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Micropropagação de cana-de-açúcar cultivar RB966928

Franca, Mariana Almeida January 2016 (has links)
Orientador : Prof. Dr. João Carlos Bespalhok Filho / Co-orientador : Profª. Drª. Giovana Bomfim de Alcantara / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 23/02/2016 / Inclui referências : f. 24-30-51-53-62-63 / Área de concentração: Produção vegetal / Resumo: A cana-de-açúcar foi trazida para o Brasil para quebrar o monopólio de produção de açúcar do Oriente Médio e, desde então, passou a ser uma cultura de grande importância econômica para o país. Atualmente o Brasil é o maior produtor de cana e de açúcar do mundo. Isto é devido ao somatório de variáveis favoráveis como: o clima adequado para a produção, o desenvolvimento de cultivares elite e o manejo da cultura. O desenvolvimento de cultivares de excelência é um ponto chave na produção. A cultivar RB966928 foi desenvolvida pela RIDESA e lançada no mercado em 2010. Ela possui boa brotação em cana planta e cana soca, resistência às principais doenças e excelente adaptabilidade fenotípica. O censo varietal realizado pela RIDESA em 2015 mostrou que a cultivar RB966928 foi a mais plantada nos estados de São Paulo e Mato Grosso do Sul. Aliado ao uso de boas cultivares está o uso de mudas de qualidade, que ajudam a reduzir perdas, uniformizam a plantação e elevam a fitossanidade. Neste contexto a micropropagação tem um importante papel na produção de mudas, já que é possível produzir mudas de excelência em espaço e tempo reduzidos, além de garantir um alto grau de fitossanitarismo. Desta forma é importante desenvolver e otimizar protocolos de micropropagação para a produção massal de mudas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de micropropagação para a cultivar de cana-de-açúcar RB966928. Para a brotação de meristemas foram testados dois tratamentos: meio de cultura MS com O mg L-1 de cinetina e O mg L-1 de BAP e meio de cultura MS com 0,1 mg L-1 de cinetina e 0,2 mg L-1 de BAP. Para a multiplicação avaliou-se as concentrações de O; 0,2; 0,5 e 1 mg L-1 de BAP em meio MS. Para a multiplicação em biorreator de imersão temporária avaliou-se as frequências de imersão de 1 vez ao dia, 4 vezes ao dia e 8 vezes ao dia e os tempos de imersão de 5, 10 e 25 minutos. Para o enraizamento utilizou-se os meios de cultura MS, MS com redução dos sais pela metade, MS com 0,5 mg L-1 de AIB e MS com 70 g L-1 de sacarose. Para a aclimatização variou-se a presença e ausência de urna cobertura com saco plástico para o crescimento das plantas e os locais de acondicionamento: sala de crescimento e casa de vegetação. Foi testado, também, a influência de concentrações de sacarose no enraizamento da cultivar RB966928 in vitro. Foram realizados cinco tratamentos com as seguintes concentrações de sacarose O; 20; 40; 60 e 80 g L-1 o A maior porcentagem de meristemas brotados foi obtida utilizando meio de cultura suplementado com citocininas. As concentrações crescentes de BAP elevaram as taxas de brotações adventícias, porém as concentrações mais altas reduziram o crescimento da parte aérea, assim a melhor dosagem para multiplicação da cultivar foi a de 0,2 mg L-1 de BAP. No biorreator a melhor frequência de imersão foi de 4 vezes ao dia e o tempo de 5 minutos de imersão. Para o enraizamento as plantas suplementadas com 70 g L-1 de sacarose apresentaram maior crescimento de raízes e na aclimatização as plantas podem ser mantidas sem a cobertura do saco plástico e em casa de vegetação sem grandes prejuízos. O aumento crescente nas concentrações de sacarose elevou o comprimento da parte aérea, raízes, número de raízes, peso seco e fresco. A concentração de 60 g L-1 de sacarose foi a que apresentou os melhores resultados. Desta forma foi possível desenvolver um protocolo de micropropagação para a cultivar de cana-de-açúcar RB966928. Palavras-chave: Saccharum spp., biorreator de imersão temporária, meristema, sacarose. / Abstract: The sugarcane was brought to Brazil to break the sugar production monopoly in lhe Middle East and since then the sugarcane has become a very important crop for the economic in the country. Currently Brazil is the largest producer of sugarcane and sugar in the world. This is due to the sum of favorable variables such as climate for the production, development of elite cultivars and crop management. The development of excellent cultivars is a key point for producing. The cultivar RB966928 was developed by RIDESA released on the market in 2010. lt has good plant cane and ratoon cane sprouting, resistance to major diseases and great phenotypic adaptability. The varietal census conducted by RIDESA in 2015 showed that RB966928 was the most planted cultivar in the states of São Paulo and Mato Grosso do Sul. Coupled with the use of good cultivars is the use of quality seedlings, which assist to reduce losses, standardize planting and increase plant health. In this context micropropagation has an important role in the production of seedlings since it is possible to produce seedlings of excellence on reduced space and time in addition to ensuring a bigh levei of plant health. Thus it is important to optimize micropropagation protocols for mass production of seedlings. The objective of tbis study was to develop a micropropagation protocol for sugarcane cultivar RB966928. For regeneration meristems two treatments were tested: culture media MS with O mg L-1 kinetin and O mg L-1 BAP and culture media MS with 0.1 mg L-1 kinetin and 0.2 mg L-1 BAP. For multiplication were tested concentrations ofO, 0.2, 0.5 e l mg L-1 BAP in culture media MS. For multiplication in temporary immersion bioreactor the following aspects were evaluated: lhe immersion of l time a day, 4 times a day or 8 times a day and dipping frequency of 5, 10 and 25 minutes. For rooting it was compared the MS culture media, MS with salts reducing by half, MS with 0.5 mg L-1 de AIB and MS with 70 g L-1 sucrose. For acclimatization it was varied the presence and absence of a plastic cover for the growth of plants and acclimatization site: growth chamber and greenhouse. It was tested also the influence of sucrose concentration in growth ofRB966928 in vitro. Five treatments were performed with the sucrose leveis of O, 20, 40, 60 and 80 g L-1 o The highest percentage of regenerated meristems was obtained using culture media supplernented with cytokinins. Increasing doses of BAP raise the adventitious shoots rates, however the higher concentrations reduced the shoot increase, thus the better dosage for multiplication of cultivar was 0.2 mg L-1 BAP. ln bioreactor the best immersion frequency was 4 times a day and immersion time of 5 minutes. For rooting plants supplernented with 70 g L-1 sucrose showed greater growth of root and acclimatization plants can keep without plastic cover and in greenhouse with no major losses. The increase in sucrose doses increased the length of shoots, roots, number of roots, dry and fresh weight.. The levei of 60 g L-1 sucrose showed the best results. Therefore was possible develop a micropropagation protocol for sugarcane cultivar RB966928. Keywords: Saccharum spp, temporary immersion bioreactor, meristem, sucrose.
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ESTABELECIMENTO E MULTIPLICAÇÃO IN VITRO DE SAPUCAIA (Lecythis pisonis CAMBESS)

MELLO, T. 27 February 2018 (has links)
Made available in DSpace on 2018-08-01T22:35:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_11762_Dissertação TAMYRIS 2018-Final.pdf: 2531811 bytes, checksum: 9b3378aa9b2594a37ce5303345588421 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / A espécie Lecythis pisonis Cambess, conhecida popularmente como sapucaia, apresenta grande potencial para uso ornamental, produção de castanhas e madeira, sendo indicada para reflorestamento por ser uma espécie clímax e por atrair a fauna. Porém, apresenta baixa produção de frutos, e dificuldade na obtenção e germinação das sementes, limitando a propagação seminífera da espécie. Assim, a propagação vegetativa in vitro se apresenta como uma técnica a ser testada, visto que ela possibilita plantas livre de patógenos. Portanto, o objetivo deste estudo foi propagar in vitro segmentos caulinares de L. pisonis. O estudo foi dividido em quatro partes: i) minijardim seminal; ii) desinfestação dos segmentos caulinares; iii) indução de brotações in vitro; e iv) enraizamento in vitro. Para a montagem do minijardim seminal, as mudas com dois anos de idade foram transplantadas para vasos e feito o processo de revigoramento. Foram realizadas coletas mensais e contabilizada a produtividade das minicepas. No desenvolvimento do protocolo de desinfestação foram feitos três experimentos, onde foram testadas diferentes concentrações e tempo de exposição ao hipoclorito de sódio (NaOCl), e diferentes concentrações e método de aplicação de amoxicilina®. No processo de indução de brotações foram montados dois experimentos, testando diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP), cinetina (CIN) e os meios de cultura WPM e MS. Para o enraizamento, foram analisadas diferentes concentrações de ácido indol-3-butírico (AIB) com diferentes tempos de exposição a um estresse térmico de 40 °C. Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizados, foi realizada a análise de variância e a análise estatística pertinente a cada caso. Com os resultados obtidos do minijardim, foi possível identificar que os meses mais quentes do ano, principalmente dezembro, foram os de maior produtividade média das minicepas, com uma correlação positiva da produtividade com a temperatura mensal média da região. Para a desinfestação do material vegetativo, os melhores resultados foram a imersão dos explantes em NaOCl a 3% e em amoxicilina® a 3000 mg L-1, por 20 minutos cada. Quanto a indução de brotações, o meio de cultura MS suplementado com BAP (0,25 mg L-1) diferenciaram dos demais, obtendo as melhores médias nas características avaliadas. E o enraizamento ocorre com AIB (1 mg L-1), não sendo necessário adotar estresse térmico. A propagação in vitro de sapucaia é possível com as técnicas utilizadas nesse trabalho. Porém, necessita de mais estudos e aprimoramento das técnicas na espécie para produção de mudas em larga escala, além de estudos quanto a aclimatação das plântulas. Palavras-chave: sapucaia, cultivo in vitro, micropropagação, desinfestação, minijardim seminal, regulador de crescimento.
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Desenvolvimento in vitro e criopreservação de sementes de orquídeas /

Souza, Gilberto Rostirolla Batista de. January 2015 (has links)
Orientador: Kathia Fernandes Lopes Pivetta / Coorientador: Ricardo Tadeu de Faria / Coorientador: Wagner Aparecido Vendrame / Banca: Renata Gimenes / Banca: Marcos Vieira Ferraz / Banca: Paulo Hercilio Viegas Rodrigues / Banca: Claudia Fabrino Machado Mattiuz / Resumo: As plantas da família Orchidaceae são muito apreciadas pelo potencial ornamental, ecológico e econômico. O domínio de técnicas para a domesticação e propagação em massa das espécies é extremamente importante, visto que, possibilita diminuir a coleta predatória, além de reduzir o custo de produção das plantas. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de plantas; entretanto, ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). O aprimoramento dos métodos de conservação de recursos genéticos por meio de criopreservação de sementes em desenvolvimento é uma importante estratégia para a conservação de germoplasma e programas de melhoramento genético de plantas desta família. Este trabalho teve como objetivos avaliar o desenvolvimento in vitro de plântulas em meio de cultura alternativo e diferentes ambientes das orquídeas Amblostoma amblostomoides e Cattleya percivaliana, bem como, diferentes protocolos para a criopreservação de sementes da orquídea Ionopsis utricularioides. Nos experimentos sobre desenvolvimento in vitro de plântulas em meio de cultura alternativo e diferentes ambientes, para cada espécie, o delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado. Inicialmente foram seis tratamentos (T1 - meio MS (Murashige e Skoog) + sala de crescimento - Controle; T2 - MCA (meio de cultura alternativo) + sala de crescimento; T3 - MCA + tela preta com 70% de sombreamento; T4 - MCA + tela azul com 50% de sombreamento; T5 - MCA + tela preta com 50% de sombreamento e T6 - MCA + tela vermelha com 50% de sombreamento) e quatro repetições com 10 plântulas por parcela avaliando-se porcentagem de sobrevivência; para avaliação dos dados biométricos, em razão do alto índice de mortalidade, foram avaliados quatro tratamentos para A. amblostomoides e três tratamentos para C. percivaliana, com 12 repetições para ambas as espécies, sendo uma plântula... / Abstract: Orchids are well appreciated by ornamental, ecological and economic potential. The improvement of genetic resources conservation methods through seeds and protocorms cryopreservation is an important strategy for the conservation of germplasm and plant breeding programs of this family. The domain of techniques for domestication and mass propagation of species is very important because, enables decreasing predation and reduce the cost of production of plants. The in vitro culture is a technique that allows the production of a large numbers of plants; however, there are many losses during the acclimatization period (ex vitro). This work aimed to evaluate different protocols for cryopreservation of Ionopsis utricularioides seeds, as well as the in vitro development of seedlings in alternative culture media and different environments of the orchids, Amblostoma amblostomoides and Cattleya percivaliana. In experiments on cryopreservation of seeds for each species, the experimental design was completely randomized with eight treatments and four replications each. The treatments were: T1) seeds without cryopreservation (control 1); T2) seeds cryopreserved without cryoprotectants (Control 2); T3) glycerol + PVS2; T4) glycerol + PVS2 + phloroglucinol; T5) sucrose + PVS2; T6) sucrose + PVS2 + phloroglucinol; T7) glycerol + sucrose + PVS2; and T8) + sucrose + glycerol + PVS2 + phloroglucinol and 10 repetitions. The variables analyzed were germination percentage, number of seedlings and protocorms and development of the seedlings formed. In the experiments on in vitro development of seedlings in an alternative culture media and in different environments, the experimental design was completely randomized for each species. There were six treatments [T1: MS medium (Murashige e Skoog) - under laboratory conditions; T2: ACM (Alternative Culture Medium) - under laboratory conditions; T3: MCA - black net with 50% shading; T4: MCA - black net with ... / Doutor
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Cultivo in vitro de Crambe abyssinica Hochst. : germinação, micropropagação, estabilidade genética e anatomia foliar

Werner, Elias Terra 27 February 2014 (has links)
Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2015-07-13T21:22:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Cultivo in vitro de Crambe abyssinica Hochst. germinação, micropropagação, estabilidade genética e anatomia foliar.pdf: 1623266 bytes, checksum: 2418289d7e06cfc5f1456182850c229e (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2015-08-12T14:08:02Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Cultivo in vitro de Crambe abyssinica Hochst. germinação, micropropagação, estabilidade genética e anatomia foliar.pdf: 1623266 bytes, checksum: 2418289d7e06cfc5f1456182850c229e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-12T14:08:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Cultivo in vitro de Crambe abyssinica Hochst. germinação, micropropagação, estabilidade genética e anatomia foliar.pdf: 1623266 bytes, checksum: 2418289d7e06cfc5f1456182850c229e (MD5) Previous issue date: 2014 / Capes / Crambe (Crambe abyssinica) pertence à família Brassicaceae, originário da Etiópia e principalmente destinado à produção de forragem (30 a 32% de proteína bruta). Atualmente, tem sido bastante cultivado visando à extração de óleo vegetal. Com os atuais incentivos à busca de fontes de energias renováveis, o cultivo de crambe vem ganhando papel de destaque na produção de biodiesel por suas diversas vantagens, como: (a) rápido ciclo de vida (colhida em torno de 90 dias); (b) alta produção de biomassa; (c) alta produtividade de sementes (1000 e 1500 kg ha-1); (d) menor custo de produção em relação a outras fontes oleaginosas, como, canola, girassol e soja; (e) um percentual de óleo total na semente entre 32 e 38%, superando, por exemplo, a soja; (f) potencial de fitorremediação, eficiente na descontaminação de arsênio, cromo e outros metais pesados; e (g) elevado percentual de ácido erúcico (50 a 60%) sendo útil na indústria de plástico e lubrificante. Devido aos poucos trabalhos realizados com crambe, abre-se um vasto campo de investigações científicas que tenham como objetivo desenvolver as potencialidades dessa cultura e, consequentemente, melhorar os aspectos agronômicos e tecnológicos para seu emprego na indústria de biodiesel. Nesse contexto, as técnicas de cultivo in vitro foram importantes tanto para a propagação massal, quanto como ferramenta para uma possível aplicação de outras técnicas biotecnológicas, contribuindo para uma produção homogênea, fiel e em larga escala. Portanto, este trabalho teve como objetivo geral avaliar as condições mais favoráveis à germinação, estabelecimento in vitro e micropropagação de Crambe abyssinica Hochst., além de verificar possíveis alterações genéticas e anatômicas, possibilitando a regeneração e produção de plântulas viáveis. Para a germinação e estabecimento in vitro de crambe, as condições mais favoráveis foram em meio B5 ou WPM, na presença ou ausência de pericarpo e na presença de luz. Na micropropagação dessa espécie, uma frequência satisfatória de regeneração de brotos foi obtida a partir de segmentos apicais utilizados como explante em meio contendo 5 μM de BAP (6- benzilaminopurina), e o alongamento foi satisfatório com 1 μM de GA3 (ácido giberélico). Os marcadores moleculares ISSR (Inter-Simples Sequence Repeats) utilizados para a análise da estabilidade genética indicaram que o segmento apical de crambe é um explante confiável para a micropropagação de plantas geneticamente verdadeiras (true-to-tipe), ou seja, mantém a estabilidade genética. As diversas fontes de citocininas e concentrações utilizadas neste trabalho não promoveram mudanças, no sentido de alterar a organização e/ou a espessura em relação ao controle, e as alterações observadas na estrutura e espessura das folhas dos tratamentos de aclimatização prejudicaram o processo de estabelecimento da plântula ex vitro. Contudo, existe a necessidade de um enraizamento e aclimatização eficiente para completa propagação in vitro de crambe. Portanto, este protocolo de regeneração de plantas in vitro de crambe pode ser útil no processo de criação e desenvolvimento de novas cultivares em um tempo mais curto e no melhoramento genético usando explantes apicais. / Crambe (Crambe abyssinica) belongs to the Brassicaceae family, originally from the Ethiopia and primarily designed for forage production (30-32% crude protein). Currently, it has been largely cultivated for extraction of vegetable oil. With the current incentives to the search for renewable energy sources, the cultive of crambe has gained a prominent role in the production of biodiesel for its various advantages, such as: (a) rapid life cycle (harvested around 90 days); (b) high biomass production; (c) high seed crop (1000 and 1500 kg ha-1); (d) lower production cost compared to other oil sources, such as, canola, sunflower and soybean; (e) a percentage of total seed oil between 32 and 38%, surpassing, for example, the soybean; (f) potential for phytoremediation, effective in the decontamination of arsenic, chrome and other heavy metals; and (g) a high percentage of erucic acid (50 to 60%) being useful in lubricant and plastic industry. Because of the few studies with crambe opens up a vast camp of scientific research that aim to develop the potential of this crop and, hence, improve the agronomic and technological aspects to its use in the biodiesel industry. In this context, the techniques of in vitro culture were important for mass propagation, and as a tool for a possible application of other biotechnological techniques, contributing to a homogeneous, true and large scale production. Therefore, this study aimed to evaluate the general conditions more favorable for Crambe abyssinica Hochst. germination, establishment in vitro and micropropagation. To investigate possible genetic and anatomical changes enabling regeneration and production of viable seedlings. For in vitro germination and establishment of crambe, the most favorable conditions were in B5 or WPM medium, in the presence or absence of the pericarp and in the presence of light. In micropropagation of this species, a satisfactory frequency of shoot regeneration was obtained from shoot tip used as explants in medium containing 5 μM BAP (6- benzylaminopurine), and the elongation was satisfactory with 1 μM of GA3 (gibberellic acid). The ISSR (Inter-Simples Sequence Repeats) molecular markers used for genetic analysis indicated that the stability shoot tip crambe is a reliable explant for micropropagation of plants genetically true-to-tipe, maintains genetic stability. The various sources of cytokinins and concentrations used in this study did not cause changes, in way to change the organization and/or thickness compared to control, and that the observed changes in the structure and thickness of the leaves of acclimatization treatments hindered the process ex vitro establishment of seedlings. However, there is a need for an efficient rooting and acclimatization for full in vitro propagation of crambe. Therefore, this protocol for in vitro plant regeneration of crambe may be useful in the process creation and development of new cultivars in a shorter time and in genetic improvement using shoot tips explants.
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Desenvolvimento in vitro e criopreservação de sementes de orquídeas

Souza, Gilberto Rostirolla Batista de [UNESP] 31 August 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-04-01T17:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:53Z : No. of bitstreams: 1 000859876_20160630.pdf: 471050 bytes, checksum: b283e5cdd6fee1565d98e89bf93e40b0 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-01T13:02:23Z: 000859876_20160630.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:03:18Z : No. of bitstreams: 1 000859876.pdf: 729708 bytes, checksum: 0c3f9644fb91e37bed700362170aae04 (MD5) / As plantas da família Orchidaceae são muito apreciadas pelo potencial ornamental, ecológico e econômico. O domínio de técnicas para a domesticação e propagação em massa das espécies é extremamente importante, visto que, possibilita diminuir a coleta predatória, além de reduzir o custo de produção das plantas. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de plantas; entretanto, ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). O aprimoramento dos métodos de conservação de recursos genéticos por meio de criopreservação de sementes em desenvolvimento é uma importante estratégia para a conservação de germoplasma e programas de melhoramento genético de plantas desta família. Este trabalho teve como objetivos avaliar o desenvolvimento in vitro de plântulas em meio de cultura alternativo e diferentes ambientes das orquídeas Amblostoma amblostomoides e Cattleya percivaliana, bem como, diferentes protocolos para a criopreservação de sementes da orquídea Ionopsis utricularioides. Nos experimentos sobre desenvolvimento in vitro de plântulas em meio de cultura alternativo e diferentes ambientes, para cada espécie, o delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado. Inicialmente foram seis tratamentos (T1 - meio MS (Murashige e Skoog) + sala de crescimento - Controle; T2 - MCA (meio de cultura alternativo) + sala de crescimento; T3 - MCA + tela preta com 70% de sombreamento; T4 - MCA + tela azul com 50% de sombreamento; T5 - MCA + tela preta com 50% de sombreamento e T6 - MCA + tela vermelha com 50% de sombreamento) e quatro repetições com 10 plântulas por parcela avaliando-se porcentagem de sobrevivência; para avaliação dos dados biométricos, em razão do alto índice de mortalidade, foram avaliados quatro tratamentos para A. amblostomoides e três tratamentos para C. percivaliana, com 12 repetições para ambas as espécies, sendo uma plântula... / Orchids are well appreciated by ornamental, ecological and economic potential. The improvement of genetic resources conservation methods through seeds and protocorms cryopreservation is an important strategy for the conservation of germplasm and plant breeding programs of this family. The domain of techniques for domestication and mass propagation of species is very important because, enables decreasing predation and reduce the cost of production of plants. The in vitro culture is a technique that allows the production of a large numbers of plants; however, there are many losses during the acclimatization period (ex vitro). This work aimed to evaluate different protocols for cryopreservation of Ionopsis utricularioides seeds, as well as the in vitro development of seedlings in alternative culture media and different environments of the orchids, Amblostoma amblostomoides and Cattleya percivaliana. In experiments on cryopreservation of seeds for each species, the experimental design was completely randomized with eight treatments and four replications each. The treatments were: T1) seeds without cryopreservation (control 1); T2) seeds cryopreserved without cryoprotectants (Control 2); T3) glycerol + PVS2; T4) glycerol + PVS2 + phloroglucinol; T5) sucrose + PVS2; T6) sucrose + PVS2 + phloroglucinol; T7) glycerol + sucrose + PVS2; and T8) + sucrose + glycerol + PVS2 + phloroglucinol and 10 repetitions. The variables analyzed were germination percentage, number of seedlings and protocorms and development of the seedlings formed. In the experiments on in vitro development of seedlings in an alternative culture media and in different environments, the experimental design was completely randomized for each species. There were six treatments [T1: MS medium (Murashige e Skoog) - under laboratory conditions; T2: ACM (Alternative Culture Medium) - under laboratory conditions; T3: MCA - black net with 50% shading; T4: MCA - black net with ...
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Protocolo para micropropagação de bananeira ‘Thap maeo’

Pereira, Gustavo Alves [UNESP] 15 June 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-15Bitstream added on 2014-06-13T19:24:45Z : No. of bitstreams: 1 pereira_ga_dr_ilha.pdf: 676017 bytes, checksum: 076edefb20fc0b9ca3fe2971dd3db42e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A evolução da bananicultura brasileira foi possível em virtude dos progressos obtidos no que se refere à disponibilidade de material genético diversificado, à disponibilidade de mudas sadias e de boa qualidade genética, às práticas culturais de manejo pré e pós-colheita, às técnicas fitossanitárias desenvolvidas, às técnicas de nutrição e de irrigação, e à melhoria do nível técnico e organizacional do bananicultor brasileiro. Métodos de propagação, como a micropropagação in vitro, vêm sendo desenvolvidos e aperfeiçoados, para elevar a taxa de multiplicação em curto espaço de tempo e melhorar a qualidade das mudas. O processo de micropropagação é realizado em fases, sendo estas a escolha da planta matriz, desinfestação do material, estabelecimento, multiplicação enraizamento e aclimatação das mudas. Objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo de micropropagação de explantes de bananeira ‘Thap maeo’, envolvendo as etapas de desinfestação utilizando concentrações de cloro ativo e os antibióticos ampicilina sódica e cloranfenicol, multiplicação estudando concentraçoes de citocininas como o 6-Benzilaminopurina (BAP) e Cinetina e no enraizamento in vitro verificando concentrações de auxinas como o Ácido Indol Butírico (AIB) e o Ácido Naftaleno Acético (ANA). Concluiu-se que a concentração de 2% de cloro ativo proporcionou redução de 92% e 88% respectivamente para bactérias e fungos. Para os antibióticos ampicilina sódica e cloranfenicol a concentração de 20 mg L-1 reduziu em 70% de desinfestação de bactérias e fungos. Quando se utilizou os reguladores vegetais, BAP e cinetina, o maior numero de brotos obtido foi na concentração foi de 4mg L-1 conseguindo em média 3,8 brotos por explantes no 4o subcultivo. Para o enraizamento in vitro a concentração de 4,0 mg L-1 de AIB apresentou melhor resultado com 3,2 raizes por broto / The evolution of Brazilian banana was possible because of progress in relation to the availability of diverse genetic material, the availability of healthy seedlings and good quality genetics, cultural practices of management and post-harvest phytosanitary techniques developed techniques, nutrition and irrigation, and improving the technical and organizational bananicultor Brazil. Propagation methods, such as in vitro micropropagation, have been developed and improved to increase the multiplication rate in a short time and improve the quality of seedlings. The acclimatization process is performed in phases, these being the choice of the mother plant, disinfection equipment, establishment, multiplication, rooting and acclimatization of the seedlings. The objective of this study establish a protocol for micropropagation of banana explants 'Thap Maeo', involving the steps of disinfection using chlorine concentrations and antibiotic ampicillin sodium and chloramphenicol, multiplication studying concentrations of cytokinins like 6-Benzylaminopurine (BAP ) and Kinetin and in vitro rooting checking concentrations of auxin and Indole Butyric acid (IBA) and Naphthalene Acetic Acid (NAA). It was concluded that the 2% concentration provided a reduction of active chlorine of 92% and 88% respectively for bacteria and fungi. For the antibiotics sodium ampicillin and chloranphenicol concentration of 20 mg.L-1 reduced by 70% of disinfection of bacteria and fungi. When using the plant growth regulators, BAP and kinetin, the highest number of shoots was obtained on concentration was 4 mg L -1 achieving an average of 3,8 shoots per explant in the 4th subculture. For rooting in vitro concentration of 4.0 mg L-1 IBA showed the best result with 3,2 roots per shoot
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Protocolo para micropropagação de bananeira 'Thap maeo' /

Pereira, Gustavo Alves. January 2012 (has links)
Orientador: Aparecida Conceição Boliani / Banca: Luiz de Souza Corrêa / Banca: Enes Furlani Junior / Banca: Fernando Alves de Azevedo / Banca: José Carlos Cavichioli / Resumo: A evolução da bananicultura brasileira foi possível em virtude dos progressos obtidos no que se refere à disponibilidade de material genético diversificado, à disponibilidade de mudas sadias e de boa qualidade genética, às práticas culturais de manejo pré e pós-colheita, às técnicas fitossanitárias desenvolvidas, às técnicas de nutrição e de irrigação, e à melhoria do nível técnico e organizacional do bananicultor brasileiro. Métodos de propagação, como a micropropagação in vitro, vêm sendo desenvolvidos e aperfeiçoados, para elevar a taxa de multiplicação em curto espaço de tempo e melhorar a qualidade das mudas. O processo de micropropagação é realizado em fases, sendo estas a escolha da planta matriz, desinfestação do material, estabelecimento, multiplicação enraizamento e aclimatação das mudas. Objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo de micropropagação de explantes de bananeira 'Thap maeo', envolvendo as etapas de desinfestação utilizando concentrações de cloro ativo e os antibióticos ampicilina sódica e cloranfenicol, multiplicação estudando concentraçoes de citocininas como o 6-Benzilaminopurina (BAP) e Cinetina e no enraizamento in vitro verificando concentrações de auxinas como o Ácido Indol Butírico (AIB) e o Ácido Naftaleno Acético (ANA). Concluiu-se que a concentração de 2% de cloro ativo proporcionou redução de 92% e 88% respectivamente para bactérias e fungos. Para os antibióticos ampicilina sódica e cloranfenicol a concentração de 20 mg L-1 reduziu em 70% de desinfestação de bactérias e fungos. Quando se utilizou os reguladores vegetais, BAP e cinetina, o maior numero de brotos obtido foi na concentração foi de 4mg L-1 conseguindo em média 3,8 brotos por explantes no 4o subcultivo. Para o enraizamento in vitro a concentração de 4,0 mg L-1 de AIB apresentou melhor resultado com 3,2 raizes por broto / Abstract: The evolution of Brazilian banana was possible because of progress in relation to the availability of diverse genetic material, the availability of healthy seedlings and good quality genetics, cultural practices of management and post-harvest phytosanitary techniques developed techniques, nutrition and irrigation, and improving the technical and organizational bananicultor Brazil. Propagation methods, such as in vitro micropropagation, have been developed and improved to increase the multiplication rate in a short time and improve the quality of seedlings. The acclimatization process is performed in phases, these being the choice of the mother plant, disinfection equipment, establishment, multiplication, rooting and acclimatization of the seedlings. The objective of this study establish a protocol for micropropagation of banana explants 'Thap Maeo', involving the steps of disinfection using chlorine concentrations and antibiotic ampicillin sodium and chloramphenicol, multiplication studying concentrations of cytokinins like 6-Benzylaminopurine (BAP ) and Kinetin and in vitro rooting checking concentrations of auxin and Indole Butyric acid (IBA) and Naphthalene Acetic Acid (NAA). It was concluded that the 2% concentration provided a reduction of active chlorine of 92% and 88% respectively for bacteria and fungi. For the antibiotics sodium ampicillin and chloranphenicol concentration of 20 mg.L-1 reduced by 70% of disinfection of bacteria and fungi. When using the plant growth regulators, BAP and kinetin, the highest number of shoots was obtained on concentration was 4 mg L -1 achieving an average of 3,8 shoots per explant in the 4th subculture. For rooting in vitro concentration of 4.0 mg L-1 IBA showed the best result with 3,2 roots per shoot / Doutor
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Variabilidade genética, biologia floral e propagação in vitro da orquídea sapatinho Phragmipedium lindleyanum (R.H. Schomb. ex Lindl.) Rolfe var sargentianum (Rolfe) O. Gruss.

Hansen, Daniela de Souza January 2011 (has links)
O objetivo deste trabalho foi estudar a variabilidade genética, a biologia floral e a propagação in vitro de P. lindleyanum var. sargentianum em remanescente de Mata Atlântica no Estado da Bahia. Para o estudo da variabilidade genética foi uttilizada análise morfométrica das peças florais empregando-se métodos estatísticos univariados e multivariados. A biologia floral foi realizada por meio de observações em campo, e a propagação in vitro por meio de experimentos de germinação, multiplicação e crescimento. Houve diferença significativa entre as populações, para 11 caracteres florais, sendo as populações 2 e 3 as mais distantes geneticamente. A floração durou cerca de 2 meses e meio, e o seu pico ocorreu em setembro. As flores duraram em média 9,4 dias. A frutificação natural foi alta, assim como a frutificação após a polinização cruzada manual e autopolinização manual, e os frutos necessitaram de cerca de 75 dias para alcançarem a maturidade. Os principais visitantes florais foram os curculionídeos e as abelhas. O padrão de distribuição espacial foi agregado. Os meios de cultura compostos por 1/3 dos sais de MS na presença de luz e 1/4 dos sais de MS na ausência de luz, promoveram uma cultura rica em protocormos na germinação in vitro. A utilização de BAP na concentração de 1,0 mg.L-1 acrescido de 0,1 mg.L-1 de ANA resultou em maior número de brotos adventícios, e a concentração de 40 g.L-1 de sacarose foi a mais eficiente no crescimento in vitro das plantas. / O objetivo deste trabalho foi estudar a variabilidade genética, a biologia floral e a propagação in vitro de P. lindleyanum var. sargentianum em remanescente de Mata Atlântica no Estado da Bahia. Para o estudo da variabilidade genética foi uttilizada análise morfométrica das peças florais empregando-se métodos estatísticos univariados e multivariados. A biologia floral foi realizada por meio de observações em campo, e a propagação in vitro por meio de experimentos de germinação, multiplicação e crescimento. Houve diferença significativa entre as populações, para 11 caracteres florais, sendo as populações 2 e 3 as mais distantes geneticamente. A floração durou cerca de 2 meses e meio, e o seu pico ocorreu em setembro. As flores duraram em média 9,4 dias. A frutificação natural foi alta, assim como a frutificação após a polinização cruzada manual e autopolinização manual, e os frutos necessitaram de cerca de 75 dias para alcançarem a maturidade. Os principais visitantes florais foram os curculionídeos e as abelhas. O padrão de distribuição espacial foi agregado. Os meios de cultura compostos por 1/3 dos sais de MS na presença de luz e 1/4 dos sais de MS na ausência de luz, promoveram uma cultura rica em protocormos na germinação in vitro. A utilização de BAP na concentração de 1,0 mg.L-1 acrescido de 0,1 mg.L-1 de ANA resultou em maior número de brotos adventícios, e a concentração de 40 g.L-1 de sacarose foi a mais eficiente no crescimento in vitro das plantas. / Tese submetida ao Colegiado de Curso do Programa de Pós-Graduação em Ciências Agrárias da Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, como requisito para obtenção do Grau de Doutor em Ciências Agrárias.
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Cultura de tecidos de Cecropia glaziovii Sneth (Moraceae) : micropropagação vegetativa e regeneração por organogenese

Alves, Marcos Nopper, 1962- 18 July 2018 (has links)
Orientador : Rolf Dieter Illg / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T15:24:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_MarcosNopper_M.pdf: 11750543 bytes, checksum: 1e11833393cdb525ec96a953e4e0389a (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: A flora tropical sul-americana é rica em espécies produtoras de farmacos. Cecropia glaziovii é uma das espécies tropicais indicadas pela Central de Medicamentos como possuidora de atividade farmacológica comprovada no tratamento da bronquite, tosse, coqueluche e cancro. O único princípio ativo até hoje identificado nesta espécie, a isovitexina é indicado também como diurético e tônico cardíaco. Esta espécie alógama possui na sua população natural uma variação morfológica que se reflete diretamente na sua biomassa, como também na variação em concentrações de princípios ativos presentes nas suas folhas e estípula. Uma fonte de dificuldades no uso de plantas diretamente a partir de populações naturais é a variação genética, fisiológica e química, que leva eventualmente a atividades biológicas muito variáveis ou em casos extremos até opostas. Medidas que visem a obtenção de clones que possuem altos teores de princípios ativos seriam de grande valia para estudos químicos e farmacológicos desta espécie. O presente trabalho objetivou o desenvolvimento de metodologia de cultura ¿ in vitro¿ dessa espécie arbórea visando a sua multiplicação em larga escala. A finalidade por um lado é de obter metodologia adequada para clonagem de plantas possuidoras de princípios ativos em quantidades elevadas através de micropropagação, por outro lado, objetivamos a regeneração de plantas com possível variabilidade morfológica de interesses agronômico e químico. Todos os ensaios foram conduzidos em condições controladas de luz e temperatura. Visando a multiplicação vegetativa, brotos apicais, axilares e submeristemas previamente esterilizados foram inoculados em meios de cultura compostos por sais de Murashige & Skoog (1962) suplementado com diferentes concentrações dos fitoreguladores BAP, 2iP, KIN, ZEA e IAA. Folhas, estípulas e pecíolos previamente esterilizados foram testados para a indução de calos em meio básico de M.S. suplementado com diferentes concentrações de BAP, 2iP, KIN, 2,4-D e IAA. Tentativas de regeneração de plântulas via organogênese ou embriogênese foram realizadas a partir de meios de M.S. suplementado com diferentes concentrações de BAP, 2,4-D, IAA, 2iP e ZEA inoculados com calos compactos e friáveis. Os resultados demonstraram que as combinações BAP 10,0 mg/1 + NAA 2,0 mg/1 e BAP 10,0 + IAA 1,0 mg/1 e apenas BAP 10,0 mg/1 levaram a uma maior proliferação vegetativa de brotos. Calos foram obtidos com maior frequência quando meios de M;S. suplementado com 2,4-D 5,0 mg/1 + BAP 1,0 mg/1, foram inoculados com pecíolos e incubados na ausência de luz à temperatura de 25º C. Plântulas foram regeneradas a partir de calos por organogênese quando estes foram mantidos em meio M>S. suplementado com 2,4-D 10,0 mg/1 ou 2,4-D 1,0 mg/1 + ZEA 0,1 mg/1 por 30 dias. As plantas regeneradas foram posteriorm,ente propagadas vegetativamente utilizando os melhores meios de propagação vegetativa já descritos acima. O enraizamento foi obtido transferindo-se brotos para meio M.S. acrescido de IAA 1,0 mg/1. As plantas foram aclimatadas durante 30 dias em substrato de vermiculita, sob alta umidade relativa (90 a 100%) acrescida de solução nutritiva de Hoagland a cada 2 dias / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas
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Lodo de esgoto tratado no cultivo in vitro de sucupira-preta

OLIVEIRA, Robert Marques de 15 December 2015 (has links)
O tratamento de esgoto tem se evidenciado devido às necessidades ambientais, e no final do processo há geração de um resíduo denominado lodo de esgoto ou biossólido, rico em matéria orgânica e elementos essenciais as plantas. Neste estudo, propôs-se a utilização do biossólido da ETE de Paraguaçu- MG como fonte alternativa para nutrição in vitro de Sucupira-preta (Bowdichia virgilioides Kunth.), espécie lenhosa nativa do cerrado brasileiro. As sementes de sucupira-preta foram desinfestadas em etanol 70 % e hipoclorito de sódio, e imersas em ácido sulfúrico concentrado (98 %) para superação da dormência tegumentar. Após 3 enxágues em água destilada autoclavada as sementes foram inoculadas, uma por tubo de ensaio contendo 30 mL de meio WPM e diferentes concentrações do biossólido moído. Os tratamentos foram divididos da seguinte maneira: controle com meio WPM; meio WPM acrescido de concentrações crescentes de biossólido; concentrações crescentes de biossólido apenas; e um segundo controle contendo apenas água destilada. O delineamento foi inteiramente casualizado em esquema fatorial (2 x 7 com 14 tratamentos e 8 repetições por tratamento), com fator presença e ausência de meio WPM e fator concentração de biossólido (ausência; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10 g L-¹). Os tubos foram mantidos em sala de crescimento até o 41º dia, quando foram avaliados: número de folhas; comprimento da parte aérea; área foliar; número de gemas; número de raízes secundárias; comprimento da raiz principal; espessura do caule e massa seca da planta inteira. O fator presença de biossólido apenas, foi significativo influenciando de forma direta as variáveis área foliar, número de raízes secundárias e número de gemas. A presença do biossólido influenciou de forma significativa nos tratamentos onde há interação deste com meio WPM apenas para variável comprimento da raiz principal. Quanto as demais variáveis: número de folhas, comprimento da parte área, espessura de caule e massa seca, não houve resultado significativo para os tratamentos com a presença do biossólido apenas. Os resultados mostraram que a suplementação do meio com o biossólido é possível. Conclui-se que devido à maioria dos parâmetros avaliados não diferirem estatisticamente, o biossólido tem potencial para a substituição dos nutrientes do meio WPM, no que se refere ao estabelecimento in vitro de Sucupira-preta utilizando sementes como explante, resultando em economia para o processo, além de reutilizar o resíduo do tratamento de esgotos. Estudos complementares visando a padronização dos teores de cada componente do biossólido auxiliarão na consolidação do uso deste na cultura de tecidos vegetais. / The high organic matter content of sewage sludge is one of the motivations for their disposal in the environment as a soil conditioner, and at the end of the process, there is a production of one residue denominated the biosolids, wich is rich in organic matter and essential elements to the plants. This study aim to use the biosolids from ETE Paraguaçu (Minas Gerais) as alternative source to in vitro nutrition of sucupira-preta (Bowdichia virgilioides Kunth.), a native woody species from Brazilian Cerrado. Sucupira-preta seeds was sterilized in both 70 % ethanol and hypochlorite of sodium and immersed in 98 % concentrated sulphuric acid for breaking of seed coat dormancy. After 3 rinses in distilled autoclaved water the seeds were inoculated one by each one test tube containing 30 ml of WPM medium and at different concentrations of grounded biosolids. The treatments were divided in four procedures: first control with WPM medium, one with WPM medium amended with increased concentrations of biosolids, other with only increased concentrations of biosolids and the last control medium with only distillated water. The experimental design was completely randomized in a factorial arrangement (2 x 7 with 14 treatments with eight replications), with the presence or absence factor of WPM medium and the biosolids concentration factor (absence; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10 g L-¹). Test tubes were maintained in growing room until the 41th day and it was evaluated the number of leaves, aerial part length,  leaf area measurements, the number of buds, the number of secondary roots, the length of the main root,  the thickness of the stem and the mass of dry matter of the whole plant. The factor with only the biosolids presence was significate influenced the leaf area, number of secondary roots and the number of buds directly. The biosolids presence significantly influences the treatments as the biosolids interacted with WPM medium affecting only the main root length variable. As for the other variables such as the number of leaves, aerial part length, the thickness of the stem and the drier mass, the results showed no significance to those treatments with only biosolids presence. Results demonstrated that the supplementation of medium with the biosolids is possible. The Since the majority of estimated parameters did not have significative  differences, it is possible to infer that biosolids has a potential to substitute the nutrients of WPM medium regarding the establishment in vitro of sucupira-preta using seeds as explants. Consequently, it is a safety way for the process besides of the reusing of sludge that result from processes of sewing treatment. Complementary studies searching for the standardization of each components of biosolids will contributed to evaluated the feasibility of this residue use as substrate in plants tissue cultivation.

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