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CaracterizaÃÃo quÃmica, atividade antioxidante e seguranÃa de uso de sementes de Licania rigida Benth / Chemical, antioxidant activity and safety Licania seed use rigid Benth

Igor Parra Pessoa 24 April 2015 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Radicais livres tÃm sido associados à etiologia e à progressÃo de diversas patologias crÃnico-degenerativas, e constituem um dos fatores de deterioraÃÃo da qualidade de alimentos. Existe um crescente interesse em encontrar fontes naturais e seguras de antioxidantes capazes de neutralizar esses agentes nocivos sem alterar de forma negativa caracterÃsticas sensoriais dos alimentos. Dentro deste contexto, extratos de plantas ricos em polifenÃis tÃm sido investigados para esse fim. Este estudo objetivou caracterizar a composiÃÃo fenÃlica do extrato etanÃlico (EELr) e fraÃÃes derivadas de sementes de Licania rigida (aquosa, FALr; metanÃlica, FMLr; acetato de etila, FAELr; clorofÃrmica, FCLr; hexÃnica, FHLr), estimar a capacidade antioxidante total e, paralelamente, avaliar a seguranÃa de uso atravÃs de testes de toxicidade in vitro e in vivo. Foram detectadas atravÃs de prospecÃÃo fitoquÃmica qualitativa trÃs classes de metabÃlitos secundÃrios no extrato: taninos, flavonoides e saponinas. AlÃm disso, foi determinada a quantidade de fenÃis totais, flavonoides e taninos do EELr e das fraÃÃes FAELr, FALr e FMLr (de 3,815 a 6,452; 0,006 a 0,135; 0,147 a 0,294 equivalentes em micrograma de Ãcido gÃlico, quercetina e Ãcido tÃnico por grama de amostra, respectivamente). Onze compostos fenÃlicos distintos, classificados como Ãcidos fenÃlicos e flavonoides, foram identificados via CLAE. O Ãcido cafeico e o Ãcido clorogÃnico foram os majoritÃrios dentre os Ãcidos fenÃlicos, e a quercetina e o kaempferol dentre os flavonoides. Em geral, o EELr, FALr, FAELr e FMLr mostraram atividade antioxidante no ensaio DPPH com CN50 variando de 2,79 a 196,6 Âg/mL. Em relaÃÃo ao ensaio de inibiÃÃo da peroxidaÃÃo lipÃdica (usando TBARS), a FALr foi capaz de prevenir peroxidaÃÃo lipÃdica tanto em condiÃÃes normais como na presenÃa de indutor de estresse (ferro). Houve tambÃm uma clara relaÃÃo positiva entre o conteÃdo de taninos das amostras e o bom desempenho nas atividades antioxidantes. Flavonoides como a quercetina, quercitrina e catequina correlacionaram-se positivamente com o resultado do teste DPPH e do TBARS sem induÃÃo de estresse por ferro. Jà os Ãcidos fenÃlicos, como Ãcido clorogÃnico, mostraram-se mais importantes quando o ferro foi usado. EELr, FALr, FAELr e FMLr mostraram perfil fenÃlico promissor com potente atividade antioxidante total. A composiÃÃo natural das sementes dessa planta pode ser explorada na indÃstria farmacÃutica para produzir nutracÃuticos. De forma geral, o EELr apresentou baixa ou nenhuma toxicidade de acordo com os ensaios utilizados. No entanto, abordagens mais sensÃveis como a toxicogenÃmica e ensaios de toxicidade crÃnica em animais devem ser feitos a fim de garantir a sua seguranÃa de uso. / Free radicals have been associated to the etiology and the progression of various chronic-degenerative diseases, and constitute one of the factors that affect food quality deterioration. There is a growing interest in finding natural and safe sources of antioxidants that are able to neutralize those damaging agents without negatively altering food sensorial characteristics. In this context, plant extracts rich in polyphenols have been investigated to this end. This study aimed to characterize the phenolic composition of the ethanolic extract (EELr) and derived fractions from Licania rigida seeds (aqueous, FALr; methanol, FMLr; ethyl acetate, FAELr; chloroform, FCLr; hexane, FHLr), to estimate the total antioxidant capacity and, at the same time, to evaluate the safe use through in vitro and in vivo toxicity tests. Phytochemical screening has detected three secondary metabolite classes from EELr: tannins, flavonoids and saponins. Moreover, it was determined the amount of total phenols, flavonoids and tannins (from 3.815 to 6.452; 0.006 to 0.135; 0.147 to 0.294 gallic acid, quercetin and tannic acid equivalents in micrograms per gram of sample, respectively). Eleven distinct phenolic compounds, classified as phenolic acids and flavonoids, were identified by HPLC. The caffeic and chlorogenic acid were the major compounds among the phenolic acids, and quercetin and kaempferol among the flavonoids. In general, the EELr, FALr, FAELr and FMLr showed antioxidant activity towards the DPPH free radical with SC50 ranging from 2.79 to 196.6 Âg/mL. Regarding the inhibition of lipid peroxidation assay (using TBARS), FALr was capable of preventing lipid peroxidation both in normal conditions and in the presence of stress inducer (iron). There was a clear positive relation between the samplesâ tannin content and a good performance in the antioxidant activities. Flavonoids as quercetin, quercitrin and catechin correlated positively with the results of DPPH assay and TBARS assay without iron as a stress-inducer. In the other hand, the phenolic acids, such as chlorogenic acid, showed to be more preponderant when iron was used. EELr, FALr, FAELr and FMLr showed a promising phenolic profile with potent antioxidant activity. The natural composition of L. rigida seeds can be explored in the pharmaceutical industries to produce nutraceuticals. Generally, the EELr presented low toxicity accordingly to the assays used. Nevertheless, more sensitive approaches like toxicogenomics and non-acute toxicity assays with animals must be performed to guarantee its safe use.

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