Magíster en Bioquímica área de Especialización en Bioquímica ambiental y Memoria para optar al Título de Bioquímico / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento hasta enero 2018 / El mercado de la uva de mesa en Chile es una importante fuente de ingreso económico, siendo nuestro país catalogado como líder exportador de esta fruta. Sin embargo, el principal problema de índole fitopatológico que afecta la uva de mesa son las infecciones producidas por el hongo Botrytis cinerea, que se caracterizan por generar pudriciones o atizonamientos de las partes florales, brotes y bayas, causando importantes pérdidas económicas. Su control incluye un manejo integrado del cultivo, además de un tratamiento químico preventivo mediante el uso de fungicidas. No obstante, aunque se realicen todas estas prácticas el control total no resulta satisfactorio, debido al aumento de cepas fúngicas resistentes a la acción de los fungicidas. Frente a esta problemática, se han estudiado otras formas de control dentro de las que se incluye la utilización de microorganismos capaces de impedir la infección de B. cinerea sobre cultivos susceptibles, entre los cuales podemos destacar el biocontrolador comercial Serenade, que posee como ingrediente activo la cepa bacteriana Bacillus subtilis QST 713. El objetivo principal de esta tesis fue caracterizar cepas bacterianas silvestres con actividad antifúngica y determinar la capacidad protectora de las bacterias contra el ataque del hongo sobre el vegetal. Se seleccionaron cepas bacterianas silvestres que al ser caracterizadas a nivel filogenético, bioquímico y ultraestructural, fueron clasificadas en el género Bacillus y en las especies B. subtilis y B. pumilus. Luego de evaluar su capacidad antifúngica mediante bioensayos in vitro e in vivo, se seleccionaron las cepas B. subtilis NB y B. pumilus G2, las que fueron capaces de proteger al tejido vegetal de forma más eficiente que el producto comercial Serenade. Posteriormente, se realizó extracción orgánica de las moléculas secretadas por estas bacterias, determinándose preliminarmente su naturaleza y estructura química, utilizando las técnicas TLC, IR, HPLC, LC-MS/MS y GC-MS. Finalmente, con el uso de estas metodologías se pudo demostrar que B. subtilis NB y B. pumilus G2 secretan enzimas que degradan la pared celular fúngica, dipéptidos cíclicos ciclo-(Pro-Leu) y ciclo- (Pro-Phe) y lipopéptidos cíclicos (iturinas, fengicinas y surfactinas). Estas bacterias poseen un gran potencial para controlar infecciones producidas por B. cinerea en las variedades de uva de mesa afectadas por este hongo. Sin embargo, se requieren estudios posteriores que permitan confirmar y ampliar los resultados de esta tesis, antes que se pueda desarrollar un producto comercial / Chile is a leading exporter of table grapes, and this market is an important source of income for the country. However, infection with the fungus Botrytis cinerea, characterized by the rotting of grape flowers, buds, and berries, causes important economic losses. Fungus control includes integrated crop management and preventive chemical fungicide treatments. Despite these practices, overall control is unsatisfactory as fungal strains become increasingly resistant to fungicides. Alternative control methods have been studied, including the use of microorganisms capable of preventing B. cinerea infection on susceptible cultivars. Among these is the commercial biocontrol Serenade, which contains the Bacillus subtilis QST 713 bacterial strain as the main active ingredient. The main objectives of this thesis were to characterize wild bacterial strains with antifungal activity and determine the protective ability of these strains for table grape vines challenged by B. cinerea. Wild bacterial strains were characterized at the phylogenetic, biochemical, and ultrastructural levels and classified in the genus Bacillus and species B. subtilis and B. pumilus. After evaluating antifungal capacities through in vitro and in vivo bioassays, the B. subtilis NB and B. pumilus G2 strains were selected. These strains were able to more efficiently protect plant tissue than the commercial product Serenade. Subsequently, the molecules secreted by these bacteria were organically extracted, and their chemical structures and natures were determined using the techniques TLC, IR, HPLC, LC-MS/MS, and GC-MS. These methodologies revealed that B. subtilis NB and B. pumilus G2 secreted enzymes that degraded the fungal cell wall, the cyclic dipeptides cyclo-(Pro-Leu) and cyclo-(Pro-Phe), and cyclic lipopeptides (iturins, fengycins, and surfactins). These bacteria show promising potential in controlling B. cinerea infections among affected Chilean table grape species. However, further studies are required to expand upon the present results before a product can be developed for commercial use / Proyecto DGT-2014AC

Tesis para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo y Grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias, Mención Sanidad Vegetal / Los nemátodos entomopatógenos (NEP) son considerados como una solución efectiva en el control de plagas del suelo, ya que son capaces de desplazarse en este hábitat para encontrar y parasitar al insecto hospedero. En este estudio se determinó la capacidad infectiva de Steinernema sp. aislamiento Licán Ray, en suelos de textura arenosa, franca y arcillosa, bajo condiciones de laboratorio. Primero se determinó la concentración adecuada en la arena experimental, por lo que se aplicaron concentraciones de 10, 50 y 100 JI cm-2. Posteriormente se midió el desplazamiento de los NEP, tanto vertical como horizontal, en arenas experimentales de 30/50/70 y 10/20/30/40 cm, respectivamente, utilizando como hospedero larvas de Galleria mellonella (L.). En los tres ensayos se midió la mortalidad al día 3, 6 y 9 después de la aplicación de los NEP. Todas las concentraciones de NEP provocaron 100% de mortalidad en todos los suelos, excepto en suelo arcilloso, donde se observó menor eficacia al utilizar la menor concentración. La velocidad de infección fue mayor cuando se aplicaron 50 y 100 JI cm-2 en las tres texturas. La capacidad de los NEP de desplazarse verticalmente e infectar al hospedero a 30 cm fue de 100% en todos los suelos, tardando más horas en infectar larvas en suelo arenoso. A 50 y 70 cm la mortalidad disminuyó, manteniendo el suelo franco la mayor eficacia. Al desplazarse horizontalmente, se observó diferencias a partir de los 30 cm en todos los suelos, siendo el NEP más eficiente en suelo franco y menos eficiente en suelo arenoso. Los resultados del presente estudio sugieren que Steinernema sp. tiene la capacidad de desplazarse tanto vertical como horizontalmente, pero su eficiencia en atacar al hospedero depende de la textura del suelo en que se encuentren. / Entomopathogenic nematodes (EPN) are considered an effective solution for the control of soil pests due to their capacity of moving in this habitat to find and parasitize the insect host. This study evaluated the infectivity of Steinernema sp. strain Licán Ray in sandy, loam and clay textured soils, under laboratory conditions. Firstly, concentrations of 10, 50 and 100 JI cm-2 were evaluated to establish the appropriate concentration of EPN in the experimental sand. Second, the displacement capacity of the EPN both vertically and horizontally was evaluated in experimental arenas at 30/50/70 and 10/20/30/40 cm, respectively, using Galleria mellonella (L.) larvae as host. In all three trials host mortality was evaluated at day 3, 6 and 9 after application of EPN. The results show that all EPN concentrations used caused 100% mortality in all soils, except for clay soil, where the efficacy decreased with the lowest concentration. The velocity of infection was highest with 50 to 100 cm-2 JI in all soil textures. The EPN capacity of vertically displacement and infection of the host at 30 cm was 100% in all textured soils, taking longer to infect larvae in sandy soil. At 50 and 70 cm mortality decreased, showing the loam soil the highest efficacy. When moving horizontally, differences were observed from 30 cm up in all textured soils, being EPN most efficient in loam and least efficient in sandy soil. These results suggest that Steinernema sp. has the capacity to displace in the soil, both horizontally and vertically, but their efficiency in attacking the host depends on the texture of the soil.

La plaga Spodoptera frugiperda (Lepidopteroa: Noctuidae), es una especie polífaga que se encuentra difundida en todos los países americanos, provocando grandes pérdidas en los rendimientos de varios cultivos. La plaga Aphis craccivora causa daños a los cultivos anuales como alfalfa, habas, alcachofa, tomate y otros, al alimentarse de la savia, provoca deformaciones en los brotes tiernos y enrollamiento de las hojas y la muerte de la planta; asimismo, secreta una mielecilla que favorece el desarrollo de especies de hongos causantes de fumagina, afectando la fotosíntesis de la planta. Dentro de las alternativas de control con bajo impacto ambiental, se realizó la investigación para evaluar la susceptibilidad de estas dos plagas a la cepa Beauveria bassiana CBLE-265, producida por el Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA), con la finalidad de determinar la concentración letal al 50 % (CL50) y la concentración letal al 90 % (CL90) de la cepa frente a la plaga Spodoptera frugiperda y la plaga Aphis craccivora. Para definir las concentraciones se tuvo como base la dosis comercial del producto. Para la inoculación se asperjaron soluciones en diferentes concentraciones de Beauveria bassiana CBLE-265 con atomizadores manuales, a las larvas del I, II, y III estadío de Spodoptera frugiperda, después se colocaron en rejillas acrílicas con dieta artificial para su evaluación, mientras que para Aphis craccivora se asperjaron a las ninfas que estaban en maceteros con alfalfa para su evaluación. Utilizando el programa Probit se analizaron los datos de mortalidad del bioensayo a partir del 5to día hasta que lleguen a la etapa adulta, determinándose mediante proyecciones la concentración letal media y la concentración letal noventa. Para Spodoptera frugiperda estadío I, el valor del CL50 fue de 1,90 x 1024 conidias/g y el valor del CL90 fue de 2,30 x 1031 conidias/g, para estadío II, el valor del CL50 fue de 7,90 x 1024 conidias/g y el valor del CL90 fue de 9,10 x 1031 conidias/g. Para el estadio III, no se encontró letalidad con la cepa estudiada. Así como para las ninfas de Aphis craccivora no tuvo efecto alguno la cepa estudiada, por lo que se concluye que la cepa Beauveria bassiana CBLE-265 no es adecuada para el control de Plaga como Aphis Craccivora, no teniendo un efecto significativo. / -- The plague Spodoptera frugiperda (Lepidopteroa: Noctuidae), is a polyphagous species that is widespread throughout in all Americans countries, causing great losses in yields of several crops. The plague Aphis craccivora cause damage to the annual crops as alfalfa, beans, artichoke, tomato and others, by feeding on sap, causing deformations in the buds and the leaves curl and the death of the plant; also, excreted a honeydew that encourages the development of species of fungi causing fumagin, affecting the photosynthesis of the plant. Among the control alternatives with lower environmental impact, research was conducted to evaluate the susceptibility of these two plagues at the strain Beauveria bassiana CBLE-265, produced by the National Service of Agrarian Health (SENASA), in order to determine the LC50 and LC90 of the strain against the plague Spodoptera frugiperda and the plague Aphis craccivora. To define the concentrations was based on the commercial dose of the product. For inoculation were sprayed solutions at different concentrations of Beauveria bassiana CBLE-265 with manual spray to the larva of I, II and III stage of Spodoptera frugiperda, then placed in acrylic racks with artificial diet for its evaluation, whereas Aphis craccivora were sprayed at the nymphs, were in pots with alfalfa for its evaluation. Using the Probit program were analyzed mortality data from bioassay of the 5th day until they reach the adult stage, determined through projections the median lethal concentration and lethal concentration ninety. For stage I of Spodoptera frugiperda, the value of LC50 was 1,90 x 1024 conidia/g and the value of LC90 was 2,30 x 1031 conidia/g, for stage II, the value of LC50 was 7,90 x 1024 conidia/g and the value of LC90 was 9,10 x 1031 conidia/g. While for the nymphs of Aphis craccivora had no effect of the strain studied, so it is concluded that the strain of Beauveria bassiana CBLE-265 is not adequate to control both plagues, not having a significant effect.

La plaga Spodoptera frugiperda (Lepidopteroa: Noctuidae), es una especie polífaga que se encuentra difundida en todos los países americanos, provocando grandes pérdidas en los rendimientos de varios cultivos. La plaga Aphis craccivora causa daños a los cultivos anuales como alfalfa, habas, alcachofa, tomate y otros, al alimentarse de la savia, provoca deformaciones en los brotes tiernos y enrollamiento de las hojas y la muerte de la planta; asimismo, secreta una mielecilla que favorece el desarrollo de especies de hongos causantes de fumagina, afectando la fotosíntesis de la planta. Dentro de las alternativas de control con bajo impacto ambiental, se realizó la investigación para evaluar la susceptibilidad de estas dos plagas a la cepa Beauveria bassiana CBLE-265, producida por el Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA), con la finalidad de determinar la concentración letal al 50 % (CL50) y la concentración letal al 90 % (CL90) de la cepa frente a la plaga Spodoptera frugiperda y la plaga Aphis craccivora. Para definir las concentraciones se tuvo como base la dosis comercial del producto. Para la inoculación se asperjaron soluciones en diferentes concentraciones de Beauveria bassiana CBLE-265 con atomizadores manuales, a las larvas del I, II, y III estadío de Spodoptera frugiperda, después se colocaron en rejillas acrílicas con dieta artificial para su evaluación, mientras que para Aphis craccivora se asperjaron a las ninfas que estaban en maceteros con alfalfa para su evaluación. Utilizando el programa Probit se analizaron los datos de mortalidad del bioensayo a partir del 5to día hasta que lleguen a la etapa adulta, determinándose mediante proyecciones la concentración letal media y la concentración letal noventa. Para Spodoptera frugiperda estadío I, el valor del CL50 fue de 1,90 x 1024 conidias/g y el valor del CL90 fue de 2,30 x 1031 conidias/g, para estadío II, el valor del CL50 fue de 7,90 x 1024 conidias/g y el valor del CL90 fue de 9,10 x 1031 conidias/g. Para el estadio III, no se encontró letalidad con la cepa estudiada. Así como para las ninfas de Aphis craccivora no tuvo efecto alguno la cepa estudiada, por lo que se concluye que la cepa Beauveria bassiana CBLE-265 no es adecuada para el control de Plaga como Aphis Craccivora, no teniendo un efecto significativo. / The plague Spodoptera frugiperda (Lepidopteroa: Noctuidae), is a polyphagous species that is widespread throughout in all Americans countries, causing great losses in yields of several crops. The plague Aphis craccivora cause damage to the annual crops as alfalfa, beans, artichoke, tomato and others, by feeding on sap, causing deformations in the buds and the leaves curl and the death of the plant; also, excreted a honeydew that encourages the development of species of fungi causing fumagin, affecting the photosynthesis of the plant. Among the control alternatives with lower environmental impact, research was conducted to evaluate the susceptibility of these two plagues at the strain Beauveria bassiana CBLE-265, produced by the National Service of Agrarian Health (SENASA), in order to determine the LC50 and LC90 of the strain against the plague Spodoptera frugiperda and the plague Aphis craccivora. To define the concentrations was based on the commercial dose of the product. For inoculation were sprayed solutions at different concentrations of Beauveria bassiana CBLE-265 with manual spray to the larva of I, II and III stage of Spodoptera frugiperda, then placed in acrylic racks with artificial diet for its evaluation, whereas Aphis craccivora were sprayed at the nymphs, were in pots with alfalfa for its evaluation. Using the Probit program were analyzed mortality data from bioassay of the 5th day until they reach the adult stage, determined through projections the median lethal concentration and lethal concentration ninety. For stage I of Spodoptera frugiperda, the value of LC50 was 1,90 x 1024 conidia/g and the value of LC90 was 2,30 x 1031 conidia/g, for stage II, the value of LC50 was 7,90 x 1024 conidia/g and the value of LC90 was 9,10 x 1031 conidia/g. While for the nymphs of Aphis craccivora had no effect of the strain studied, so it is concluded that the strain of Beauveria bassiana CBLE-265 is not adequate to control both plagues, not having a significant effect.

Los escarabajos de la especie Alphitobius diaperinus son una de las mayores plagas de granjas avícolas a nivel mundial. Las larvas y adultos de esta especie causan graves pérdidas económicas y daños sanitarios de los productos cárnicos y sus derivados comercializados. Actualmente se vienen desarrollando métodos químicos alternativos mediante el uso de semioquímicos en biotrampas para disminuir el uso de insecticidas como control rutinario de esta plaga. Sin embargo, se precisa mayor investigación con respecto a la identificación de las señales químicas de A. diaperinus y evaluación de su comportamiento conductual frente a esas señales, siendo estos factores clave para la eficacia de las biotrampas. El presente trabajo de tesis tiene como objetivo diseñar y desarrollar biotrampas avanzadas usando semioquímicos de A. diaperinus como herramientas químicas con el fin de reducir las poblaciones de esta plaga. Para ello, primero se evaluó, en horas de mayor actividad sexual, el efecto de las señales químicas emitidas por adultos de A. diaperinus de ambos sexos (hembras y machos) en sus estadios de experiencia sexual (virgen y experimentado) en la atracción a largo alcance y en las respuestas de comportamiento de apareamiento (tocar, montar y copular) a corto alcance sobre otros adultos mediante ensayos olfatométricos. Los adultos de A. diaperinus demostraron un comportamiento complejo en la atracción y apareamiento basado en señales olfativas de corto y largo alcance, las cuales se ven afectadas por el sexo y la experiencia sexual. Por un lado, se identificaron las señales olfativas asociadas al sexo y experiencia sexual que afectan el apareamiento y la atracción en adultos de A. diaperinus, lo cual permitió detectar un total de 67 señales químicas de largo alcance mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, de las cuales 28 señales son específicas a cada sexo y 39 señales generalizadas que emiten ambos sexos. Por otro lado, se detectaron 19 señales químicas de corto alcance relacionadas a su experiencia sexual, de las cuales todas las señales se detectaron en ambos sexos, mientras que solo 14 se detectaron en adultos vírgenes. Entre los compuestos identificados se encuentran alcanos, quinonas, benzotiazoles, benzofenonas, ácidos grasos, ésteres y terpenos. Adicionalmente, se evaluaron las respuestas electrofisiológicamente activas a las antenas de machos de las señales químicas de adultos de A. diaperinus según su sexo y experiencias sexual mediante cromatografía de gases acoplada a electroantenografía, detectando un total de 39 señales químicas electrofisiológicamente activas. Entre los compuestos identificados se encuentran benzoquinonas, limoneno, alcanos, ácidos grasos y ésteres. Posteriormente, se describieron los procesos de manufactura involucrados en el diseño de trampas que permita la captura de la plaga en estudio. Para su manufactura, se contempló parámetros físicos, métodos químicos de control y aspecto ecológico de esta plaga. Finalmente, se implementó y validó en laboratorio las biotrampas avanzadas fabricadas utilizando las señales de largo alcance de machos como herramientas químicas para el control de A. diaperinus. Los resultados del presente proyecto permiten sentar las bases a nivel nacional de una tecnología alternativa a los métodos convencionales para el control de la plaga de A. diaperinus en industrias avícolas. Asimismo, se espera contribuir con la generación de una tecnología limpia y simple que permita mejorar la productividad de la actividad avícola.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / El control de enfermedades de poscosecha es una problemática constante en la producción de uva de mesa, siendo Botrytis cinerea y Penicillium expansum, dos de los patógenos más importantes. El cuestionamiento a la cantidad máxima de residuos de agroquímicos permitidos en la fruta en los mercados de destino y la acotada cantidad de fungicidas disponibles en el mercado, han llevado a la búsqueda de alternativas a los fungicidas sintéticos, la cual se ha enfocado a productos naturales, amigables con el medio ambiente y libres de residuos. El principal objetivo de este estudio fue evaluar la actividad de 15 extractos de macrohongos en el control de ambos patógenos. Los macrohongos fueron colectados desde su ambiente natural, posteriormente secados, triturados y macerados en alcohol al 95%, y los extractos resultantes fueron utilizados en bioensayos de inhibición in vitro e in vivo. Para el control in vitro se enmendó agar papa dextrosa con cada extracto en etanol al 1% donde se sembró micelio y conidias de los patógenos. El control in vivo se realizó sobre bayas de uva de mesa del cv. Red Globe sometidas o no a desinfección previa con NaClO (0,5%). A las bayas se les realizó una herida y luego se aplicaron los extractos 1 y 24 horas antes de la inoculación con conidias de los patógenos. Los extractos con mayor efectividad inhibitoria in vitro del crecimiento miceliar de B. cinerea fueron Suillus luteus, Agarical sp. y Amanita sp. los que inhibieron en un 92,9, 71,0 y 69,4%, respectivamente. Para el control in vitro de P. expansum los dos extractos que tuvieron un mayor efecto fueron los de Agarical sp. y Agaricus arvensis con un 35,3 y 34,6% de inhibición del crecimiento miceliar, respectivamente. Los extractos con mayor efectividad en la inhibición de la germinación de conidias fueron: Agarical sp. y Macrolepiota rhacodes, para B. cinerea, y Agaricus arvensis y Laetiporus sulphureus para P. expansum. En el control in vivo solo el extracto de Amanita sp. tuvo un efecto en la inhibición de la pudrición causada por B. cinerea sobre las bayas, aplicado 24 horas antes de la inoculación, e igualmente en bayas sin desinfectar inoculadas con P. expansum. / Postharvest rots of table grapes are a constant problem for the industry with Botrytis cinerea and Penicillium expansum as the most important pathogens. Restrictions on the maximum amount of pesticide residues allowed on the fruit, and the limited number of fungicides registered in the markets have prompted the look for alternatives to the traditional chemical fungicides, focusing mainly on natural products environmentally friendly and free from residue restrictions. This study was aimed to evaluate the activity of 15 extracts of mushrooms in the control of both pathogens. The mushrooms were collected from their natural sources, dried, grounded and macerated in ethanol 95%, and the extracts obtained were evaluated in vitro and in vivo. Potato dextrose agar media was amended with the ethanol extracts at a rate of 1%, for the in vitro tests with mycelia or conidia of the pathogens. In vivo assays were conducted on Red Globe berries that were surface disinfected with NaOCl (0,5 %) or not disinfected at all. The berries were wound inoculated with a spore suspension of each pathogen 1 or 24 hours after the extracts treatments. The extracts that gave the greatest inhibition of the mycelial growth of B. cinerea were those of Suillus luteus, Agarical sp. and Amanita sp, which gave a 92.9, 71.0 and 69.4 % inhibition, respectively. While the extracts with the higher inhibition of the mycelial growth of P. expansum were those of Agarical sp. and Agaricus arvensis with 35.3 and 34.6 % inhibition, respectively. The extracts with the higher inhibition of the conidia germination were those of Agarical sp. and Macrolepiota rhacodes, for B. cinerea, and Agaricus arvensis and Laetiporus sulphureus for P. expansum. Only the extract of Amanita sp. reduced the rot caused by B. cinerea when applied 24 hours before berry inoculation and the rot caused by P. expansum on berries that were not disinfected.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / En los últimos años, la enfermedad descrita como “Botryosphaeria dieback”, se ha transformado en un grave problema al no existir un método de control químico efectivo, potenciando la búsqueda de alternativas de control biológico eficaces en limitar el daño provocado por patógenos de la madera de la vid. Por lo anterior, el objetivo de esta investigación fue evaluar la acción de distintos biocontroladores sobre Diplodia seriata, que es el principal agente asociado en Chile al decaimiento y muerte del brazo de la vid. Se evaluaron distintos biocontroladores, fungosos (Trizian 1, Trizian 2, Closea 1, Producto comercial a base de Trichoderma spp. (Trichoderma harzianum cepa Queule, T. virens cepa Sherwood, T. parceramosum cepa Traile)) y bacterianos (Ballus 1, Ballus 2 y Producto comercial a base de Streptomyces lydicus WYEC 108). Estos tratamientos se compararon con un control químico a base de benomilo más mancozeb y controles inoculados y no inoculados con el patógeno. La evaluación se realizó mediante la determinación del índice de inhibición de la lesión en cada uno de los tratamientos. Se utilizaron sarmientos no enraizados de uva de mesa cv. Thompson Seedless, en los cuales se realizó una herida de 0,5 cm de diámetro. Una vez aplicados los tratamientos con los diferentes biocontroladores, se inocularon los sarmientos con un disco de micelio de D. seriata, cubriendo la zona de infección con parafilm. Los tratamientos fueron incubados por 30 días a una temperatura promedio de 20,3°C y una humedad relativa sobre el 98%. La inoculación con el patógeno se realizó en dos tiempos: 1 (tiempo 1) y 96 horas (tiempo 2) después de efectuados los tratamientos correspondientes. Los resultados mostraron que el mejor tratamiento fue el fungicida comercial con un 76,7% y 30,6% de eficacia tanto para el tiempo 1 como para el tiempo 2 respectivamente. Los mejores resultados de biocontrol con antagonistas bacterianos, se obtuvieron con el producto comercial a base de Streptomyces lydicus WYEC 108 y Ballus 2 con un índice de inhibición de 40,9% y 39,7%; menor porcentaje es el que obtuvo Ballus 1 alcanzando un índice de inhibición de 20%, en el tiempo 1. Los tratamientos en base a biocontroladores fúngicos que incluían Trichoderma spp.: producto comercial, Trizian 2 y Trizian 1, presentaron un índice de inhibición de 30,4%; 29% y 3,9% respectivamente en el tiempo 1, reduciendo a 0% la inhibición de D. seriata en el tiempo 2. A su vez Closea 1 logró un 20,3% de inhibición en el tiempo 1, siendo el único tratamiento que mejora su acción de biocontrol al aumentar el tiempo de inoculación del patógeno, alcanzando un 25,8% de inhibición en el tiempo 2. / In last years, the disease named "Botryosphaeria dieback", has been a serious problem due to ineffective chemical control methods. This has enhanced the search of effective biological control alternatives to limit the damage caused by trunk pathogens in grapevines. Therefore, the aim of this study was to evaluate the action of different biocontrollers on Diplodia seriata, which is the main agent of shoots decay and death in the vineyards of Chile. Several biocontrollers were evaluated, fungal (Trizian 1, Trizian 2, Closea 1, commercial product based on Trichoderma spp. (Trichoderma harzianum strain Queule, T. virens strain Sherwood, T. parceramosum strain Traile)) and bacterial (Ballus 1, Ballus 2 and commercial product based Streptomyces lydicus WYEC 108). These treatments were compared with a chemical control based on benomilo more mancozed and inoculated and uninoculated controls with the pathogen. The evaluation was made establishing the inhibition index of the lesion for each of the treatments. Unrooted canes of Thompson Seedless grapevines were used, in which a wound diameter of 0.5 cm was made. After applying the different biocontrollers treatments, the canes were inoculated with a mycelium disc of D. seriata, covering the area of infection with parafilm. Treatments were incubated for 30 days at 20.3°C on average and in a relative humidity above 98%. Inoculation with the pathogen was performed in two occasions: 1 (time 1) and 96 hours (time 2) after the corresponding treatments. The results showed that the best treatment was the commercial fungicide with 76.7% and 30.6% efficiency in time 1 and time 2, respectively. The best results of biocontrollers with bacterial antagonists were obtained with the commercial product based on Streptomyces lydicus WYEC 108 and Ballus 2 with an inhibition percentage of 40.9% and 39.7% respectively; the lowest percentage was the one managed with Ballus 1, reaching an inhibition index of 20% in time 1. Treatments based on fungal biocontrollers, as Trichoderma spp.: commercial product, Trizian 2 and Trizian 1 showed an inhibition percentage of 30.4%; 29% and 3.9% respectively at time 1, reducing to 0% inhibition of D. seriata in time 2. Closea 1 achieved a 20.3% inhibition at time 1, being the only treatment that enhanced the action as a biocontroller with increasing time of pathogen inoculation, reaching a 25.8% inhibition at time 2.

Expone que, en el Perú el uso indiscriminado de insecticidas químicos para combatir las plagas agrícolas ha generado resistencia en los insectos plaga y no ha solucionado los problemas de producción y exportación del agricultor. Se han evaluado diversos controladores con resultados exitosos, convirtiendo al Control Biológico en una eficaz alternativa a través de insectos biocontroladores, garantizando además productos de consumo inocuos a la salud humana y su entorno. El objetivo de este trabajo fue evaluar y determinar la capacidad del Chelonus insularis (Hymenoptera:Braconidae) como parasitoide de tres especies de Spodoptera en condiciones de laboratorio. Se estableció la crianza de Spodoptera en el insectario utilizando dieta artificial. Las tres especies de Spodoptera tuvieron un desarrollo larval que duró 20 días a temperaturas de 22ºC a 28ºC; de 15 días en verano a 29ºC; y 45 días en invierno entre 12ºC y 15ºC. También se implementó la crianza de Chelonus insularis bajo condiciones de laboratorio, desde el periodo de oviposición hasta la obtención de los adultos, completando el ciclo en 24 días. Se determinó la eficacia del himenóptero como controlador sobre las larvas de las especies de Spodoptera mediante bioensayos que consistieron en tres tratamientos cada uno con tres repeticiones por especie. Cada tratamiento consistió en enfrentar las posturas de la plaga con hembras de Chelonus insularis, observándose en cada caso, alta mortalidad de la plaga. La capacidad de parasitismo del Chelonus insularis fue de 67% en S. eridania, 68.21% en S. frugiperda, y 70.5% en S. ochrea; por lo que se concluye que Chelonus insularis, tiene un buen potencial como controlador biológico. / Tesis

El cafeto (Coffea arábica, L.) es uno de los principales productos de la canasta agroexportadora peruana, hecho que ha contribuido con el desarrollo económico y social del Perú. Sin embargo este se ve afectado por enfermedades fúngicas como la pudrición vascular causado por Fusarium oxysporum, reduciendo el sistema radicular en más de 90% afectando la producción y calidad. Por ello, se busca aislar cepas nativas de Bacillus y Trichoderma de rizósfera de café con capacidad antagonista frente a Fusarium oxysporum que puedan utilizarse en programa de manejo integrado de plagas del cafeto, en el distrito de Monzón, región Huánuco. Se logró aislar 30 cepas de Bacillus ssp. y 20 cepas de Trichoderma spp las mismas que fueron evaluadas por su capacidad antagonista frente al patógeno F. oxysporum, siguiendo la metodología de enfrentamiento directo dual en el medio Agar Papa Dextrosa . Se realizó pruebas bioquímicas, caracterización macroscopica y microscópica a las cepas con actividad antagonista y se identificó por claves taxonómicas. Las 9 cepas de Trichoderma (M3PI.I, B1.T, MTS.I, MT5.A, MT12.A, PLSO1, TL7.R, MT24.I, MT14.e) y 6 cepas de Bacillus (MT1.I, MT1.II, MT2.I, MT2.II, MT7, MT3P3) con actividad antagonista; siendo la cepa M3PI.I la que alcanzó 80 % de actividad de inhibición del fitopatogeno. Las cepas con mayor actividad antagonista (MT3P3, B1.T, MTS.I) fueron identificadas molecularmente como Trichoderma sp, Trichoderma asperellum, Trichoderma sp respectivamente. Las cepas aisladas de Bacillus sp y Trichoderma sp podrían considerarse como potenciales biocontroladores de pudrición vascular en cafeto representando una nueva vía de trabajo en pro de una agricultura sostenible. / Tesis