Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, da Universidade do Extremo Sul Catarinense- UNESC, para obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / A deficiência de desidrogenase de acil-CoA de cadeia média (MCADD) é o mais frequente defeito de beta-oxidação dos ácidos graxos, cujos pacientes apresentam o acúmulo de ácidos graxos de cadeia média, principalmente dos ácidos octanoico (AO), decanoico e cis-4-decenoico, em tecidos e fluidos biológicos. Durante as crises, os indivíduos afetados podem apresentar vômito, hipotonia, letargia e convulsões, podendo evoluir para coma e morte. Cronicamente, os pacientes apresentam atraso no desenvolvimento psicomotor, paralisia cerebral, retardo no crescimento, alterações comportamentais e dificuldade de atenção. No presente trabalho, investigou-se o efeito da administração intracerebroventricular (ICV) de AO sobre a atividade e a expressão da enzimas Na+,K+-ATPase, os níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS), conteúdo de sulfidrilas e conteúdo de água em cérebro de ratos adultos. Para tanto, ratos Wistar machos com 60 dias de vida receberam uma única administração ICV de AO (0,83 μmol/μL; grupo AO) ou líquido cefalorraquidiano artificial no mesmo volume (grupo controle). Os animais sofreram eutanásia uma hora após a administração e o cérebro foi retirado e as estruturas córtex cerebral, estriado, hipocampo e cerebelo foram isoladas, limpas e utilizadas para as análises. Observouse que a administração de AO diminuiu significativamente a atividade da enzima Na+,K+-ATPase em córtex cerebral e hipocampo, sem alterar significativamente essa atividade em estriado e cerebelo. Além disso, a expressão de subunidades catalíticas da Na+,K+-ATPase não foi alterada em córtex cerebral e hipocampo pela administração ICV de AO. Por outro lado, observou-se um aumento significativo do níveis de TBA-RS, um marcador de peroxidação lipídica, em todas as estruturas cerebrais analisadas no grupo que recebeu AO em comparação ao grupo controle. Adicionalmente, o conteúdo de grupos sulfidrila foi diminuído significativamente em córtex cerebral, estriado e cerebelo de animais do grupo AO. Por fim, não houve alteração no conteúdo de água no cérebro desses animais, quando comparados ao grupo controle, sugerindo que a administração de AO não induz edema cerebral. Diante dos resultados demonstrados, pode-se sugerir que a administração ICV de AO inibe a atividade da Na+,K+-ATPase, enzima importante para a manutenção da homeostase cerebral, possivelmente por induzir oxidação de lipídeos de membrana plasmática. Estes dados podem contribuir para a compreensão dos mecanismos fisiopatológicos que levam aos achados neurológicos característicos dos pacientes afetados por MCADD.

O consumo de ácidos graxos n-3 tem sido associado à proteção contra a obesidade, inflamação e resistência à insulina. Os n-3 são ligantes fracos dos receptores nucleares PPARγ, e pela ativação deste podem exercer suas ações metabólicas e anti-inflamatórias. No presente trabalho, foi investigado se o aumento da disponibilidade dos n-3 geneticamente ou por dieta, via ativação de PPARγ, protege camundongos do desenvolvimento da obesidade, intolerância a glicose e inflamação do tecido adiposo. Foi visto em um modelo com camundongos fat-1 (elevados níveis endógenos de n-3) que dentre as ações dos ácidos graxos n-3, a proteção contra o aumento de peso/adiposidade associada à obesidade, bem como a melhora da intolerância à glicose são dependentes de PPARγ. Além disso, por meio da utilização de camundongos com deleção de PPARγ em hepatócitos os dados desse trabalho mostram que os PPARγ são, ao menos em parte, essenciais ao aumento da oxidação de ácidos graxos induzida pelos n-3 devido à modulação da expressão gênica e protéica de enzimas mitocondriais e peroxissomais. / The intake of n-3 fatty acids have been associated to the protection against obesity, inflammation and insulin resistance. The n-3 fatty acids are ligands of the nuclear receptor PPARγ, and by the activation of this receptor can promote their metabolic and anti-inflammatory effects. Herein, we investigated whether increasing body n-3 fatty acids levels either genetically or by a n-3 enriched diet protects mice from diet-induced obesity, glucose intolerance and adipose tissue inflammation through PPARγ activation. Fat-1 mice were protected from diet-induced obesity, glucose intolerance and adipose tissue inflammation. To better investigate PPARγ involvement in n-3 beneficial actions, mice with genetic deletion of PPARγ specifically in hepatocytes. In spite of the absence of changes in body weight and glucose homeostasis PPARγ deletion in hepatocytes completely abolished the increase in liver fatty acid oxidation and hepatic gene expression of genes associated to mitochondrial and peroxisomal activity.

Submitted by Edineia Teixeira (edineia.teixeira@unioeste.br) on 2018-02-27T12:47:21Z No. of bitstreams: 2 Fernanda_Morita2017.pdf: 1916527 bytes, checksum: d53cab0d448357d03f1447766ef5948a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-27T12:47:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Fernanda_Morita2017.pdf: 1916527 bytes, checksum: d53cab0d448357d03f1447766ef5948a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Objective: Here, we compared the effects of Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) and sleeve gastrectomy (SG) on fat liver deposition and expression of hepatic enzymes involved in hepatic de novo (DN) lipogenesis and β-oxidation, in western diet (WD)-obese rats. Background: Bariatric operations are known to improve non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), often found in obese humans. However, comparative studies on the efficacy of different bariatric procedures against NAFLD are scarce. Methods: At two months after WD consumption, the rats were divided into three groups: WD sham operation (WD-Sham), WD-RYGB and WD-SG. Three months after procedures, hepatic steatosis and lipid metabolism were verified. Results: After 3 months, body weight and abdominal fat mass were lower in WD-RYGB, compared with WD-SG rats. Both bariatric operations enhanced glucose tolerance and decreased triglycerides (TG) serum levels. However, total serum cholesterol (CHOL) as well as, hepatic TG and CHOL contents were reduced only in liver of WD-RYGB rats. Hepatic steatosis was corrected in 83% of the WD-RYGB rats, whereas microvesicular steatosis occurred in 100% of the WD-SG livers. Reduction in FASN protein content was observed in both WD-RYGB and WD-SG rats. However, reduced hepatic ACC and enhanced pACC/ACC and CPT-1a protein levels were observed only in WD-RYGB rats. Conclusions: NAFLD is more marked reduced in obese rats that underwent RYGB than SG procedures. This RYGB effect may be associated with decreased hepatic DN lipogenesis, associated with enhancement in β-oxidation, which reduced TG and CHOL content in the liver and serum of WD rats. / Introdução: As operações bariátricas são conhecidas por melhorar a doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA), frequentemente encontrada em indivíduos obesos. No entanto, estudos que comparam a eficácia de diferentes procedimentos bariátricos sobre a DHGNA são escassos. Objetivo: Nesse trabalho, são comparados os efeitos da Derivação Gástrica em Y de Roux (DGYR) e da Gastrectomia Vertical (GV) sobre a esteatose hepática e sobre a expressão de enzimas envolvidas na lipogênese de novo e β-oxidação no fígado de ratos obesos pela dieta de cafeteria. Métodos: Dois meses após o consumo de dieta de cafeteria, os ratos foram divididos aleatoriamente em três grupos: cafeteria pseudo-cirúrgico (CAF-PC), cafeteria derivação gástrica em Y Roux (CAF-DGYR) e cafeteria gastrectomia vertical (CAF-GV). Três meses após os procedimentos cirúrgicos, a esteatose hepática e o metabolismo lipídico foram avaliados. Resultados: Três meses após os procedimentos operatórios, os animais CAF-DGYR apresentaram menor peso corporal e gordura abdominal em comparação com os ratos CAF-PC e CAF-GV. Ambas as operações bariátricas aumentaram a tolerância à glicose e diminuíram a concentração de triglicerídeos (TG) plasmáticos. No entanto, o colesterol total (COL), bem como as concentrações de TG e COL hepáticos, foram reduzidos apenas no fígado dos ratos CAF-DGYR. A esteatose hepática foi corrigida em 83% dos ratos CAF-DGYR, enquanto que os animais CAF-GV apresentaram 100% de esteatose microvesicular. Os ratos CAF-DGYR e CAF-GV apresentaram redução na expressão proteica da FASN. No entanto, apenas os animais CAF-DGYR tiveram redução da proteína ACC e aumento da razão da pACC/ACC e CPT-1a. Conclusões: A operação de DGYR foi mais eficaz na redução da DHGNA em ratos obesos, em comparação com a GV. Esse efeito da DGYR pode estar associado à diminuição da lipogênese hepática de novo, associado ao aumento da β-oxidação, que levou à redução das concentrações de TG e COL no plasma e no fígado de ratos obesos por dieta de cafeteria.

O consumo de ácidos graxos n-3 tem sido associado à proteção contra a obesidade, inflamação e resistência à insulina. Os n-3 são ligantes fracos dos receptores nucleares PPARγ, e pela ativação deste podem exercer suas ações metabólicas e anti-inflamatórias. No presente trabalho, foi investigado se o aumento da disponibilidade dos n-3 geneticamente ou por dieta, via ativação de PPARγ, protege camundongos do desenvolvimento da obesidade, intolerância a glicose e inflamação do tecido adiposo. Foi visto em um modelo com camundongos fat-1 (elevados níveis endógenos de n-3) que dentre as ações dos ácidos graxos n-3, a proteção contra o aumento de peso/adiposidade associada à obesidade, bem como a melhora da intolerância à glicose são dependentes de PPARγ. Além disso, por meio da utilização de camundongos com deleção de PPARγ em hepatócitos os dados desse trabalho mostram que os PPARγ são, ao menos em parte, essenciais ao aumento da oxidação de ácidos graxos induzida pelos n-3 devido à modulação da expressão gênica e protéica de enzimas mitocondriais e peroxissomais. / The intake of n-3 fatty acids have been associated to the protection against obesity, inflammation and insulin resistance. The n-3 fatty acids are ligands of the nuclear receptor PPARγ, and by the activation of this receptor can promote their metabolic and anti-inflammatory effects. Herein, we investigated whether increasing body n-3 fatty acids levels either genetically or by a n-3 enriched diet protects mice from diet-induced obesity, glucose intolerance and adipose tissue inflammation through PPARγ activation. Fat-1 mice were protected from diet-induced obesity, glucose intolerance and adipose tissue inflammation. To better investigate PPARγ involvement in n-3 beneficial actions, mice with genetic deletion of PPARγ specifically in hepatocytes. In spite of the absence of changes in body weight and glucose homeostasis PPARγ deletion in hepatocytes completely abolished the increase in liver fatty acid oxidation and hepatic gene expression of genes associated to mitochondrial and peroxisomal activity.