Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O cÃncer à uma doenÃa que afeta cada vez mais um nÃmero maior de pessoas em todo o mundo. As terapias atuais utilizadas para o tratamento do cÃncer sÃo ainda insatisfatÃrias. Produtos naturais tÃm sido avaliados para seleÃÃo de compostos ativos, capazes de reduzir os tumores malignos de uma forma mais eficiente e com menos efeitos indesejÃveis. O polissacarÃdeo sulfatado extraÃdo da alga Champia feldmannii (Cf-PLS) foi testado para avaliaÃÃo do seu potencial antitumoral e imunoestimulante. AlÃm disso, foram feitos testes de toxicidade do fÃgado, rins e baÃo apÃs o tratamento com Cf-PLS. Os resultados demonstraram que Cf-PLS nÃo apresenta citotoxicidade in vitro, mas à capaz de reduzir o tumor Sarcoma 180 implantado em camundongos em 48,16% e 48,62% nas doses de 10 e 25mg/kg, respectivamente, e reduz 68,32% quando adiministrado juntamente com 5-Fluorouracil (5-FU). As anÃlises do fÃgado e rins revelaram que houve certa toxicidade no rim, com Ãreas de necrose tubular aguda na maior dose. Os testes da perfusÃo renal revelaram que Cf-PLS causa aumento da pressÃo de perfusÃo, resistÃncia vascular renal, ritmo de filtraÃÃo glomerular e fluxo urinÃrio, alÃm da excreÃÃo de sÃdio, cloreto e potÃssio. NÃo houve alteraÃÃes nos percentuais de transporte totais ou tubular proximais de sÃdio, cloreto ou potÃssio. Houve discreta deposiÃÃo protÃica nos glomÃrulos e tÃbulos renais. NÃo houve alteraÃÃes nas anÃlises bioquÃmicas e os testes hematolÃgicos revelaram uma leucopenia causada por 5-FU, entretanto esta foi revertida pelo tratamento com Cf-PLS. TambÃm foi demonstrado que Cf-PLS age como agente imunoestimulante e imunomodulador, aumentando a produÃÃo de anticorpos totais e especÃficos contra Cf-PLS e OVA, aumentando tambÃm a polpa branca e o nÃmero de megacariÃcitos nos baÃos dos animais tratados e induzindo a migraÃÃo de neutrÃfilos para a cavidade peritoneal de camundongos. Pode-se concluir que Cf-PLS apresenta atividade antitumoral e que isso pode estar relacionado com suas propriedades imunoestimulantes. / Cancer is a desease that occurs in a larger number of people each year. The therapies used to treat it are still not satisfatory. Natural products have been studied to select new compounds capable of reducing tumours and with fewer side effects. The sulfated polysaccharide isolated from the seaweed C. feldmannii (Cf-PLS) was investigated for its antitumor and immunostimulating properties and also for the toxicological aspects related to Cf-PLS treatment. The Cf-PLS did not show any significant in vitro cytotoxic effect, but showed a strong in vivo antitumor effect. The inhibition rates of sarcoma 180 tumor development were 48.16 % and 48.62% at the doses of 10 and 25 mg/kg, respectively, and 68.32% when treated together with 5-fluorouracil (5-FU). The histopathological analysis of liver and kidney showed that the kidneys were affected by Cf-PLS-treatment, presenting some focal areas of acute tubular necrosis at the higher dose. Cf-PLS caused considerable changes in renal physiology, as shown by an increase in parameters such as perfusion pressure, renal vascular resistance, glomerular filtration rate, urinary flow and sodium, chloride and potassium excretion. Neither enzymatic activity of alanine aminotransferase, urea nor creatinin levels were significantly altered. In hematological analyses, leucopeny was observed after 5-FU treatment, but this effect was prevented when the treatment was associated with the Cf-PLS. It was also demonstrated that Cf-PLS acts as an immunomodulatory agent, raising the production of specific antibodies, and also increasing the production of OVA-specific antibodies. In addition, it induced a discreet increase of the white pulp and nest of megakaryocytic in spleen of treated mice and the neutrophil migration to the intraperitoneal cavity of mice. In conclusion, Cf-PLS has some interesting antitumour activity that could be associated with its immunostimulanting properties.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / This work reports the preparation and characterization of collagen-sulfated polysaccharide films and applications in coating of cardiovascular prostheses. The films were prepared by adding the sulfated polysaccharide solution on soluble collagen (0, 5, 10, 20 and 25 %). The blends of collagen-sulfated polysaccharide were casted in acrylic molds, and dried at low temperature. The physico-chemical properties of collagen-sulfated polysaccharide films, were studied using infrared spectroscopy that showed absorptions typical of collagen and sulphated polysaccharide; the thermal analysis (DSC) showed that the structural integrity of collagen was unmodified during the extraction process and the polysaccharide present in the samples did not decrease the thermal stability of the collagen, which was higher for the concentrations of 20 %. In the thermal analysis (DTG), the addition of the polysaccharide caused a small decrease of the stability of thermal degradation and when was adding 5 % of the sulfated polysaccharide to the collagen, a reduction in its stability occurs, however, in the concentrations of 10, 20 and 25 %, the stability of thermal degradation of the film increased. In the impedance spectroscopy, the results are associated possibly, to the interactions between the macromolecules. The blood compatibility was analyzed by platelet adhesion and the results showed that the films possess hemocompatibility and antitrombogenic properties. / Este trabalho aborda sobre o preparo e a caracterizaÃÃo de filmes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado e sua aplicaÃÃo para revestimento de prÃteses vasculares. Os filmes foram obtidos a partir da mistura de soluÃÃo de colÃgeno e polissacarÃdeo sulfatado, nas concentraÃÃes 0, 5, 10, 20 e 25 % do polissacarÃdeo. As soluÃÃes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado foram formatadas em moldes de acrÃlico em condiÃÃes de baixa umidade e temperatura. A caracterizaÃÃo fÃsico-quÃmica dos filmes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado foi estudada por espectrometria no infravermelho que mostraram bandas tÃpicas do colÃgeno e bandas tÃpicas do polissacarÃdeo sulfatado; a anÃlise tÃrmica por DSC mostra que a integridade estrutural do colÃgeno foi preservada no processo de extraÃÃo e que a adiÃÃo do polissacarÃdeo nas amostras nÃo diminuiu a estabilidade tÃrmica do colÃgeno tendo sido maior na concentraÃÃo de 20 %. Na anÃlise tÃrmica por DTG, a adiÃÃo do polissacarÃdeo causa um pequeno decrÃscimo da estabilidade de degradaÃÃo tÃrmica e ao adicionarmos 5 % do polissacarÃdeo sulfatado ao colÃgeno, ocorre uma reduÃÃo em sua estabilidade, porÃm, a partir daÃ, nas concentraÃÃes 10, 20 e 25 %, a estabilidade de degradaÃÃo tÃrmica do filme vai aumentando. Na espectroscopia de impedÃncia, os resultados estÃo associados, possivelmente, a interaÃÃes entre as macromolÃculas. A compatibilidade sangÃÃnea foi analisada por adesÃo de plaquetas e os resultados mostraram que os filmes possuem hemocompatibilidade e propriedades antitrombogÃnicas.

MACEDO, A. A. M.Filmes de colágeno - polissacarídeo sulfatado como matrizes com propriedades antitrombogênicas: preparação e caracterização. 2006. 77f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)- Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, 2006. / Submitted by JOANA BEZERRA (joanabib@yahoo.com.br) on 2013-01-07T19:14:17Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_aammacedo.pdf: 1291383 bytes, checksum: 82d27442aec13166192157ba1d4a7a47 (MD5) / Approved for entry into archive by Érica Barros(ericabarros@ufc.br) on 2013-01-09T16:59:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_aammacedo.pdf: 1291383 bytes, checksum: 82d27442aec13166192157ba1d4a7a47 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-09T16:59:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_aammacedo.pdf: 1291383 bytes, checksum: 82d27442aec13166192157ba1d4a7a47 (MD5) / This work reports the preparation and characterization of collagen-sulfated polysaccharide films and applications in coating of cardiovascular prostheses. The films were prepared by adding the sulfated polysaccharide solution on soluble collagen (0, 5, 10, 20 and 25 %). The blends of collagen-sulfated polysaccharide were casted in acrylic molds, and dried at low temperature. The physico-chemical properties of collagen-sulfated polysaccharide films, were studied using infrared spectroscopy that showed absorptions typical of collagen and sulphated polysaccharide; the thermal analysis (DSC) showed that the structural integrity of collagen was unmodified during the extraction process and the polysaccharide present in the samples did not decrease the thermal stability of the collagen, which was higher for the concentrations of 20 %. In the thermal analysis (DTG), the addition of the polysaccharide caused a small decrease of the stability of thermal degradation and when was adding 5 % of the sulfated polysaccharide to the collagen, a reduction in its stability occurs, however, in the concentrations of 10, 20 and 25 %, the stability of thermal degradation of the film increased. In the impedance spectroscopy, the results are associated possibly, to the interactions between the macromolecules. The blood compatibility was analyzed by platelet adhesion and the results showed that the films possess hemocompatibility and antitrombogenic properties. / Este trabalho aborda sobre o preparo e a caracterização de filmes de colágeno-polissacarídeo sulfatado e sua aplicação para revestimento de próteses vasculares. Os filmes foram obtidos a partir da mistura de solução de colágeno e polissacarídeo sulfatado, nas concentrações 0, 5, 10, 20 e 25 % do polissacarídeo. As soluções de colágeno-polissacarídeo sulfatado foram formatadas em moldes de acrílico em condições de baixa umidade e temperatura. A caracterização físico-química dos filmes de colágeno-polissacarídeo sulfatado foi estudada por espectrometria no infravermelho que mostraram bandas típicas do colágeno e bandas típicas do polissacarídeo sulfatado; a análise térmica por DSC mostra que a integridade estrutural do colágeno foi preservada no processo de extração e que a adição do polissacarídeo nas amostras não diminuiu a estabilidade térmica do colágeno tendo sido maior na concentração de 20 %. Na análise térmica por DTG, a adição do polissacarídeo causa um pequeno decréscimo da estabilidade de degradação térmica e ao adicionarmos 5 % do polissacarídeo sulfatado ao colágeno, ocorre uma redução em sua estabilidade, porém, a partir daí, nas concentrações 10, 20 e 25 %, a estabilidade de degradação térmica do filme vai aumentando. Na espectroscopia de impedância, os resultados estão associados, possivelmente, a interações entre as macromoléculas. A compatibilidade sangüínea foi analisada por adesão de plaquetas e os resultados mostraram que os filmes possuem hemocompatibilidade e propriedades antitrombogênicas.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Santana Santos Pereira da Costa_DISSERT.pdf: 1585088 bytes, checksum: 3aeda3818f245371875985348e34059a (MD5) Previous issue date: 2010-03-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds sulfated polysaccharides have been described as having various pharmacological activities. However, nothing is known about the influence of salinity on the structure of sulfated polysaccharides from green seaweed and pharmacological activities they perform. Therefore, the main aim of this study was to evaluate the effect of salinity of seawater on yield and composition of polysaccharides-rich fractions from green seaweed Caulerpa cupressoides var. flabellata, collected in two different salinities beaches of the coast of Rio Grande do Norte, and to verify the influence of salinity on their biological activities. We extracted four sulfated polysaccharides-rich fractions from C. cupressoides collected in Camapum beach (denominated CCM F0.3; F0.5; F1.0; F2.0), which the seawater has higher salinity, and Buzios beach (denominated CCB F0.3; F0.5; F1.0; F2.0). Different from that observed for other seaweeds, the proximate composition of C. cupressoides did not change with increased salinity. Moreover, interestingly, the C. cupresoides have high amounts of protein, greater even than other edible seaweeds. There was no significant difference (p>0.05) between the yield of polysaccharide fractions of CCM and its CCB counterparts, which indicates that salinity does not interfere with the yield of polysaccharide fractions. However, there was a significant difference in the sulfate/sugar ratio of F0.3 (p<0.05) and F0.5 (p<0.01) (CCM F0.3 and CCB F0.5 was higher than those determined for their counterparts), while the sulfate/sugar ratio the F1.0 and F2.0 did not change significantly (p>0.05) with salinity. This result suggested that the observed difference in the sulfate/sugar ratio between the fractions from CCM and CCB, is not merely a function of salinity, but probably also is related to the biological function of these biopolymers in seaweed. In addition, the salinity variation between collection sites did not influence algal monosaccharide composition, eletrophoretic mobility or the infrared spectrum of polysaccharides, demonstrating that the salinity does not change the composition of sulfated polysaccharides of C. cupressoides. There were differences in antioxidant and anticoagulant fractions between CCM and CCB. CCB F0.3 (more sulfated) had higher total antioxidant capacity that CCM F0.3, since the chelating ability the CCM F0.5 was more potent than CCB F0.5 (more sulfated). These data indicate that the activities of sulfated polysaccharides from CCM and CCB depend on the spatial patterns of sulfate groups and that it is unlikely to be merely a charge density effect. C. cupressoides polysaccharides also exhibited anticoagulant activity in the intrinsic (aPTT test) and extrinsic pathway (PT test). CCB F1.0 and CCM F1.0 showed different (p<0,001) aPTT activity, although F0.3 and F0.5 showed no difference (p>0,05) between CCM and CCB, corroborating the fact that the sulfate/sugar ratio is not a determining factor for biological activity, but rather for sulfate distribution along the sugar chain. Moreover, F0.3 and F0.5 activity in aPTT test was similar to that of clexane?, anticoagulant drug. In addition, F0.5 showed PT activity. These results suggest that salinity may have created subtle differences in the structure of sulfated polysaccharides, such as the distribution of sulfate groups, which would cause differences in biological activities between the fractions of the CCM and the CCB / Polissacar?deos sulfatados de algas marinhas t?m sido descritos por apresentarem diversas atividades farmacol?gicas. No entanto, nada se sabe a respeito da influ?ncia da salinidade da ?gua do mar na estrutura de polissacar?deos sulfatados de algas verdes e nas atividades farmacol?gicas por eles desempenhadas. Por isso, objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito da salinidade da ?gua do mar no rendimento e na composi??o de fra??es polissacar?dicas da alga verde Caulerpa cupressoides var. flabellata, coletada em duas praias de diferentes salinidades do litoral do Rio Grande do Norte, bem como verificar se as altera??es provocadas pela salinidade se refletiriam em atividades biol?gicas das fra??es. Extraiu-se quatro fra??es ricas em polissacar?deos sulfatados da C. cupressoides coletada na praia de Camapum (denominado CCM F0.3, F0.5, F1.0, F2.0), a qual a ?gua tem maior salinidade, e na praia de B?zios (denominados CCB F0.3; F0.5, F1.0, F2.0). Diferente do observado para outras algas, a composi??o centesimal da C. cupressoides n?o se alterou em fun??o desta crescer em ambiente de maior da salinidade. Al?m disso, interessantemente, a C. cupressoides t?m altas quantidades de prote?nas, maior at? do esp?cies de algas comest?veis. N?o houve diferen?a significativa (p> 0,05) entre o rendimento das fra??es polissacar?dicas da CCM e das suas correlatas na CCB, o que indica que a salinidade n?o interfere no rendimento das fra??es polissacar?dicas. No entanto, houve uma diferen?a significativa na raz?o sulfato/a??car da F0.3 (p <0,05) e F0.5 (p <0,01) (a raz?o sulfato/a??car da CCM F0.3 e da CCB F0.5foram maiores do que suas correlatas), enquanto a raz?o sulfato/a??car da F1.0 e F2.0 n?o se alterou significativamente (p> 0,05) com a salinidade. Este resultado sugere que a diferen?a observada na raz?o sulfato/a??car entre as fra??es da CCM e CCB, n?o ?, meramente, fun??o da salinidade, mas provavelmente est? relacionada com a fun??o biol?gica destes biopol?meros nas algas marinhas. Al?m disso, a varia??o de salinidade entre os locais de coleta n?o influenciou a composi??o monossacar?dica, a mobilidade eletrofor?tica ou os espectros de infravermelho das fra??es polissacar?dicas, demonstrando que a salinidade n?o altera a composi??o de polissacar?deos sulfatados de C. cupressoides. Houve diferen?as nas atividades antioxidantes e anticoagulantes entre a CCM e CCB. CCB F0.3 (mais sulfatada) apresentou maior capacidade antioxidante total que CCM F0.3, j? a habilidade quelante da CCM F0.5 foi mais potente que a CCB F0.5 (mais sulfatada). Estes dados indicam que, provavelmente, as atividades biol?gicas das fra??es polissacar?dicas da CCM e CCB dependem do padr?o de distribui??o espacial dos grupos sulfatos no pol?mero e que n?o ?, meramente, um efeito da densidade de carga. Polissacar?deos de C. cupressoides tamb?m exibiram atividade anticoagulante na via intr?nseca (aPTT) e via extr?nseca (teste PT). CCB F1.0 e CCM F1.0 mostraram diferen?as significantes (p <0,001) no aPTT, j? F0.3 e F0.5 n?o mostraram diferen?a (p> 0,05) entre a CCM e CCB, corroborando o fato de que a raz?o sulfato/a??car n?o ? um fator determinante para a atividade biol?gica, mas sim, a distribui??o do sulfato ao longo da cadeia do polissacar?deo. Al?m disso, F0.3 e F0.5 apresentaram atividade no teste de aPTT semelhante a clexane?, medicamento anticoagulante. Adicionalmente, as F0.5 mostraram atividade no PT. Estes resultados sugerem que a salinidade pode ter criado sutis diferen?as na estrutura dos polissacar?deos sulfatados, como por exemplo, na distribui??o dos grupos sulfatos, o que ocasionaria as diferen?as nas atividades biol?gicas entre as fra??es da CCM e da CCB