Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IvanRLA_TESE.pdf: 840968 bytes, checksum: 115a13f8f6afbdbf79640f4d750c9ccc (MD5) Previous issue date: 2013-12-13 / Fucana ? um termo que define uma fam?lia de hetero e homopolissacar?deos que contem L-fucose em sua estrutura. Neste trabalho uma hererofucan F 2,0v da alga Dictyota menstrualis foi avaliada como agente antinociceptivo e antiinflamat?rio. A fucana F 2,0v inibiu a migra??o de leuc?citos em at? 100% (20.0 mg/kg) para a cavidade peritoneal ap?s estimulo qu?mico, por?m, n?o alterou a express?o das interleucinas IL-1β, IL-6 e de TNF-α. Com rela??o a sensa??o dolorosa a F 2,0v (20.0 mg/kg) possui atividade antinociceptiva perif?rica com pot?ncia semelhante ? dipirona. Por outro lado n?o apresentou efeito no teste da placa quente. An?lises de microscopia confocal e citometria de fluxo mostram que a F 2,0v se liga a superf?cie dos leuc?citos. O conjunto de resultados apresentados pela fucana F 2,0v sugerem que o mecanismo de a??o est? relacionado com sua capacidade de inibir a migra??o de leuc?citos para o local da inj?ria tecidual. Em resumo os dados mostram que F 2,0v apresenta grande potencial como composto antinociceptivo e antiinflamat?rio. Estudos futuros ser?o realizados para caracterizar melhor o mecanismo de a??o da F 2,0v

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdjaneMAB.pdf: 131472 bytes, checksum: fa624d7510ee901925a2df6063e51778 (MD5) Previous issue date: 2008-07-30 / Fucan is a term used to denominate a family of sulfated L-fucose-rich polysaccharides. The brown alga Spatoglossum schr?ederi (Dictyotaceae) has three heterofucans namely fucan A, B and C. The 21 kDa fucan A is composed of a core of β (1-3) glucuronic acid-containing oligosaccharide of 4.5 kDa with branches at C4 of fucose chains α (1-3) linked. The fucose is mostly substituted at C4 with a sulfate group and at C2 with chains of β (1-4) xylose. This fucan has neither anticoagulant (from from 0.1 to 100?g) nor hemorrhagic activities (from 50 to 800 ?g/mL). The antithrombotic test in vivo showed the fucan A has no activity in any of the concentrations (from 0.2 to 20?g/g/day) tested 1h after polysaccharide administration. However, when fucan A was injected endovenously 24h before the ligature of the venae cavae, we observed a dose-dependent effect, reaching saturation at around 20g/g of rat weight. In addition, this effect is also time-dependent, reaching saturation around 16h after fucan administration. In addition, regardless of administration pathway, fucan A displayed antithrombotic action. The exception was the oral pathway. Of particular importance was the finding that fucan A stimulates the synthesis of an antithrombotic heparan sulfate from endothelial cells like heparin. The hypothesis has been raised that in vivo antithrombotic activity of fucan A is related to the increased production this heparan. Taken together with the fact that the compound is practically devoid of anticoagulant and hemorrhagic activity suggests that it may be an ideal antithrombotic agent in vivo / Fucanas ? um termo utilizado para denominar a fam?lia de polissacar?deos sulfatados que apresentam em sua constitui??o α-L-fucose sulfatada. A alga marrom Spatoglossum schr?ederi da fam?lia Dictyotaceae, apresenta tr?s heterofucanas denominadas de fucana A, B, e C. A fucana A (21kDa) ? composta por um n?cleo central formado por ?cido glucur?nico, β 1→3 ligado, substitu?dos em C4 por L-fucoses α (1→3) ligados. A fucose ainda ? substitu?da no C4 por grupos sulfatos e no C2 por cadeias de β (1→4) xilose. Esta fucana n?o apresentou atividade anticoagulante entre 0,1 e 100?g/mL e nenhuma atividade hemorr?gica entre 50 e 800?g /mL. Os testes antitromb?tico in vivo mostraram que a fucana A n?o apresentou atividade nas concentra??es (0,2 a 20?g/g) testadas 1 hora ap?s a administra??o do polissacar?deo. No entanto, quando a fucana A foi administrada endovenosamente, 24h antes da ligadura da veia cava, observou-se um efeito dose-dependente, alcan?ando a sua satura??o em torno de 20?g/g de massa do animal. Al?m disso, o efeito se mostrou tempo-dependente, atingindo satura??o em 16h ap?s a administra??o da fucana. Em todas as vias em que foi administratada (SC, IM, IP, e IV), a fucana A demonstrou a??o antitromb?tica. Exce??o apenas para a via oral. A import?ncia dos resultados obtidos foi o fato da fucana A estimular a s?ntese de um heparam sulfato com caracter?sticas antitromb?tica semelhante ? heparina pelas c?lulas endoteliais. Esta descoberta levou a hip?tese de que a atividade antitromb?tica da fucana A est? relacionada com o aumento na produ??o deste heparam sulfato. Devido as suas caracter?sticas e por ser um composto praticamente desprovido de atividade anticoagulante e hemorr?gico sugere-se que a fucana A possa vir a ser um agente antitromb?tico in vivo . A realiza??o deste estudo teve car?ter multidisciplinar, envolvendo pesquisadores da Bioqu?mica, Morfologia, Hematologia, Bot?nica e Veterin?ria. Este aspecto preencheu os requisitos da multidisciplinaridade do Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias da Sa?de

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JailmaAL_TESE.pdf: 4285605 bytes, checksum: 24785ef0d4160d79d6624877783e325f (MD5) Previous issue date: 2014-03-21 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Fucanas s?o polissacar?deos sulfatados encontrados em algas marrons e equinodermos. Tem sido demonstrado que uma fucana denominada de fucana A, obtida da alga marrom Spatoglossum schr?ederi, apresenta uma s?rie de efeitos biol?gicos, em particular, a atividade antitumoral. Com intuito de se potencializar essa atividade, foram adicionados grupamentos ti?is a estrutura da fucana A. Posteriormente, os nanog?is foram sintetizados pela forma??o de nanocomplexos entre a fucana A tiolada e o polietileno glicol (PEG) em v?rias rela??es 2.5, 5.0, 10, 15 e 30. Os nanog?is com as rela??es de 10 e 15 (FucA:PEG10 e FucA:PEG15) foram os que se apresentaram com os menores tamanhos, mais esf?ricos, com di?metro em torno de 186,95 ? 10,62 nm e carga de superf?cie ligeiramente negativa. Ap?s a s?ntese dos nanog?is, estes foram submetidos aos ensaios antiproliferativos com c?lulas da linhagem tumoral 786-0 nas concentra??es 8,0 a 64 μg/mL. As c?lulas foram analisadas durante um per?odo de 24, 48 e 72 horas. Os dados mostraram que em todas as concentra??es de nanog?is de fucana A, a atividade antiproliferativa foi tempo e dose dependente, o mesmo n?o sendo observado para a fucana A avaliada isoladamente. O nanogel de FucA:PEG15 tamb?m induziu apoptose por mecanismos dependentes e independentes de caspases. Posteriormente, FucA:PEG15 tamb?m foi marcado com FITC sendo completamente incorporado pelas c?lulas 786-0 ap?s 1 hora. Quando a endocitose celular foi parada, o FucA:PEG15 teve o seu efeito antiproliferativo reduzido. Apesar de FucA:PEG15 n?o possuir efeito anticoagulante por aPTT e PT (at? 100 μg/mL), ele apresesentou efeito antioxidante e angiog?nico. Esses dados mostram que o nanogel de fucana A exibe v?rias efeitos (antiproliferativa, antioxidante e antiangiog?nica) e, portanto, o seu potencial para a terapia do c?ncer deve ser investigada

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-01-27T13:32:41Z No. of bitstreams: 1 FabianaLimaBezerra_TESE.pdf: 4985146 bytes, checksum: ce1c1005e6775f052912c875b1d39910 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-01-31T13:32:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 FabianaLimaBezerra_TESE.pdf: 4985146 bytes, checksum: ce1c1005e6775f052912c875b1d39910 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-31T13:32:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FabianaLimaBezerra_TESE.pdf: 4985146 bytes, checksum: ce1c1005e6775f052912c875b1d39910 (MD5) Previous issue date: 2016-06-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A dengue ? a mais importante arbovirose que afeta o homem e constitui-se em um grave problema de sa?de p?blica. A doen?a ? end?mica em regi?es tropicais e subtropicais, abrangendo mais de 100 pa?ses, correspondendo ? metade da popula??o mundial. As epidemias s?o recorrentes e estima-se que os v?rus da dengue causem 390 milh?es de infec??es a cada ano, sendo uma importante causa de morbidade. Apesar desse cen?rio, atualmente, ainda n?o se disp?e de um antiviral contra a dengue. Neste contexto, diversos estudos relatam a atividade antiviral dos polissacar?deos sulfatados obtidos das algas marinhas contra v?rus envelopados, cuja a??o est? associada ? interfer?ncia nas etapas iniciais do processo de infec??o viral. Neste estudo, avaliou-se a potencial atividade antiviral de extratos brutos ricos em polissacar?deos sulfatados obtidos das algas marrons Dictyota menstrualis (EBDMens) e Dictyota mertensii (EBDM) e das algas verdes Codium isthmocladum (EBCI) e Caulerpa sertularioides (EBCS) contra o v?rus dengue 2 (DENV-2), em linhagem de c?lulas Vero, usando diferentes estrat?gias metodol?gicas (tratamento simult?neo, tratamento p?s-infec??o, pr?-tratamento da c?lula, pr?tratamento do v?rus, adsor??o, p?s-adsor??o e penetra??o). A citotoxicidade dos extratos foi analisada pelo ensaio de redu??o do MTT. O estudo da atividade antiviral foi determinado pela quantifica??o do n?mero de c?pias do RNA viral por RT-qPCR ap?s 120 h de infec??o. Nenhum extrato exibiu toxicidade para as c?lulas Vero no ensaio de redu??o do MTT na concentra??o de 100 ?g/mL. Todos os extratos exibiram atividade antiviral quando adicionados durante os primeiros 90 minutos de infec??o, demonstrando redu??o significativa no n?mero de c?pias do RNA viral ap?s 120 horas. Os extratos EBDMens e EBDM foram mais eficazes nos ensaios de pr?-tratamento da c?lula e do v?rus, e o primeiro exerceu atividade antiviral superior ao EBDM durante a adsor??o viral. Os extratos EBCI e EBCS apresentaram atividade antiviral semelhante no ensaio de pr?-tratamento da c?lula. O EBCI foi mais eficaz na redu??o da adsor??o do DENV-2 em c?lulas Vero. Por?m, o EBCS se mostrou mais eficiente nos ensaios de pr?-tratamento do v?rus e penetra??o. Dentre os extratos avaliados, o EBCS parece ser o mais efetivo no combate ao DENV-2. Estes resultados revelam o potencial desses extratos ricos em polissacar?deos sulfatados como compostos com a??o antiviral, sugerindo que eles atuam nos est?gios iniciais da infec??o por DENV-2. / Dengue is considered the most important human arboviruses, and is a serious public health problem. This disease is endemic in tropical and subtropical regions, reaching more than 100 countries, which means the half of world population, and those epidemies have been appellant. It is estimated that Dengue virus could cause 390 millions of infections each year, and is an important cause of morbidity. Although this scenario, actually doesn?t exist a dengue antivirals still. Sorts of studies have showed antivirus activity of seaweed sulfated polysaccharides against enveloped viruses, which action seems to be associated to initials steps of infection process. In this study, was evaluated the potential antiviral activity of crude extracts rich in sulfated polysaccharides obtained from the brown algae Dyctiota menstrualis (EBDMens) and Dyctiota mertensii (EBDM), and green algae Codium isthmocladium (EBCl) and Caulerpa sertularioides (EBCS), tested against Dengue virus 2 (DENV-2) in Vero cell line, by using different methodological strategies (simultaneous treatment, post-infection treatment, cell pre-treatment, virus pre-treatment, adsorption, post-adsorption and penetration). The extracts cytotoxicity was evaluated by MTT reduction assay. The study of antiviral activity was determinated by quantifying viral RNA load using RT-qPCR, after 120 hours of infection. None extract has showed toxicity against Vero Cells in MTT reduction assay with 100 ?g/mL concentration. All extracts have shown antiviral activity when added during the first 90 minutes of infection, and a significant reduction of viral RNA number of copies after 120 hours. The EBDMens and EBDM extracts were more efficient to cell and virus pretreatment assays, and the first has showed higher antiviral activity than EBDM during viral adsorption. The EBCI and EBCS extracts have presented antiviral activity very similar in cell pre-treatment assay. EBCI was more efficient in the reduction of DENV-2 adsorption in Vero cell. However, EBCS has showed more efficient in cell pre-treatment and penetration assays. Between the extracts evaluated, EBCS seems to be more effective against DENV-2. These results have showed potential action of extracts rich in sulfated polysaccharides with antivirus activity, suggesting that they act in the initials steps of infection process of DENV-2.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RafaelBGC_DISSERT.pdf: 2123374 bytes, checksum: 0195cd61affe048d50e8378ceba77a87 (MD5) Previous issue date: 2010-10-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / In the present study, extracts rich-sulfated polysaccharides were obtained from three different species of Dictyotales (a class of brown macroalgae): Canistrocarpus cervicornis, Dictyota mertensii and Dictyopteris delicatula and their anticoagulant and antioxidant activities were evaluated. All extracts showed anticoagulant activity on aPTT assay, but not on PT assay. Extracts also exhibited total antioxidant activity, superoxide radical scavenging capacity and ferric chelating property. The extract from C. cervicornis showed the best results and was choose to have their sulfated polysaccharides fractioned and subsequently analysed. Thus, six fractions (CC-0.3, CC-0.5, CC-0.7, CC-1.0, CC-1.2 and CC-2.0) were obtained by proteolysis followed by sequential acetone precipitation. Agarose gel eletrophoresis stained with blue toluidine, confirmed the presence of sulfated polysaccharides in all fractions. Chemical analyses showed that all fractions presented heterofucans mainly constitued by fucose, galactose, glucuronic acid and sulfate. Any fraction changed the PT. However, all fractions were able to double the aPTT on a dose-dependent manner. CC- 0.3, CC-0.5, CC-0.7 and CC-1.0 needed only 0.100 mg/mL to double the aPTT, result only 1.25 times higher than the Clexane? (0.080 mg/mL), a commercial low molecular heparin. The heterofucans presented appreciable total antioxidant capacity, low capacity on scavenging hydroxyl radical and good efficiency on scavenging superoxide radicals (except CC-1.0). CC-1.2 showed 43.1 % on superoxide radical scavenging. This result was higher than that showed by the same concentration of gallic acid (41.8 %), a known antioxidant. Furthermore, the heterofucans showed excelent activity on ferrous chelating activity (except CC-0.3). CC-0.5, CC-0.7 and CC-1.0 showed the highest activities with 47.0 % of ferrous chelating activity, a result 2.0 times lesser than that exhibited by the same concentration of EDTA. These results clearly indicated the beneficial effects of heterofucans extracted from C. cervicornis as potential anticoagulant and antioxidant agents. However additional steps of purification, structural studies, besides in vivo experiments are needed for these fucans may be used as therapeutic agents / No presente estudo, extratos brutos ricos em polissacar?deos sulfatados foram obtidos a partir de tr?s esp?cies de Dictyotales (uma ordem de macroalgas marrons): Canistrocarpus cervicornis, Dictyota mertensii e Dictyopteris delicatula, e suas atividades anticoagulante e antioxidante foram avaliadas. Todos os extratos apresentaram atividade anticoagulante frente ao ensaio de aPTT, mas n?o sobre o ensaio de PT. Os extratos tamb?m exibiram atividade antioxidante total, capacidade em sequestrar radicais super?xido e propriedade de quelar ferro. O extrato obtido a partir de C. cervicornis apresentou os melhores resultados e foi escolhido para ter seus polissacar?deos sulfatados fracionados e subsequentemente analisados. Deste modo, seis fra??es (CC-0.3, CC-0.5, CC-0.7, CC-1.0, CC-1.2 e CC-2.0) foram obtidas por prote?lise seguida de precipita??o sequencial com acetona. Eletroforese em gel de agarose corada com azul de toluidina comprovou a presen?a de polissacar?deos sulfatados em todas as fra??es. As an?lises qu?micas mostraram que todas as fra??es apresentam heterofucanas constitu?das principalmente por fucose, galactose, ?cido glucur?nico e sulfato. Nenhuma fra??o alterou o PT. Entretanto todas as fra??es foram capazes de dobrar o aPTT de uma maneira dose dependente. As fra??es, CC-0.3, CC-0.5, CC-0.7 e CC-1.0, precisaram de apenas 0,100 mg/mL para dobrar o tempo de coagula??o, concentra??o que ? apenas 1,25 vezes maior do que aquela utilizada com Clexane? (heparina de baixo peso molecular) para se obter o mesmo efeito. As heterofucanas apresentaram apreci?vel capacidade antioxidante total, baixa capacidade em sequestrar radicais hidroxila e uma boa efici?ncia em sequestrar radicais super?xido (exceto CC-1.0). CC-1.2 mostrou uma capacidade de sequestrar 43,1 % dos radicais super?xido. Este resultado foi maior do que o apresentado pela mesma concentra??o de ?cido g?lico (41,8 %), um antioxidante conhecido. Al?m disso, as heterofucanas mostraram uma excelente atividade em quelar ferro (exceto CC-0.3). CC-0.5, CC-0.7 e CC-1.0 apresentaram as maiores atividades com 47,0 % de quela??o f?rrica, um resultado 2 vezes menor do que o exibido pela mesma concentra??o de EDTA. Estes resultados indicaram claramente os efeitos ben?ficos de heterofucanas extra?das de C. cervicornis como potenciais agentes anticoagulante e antioxidante. Entretanto, passos adicionais de purifica??o, estudos estruturais, al?m de experimentos in vivo, s?o necess?rios para que estas fucanas possam vir a ser utilizadas como agentes terap?uticos

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SaraLC_DISSERT.pdf: 1277760 bytes, checksum: 4ab6e4050b3bef93e51e123918051267 (MD5) Previous issue date: 2013-03-11 / Sulfated polysaccharides comprise a complex group of macromolecules with a range of several biological activities, including antiviral activity, anticoagulant, antiproliferative, antiherp?tica, antitumor, anti-inflammatory and antioxidant. These anionic polymers are widely distributed in tissues of vertebrates, invertebrates and algae. Seaweeds are the most abundant sources of sulfated polysaccharides in nature. The green algal sulfated polysaccharides are homo or heteropolysaccharides comprised of galactose, glucose, arabinose and/or glucuronic acid. They are described as anticoagulant, anti-inflammatory, antiviral, anti-angiogenic, antitumor compounds. However, there are few studies about elucidation and evaluation of biological/pharmacological effects of sulfated polysaccharides obtained from green algae, for example, there is only one paper reporting the antinociceptive activity of sulfated polysaccharides of these algae. Therefore this study aimed to obtain sulfated polysaccharides of green seaweed Codium isthmocladum and evaluates them as potential antinociceptive agents. Thus, in this study, the total extract of polysaccharides of green alga C. isthmocladum was obtained by proteolytic digestion, followed by fractionation resulting in five fractions (F0.3, F0.5, F0.7, F0.9 and F1.2) by sequential precipitation with acetone. Using the test of abdominal contractions we observed that the fraction F0.9 was the most potent antinociceptive aompound. F0.9 consists mainly of a sulfated heterogalactana. More specific tests showed that Fo.9 effect is dose and time dependent, reaching a maximum at 90 after administration (10 mg / kg of animal). F0.9 is associated with TRPV1 and TRPA1 receptors and inhibits painful sensation in animals. Furthermore, F0.9 inhibits the migration of lymphocytes induced peritonitis test. On the other hand, stimulates the release of NO and TNF-?. These results suggest that F0.9 has the potential to be used as a source of sulfated galactan antinociceptive and anti-inflammatory / Os polissacar?deos sulfatados comp?em um grupo complexo de macromol?culas com uma gama de importantes atividades biol?gicas, incluindo atividade antiviral, anticoagulante, antiproliferativa, antiherp?tica, antitumoral, antiinflamat?ria e antioxidante. Esses pol?meros ani?nicos s?o amplamente distribu?dos em tecidos de vertebrados, invertebrados e algas. As algas marinhas s?o as fontes mais abundantes de polissacar?deos sulfatados na natureza. Os polissacar?deos sulfatados de algas verdes s?o homo ou heteropolissacar?deos compostos por galactose, glicose, arabinose e/ou ?cido glucur?nico. Para estes pol?meros s?o descritas atividades como anticoagulante, anti-inflamat?ria, antiviral, antiangiog?nica, antitumoral. Por?m, ainda h? poucos estudos de elucida??o e avalia??o de atividades biol?gicas/farmacol?gicas de polissacar?deos sulfatados obtidos de algas verdes, por exemplo, h? somente um trabalho relatando a atividade antinociceptiva de polissacar?deos sulfatados destas algas. Portanto este trabalho teve como objetivo obter polissacar?deos sulfatados da alga verde Codium isthmocladum e avalia-los como poss?veis agentes antinociceptivos. Assim, no presente estudo, o extrato total de polissacar?deos da alga verde C. isthmocladum foi obtido atrav?s de digest?o proteol?tica, seguida de fracionamento resultando em cinco fra??es (F0.3; F0.5; F0.7; F0.9 e F1.2) por precipita??o sequencial com acetona. Com o teste de contra??es abdominais observou-se que a fra??o F0.9 foi o mais potente antinociceptivo. F0.9 ? composta principalmente por uma heterogalactana sulfatada. Ensaios mais espec?ficos mostraram que o seu efeito ? dose e tempo dependente, chegando ao m?ximo com 90 ap?s a administra??o (10 mg/kg de animal). F0.9 se associa a receptores TRPV1 e TRPA1 e inibe sensa??o dolorosa em animais. Al?m disso, F0.9 inibe a migra??o de linf?citos em ensaios de peritonite induzida. Por outro lado estimula a libera??o de NO e TNF-?. Esses resultados sugerem que F0.9 tem potencial para ser usada como fonte de galactana sulfatada antinociceptiva e anti-inflamat?ria

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KalineDM_DISSERT.pdf: 984274 bytes, checksum: 8150a2011f0eac140bc8113ffa4bc1ea (MD5) Previous issue date: 2011-12-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / In the present study, six families of sulfated polysaccharides were obtained from seaweed Dictyopteris delicatula (Lamouroux, 1809) and their anticoagulant, antioxidant and antitumor activities were evaluated. All fractions showed anticoagulant activity on aPTT assay, but not on PT assay. Fractions also exhibited total antioxidant activity, superoxide radical scavenging capacity and ferric chelating property. Thus, six fractions (F0.5v, F0.7v, F1.0v, F1.3v, F1.5v e F2.0v) we obtained by proteolytic digestion, followed by acetone fractionation and molecular sieving on Sephadex G-100. Chemical analyses demonstrated that all polysaccharides contain heterofucans composed mainly of fucose, xylose, glucose, galactose, uronic acid, and sulfate. Any fractions changed the PT. However, all fractions were able on double the aPPT on a dose-dependent manner. The heterofucans F0.7v and F1.0v showed low anticoagulant activity while F1.5v presented the most prominent anticoagulant activity .When compared to Clexane?, a low molecular weight heparin, at same concentration F1.5v presented similar anticoagulant activity. The fucans F0.5v and F0.7v at 1.0 mg/mL showed high ferric chelating activity (~45%), whereas fucans F1.3v (0.5 mg/mL) showed considerable reducing power, about 53.2% of the activity of vitamin C. The fucan F1.5v presented the most prominent anticoagulant activity. The best antiproliferative activity was found with fucans F1.3v and F0.7v. However, F1.3v activity was much higher than F0.7v inhibiting almost 100% of HeLa cell proliferation. These fucans have been selected for further studies on structural characterization as well as in vivo experiments, which are already in progress / No presente estudo, seis popula??es de polissacar?deos sulfatados foram obtidas a partir da alga Dictyopteris delicatula (Lamouroux, 1809) e suas atividades anticoagulante, antioxidante e antitumoral avaliadas. Deste modo, as seis fra??es (F0.5v, F0.7v, F1.0v, F1.3v, F1.5v e F2.0v) foram obtidas por prote?lise seguida por fracionamento de acetona e gel filtra??o molecular Sephadex G-100. Todas as fra??es apresentaram atividade anticoagulante frente ao ensaio de aPTT, mas n?o sobre o ensaio de PT. As heterofucanas exibiram atividade antioxidante total, capacidade em sequestrar radicais super?xido e propriedade de quelar ferro. As an?lises qu?micas demonstraram que todos os polissacar?deos cont?m heterofucanas composta principalmente por fucose, xilose, glicose, galactose, ?cido ur?nico, e sulfato. Nenhuma das fra??es alterou o PT. Entretanto, todas as fra??es foram capazes de dobrar o aPTT de uma maneira dose dependente. As heterofucanas F0.7v e F1.0v demonstraram baixa atividade anticoagulante, enquanto a F1.5v apresentou a maior atividade anticoagulante e quando comparada com Clexane?, uma heparina de baixo peso molecular, em mesma concentra??o, apresentou antividade anticoagulante semelhante. As fucanas F0.5v e F0.7v a 1,0 mg/mL mostraram alta atividade de quela??o ferica (~ 45%), enquanto a fucana F1.3v (0,5 mg/mL) mostrou consider?vel potencial redutor, cerca de 53,2% da atividade da vitamina C. A melhor atividade antitumoral foi encontrada nas fucanas F1.3v e F0.7v. No entanto, a atividade F1.3v foi muito superior a F0,7v, quase 100% de inibi??o da prolifera??o de c?lulas HeLa (c?lula de c?ncer de colo de ?tero). Estas fucanas foram selecionadas para novos estudos sobre caracteriza??o estrutural, bem como em experimentos in vivo, que j? est?o em andamento / 2020-01-01

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaMCS.pdf: 573830 bytes, checksum: 9b4db031d8ca76bd1eed966ee42dfb5b (MD5) Previous issue date: 2008-11-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Sulfated polysaccharides (PS) are biomolecules with a great biotechnological potential. There are few data about PS from high plants. In addition, pharmacological activities of PS from plants have not been carrying out. The aim of this work was extract PS from the angiosperm Halodule wrightii and study their anticoagulant and antioxidant activities. Histological analysis showed the presence of the PS manly in the roots. A polysaccharide-rich extract was obtained from H. wrightii by proteolysis followed by methanol and TCA precipitation. Chemical, infra-red analysis and agarose gel electrophoresis in 1.3 diaminopropane acetate buffer confirmed the presence of sulfated polysaccharides made by glucose, galactose, xylose and sulfate residues in the proportion 1: 0,9: 1: 1. In addition polyacrilamide electrophoresis have shown that extract is mainly compose by 11kDa sulfated polysaccharides. Pharmacological analysis have shown total antioxidant capacity (CAT) that resulted in 15,21 μg for equivalent of ascorbic acid, scavenging activity of the DPPH radical with 41,36 % of scavenging, activity of reducing power with the maximum of 0,290 nm (50 % of vitamin C activity) and scavenging activity superoxide radical (O2-) with a maximum of 32,23 %. Chelating activity of metal less than 4% and scavenging activity of the radical hydroxyl (OH-) less than 2%. Time of activated partial tromboplastin (aPTT) doubling the time of coagulation from 20μg of and protrombin time (PT) was not present. The data indicate that PS from Halodule wrightii could be considered for future applications in medicine, food production or cosmetic industry / Os polissacar?deos sulfatados (PS) s?o biomol?culas com um grande potencial biotecnol?gico por apresentarem uma diversidade estrutural e farmacol?gica muito grande. Poucos s?o os relatos da exist?ncia destes pol?meros em vegetais superiores, al?m disso, ainda n?o se tem relatos da identifica??o de atividades antioxidantes e anticoagulantes com PS extra?dos destes vegetais. Com o intuito de verificar a presen?a destes polissacar?deos em angiospermas marinhas conhecidas popularmente como capim do mar, foi coletada a esp?cie marinha Halodule wrightii. As por??es vegetativas (folha, caule e raiz) n?o foram separadas sendo preparado inicialmente um extrato denominado de extrato bruto (EB). Ap?s descontamina??o prot?ica o material obtido foi chamado de extrato de polissacar?deos totais (EPT). A presen?a destes polissacar?deos foi investigada e confirmada por an?lises qu?micas, espectroscopia de infravermelho e eletroforese em gel de agarose sendo denominados de extrato rico em polissacar?deos sulfatados (EPS). A an?lise histol?gica da localiza??o dos PS resultou na presen?a destes polissacar?deos principalmente na epiderme da por??o vegetativa raiz. As an?lises qu?micas mostraram que os polissacar?deos contem glicose, galactose, xilose e sulfato na propor??o de 1: 0,9: 1: 1 e massa molecular de aproximadamente 11 kDa. Os grupos sulfatos est?o provavelmente ligados principalmente em C2 de um monossacar?deo. Testes de atividade antioxidante demonstraram que os PS de H. wrightii n?o apresentaram resultado para o teste de capacidade antioxidante total pelo m?todo CAT. Desta forma foi utilizada a atividade de seq?estro do radical DPPH indicado na literatura por dosar a capacidade antioxidante total que resultou em 41,36%. O seq?estro do ?on super?xido tamb?m foi realizado e resultou em 32,23% assim como o poder redutor que equivaleu a 50% da atividade da Vit. C. N?o houve atividade de seq?estro do radical hidroxila assim como atividade quelante de metal. O teste de atividade anticoagulante (aPTT) mostrou que EPS dobra o tempo de coagula??o com 20 g, que ? apenas 2,5 vezes a quantidade da Clexane? (heparina de baixo peso molecular). Para o tempo de protrombina (PT) H.wrightii n?o apresentou atividade. Os dados indicam que EPS possuem um potencial biotecnol?gico anticoagulante e antioxidante e que futuras an?lises se fazem necess?rias para confirmarem esse potencial

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaMCS.pdf: 573830 bytes, checksum: 9b4db031d8ca76bd1eed966ee42dfb5b (MD5) Previous issue date: 2008-11-25 / Sulfated polysaccharides (PS) are biomolecules with a great biotechnological potential. There are few data about PS from high plants. In addition, pharmacological activities of PS from plants have not been carrying out. The aim of this work was extract PS from the angiosperm Halodule wrightii and study their anticoagulant and antioxidant activities. Histological analysis showed the presence of the PS manly in the roots. A polysaccharide-rich extract was obtained from H. wrightii by proteolysis followed by methanol and TCA precipitation. Chemical, infra-red analysis and agarose gel electrophoresis in 1.3 diaminopropane acetate buffer confirmed the presence of sulfated polysaccharides made by glucose, galactose, xylose and sulfate residues in the proportion 1: 0,9: 1: 1. In addition polyacrilamide electrophoresis have shown that extract is mainly compose by 11kDa sulfated polysaccharides. Pharmacological analysis have shown total antioxidant capacity (CAT) that resulted in 15,21 μg for equivalent of ascorbic acid, scavenging activity of the DPPH radical with 41,36 % of scavenging, activity of reducing power with the maximum of 0,290 nm (50 % of vitamin C activity) and scavenging activity superoxide radical (O2-) with a maximum of 32,23 %. Chelating activity of metal less than 4% and scavenging activity of the radical hydroxyl (OH-) less than 2%. Time of activated partial tromboplastin (aPTT) doubling the time of coagulation from 20μg of and protrombin time (PT) was not present. The data indicate that PS from Halodule wrightii could be considered for future applications in medicine, food production or cosmetic industry / Os polissacar?deos sulfatados (PS) s?o biomol?culas com um grande potencial biotecnol?gico por apresentarem uma diversidade estrutural e farmacol?gica muito grande. Poucos s?o os relatos da exist?ncia destes pol?meros em vegetais superiores, al?m disso, ainda n?o se tem relatos da identifica??o de atividades antioxidantes e anticoagulantes com PS extra?dos destes vegetais. Com o intuito de verificar a presen?a destes polissacar?deos em angiospermas marinhas conhecidas popularmente como capim do mar, foi coletada a esp?cie marinha Halodule wrightii. As por??es vegetativas (folha, caule e raiz) n?o foram separadas sendo preparado inicialmente um extrato denominado de extrato bruto (EB). Ap?s descontamina??o prot?ica o material obtido foi chamado de extrato de polissacar?deos totais (EPT). A presen?a destes polissacar?deos foi investigada e confirmada por an?lises qu?micas, espectroscopia de infravermelho e eletroforese em gel de agarose sendo denominados de extrato rico em polissacar?deos sulfatados (EPS). A an?lise histol?gica da localiza??o dos PS resultou na presen?a destes polissacar?deos principalmente na epiderme da por??o vegetativa raiz. As an?lises qu?micas mostraram que os polissacar?deos contem glicose, galactose, xilose e sulfato na propor??o de 1: 0,9: 1: 1 e massa molecular de aproximadamente 11 kDa. Os grupos sulfatos est?o provavelmente ligados principalmente em C2 de um monossacar?deo. Testes de atividade antioxidante demonstraram que os PS de H. wrightii n?o apresentaram resultado para o teste de capacidade antioxidante total pelo m?todo CAT. Desta forma foi utilizada a atividade de seq?estro do radical DPPH indicado na literatura por dosar a capacidade antioxidante total que resultou em 41,36%. O seq?estro do ?on super?xido tamb?m foi realizado e resultou em 32,23% assim como o poder redutor que equivaleu a 50% da atividade da Vit. C. N?o houve atividade de seq?estro do radical hidroxila assim como atividade quelante de metal. O teste de atividade anticoagulante (aPTT) mostrou que EPS dobra o tempo de coagula??o com 20 ug, que ? apenas 2,5 vezes a quantidade da Clexane? (heparina de baixo peso molecular). Para o tempo de protrombina (PT) H.wrightii n?o apresentou atividade. Os dados indicam que EPS possuem um potencial biotecnol?gico anticoagulante e antioxidante e que futuras an?lises se fazem necess?rias para confirmarem esse potencial

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Santana Santos Pereira da Costa_DISSERT.pdf: 1585088 bytes, checksum: 3aeda3818f245371875985348e34059a (MD5) Previous issue date: 2010-03-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds sulfated polysaccharides have been described as having various pharmacological activities. However, nothing is known about the influence of salinity on the structure of sulfated polysaccharides from green seaweed and pharmacological activities they perform. Therefore, the main aim of this study was to evaluate the effect of salinity of seawater on yield and composition of polysaccharides-rich fractions from green seaweed Caulerpa cupressoides var. flabellata, collected in two different salinities beaches of the coast of Rio Grande do Norte, and to verify the influence of salinity on their biological activities. We extracted four sulfated polysaccharides-rich fractions from C. cupressoides collected in Camapum beach (denominated CCM F0.3; F0.5; F1.0; F2.0), which the seawater has higher salinity, and Buzios beach (denominated CCB F0.3; F0.5; F1.0; F2.0). Different from that observed for other seaweeds, the proximate composition of C. cupressoides did not change with increased salinity. Moreover, interestingly, the C. cupresoides have high amounts of protein, greater even than other edible seaweeds. There was no significant difference (p>0.05) between the yield of polysaccharide fractions of CCM and its CCB counterparts, which indicates that salinity does not interfere with the yield of polysaccharide fractions. However, there was a significant difference in the sulfate/sugar ratio of F0.3 (p<0.05) and F0.5 (p<0.01) (CCM F0.3 and CCB F0.5 was higher than those determined for their counterparts), while the sulfate/sugar ratio the F1.0 and F2.0 did not change significantly (p>0.05) with salinity. This result suggested that the observed difference in the sulfate/sugar ratio between the fractions from CCM and CCB, is not merely a function of salinity, but probably also is related to the biological function of these biopolymers in seaweed. In addition, the salinity variation between collection sites did not influence algal monosaccharide composition, eletrophoretic mobility or the infrared spectrum of polysaccharides, demonstrating that the salinity does not change the composition of sulfated polysaccharides of C. cupressoides. There were differences in antioxidant and anticoagulant fractions between CCM and CCB. CCB F0.3 (more sulfated) had higher total antioxidant capacity that CCM F0.3, since the chelating ability the CCM F0.5 was more potent than CCB F0.5 (more sulfated). These data indicate that the activities of sulfated polysaccharides from CCM and CCB depend on the spatial patterns of sulfate groups and that it is unlikely to be merely a charge density effect. C. cupressoides polysaccharides also exhibited anticoagulant activity in the intrinsic (aPTT test) and extrinsic pathway (PT test). CCB F1.0 and CCM F1.0 showed different (p<0,001) aPTT activity, although F0.3 and F0.5 showed no difference (p>0,05) between CCM and CCB, corroborating the fact that the sulfate/sugar ratio is not a determining factor for biological activity, but rather for sulfate distribution along the sugar chain. Moreover, F0.3 and F0.5 activity in aPTT test was similar to that of clexane?, anticoagulant drug. In addition, F0.5 showed PT activity. These results suggest that salinity may have created subtle differences in the structure of sulfated polysaccharides, such as the distribution of sulfate groups, which would cause differences in biological activities between the fractions of the CCM and the CCB / Polissacar?deos sulfatados de algas marinhas t?m sido descritos por apresentarem diversas atividades farmacol?gicas. No entanto, nada se sabe a respeito da influ?ncia da salinidade da ?gua do mar na estrutura de polissacar?deos sulfatados de algas verdes e nas atividades farmacol?gicas por eles desempenhadas. Por isso, objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito da salinidade da ?gua do mar no rendimento e na composi??o de fra??es polissacar?dicas da alga verde Caulerpa cupressoides var. flabellata, coletada em duas praias de diferentes salinidades do litoral do Rio Grande do Norte, bem como verificar se as altera??es provocadas pela salinidade se refletiriam em atividades biol?gicas das fra??es. Extraiu-se quatro fra??es ricas em polissacar?deos sulfatados da C. cupressoides coletada na praia de Camapum (denominado CCM F0.3, F0.5, F1.0, F2.0), a qual a ?gua tem maior salinidade, e na praia de B?zios (denominados CCB F0.3; F0.5, F1.0, F2.0). Diferente do observado para outras algas, a composi??o centesimal da C. cupressoides n?o se alterou em fun??o desta crescer em ambiente de maior da salinidade. Al?m disso, interessantemente, a C. cupressoides t?m altas quantidades de prote?nas, maior at? do esp?cies de algas comest?veis. N?o houve diferen?a significativa (p> 0,05) entre o rendimento das fra??es polissacar?dicas da CCM e das suas correlatas na CCB, o que indica que a salinidade n?o interfere no rendimento das fra??es polissacar?dicas. No entanto, houve uma diferen?a significativa na raz?o sulfato/a??car da F0.3 (p <0,05) e F0.5 (p <0,01) (a raz?o sulfato/a??car da CCM F0.3 e da CCB F0.5foram maiores do que suas correlatas), enquanto a raz?o sulfato/a??car da F1.0 e F2.0 n?o se alterou significativamente (p> 0,05) com a salinidade. Este resultado sugere que a diferen?a observada na raz?o sulfato/a??car entre as fra??es da CCM e CCB, n?o ?, meramente, fun??o da salinidade, mas provavelmente est? relacionada com a fun??o biol?gica destes biopol?meros nas algas marinhas. Al?m disso, a varia??o de salinidade entre os locais de coleta n?o influenciou a composi??o monossacar?dica, a mobilidade eletrofor?tica ou os espectros de infravermelho das fra??es polissacar?dicas, demonstrando que a salinidade n?o altera a composi??o de polissacar?deos sulfatados de C. cupressoides. Houve diferen?as nas atividades antioxidantes e anticoagulantes entre a CCM e CCB. CCB F0.3 (mais sulfatada) apresentou maior capacidade antioxidante total que CCM F0.3, j? a habilidade quelante da CCM F0.5 foi mais potente que a CCB F0.5 (mais sulfatada). Estes dados indicam que, provavelmente, as atividades biol?gicas das fra??es polissacar?dicas da CCM e CCB dependem do padr?o de distribui??o espacial dos grupos sulfatos no pol?mero e que n?o ?, meramente, um efeito da densidade de carga. Polissacar?deos de C. cupressoides tamb?m exibiram atividade anticoagulante na via intr?nseca (aPTT) e via extr?nseca (teste PT). CCB F1.0 e CCM F1.0 mostraram diferen?as significantes (p <0,001) no aPTT, j? F0.3 e F0.5 n?o mostraram diferen?a (p> 0,05) entre a CCM e CCB, corroborando o fato de que a raz?o sulfato/a??car n?o ? um fator determinante para a atividade biol?gica, mas sim, a distribui??o do sulfato ao longo da cadeia do polissacar?deo. Al?m disso, F0.3 e F0.5 apresentaram atividade no teste de aPTT semelhante a clexane?, medicamento anticoagulante. Adicionalmente, as F0.5 mostraram atividade no PT. Estes resultados sugerem que a salinidade pode ter criado sutis diferen?as na estrutura dos polissacar?deos sulfatados, como por exemplo, na distribui??o dos grupos sulfatos, o que ocasionaria as diferen?as nas atividades biol?gicas entre as fra??es da CCM e da CCB