La aplicación de procesos biotecnológicos como la separación de espermatozoides X e Y mediante citometría de flujo, pueden generar la eliminación de determinados componentes del plasma seminal necesarios para conservar su funcionalidad. En este sentido, se ha observado que la adición de plasma seminal al medio espermático, protege a los espermatozoides cuando estos son sometidos a separación espermática mediante citometría de flujo. Sin embargo, diversos estudios demuestran que rel efecto beneficioso que ejerce el plasma seminal sobre los espermatozoides reside en determinadas proteínas. En el caso de la especie porcina, hay estudios previos que determinan que el efecto protector que ejerce el plasma seminal sobre los espermatozoides, se debe a una proteína denominada heterodímero PSP-I/PSP-II. El efecto beneficioso de dicha proteína sobre la funcionalidad espermática en espermatozoides de verraco altamente diluidos parece estar conservada, en su subunidad PSP-II y, concretamente, en la fracción peptídica de ésta. Estudiar, además, su localización a lo largo del tracto genital del verraco así como en las distintas fracciones del eyaculado, puede ser importante para llegar a conocer si la presencia de este heterodímero en el medio de recogida espermático de espermatozoides X e Y, es beneficioso tanto en la funcionalidad como en la capacidad fecundante de estos espermatozoides. / Biotechnological procedures of semen, such as sexing using flow cytometry/cell sorting procedures, causes high dilutions during sperm manipulation, linked with the wash away or high dilution of seminal plasma components. Thus, to develop strategies to extend the viability of treated spermatozoa are necessary. It is well known that add seminal plasma (SP) to the sperm media contributes to preserving the integrity and the fertilizing potential of sperm. Nevertheless, the beneficial effects of seminal plasma seem to be restricted to specific proteins of the SP. In porcine, previous studies have related this protective effect of the seminal plasma on the sperm cells to a protein called PSP-I/PSP-II heterodimer. The beneficial effect of this protein on the functionality of highly diluted boar spermatozoa is largely preserved in its PSP-II subunit and does not appear to require its glycan moiety. Moreover, study its localization along male reproductive tract and in different portions of the ejaculate could be important to know if the presence of PSP-I/PSP-II heterodimer in the collection medium for sex sorted spermatozoa is beneficial on the in vitro function and in vivo fertilizing ability.

En la siguiente tesis se obtuvieron los siguientes resultados. La adición de plasma seminal a los espermatozoides altamente diluidos ejerce un efecto beneficioso variable dependiendo de la fuente de plasma seminal. El heterodímero PSP-I/PSP-II ejerce un efecto beneficioso sobre los espermatozoides altamente diluidos mediante su adhesión al acrosoma. La incubación produce la migración del heterodímero a la región post-acrosomal, siendo eliminado de la superficie espermática. La adición del heterodímero a los medios de cocultivo entre gametos disminuye significativamente la capacidad fecundante de los espermatozoides. La preincubación de los espermatozoides de verraco tanto frescos como congelados preserva la viabilidad y motilidad espermáticas no afecta a la capacidad fecundante de los espermatozoides frescos de verraco y disminuye la capacidad fecundante de los espermatozoides congelados, la cual puede ser restaurada parcialmente mediante un lavado a través de un gradiente de Percoll. / The addition of 10% of seminal plasma from certain boars maintains or enhances the viability of largely extended boar spermatozoa in vitro. The protective effect of the PSP-I/PSP-II heterodimer on highly-extended boar spermatozoa could be related to the adhesion of the heterodimer to the acrosome. Exposures of the gametes to the heterodimer during in vitro gamete co-incubation significantly decrease the sperm penetration rates and number of spermatozoa per oocytes in denuded oocytes. The effect could be mediated by exposed ZP receptors. Exposure of fresh or frozen-thawed boar spermatozoa to PSP-I/PSP-II preserves sperm viability and motility. Although there is no obvious influence of the heterodimer on the capability of fresh diluted boar spermatozoa to penetrate homologous oocytes, PSP-I/II exerts a deleterious effect when frozen-thawed spermatozoa are used to penetrate IVM-oocytes. A subsequent washing through a Percoll gradient estored sperm function in some of the cells.