipótese. É importante salientar que esses resultados foram observados em uma população pequena, de origem étnica definida, contribuindo com apenas uma pequena fração do componente genético da herdabilidade da gemelaridade. Mais estudos devem ser realizados em coortes maiores e grupos com diferentes backgrounds genéticos. No entanto, eles sugerem uma explicação genética para o grande aumento na taxa de gemelaridade em CG e também apontam para uma possível nova função dos genes da rota da p53 na reprodução humana. / Twinning in humans is a complex etiology event, whose causes are not completely understood. Environmental factors such as advanced maternal age, increased parity, assisted reproduction and hormonal factors, among others, are associated with dizygotic twin pregnancies. Instead, there is little evidence of environmental factors related to monozygotic twins. Despite technological advances in genetics, it is still little knowledge about the genetic factors involved in the etiology of twin pregnancy. There are no clear associations between genetic factors and MZ twin pregnancies. On the other hand, studies show the influence of several genes in DZ twinning and genes that may influence the polyovulation, implantation and embryo development are good candidates for genetic studies. Cândido Godói (CG), located in northwestern of Rio Grande do Sul, is known as the "Twins’ Town" because of its high incidence of twin births. Recently the theory that the twins are product of experiments of Nazi doctor Josef Mengele gained wide dissemination by the press. However, the history of CG suggests that genetic factors, fueled by a founder effect occurred during the colonization of the municipality, are responsible for the recurrent double births in the city. This study aimed to test the plausibility of the "theory of Nazi doctor" and investigate possible genes related to multiple births in CG. For this, we analyzed the baptisms’ books of Catholic Churches of the city, the family histories and surnames of women in the sample collected for genetic testing. We investigated polymorphisms in genes involved in the mechanism of ovulation (Ser680Arg FSHR gene), in the embryo development (677 C ! T MTHFR gene) and in blastocyst implantation (P72R TP53 gene, rs1563828 in MDM4 gene, SNP309 in MDM2 gene, rs1529916 in USP7 gene and rs929271 in LIF gene, all in p53 pathway) in 42 mothers of twins and 101 women who had only singleton pregnancies, all natural of CG. All polymorphisms were identified by the system TaqMan of allelic discrimination by real-time PCR. Zygosity tests were performed in 41 pairs of twins residing in CG by the Applied Identifilier Bisystems. Epidemiological studies show that twin births in CG are recurrent since the beginning of the twentieth century, specifically in a community of this municipality, called Linha São Pedro, which reinforces the idea of a founder effect. There are no association between SNPs on FSHR and MTHFR genes and twinning. Nevertheless P72 allele of TP53 gene and T allele of MDM4 gene are associated with twinning in our study. Studies suggest that these alleles are not just involved with tumor suppression, but would be related to infertility, which is therefore a very interesting result. These alleles result in a less efficient apoptosis, therefore, a hypothesis is that these polymorphisms have an important role in post-implantation period, "allowing" the development of two embryos when the most common outcome would be the elimination of at least one. Studies demonstrating that mice with deficient apoptosis keep a greater percentage of their pregnancies, and that the combination of the P72 allele with wild genotypes of MDM2 and LIF change the probability of survival of male babies are a contributing evidence for this hypothesis. Importantly, these results were observed in a small population of defined ethnic origin, contributing only with a small fraction of the genetic component of heritability of multiple births. Further studies should be conducted in larger cohorts and groups with different genetic backgrounds. However, our results suggest a genetic explanation for the increased twinning rate in CG and also point to a possible new function of the route of the p53 gene in human reproduction.

Introdução A Fertilização in Vitro (FIV) é o principal tratamento para casais inférteis e tem como etapa inicial o processo de indução da ovulação. Os fármacos utilizados para o estímulo ovariano contêm variadas combinações de hormônios (FSH, LH e hCG). Os mais utilizados no nosso meio são a gonadotrofina menopausal humana (hMG) e hormônio folículo estimulante recombinante (FSHr). Eles diferem na sua composição, tendo o hMG os hormônios FSH e LH em iguais proporções além de uma pequena parcela de hCG, enquanto o FSHr contém apenas o FSH. Sabe-se que a interação do LH e do FSH é fundamental para o ciclo ovulatório espontâneo, no entanto, já se comprovou a efetividade do rFSH na estimulação ovariana da FIV. Os estudos são controversos em relação a taxas de gestação e outros desfechos relacionados ao estímulo ovariano, como dose de gonadotrofinas utilizadas, número de oócitos capturados, número de embriões e qualidade embrionária. Grande parte dos ensaios clínicos, publicados até então, pesquisou as diferenças entre essas duas medicações tendo como desfecho principal a taxa de gravidez ou o número de nascidos vivos após a FIV. No entanto, analisando com cuidado, vemos que a grande maioria desses estudos não recrutou um número suficiente de pacientes para detectar uma diferença estatisticamente significativa nesses desfechos. Ainda, os poucos estudos que arrolaram um número importante de pacientes se declararam patrocinados pela indústria farmacêutica, o que torna a análise de seus resultados prejudicada por um importante conflito de interesse. Objetivo Comparar as gonadotrofinas rFSH e hMG no protocolo de fertilização in vitro com o antagonista do GnRH tendo como desfecho principal a qualidade embrionária. Os desfechos secundários incluídos foram número e tamanho de folículos ao final da indução da ovulação, dose de gonadotrofina utilizada, número de oócitos capturados, número de embriões e taxas de gestação. Método Foi realizado um estudo randomizado onde foram recrutadas 168 mulheres com indicação de FIV. Foram randomizadas 85 pacientes para o uso de FSHr e 83 para o uso de hMG. Os embriões foram transferidos entre o terceiro e o quinto dia após a fertilização in vitro. O escore de graduação embrionário (GES) foi realizado através de avaliação de todos os embriões por 3 vezes, nos tempos: 16 – 18 horas, 25 – 27 horas e 64 – 67 horas, sempre pelo mesmo embriologista. Para pontuação do GES, avaliaram-se: citoplasma, morfologia pronuclear, fragmentação, alinhamento nucleolar, posição do corpo polar, número de blastômeros/morfologia e simetria. Resultados O escore total embrionário não diferiu entre os dois grupos (214.01 x 170.43, rFSH e hMG respectivamente, P = 0.13) , no entanto encontramos um escore de melhor embrião significativamente mais alto no grupo do FSHr (77,33 x 65,07 P = 0,03). Também foi estatisticamente maior o número de embriões nesse mesmo grupo (4,17 x 3,26 p=0,04). Não houve diferença na dose de gonadotrofinas, no número de folículos ao final da indução, no número de oócitos capturados ou nas taxas de gestação. Conclusão Concluímos que o tipo de gonadotrofina utilizada para o estímulo ovariano pode ter um impacto na qualidade embrionária. Esse achado pode ser relacionado à presença do LH, hipótese que deve ser explorada em novos estudos, para melhor compreensão e otimização do estímulo ovariano na FIV.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-13T19:10:04Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 252293 bytes, checksum: 1c80e8f3e74d50c3ed9b81b7885cf440 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-13T19:10:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 252293 bytes, checksum: 1c80e8f3e74d50c3ed9b81b7885cf440 (MD5) Previous issue date: 2004-02-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O experimento foi conduzido no Setor de Caprinocultura do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa, com o objetivo de avaliar o efeito da administração de hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH) e hormônio luteinizante (LH) sobre a indução e sincronização da ovulação em cabras em anestro sazonal com estro induzido pelo acetato de medroxiprogesterona (MAP). Foram utilizadas 45 cabras lactantes (30 da raça Alpina e 15 da raça Saanen), com idade variando entre 2 e 6 anos, peso corporal médio de 55,25 ± 12,96 kg, escore de condição corporal de 2,91 ± 1,05 e produção leiteira de 1,11 ± 0,63 kg. Os animais foram sincronizados pela inserção de esponjas intravaginais contendo 60 mg de MAP por nove dias, administração de 200 UI de gonadotrofina coriônica eqüina (eCG) e 37,5 μg de PGF 2α no 7o dia, por via intramuscular (IM). Após a sincronização, os animais foram aleatoriamente divididos em três tratamentos com 15 animais cada. Os animais do T1 (controle) receberam 1 mL de solução salina, os do T2 receberam 5 mg do LH e os do T3, 12,5 μg do GnRH, por via IM nas 24 horas após a retirada xdas esponjas. A inseminação artificial (IA) foi realizada às 24 e 36 horas, após a retirada das esponjas, com sêmen fresco e diluído. A ovulação foi monitorada por exames ultra-sonográficos, via transretal, em intervalo de quatro horas até a detecção da ovulação, tendo início 12 horas após a retirada das esponjas. A gestação foi confirmada por exame ultra- sonográfico, via transretal, 25, 40 e 60 dias após a inseminação. Os parâmetros avaliados não diferiram entre os animais das duas raças. A percentagem de animais em estro encontrada neste experimento foi de 100,0; 73,3 e de 66,6%, e o intervalo da retirada da esponja ao início do estro foi em média de 34,8 ± 10,4; 29,3 ± 3,2 e de 31,5 ± 3,0 horas para os animais do tratamento-controle, LH e GnRH, respectivamente, não diferindo entre os tratamentos. A duração do estro também, não diferiu entre os três tratamentos. O intervalo médio da retirada da esponja à ovulação foi de 46,6 ± 9,3; 52,1 ± 5,1 e de 41,6 ± 8,7 horas para o tratamento-controle, LH e GnRH, respectivamente, com diferença entre os animais do tratamento LH e GnRH (P<0,01). A ovulação após as injeções ocorreu em média 21,3 ± 8,6; 26,8 ± 4,1 e 22,3 ± 13,3 horas, para o tratamento-controle, LH e GnRH, respectivamente, não havendo diferença entre os tratamentos. Houve diferença do intervalo do início do estro à ovulação para os animais do tratamento LH e GnRH em relação aos do controle (P<0,05). As taxas de gestação não diferiram entre os animais de todos os tratamentos, apesar de ser observada uma alta taxa de perda embrionária entre 25 e 40 dias de gestação nos animais do tratamento LH e GnRH. / The experiment was conducted in the section of Dairy Goat of Department of Animal Science of Federal University of Viçosa, with the objective to evaluate the effect of the administration of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and luteinizing hormone (LH) on the induction and synchronization of ovulation in does out of the breeding season with estrus induced by medroxyprogesterone acetate (MPA). Forty five does were used (Alpine, n = 30 and Saanen, n = 15) with aged between 2 and 6 years, an average body weight of 55. 25 ± 12.96 kg, body condition score of 2.91 ± 11.05 and milk yield of 1.11 ± 0.63 kg. The animals were synchronized by insertion intravaginal sponges impregnated with 60 mg of MPA) for nine days, associated with 200 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) and 37.5 μg of cloprostenol in the 7th day. After the synchronization, the animals were randomly allotted in three treatments with 15 animals each. The animals of treatment 1 (control) received 1 mL of saline solution, treatment 2 received 5 mg of LH and T3 received 12.5 μg of GnRH, by intramuscular injection, 24 hours after the removal of the intravaginal xiisponges. Artificial insemination was done at 24 and 36 hours after the sponge removal, with fresh and diluted semen. The ovulation was monitored by transrectal ultrasound at 4 hours interval until the detection of ovulation, beginning 12 hours after the sponge removal. Gestation was confirmed with the aid of transrectal ultrasound on the 25, 40 and 60 days after the AI. The evaluated parameters did not differ between the two breeds of animals. The percentage of animals in estrus observed in this experiment was of 100.0, 73.3 and 66.6% and the interval from sponge removal to estrus was of 34.8 ± 10.4; 29.3 ± 3.2 and of 31.5 ± 3.0 hours for the control, LH and GnRH treatments, respectively, not observing difference among the treatments. There was no difference for the estrus length among animals of the three treatments. The average interval from sponge removal to ovulation was of 46.6 ± 9.3, 52.1 ± 5.1 and of 41.6 ± 8.7 hours for the control, LH and GnRH treatments, respectively. There was difference (P<0,01) between LH and GnRH treatments. Ovulation after injections occurred on average 21.3 ± 8.6, 26.8 ± 4.1 and 22.3 ± 13.3 hours, for the control, LH and GnRH treatments respectively, not observing difference among the treatments. There was difference (P<0.05) from the beginning of estrus to ovulation for LH and GnRH treatments in relation to control. Gestation rates did not differ among the treatments, despite the high rate of embryonic loss observed between 25 and 40 days of gestation in the animals of LH and GnRH treatments.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T11:39:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 275775 bytes, checksum: 1a7b24a9d4a1b02a01b3128bec3ff97c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T11:39:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 275775 bytes, checksum: 1a7b24a9d4a1b02a01b3128bec3ff97c (MD5) Previous issue date: 2001-03-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivou-se avaliar dois protocolos para sincronização de ovulação em gado de leite. Os animais foram alocados em dois tratamentos (T1 e T2), sendo que as fêmeas do T1 receberam buserelina (análogo do GnRH) (10μg, Dia 0), PGF 2α (250 mg, Dia 7) e buserelina (10μg, Dia 9), e as fêmeas do T2 receberam semelhante tratamento, mas no lugar da segunda dose de buserelina receberam 1 mg de benzoato de estradiol (BE) no Dia 8. Os animais do T1 foram inseminados 24 horas após a segunda aplicação de buserelina e os do T2 foram inseminados 35 horas após a aplicação de benzoato de estradiol. A dinâmica folicular e a concentração de progesterona plasmática foram monitoradas em oito vacas de cada tratamento. A primeira administração de GnRH induziu a ovulação em 31% das vacas (5/16) e a atresia folicular ocorreu em 56% das vacas tratadas (9/16). A emergência de uma nova onda folicular ocorreu 1,93±1,23 dias após a administração do GnRH em 87,5% das vacas (14/16). Após a administração de PGF 2α ocorreu luteólise completa em 56% das vacas (9/16). O diâmetro máximo dos folículos ovulatórios foi similar nos animais dos dois tratamentos. A ovulação dos animais do T1 foi observada 31,0 ± 8,19 horas após a aplicação do GnRH e nos do T2 decorridas 40,74 ± 3,96 horas após a aplicação do BE. Nas vacas do T1, a sincronização de ovulação ocorreu dentro de um intervalo de 20 horas após a segunda aplicação de GnRH versus a sincronização mais precisa das vacas do T2, que ocorreu dentro de 9 horas. Nesse experimento, observou-se 100% de ovulação no T1 após a aplicação do GnRH e 87,5% no T2 após a aplicação de BE. Porém, apesar dos excelentes resultados encontrados na sincronização de ovulação, as taxas de gestação obtidas nos animais deste experimento foram baixas nos dois tratamentos, no T1 foi de 16,7% e no T2 de 17,4% diagnosticadas aos 139 dias. Os folículos dominantes dos animais do experimento tiveram seus períodos de dominância prolongados, apresentando aproximadamente 7 dias nos dois tratamentos. Com base nos resultados obtidos, concluiu-se que os dois tratamentos foram efetivos em sincronizar a ovulação dos animais tratados, porém resultaram em baixas taxas de gestação, provavelmente decorrente do prolongamento da duração do período de dominância que foi observado nos animais de ambos os tratamentos e que pode ter levado a queda da qualidade dos ovócitos derivados desses folículos. / The objective of this study was to evaluate two protocols in order to synchronize the ovulation in dairy cattle. The dairy cows were assigned into two treatments (T1 e T2), the animals from T1 received buserelin (10μg, Day 0), PGF 2α (250 mg, Day 7) and buserelin (10μg, Day 9), and the animals from T2 received the same treatment, but 1 mg of estradiol benzoate on day 8 replaced the injection of GnRH on day 9. The animals from T1 were inseminated 24 hours after the second buserelin and the T2 ones were inseminated 35 hours after the estradiol benzoate injection. The follicle development and the plasma progesterone concentration were monitored in eight cows of each treatment. The first administration of GnRH induced ovulation in 31% of the cows (5/16) and follicle atresia in 56% of treated cows (9/16). The emergence of a new follicle wave occurred 1.93±1.23 days after GnRH administration in 87.5% of the cows (14/16). A complete luteolysis occurred after PGF 2α administration in 56% of the cows (9/16). The ovulatory follicle maximum diameter was similar in the two treatments. The ovulation time of the animals from T1 was 31.0 ± 8.19 hours after the GnRH administration and time for T2 40.74 ± 3.96 hours after BE administration. The ovulation time for the cows of T1 occurred within 20 hours from the end of treatment versus the ovulation time for the T2 cows that occurred within 9 hours in a shorter time than the first ones. The animals from T1 showed 100.0% ovulation rate after GnRH administration and 87.5% in T2, after BE administration. Despite, the excellent results of the ovulation time the pregnancy rates were low in the animals from both treatments of this experiment, being 16.7 and 17.4%, respectively, detected on day 139. The dominant follicles extended their life for about 7 days in the two treatments. Based on the results of this experiment, it is concluded that the two treatments were effective in synchronizing ovulation of the treated animals, but the low pregnancy rates, probably occurred because of the extended life of the dominant follicle from the cows of both treatments, which could be the cause of the decreased in oocytes quality of these follicles.